红肉火龙果果糖激酶基因HpFRK1克隆、表达与酶学活性分析

【目的】克隆红肉火龙果果糖激酶基因,检测其表达和酶活性,解析其对果实发育可溶性糖积累的生理功能。【方法】从‘紫红龙’果肉克隆HpFRK1基因,进行生物信息学和亚细胞定位分析,利用qRT-PCR检测基因表达,通过大肠杆菌诱导表达获得重组蛋白并检测酶活性。【结果】HpFRK1的开放阅读框长度为993bp,编码330个氨基酸,具有磷酸果糖激酶B家族结构域。HpFRK1与甜菜BvFRK亲缘关系最近,均属于细胞质定位的FRKs。HpFRK1在成熟茎和不同发育时期果实均表达,在花后20d的果实表达量最高,随果实发育逐渐下调,花后30d(果实成熟)表达量最低。亚细胞定位检测表明HpFRK1主要定位于细胞核和细胞质。诱导获得的Hp-FRK1重组蛋白特异性催化果糖磷酸化(Km为11.01mmol/L)。【结论】HpFRK1在细胞质特异性催化果糖磷酸化,在红肉火龙果果实发育期间负调控果实可溶性糖积累。

贵州地方李资源现状及发展建议

贵州是我国李起源中心区域之一,拥有丰富的地方李种质资源,深入开发利用地方李资源,对促进李种质创新、李品种资源基础研究及李产业发展具有重要作用。为推进贵州地方李资源开发利用及保护提供参考,介绍贵州地方李资源的分布、类型、开发与利用情况,分析贵州地方李资源开发利用存在的品种鉴选不足、资源流失、资源特性基础研究不全面等问题,从加强资源的收集保存、评价与利用方面提出发展建议。

红肉火龙果α-淀粉酶基因HpAMY3的克隆及功能鉴定

为了解α-淀粉酶在红肉火龙果〔Hylocereus polyrhizus(F.A.C.Weber)Britton et Rose〕果实淀粉降解中的作用,对红肉火龙果α-淀粉酶基因HpAMY3进行克隆和生物信息学分析,检测果实发育期间该酶的活性及其编码基因的表达,同时对HpAMY3重组蛋白的淀粉降解活性进行分析。结果表明:HpAMY3基因的开放阅读框长度为2742 bp,编码913个氨基酸;HpAMY3蛋白的理论相对分子质量为102370,理论等电点为pI 6.02,预测此蛋白位于叶绿体,且为亲水性蛋白。系统进化分析表明HpAMY3与拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕AtAMY3的亲缘关系最近,均属于AMYⅢ类。亚细胞定位实验结果显示HpAMY3定位于本氏烟草(Nicotiana benthamiana Domin)叶片的叶绿体,表明HpAMY3具有质体定位的特点。在授粉后20和23 d,红肉火龙果果实的α-淀粉酶活性较低;在授粉后25 d,α-淀粉酶活性显著(P<0.05)升高;在授粉后27和30 d,α-淀粉酶活性保持在较高水平。红肉火龙果果实的HpAMY3基因相对表达量在授粉后20和23 d较低,在授粉后25和27 d持续升高,在授粉后30 d略有降低。红肉火龙果果实发育期间α-淀粉酶活性与HpAMY3基因相对表达量的相关性较高(R^(2)=0.94)。体外淀粉降解活性实验结果显示:在含有HpAMY3重组蛋白的反应体系中均检测到麦芽糖和麦芽三糖,且二者含量极显著(P<0.01)高于含有载体对照pDR196的反应体系。综合上述结果,HpAMY3蛋白可能定位于红肉火龙果果实的淀粉体;在果实发育期间,HpAMY3基因上调表达,HpAMY3具有淀粉降解活性。

贵州不同产区蜂糖李果实糖酸组分差异及品质评价

【目的】探明贵州不同产区蜂糖李果实的糖酸品质特征,为提高蜂糖李果品质量整体水平和促进产业可持续发展提供参考。【方法】以贵州安顺4个种植区(AZNL、AZND、AZNJ和AZYH)、黔南州3个种植区(QNLF、QNLM和QNHD)以及贵阳(GXFS)、黔西南州(QXQG)、铜仁市(TYHG)和遵义市(ZSYX)种植的蜂糖李新鲜成熟果实为材料,考察果形指数和硬度等外观品质,检测分析果实糖酸组分及含量、可溶性固形物和可滴定酸含量等主要风味指标,并对果品品质22个指标进行主成分分析和系统聚类分析。【结果】11份蜂糖李果实糖含量为102.29~160.71 mg/g,糖组分以蔗糖含量最高,平均56.21 mg/g,山梨醇含量最低,仅20.71 mg/g;有机酸含量为5.29~7.89 mg/g,有机酸组分以苹果酸含量最高,平均达5.31 mg/g,抗坏血酸含量最低,仅0.04 mg/g。主成分分析共提取5个主成分,累积贡献率达92.89%,获得品质评价函数:F=0.361 F_(1)+0.241 F_(2)+0.153 F_(3)+0.107 F_(4)+0.066 F5。聚类分析显示,QXQG和AZNL各为一类,其余9个样品聚为一类,其中,AZNL和QXQG综合得分较高,品质最佳。【结论】贵州11份不同种植区蜂糖李果实品质依次为AZNL> QXQG> QNLF> AZNJ> AZND> QNLM> AZYH> QNHD> GXFS> ZSYX>TYHG。

红肉火龙果液泡转化酶基因HpVIN1的克隆、表达和酶活性鉴定

液泡转化酶(vacuolar invertase,VIN)不可逆地分解蔗糖生成葡萄糖和果糖,是可溶性糖代谢的关键酶,参与植物的生长发育、产量品质形成和抵御逆境。为探讨VIN基因在红肉火龙果(Hylocereus polyrhizus)可溶性糖代谢中的生理功能,从果实中克隆HpVIN1基因,开展序列比对、系统进化、基因表达、亚细胞定位、酵母生长互补分析和蔗糖分解活性检测。基于RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)扩增获得HpVIN1基因,其开放阅读框(open reading frame,ORF)长度为1935 bp,编码644个氨基酸。序列分析表明,HpVIN1含有转化酶催化蔗糖分解的关键结构域,且在N端含有液泡定位的相关序列。系统进化分析表明HpVIN1与猕猴桃、枇杷、苹果和葡萄的VINs具有较近的亲缘关系。实时荧光定量PCR检测表明,HpVIN1在茎和果实转色期(花后20~25 d)的表达量较高,果实成熟期(花后30 d)表达微弱。HpVIN1融合绿色荧光蛋白在拟南芥叶肉原生质体瞬时表达表明HpVIN1定位于液泡膜和液泡。HpVIN1在蔗糖利用缺陷的酵母株系过表达,恢复酵母以蔗糖为唯一碳源的生长,证明HpVIN1具有蔗糖分解活性。酵母总蛋白的离体催化实验表明,HpVIN1分解蔗糖产生葡萄糖和果糖,蔗糖分解活性在pH 4.0时最大,并随pH的升高快速降低。研究结果表明,位于液泡内的HpVIN1具有分解蔗糖产生葡萄糖和果糖的酶活性,参与红肉火龙果茎和果实转色期的可溶性糖代谢。

红肉火龙果HpHXK基因克隆、表达及酶学特性分析

【目的】分析红肉火龙果催化己糖磷酸化糖酵解途径关键酶—己糖激酶(Hexokinase,HXK)基因的克隆、表达及酶学特性,为研究HXK基因在果实可溶性糖积累过程中的作用机制及提高红肉火龙果果实品质提供理论依据。【方法】以红肉火龙果紫红龙的成熟茎组织及花后20、23、25、27和30 d的果实为研究对象,通过转录组测序获得HXK蛋白序列,反转录PCR克隆HXK基因,使用ExPASy、Plant-PLoc、Phobius和SMART等在线工具对HpHXK蛋白进行生物信息学分析,利用Clustal W进行氨基酸序列多重比对,采用MEGA 7.0邻接法(Neighbor-joining,NJ)构建系统发育进化树;构建pGEX-4T-HpHXK载体并转化至烟草叶片;分析HpHXK基因在不同组织中的表达模式并利用比色法测定重组蛋白的酶活性。【结果】HpHXK基因开放阅读框(ORF)长度为1410 bp,编码469个氨基酸残基。生物信息学分析表明,HpHXK蛋白相对分子量为52.47 kD,理论等电点(pI)为5.42,该蛋白具有HXK特征结构域。系统发育进化树结果显示,HpHXK序列与水稻、拟南芥、苹果、梨、葡萄和枇杷的HXKs聚为一类。HpHXK基因在花后20 d果实中的相对表达量最高,显著高于花后25、27和30 d果实及成熟茎(P<0.05)。亚细胞定位结果显示,HpHXK蛋白定位于细胞质和细胞膜。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测结果显示,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后,重组质粒表达产物与预期相对分子质量一致,表明成功获得HpHXK重组蛋白。HpHXK蛋白对葡萄糖[米氏常数(Km)=0.61 mmol/L]的亲和力高于果糖(K_(m)=2.92 mmol/L)。【结论】HpHXK蛋白具有HXK家族保守结构域,在红肉火龙果果实发育期间,HpHXK基因负向调控果实可溶性糖积累,在细胞质中催化以葡萄糖为主的己糖磷酸化。

装备虚拟维修训练系统设计方法研究

开发虚拟维修训练系统是一项复杂的系统工程,Agent的理论、技术为大型、复杂系统的分析、设计和实现提供了一个崭新的途径,介绍了多Agent系统工程(MaSE)方法及其开发工具agentTool,针对传统软件开发方法的局限性,运用MaSE方法指导虚拟维修训练系统的分析、设计和开发,提出了一种基于Multi-Agent的虚拟维修训练系统(VMTS)结构框架,整个系统分别由7个具有交互作用的Agent组成,并运用图形模型描述了系统目标、行为、角色、Agent类型及Agent之间的通信接口,从而将VMTS转化为一个多Agent系统的设计与开发,提高了系统的健壮性、灵活性和可重用性。

利用ADO技术实现对数据库的操纵

作为新型的数据库访问技术,介绍了ADO技术及其特点.利用ADO技术实现了对数据库的添加、删除、更新、查询等功能,并应用于专家系统中的知识库,从而可以不断地扩充知识库,体现了知识库的健壮性,并且有益于知识库维护的一致性和完整性,最后用Visual C++语言实现了编程。

电气工程研究生实验平台设计与构建

针对目前实验平台建设中存在的问题,结合我院电气工程研究生实验平台的具体建设过程,探讨了电气工程研究生实验平台建设的目标与内容、方法与途径、效益与应用。该实验平台能够模拟装备电力系统中电能产生、变化、输送、消耗的系统过程,紧贴装备,符合目前装备电力系统高度自动化、信息化、数字化的特点,实现了集专业实验、技术开发和科学研究于一体的提升教学水平、促进创新教育的研究生综合实验平台。实验平台的建设主动适应军队院校转型的需要,提高了研究生培养质量,并在科学研究及服务部队等方面均发挥了显著作用。

PCI总线及其接口设计

总线是局部总线中最具代表性的一种。文章首先阐述了总线的典型性能和技术特点,介绍了目前实现微机总线接口可采PCIPCIPCI用的方法及各自的优缺点,提出了设计时应注意的一些问题。

虚拟现实技术在导弹维修训练中的应用

军用装备维修是保持、恢复乃至提高军队战斗力的重要因素, 在国防建设中发挥重要作用。基于虚拟现实技术的虚拟维修训练系统, 为新装备的维修训练提供了全新的手段。对系统的组成、总体设计及具体实现技术等作了详细地介绍, 采用分层建模和细节层次模型技术较好地实现了虚拟装备的实时显示。

复杂装备虚拟维修训练系统中数据场景图研究

针对传统场景图结构在开发虚拟维修训练系统时的局限性,提出了一种新的场景图数据结构。该场景图具有对象-表面-面片3层结构,并用四元组的数据结构<A,S,E,B>封装了虚拟对象的属性信息、内部状态集、事件列表以及与事件相对应的行为。利用该场景图结构实现了表面间碰撞检测,并对发生碰撞的表面进行约束识别和约束求解。利用Petri网描述虚拟对象的状态及状态之间的转换,并将其转化为虚拟对象的规则集,从而确定其“事件-状态”之间的因果关系。该场景图结构弥补了商用软件开发虚拟维修训练系统的不足,实现了虚拟维修中表面间的碰撞检测,并利用虚拟对象的行为信息实现了复杂的维修操作。

基于Multi-Agent的武器装备虚拟维修训练系统

提出了一种基于M u lti-A gen t的虚拟维修训练系统(VM TS)结构框架,整个系统分别由主控A gen t、仿真A gen t、和接口A gen t3个具有交互作用的A gen t组成,从而将虚拟维修训练系统的开发转化为一个多A gen t系统的设计与开发。基于多A gen t的框架结构可实现受训者的智能模型及虚拟训练场景中虚拟物体的行为模型,从而可以提高VM TS的健壮性和可重用性。基于A gen t的概念模型实现了A gen t之间的交互和协作,并介绍了主控A gen t和仿真A gen t的具体实现方法。

一种基于面向对象技术的故障诊断专家系统

介绍了专家系统和面向对象技术的概念、特点 ,在某型导弹控制系统自动测试平台上采用面向对象的技术 ,建立了故障诊断专家系统 ,并结合实例阐述了如何将面向对象技术应用于知识表示、知识库建立和知识推理。

军用电站电缆雷电感应过电压影响因素研究

根据偶极子模型,研究雷电电磁场分布及其规律,建立军用电站电缆雷电感应过电压的计算模型并进行数值计算,分析了雷电流幅值、电缆长度、电缆高度、电缆端接电阻、雷击位置对电缆雷电感应过电压的影响规律。研究结果表明:过电压峰值大小与雷电流幅值、电缆高度、电缆长度呈一定的正比例关系,但当电缆长度增加到一定大小时,过电压峰值增加幅度越来越小;当始端为匹配电阻,末端感应过电压值随着末端电阻的增大而不断增大;闪电在电缆的垂直方向上距离不断增加时,其感应过电压迅速减小,并不与距离呈正比例关系。为军用电站雷电感应过电压的防护设计提供了量化参考指标。

基于某型导弹的故障诊断专家系统

本文简述了专家系统应用于导弹武器系统故障诊断的重要意义 ,分别阐述了知识的表达、知识库的建立、推理机制等 ,并针对某型导弹建立了故障诊断专家系统 ,从而提高系统的效率和可维护性 ,加强导弹武器装备的技术保障能力。

科研成果向研究生课程教学资源转化方式研究

科研是教学的底蕴。本文从科研成果向教学资源转化必要性入手,结合电气工程学科研究生教学特点,着重从科研成果向教学资源转化方式开展研究,就如何以理论引申方式深化教学内容、以案例等方式丰富教学模式、以专题形式增设科技前沿知识窗等方面进行研究和探讨,提高了电气工程研究生的培养质量,有利于高层次创新性人才培养。

军用电站雷电过电压电磁暂态仿真研究

针对军用电站雷电过电压电磁暂态模型复杂度高和计算误差大的问题,以典型军用电站为研究对象,提出了军用电站电力电子设备离散-连续分离建模方法,建立了电缆、控制箱等雷电防护关键部件的电磁暂态模型,并采用插值算法对开关的暂态等值电路模型进行修正,提高了开关动作时刻仿真模型的准确性。基于PSCAD/EMTDC软件构建了军用电站雷电过电压电磁暂态仿真系统,通过大量的仿真试验,获取了接地电阻、浪涌保护器等对军用电站耐雷水平的影响规律,基于此开发的模块化军用电站雷电过电压防护装置可阻塞沿不同电能制式、电压强度的电源/数据/信号线引入的雷电过电压,进一步验证了仿真模型的正确性。

基于数据库的知识库管理系统

本文将数据库技术和专家系统相结合 ,采用关系数据库表示产生式规则。作为新型的数据库访问技术 ,简要介绍了ADO技术及其特点 ,重点介绍了ADO技术在专家系统中的应用。并利用ADO技术对知识库进行管理和维护 ,实现了知识的添加、删除、更新、刷新以及查询等功能。最后 ,用VisualC + +语言实现了编程。

用C++语言建造某型导弹故障诊断专家系统

在导弹控制系统自动测试平台上采用面向对象的技术建立了故障诊断专家系统,并结合实例阐述了如何将面向对象技术应用于知识表示、知识库建立和知识推理.采用面向对象技术开发专家系统解决了专家系统固有的知识获取"瓶颈"问题,实现了数据抽象和信息共享,易于知识库维护,并且可以提高推理效率.