基于16S rRNA全长高通量测序分析桶子鸡中细菌多样性

[目的]研究不同加工过程桶子鸡所携带的微生物多样性及菌落组成。[方法]采用PacBio三代全长高通量测序技术,对桶子鸡样本所携带细菌的16S rRNA的V1-V9区进行测序后进行统计分析。[结果]共获得67287条有效序列,2300个OTU数目,不同加工环节的桶子鸡中细菌群落存在差异。在门水平上,共获得15个细菌门,优势菌主要为变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、异常球菌-栖热菌门(Deinococcus-Thermus)、疣微菌门(Verrucomicrobia);在属水平上,共获得250个细菌属,优势菌属为假单胞菌属(Pseudomonas)、不动杆菌属(Acinetobacter)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、环丝菌属(Brochothrix)、中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)、Janthinobacterium、黄杆菌属(Flavobacterium)、希万氏菌属(Shewanella)、Kaistella、冷杆菌属(Psychrobacter);在种水平上,共获得621个细菌种,优势菌种为Sediminibacterium magnilacihabitans、慢生根瘤菌sp011516665、Bradyrhizobium sp011516665、Pseudomonas fragi、干酪巨球菌(Macrococcus caseolyticus)、希瓦氏菌(Shewanella baltica)等。[结论]同一加工环境中获得的老汤复煮桶子鸡、放置12 h桶子鸡和老汤3个样本中携带的优势菌群组成存在一定相似性,但相对丰度存在一定差异。生鲜鸡及另一加工场所制作的刚出锅桶子鸡的优势菌组成与其他样本有很大差异。

伤科擦剂外敷治疗人工全膝关节置换术后肿痛及瘀斑临床观察

目的:观察伤科擦剂外敷治疗全膝关节置换术后肿胀、疼痛、膝关节功能、瘀斑消退的临床疗效。方法:将90例符合纳入标准的全膝关节置换术后患者随机分为3组各30例。空白组予七叶皂苷钠、利伐沙班、美洛昔康片联合康复训练;治疗组在空白组基础上予伤科擦剂外敷,对照组在空白组基础上予双氯芬双钠凝胶外用,治疗14天后比较3组临床疗效。结果:治疗组患肢周径和VAS评分均在术后第3、5天明显低于空白组(P﹤0.05);治疗组HSS评分在术后第5、14天明显高于空白组(P﹤0.05);治疗组在术后第14天的瘀斑消退面积明显大于对照组和空白组(P﹤0.05)。结论:伤科擦剂外敷在TKA术后短期疗效较好,可缓解肿痛、提升膝关节功能评分,促进瘀斑消退。

基于功效的两面针药理作用研究进展及临床应用分析

两面针是广西道地药材,具有活血化瘀、行气止痛、祛风通络、解毒消肿的功效,为临床常用中药。两面针具有多种生物活性及药理作用,越来越多含两面针的中医药处方制剂被广泛应用。从两面针药味出发,分析了两面针药味与传统功效的联系,并将中药传统与现代研究相联系,基于功效对两面针的药理作用进行综述。结合相关临床研究,对含两面针处方制剂的主治疾病进行分类频次占比统计分析,形成两面针“药味-功效-药理作用-主治疾病-处方制剂”的对应关联,以期为两面针临床合理用药和新药研发提供参考。

暴露评估在中药危害物质限量标准中的方法、应用及展望

中药“安全、有效、质量可控”是我国中医药发展的基石。然而,其内外源性危害物的存在不仅影响了中药的质量和药效,更可能给人们的用药安全带来隐患,阻碍中医药(TCM)的高质量发展。因此探究确保中药质量与安全性的有效方法对中药临床合理用药具有重要意义。暴露评估作为一种定性定量评估危害因子的方法,近年来已逐渐用于制定合理的中药危害物限量标准。为此,该文重点综述了暴露评估用于中药危害物评估的各种方法及其在中药领域中的应用,并针对我国中药危害物暴露评估体系中存在的问题提出合理建议。以期提供适合于我国中药的暴露评估模型,并为我国制定与修改中药危害物限量标准和相关安全检测提供科学的参考和指导。

人工全膝关节置换术后患肢瘀斑的研究进展

患肢瘀斑是全膝关节置换术(total knee arthroplasty, TKA)后常见的并发症之一。瘀斑可能会延缓TKA术后患肢肿胀的消退和疼痛的缓解,影响患者的康复,并给患者造成巨大的心理负担。但由于人们认为瘀斑会自然消退,TKA术后患肢瘀斑获得的关注较少,相关研究亦较少。为给临床进一步认识TKA术后患肢瘀斑提供参考,本文从其形成的原因、危险因素、预防治疗3个方面进行了综述。

缺血再灌注大鼠脑皮质Bcl-2、Bax和p53的动态表达

目的:探讨大鼠脑缺血再灌注损伤早期凋亡相关基因Bcl-2、Bax和p53mRNA和蛋白表达的动态变化,为研究脑缺血再灌注损伤过程中的神经保护机制提供实验依据。方法:选择健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠52只,随机分为假手术对照组(12只)和缺血再灌注2、3、6、8、12h组(每组8只)。采用插线法制作大鼠大脑中动脉栓塞后再灌注模型;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测脑缺血再灌注不同时间点神经细胞凋亡的变化;通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组织化学法观察凋亡相关基因Bcl-2、Bax和p53表达的动态变化。结果:TUNEL染色显示,缺血再灌注组大鼠脑缺血周围区,再灌注2h后凋亡细胞开始出现,6～12h明显增多。Bcl-2、Bax和p53mRNA和蛋白的表达随着缺血再灌注时间的延长呈增高趋势,Bcl-2蛋白高表达的细胞形态相对完整,Bax和p53蛋白高表达的细胞受损严重。Bcl-2mRNA和蛋白的表达较Bax和p53出现的早。结论:Bcl-2蛋白的表达对神经细胞具有保护作用,早期调控促进Bcl-2的表达并减少Bax和p53的表达,对降低缺血再灌注过程中神经细胞的损伤有重要作用。

β-伴大豆球蛋白α′-亚基的基因克隆及原核表达

为制备N-连接糖基缺失的重组β-伴大豆球蛋白α′-亚基,以‘鲁96150’大豆种子为原料提取总RNA,经RT-PCR一步法获得‘鲁96150’大豆的全长cDNA,采用自行设计的引物F1/F2扩增得到目的基因α′,与pGEM-T easy载体相连构建重组克隆载体pGEM-α′,经XhoⅠ/EcoRⅠ双酶切得到目的基因与载体pET-28a连接构建重组原核表达载体pET-28a-α′,将经菌落PCR、双酶切及测序鉴定正确的表达载体转入感受态细胞E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白α′-亚基。对重组α′-亚基的诱导表达条件进行筛选,发现在菌液OD600值为0.8、诱导温度30℃、IPTG浓度为0.2mmol/L的诱导条件下诱导9h后α′-亚基的表达量较高,重组α′-亚基的分子质量大小约为70ku;工程菌pET-28a-α′-BL21经超声破碎、离心后发现重组α′-亚基部分存在于上清液中,部分形成包涵体蛋白。重组α′-亚基的克隆及表达为β-伴大豆球蛋白结构及功能特性的研究奠定基础。

中医外治法治疗前交叉韧带重建术后关节肿痛的研究进展

前交叉韧带 (Anterior cruciate ligament ,ACL) 损伤一种常见的膝关节运动损伤,通常由高能量损伤所致。前交叉韧带重建术(anterior cruciate ligament reconstruction ,ACLR)具有良好的临床效果,是目前治疗的金标准,但手术后常并发患肢关节肿痛。中医外治法治疗术后关节肿痛具有操作简单、疗效持久、副作用少、个体化治疗等优势,临床应用广泛,效果显著。本文现总结近年来中医外治法中中药熏洗、中药外敷、针刺穴位、刺络放血、推拿、艾灸等治疗方法在防治前交叉韧带重建术后关节肿痛方面的研究进展,以期为今后中医药尤其是中医外治法在预防和治疗前交叉韧带重建术后关节肿痛方面提供更多的借鉴与参考。

中医执业医师考试模式的毕业实习临床技能训练与考试方案研究

目的:探索并制定结合执业医师考试模式的学生毕业实习技能训练与考试方案,以切实提高学生的临床技能及执业医师考试的通过率。方法:整合2011、2012年中医执业医师技能考试大纲与南京中医药大学实习大纲,制定技能教学、训练及考试方案。以南京中医药大学境内本科实习生为研究对象,对比、分析按上述方案进行技能教学、训练及考试(试验组)与没有按上述方案实施教学、训练(对照组)的学生成绩。结果:经反复讨论与实践,制定并形成南京中医药大学后期临床教学技能训练方案与毕业综合技能考试实施方案,根据方案进行技能教学、训练及考试组的学生技能考核成绩要明显优于对照组(P<0.05)。结论:结合执业医师考试模式的毕业实习临床技能训练与考核方案,能够显著提高医学实习生的临床技能水平。

高等医学院校附属医院教学管理工作的探讨

附属医院承担着医学院校后期临床教学的重要任务,是高等医学教育整体进程中的重要环节。医院在教学管理工作中,应积极探索与思考,加强规范管理,扎实推进师资队伍建设,强化学生的临床思维,开展教学改革研究,以切实提升全员教学水平和医学人才培养质量。

基于多目标优化的混合动力城市物流车制动能量回收控制策略研究

针对混合动力城市物流车制动能量回收的安全与效率问题,提出了基于多目标优化的制动能量回收控制策略。建立了载荷估计和质心位置解析模型,使控制策略适应各种载荷变化。控制策略以制动安全性和能量回收性为优化目标,以制动力分配系数和电机制动力矩比例系数为控制变量,采用多目标遗传算法和基于模糊控制器的理想解决策法得到决策解。驾驶循环分析结果显示,所提控制策略具有较好的制动安全性和更高的制动能量回收性。

关于药物分析学科教学体系的研究

面对药品质量标准的国际化以及CFDA针对仿制药一致性评价的新要求,高校药物分析学科教学面临越来越多的挑战。为进一步完善药物分析学科的培养方案,推动笔者所在学校药物分析学科的教学改革,现对全国几大院校药物分析学科的教学方案进行调研分析,并从课程设置、实验教学、教学学时及教材建设等方面入手进行归纳总结,提出符合我校药物分析学科发展的培养计划,有助于提高教学质量,满足药品质量全面控制对药物分析高素质专业人才的要求。

HES1、JAG1、MT2A和MAFA介导茶多酚抑制微卫星不稳定结直肠癌

目的:探讨茶多酚是否能特异性抑制结直肠癌微卫星不稳定及其可能机制。方法:使用茶多酚的水溶液处理LoVo细胞(MSH2基因缺失的结肠癌细胞株)和SW480细胞(错配修复基因正常的结肠癌细胞株),四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖,基因扫描法检测细胞的微卫星序列变化,基因芯片检测茶多酚处理后LoVo细胞基因表达的变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测有变化的基因。结果:茶多酚对LoVo细胞和SW480细胞的抑制率随着药物浓度的增加而增加,随着时间的延长也呈逐渐上升趋势,但茶多酚对LoVo细胞的抑制率高于SW480细胞,在24、72h和1周时间点测得二者抑制率的差异有统计学意义。经过茶多酚处理后,LoVo细胞的微卫星序列有趋于稳定的趋势。基因芯片和实时荧光定量PCR检测结果提示茶多酚能抑制MT2A、MAFA、HES1和JAG1基因的表达,治疗前后基因表达差异均有统计学意义。结肠癌相关基因检查发现,茶多酚能上调BAX和抑制P38基因,治疗前后基因表达差异有统计学意义,但是对于核因子-κB抑制不明显。结论:茶多酚有使LoVo的微卫星状态趋于稳定的趋势,并可抑制MT2A、MAFA、HES1和JAG1等基因表达,同时上调BAX基因的表达和抑制P38基因的表达;但是对于这些途径怎么相互联系,哪些是始动原因,哪些是继发性原因还需要进一步研究。

代谢组学与天然药物和中药研究

代谢物组学是后基因时代出现的一门新兴"组学"学科,它能用反映整体的代谢物图直接认识生命体的生理和生化状态,因此能提供区别于其他"组学"而来的大量信息。在天然药物和中药研究中,应用代谢组学研究的方法和技术具有广泛的前景,特别是在药物作用机制、靶器官的效应、新药筛选、安全性研究等方面具有理论意义和应用价值。

挤压预糊化对苦荞面团流变学性质及芦丁降解的影响

为研究挤压预糊化处理对苦荞面团流变学性质及芦丁降解的影响,采用单螺杆挤压设备处理苦荞粉得到预糊化粉,制成面团后,通过粉质仪、质构仪TPA模式、应力松弛及扫描电镜对面团的结构进行测定、观察,并利用HPLC测定芦丁、槲皮素含量。结果表明,预糊化使苦荞面团的粉质特性得到改善,全粉和预糊化面团的最适加水量分别为60%和70%,与未处理的全粉面团相比,预糊化面团内部形成了连续、均匀的网状结构,而且硬度、黏聚性和黏度增大,而黏着性降低。全粉和预糊化面团中芦丁和槲皮素含量分别为0.86和12.045、9.78和1.23 mg/g,预糊化处理抑制了苦荞面团中芦丁的降解。以上结果说明,挤压预糊化处理后苦荞面团的结合力显著提高,并且降低了苦荞面团的苦味程度。

不同植被类型对滨海盐碱土壤有机碳库的影响

对江苏滨海盐碱地5种不同植被类型土壤(0～40 cm)有机碳(SOC)含量、密度和表层(0～20 cm)土壤微生物量碳(SMBC)、可溶性有机碳(DOC)含量及其占总有机碳(TOC)的比例进行了分析。结果显示,随土层深度的增加,SOC含量降低,表层SOC密度占整个剖面的54.6%～75.8%。表层SOC含量和密度分别介于2.02～9.61 g/kg和5.87～21.54t/hm^2,平均值分别为4.77 g/kg和12.56t/hm^2。随着原生植被群落的演替(光滩→盐蒿→茅草),SOC、SMBC和DOC含量均依次增加。茅草荒地围垦后,稻-油轮作地和菊芋地表层SOC密度分别比茅草地的增加了55%(5.77 t/hm^2)和107%(11.15 t/hm^2);稻-油轮作地的SMBC含量及SMBC/TOC比值下降,而菊芋地的上升;围垦后土壤DOC含量及DOC/TOC比值都明显下降。结果表明,滨海盐碱地SOC主要分布在表层,原生植被群落的顺行演替使SOC库容增加且活性增强,在盐荒地围垦初期(3年),SOC库容增加但活性有所减弱。经估算,滨海盐碱非耕地具有较大的固碳潜力,但需要合理的耕作管理措施来保证农业生产的可持续发展并实现增汇减排的目标。

废弃铜矿周边农田土壤重金属污染特征及风险评价

本文以某废弃铜矿为研究对象,对矿区农田土壤进行取样分析,从重金属污染特征及生态风险水平对矿区重金属污染情况进行研究。结果表明,表层土壤中Cd、Cu和Cr三种重金属污染严重,平均含量分别为土壤环境背景值的1.25倍、13.15倍和1.31倍,Cu在矿区内富集最为严重,相较农用地风险筛选值,其超标率达到29.55%。内梅罗综合污染指数显示,矿区内达到中度和重度污染的点位分别占10.29%和30.88%。综合潜在生态风险指数结果表明,超过17%的点位达到中度及以上风险级别,矿区局部区域存在极强的生态风险。

黄芪多糖对致衰老模型小鼠氧自由基水平的影响

目的探讨黄芪多糖对D-半乳糖(D-gal)致衰老模型小鼠抗氧自由基的作用。方法用D-gal诱导致衰老模型小鼠,以黄芪多糖灌胃,6 w后分别检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GR)、过氧化物酶(POD)、脂褐素(LPF)含量变化。结果黄芪多糖能够明显提高D-gal致衰老小鼠心、肾组织GSH-Px、GR、POD活性,而降低LPF含量。结论黄芪多糖能提高衰老小鼠机体抗氧化能力和清除氧自由基,起到延缓衰老作用。

酶法辅助提取鸭儿芹总黄酮的工艺优化研究

目的:优化酶法辅助提取鸭儿芹总黄酮的工艺条件。方法:以鸭儿芹总黄酮提取率为主要指标,通过单因素试验和正交试验,确定最佳工艺条件。结果:酶法辅助提取鸭儿芹总黄酮的最佳工艺条件为:酶用量为1 U/mL,酶解pH值5.5,酶解温度为60℃,酶解时间为1 h,料液比1∶30,提取温度为70℃,浸提时间为1 h,总黄酮提取率可达4.76%。结论:酶法辅助提取鸭儿芹总黄酮具有较高的提取率,是一种安全可靠的提取方法。

麻杏石甘汤对哮喘大鼠肺组织中Sec14l3表达的影响

[目的]研究麻杏石甘汤及其主要成分对哮喘模型大鼠肺组织中Sec14l3表达的影响。[方法]70只大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、麻杏石甘汤组、麻黄组、杏仁组、甘草组,每组10只,第0、7天腹腔注射卵蛋白致敏,第14天开始雾化并给予药物,连续两周。最后一次雾化24 h后测肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数、病理观察气道炎症变化、实时定量聚合酶链反应(PCR)检测大鼠肺组织中Sec14l3 mRNA的水平。[结果]与正常组相比,模型组BALF中白细胞总数、嗜酸细胞、中性粒细胞数明显升高,肺组织中可见大量炎性细胞浸润及气道上皮细胞损伤,Sec14l3 mRNA表达量明显减少,有统计学意义差异;与模型组相比,麻杏石甘汤组、地塞米松组、甘草组BALF中白细胞总数、嗜酸细胞、中性粒细胞数目明显减少,肺组织中未见大量炎性细胞浸润及上皮细胞损伤,Sec14l3 mRNA量明显增加,差异有统计学意义,而麻黄组、杏仁组的上述各项指标与模型组相比无统计学意义差异。[结论]麻杏石甘汤及甘草能够有效减轻哮喘大鼠气道炎症的程度,其机制可能与调控Sec14l3在肺组织的表达水平,增强气道保护作用有关。