银离子比色检测技术研究进展

由于银离子(Ag^(+))会威胁人类健康和生态系统平衡,其检测在环境和食品领域引起了广泛关注。比色法是检测Ag^(+)最常用的方法之一,具有简单、易操作、可现场快速检测等优点。传感机理以及显色材料的发展是比色法领域的重要研究方向。综述了Ag^(+)比色检测技术的显色机理及其传感策略,将显色机理分为三类,包括酶催化、等离子体共振和化学显色,并对相应的显色材料进行了概括。讨论了Ag^(+)检测的传感机理、传感性能和实际样品应用,并总结了目前Ag^(+)比色法检测的挑战和前景,旨在帮助读者更好地理解Ag^(+)比色法的原理,推动重金属离子快速检测技术的发展。

盾构长距离空推斜体上下坡施工技术研究

驷马山滁河四级站干渠输水隧洞暗挖段掘进工法设计为盾构法,相邻两段暗挖段设计有一段650m长明挖段,明挖段采用箱涵连接两段暗挖段隧洞。文章结合工程实例,对盾构长距离空推斜体上下坡施工过程的技术要点进行了分析总结,对类似工程施工具有借鉴意义。

功能化脂质体及其在植物源天然产物递送中的应用

植物源天然产物具有广泛的药理特性,在药物发现中占据关键地位,同时以植物膳食补充剂的形式满足人体营养需求。植物源天然产物功效强大,但普遍存在溶解性低、稳定性差、缺乏靶向性、有毒副作用、有特殊气味等限制因素,为临床药物转化带来了挑战。近年来,纳米技术的发展为植物源天然产物的应用提供了新途径。其中,脂质体是一种由两亲性物质合成的双分子层纳米囊泡,具有高载药量、稳定性强等优势。与其他纳米颗粒相比,脂质体易于制备和扩展,它的扩展基于脂质体能被灵活修饰的表面特性。通过在脂质体表面修饰具备不同功能的元件可以使脂质体功能化,这些功能体现在靶向递送、药物控释、局部释放、改善药代动力学等。使用不同类型的功能化脂质体负载植物源天然产物不仅可以增强天然产物的稳定性、提高靶向性、减少副作用,还可以掩盖天然产物的刺激性气味,提升大众的接受度。本综述围绕当前植物源天然产物面临的典型问题,结合功能化脂质体在其中的具体应用做出总结。此外,本文还将回顾功能化脂质体进入临床治疗所面临的机遇和挑战,并探讨克服这些问题的机会,以期更好地实现植物纳米药物的精准控制,为相关领域研究人员及相关产业工作人员提供思路与启发。

基于杂交链式反应扩增检测奶粉中阪崎肠杆菌的适配体磁珠荧光传感器

构建一种基于杂交链式反应(hybridization chain reaction,HCR)扩增的适配体磁珠荧光传感器。巧妙设计序列HP和发卡序列H1、H2,其中HP是由适配体序列与触发序列结合而成的,并且序列互补形成稳定的二级结构。然后采用戊二醇反应和亲和素-生物素反应进行适配体功能化磁珠的制备。将阪崎肠杆菌与适配体磁珠一起孵育,HP中的适配体序列识别靶标,引起HP构象变化,露出触发序列,通过HCR触发H1和H2的链状组装,产生长双链DNA。荧光指示剂SYBR Green I以插层和小槽结合的方式与HCR产物的长双链结合。最后加入氧化石墨烯(graphene oxide,GO)后,游离的H1、H2和SYBR Green I将通过π-π堆积紧密吸附在GO表面,荧光信号被猝灭。HCR产物不能被吸附在GO表面,因此与HCR产物结合的SYBR Green I发出依赖于靶浓度的强荧光信号,从而实现阪崎肠杆菌的定量检测。本方法在纯培养条件下的检出限为2CFU/mL,对奶粉的检出限为8CFU/g,对奶粉样品的检测结果与传统微生物培养法具有良好的一致性。该方法具有无需DNA提取,快速、稳定性高、高特异性和高灵敏度等优点,因此为阪崎肠杆菌的现场快速检测提供了一种很有潜力的方法。

铜绿假单胞菌适配体的获得及应用

铜绿假单胞菌是一种专性需氧的革兰氏阴性菌,是引起人类机会性感染的最主要的微生物,对人类造成多种健康威胁。因此,快速、灵敏、特异的检测对预防及治疗铜绿假单胞菌感染十分关键。目前常规的检测方法仍存在耗时久、成本高、操作难度大等问题,因此需要更加高效经济的检测方法。适配体是一种从随机文库中筛选出来的寡核苷酸,能够形成多种复杂的二级结构,近年来,由于其易于合成和修饰,并且具有高亲和力和强特异性而受到了广泛的关注,也涌现出了大量基于适配体的铜绿假单胞菌检测和防治的研究。本文总结了目前铜绿假单胞菌适配体的筛选和裁剪方面的研究进展,并从铜绿假单胞菌的检测和防治两个方面对其适配体的应用进行了介绍,以期为铜绿假单胞菌适配体的开发和应用提供参考。

微生物菌群多样性分析方法的研究进展

随着现代科学技术的进步,对微生物多样性的研究已经提升到了一个新的高度,特别是由于分子生物学在该分支学科中的应用,使得在微生物菌群多样性的研究中克服了传统培养的缺点,使分析方法取得了长足的进步。本文主要介绍了微生物多样性研究的多种方法,将其简要划分为三大部分:(1)传统纯培养技术;(2)现代分子生物学技术;(3)上述两种方法的联合使用,并重点阐述了这些方法的优缺点,展望了微生物多样性研究方法的发展前景。

响应曲面法优化蕨菜水溶性多糖提取工艺的研究(英文)

在单因素试验的基础上,利用响应曲面法(response surface methodology,RSM),通过中心组合设计,对蕨菜多糖提取工艺参数进行优化分析研究。选择料水比、提取温度和提取时间作为优化因子,研究了各因子对蕨菜多糖得率的影响。通过分析得到优化多糖的提取条件:水料比18.8:1(V/W),提取温度为62.5℃;时间5.9h。在此条件下蕨菜多糖提取得理论值达到2.06%,实际最大多糖得率为2.02% ± 0.16%。同时,用 FARP 法测定了多糖的抗氧化活性。

葡萄柚种子提取物对真菌的抑制作用及其在葡萄和柿子保鲜中的应用(英文)

葡萄柚种子提取物是潜在的广谱性细菌、真菌杀菌剂,应该在果蔬保鲜中具有很好的效果。本研究选取比较容易受真菌感染的葡萄和柿子作为模式保鲜材料并且测试了葡萄柚种子提取物对8种与这两种水果腐败相关的真菌的抑制效果。结果表明,这8种真菌的最小抑制浓度分别在39.06×10-6至625×10-6之间不等。果实保鲜结果也证实了葡萄柚种子提取物对真菌具有很好的杀抑作用,延缓了果实的成熟,并且使保鲜的果实保留了较好的风味。这些结果可能与葡萄柚种子提取物富含多酚类物质有关,因为多酚类物质具有很强的抗氧化活性。

转基因玉米59122品系的特异性检测

使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终止子与转基因玉米侧翼基因之间。以转基因玉米59122、MON863、MON810、GA21、NK603,转基因大豆Roundup Ready和转基因油菜GT73等为材料,证明本方法与其他转基因作物具有高特异性。本方法在检测59122时,确定出连接体系中线性DNA的最佳质量浓度为1ng/μL左右,检出限达到0.1%,灵敏度为38个单倍体基因组拷贝数。因此可准确、快速、高效地检测转基因玉米及其产品,或作为常规PCR定性检测后的验证方法。

荞麦水溶性多糖的分离纯化及其分子量的测定

通过热水浸提法从荞麦中提取水溶性多糖,并用离子交换柱和凝胶过滤柱对荞麦多糖进行分离纯化、测定其分子量。结果表明,荞麦多糖粗品用Savag法脱蛋白后,采用DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-400HR柱层析纯化,得到荞麦多糖(FEP),经过凝胶柱色谱分析表明,FEP为均一多糖。用苯酚硫酸法测定多糖的含量,用AKTA快速液相蛋白层析仪的紫外检测器在280nm波长处检测蛋白质含量。最后根据用不同分子量标准葡聚糖做出的标准曲线,测定出FEP分子量(Mw)为1720442D。

粗糙脉孢菌发酵改性黑小麦麸皮馒头配方优化及其品质分析

以黑小麦粉、粗糙脉孢菌(Nc)发酵改性黑小麦麸皮(BWB)为主要原料,制备Nc-BWB馒头。以馒头感官评分、比体积及宽高比为综合评价指标,通过单因素试验和响应面试验优化馒头配方,并对其色度、质构和挥发性风味物质进行分析。结果表明:最佳配方为以Nc-BWB与黑小麦粉总质量计,Nc-BWB添加量8%、水添加量49%、酵母添加量1%,在此条件下制得的Nc-BWB馒头综合评分为87.25。与BWB馒头和纯黑小麦粉馒头相比,Nc-BWB馒头L^(*)值最低,a^(*)值最高。Nc-BWB馒头中醇类、萜烯类、杂环类挥发性物质相对含量最多;四氢薰衣草醇、苯乙醛、反式-2,4-癸二烯醛、丙位壬内酯、亚油酸乙酯、α-石竹烯是Nc-BWB馒头中独有的风味物质。质构分析表明,用Nc发酵改性后的BWB制备馒头对其品质起到了改善作用。

莱克多巴胺的抗原合成鉴定及其抗体的制备纯化

莱克多巴胺属于β-兴奋剂类药物中的苯乙醇类衍生物,具有显著改善动物饲料利用效率,显著提高胴体瘦肉率的生产性能,因为其具有严重的副作用所以目前该类药物在我国和其他国家是被禁用的。本试验通过连接剂butane-1,4-dioldiglyciydylether把莱克多巴胺和载体蛋白BSA和OVA偶联成免疫抗原和包被抗原,并采用紫外全波长扫描和SDS-聚丙烯酰胺凝胶的方法对合成的抗原进行了鉴定。通过免疫兔子获得了RCT的多克隆抗体,然后又通过饱和硫铵沉淀和proteinA-Sepharose4B的方法对抗体进行了纯化。纯化的抗体表现出对RCT较高的特异性和灵敏性。

暴雨山洪监测技术研究进展与发展趋势

山区局地降雨是诱发暴雨山洪的最主要因素,加强山区小流域雨量监测,分析致灾临界雨量指标值并及时发布有效预警信息,是降低山洪灾害损失的有效非工程手段。目前针对暴雨山洪灾害研究主要集中在短时临近预报预警领域,对山洪监测技术适用性研究不足,山洪暴发的时空尺度具有特异性,传统监测站网无法满足山区暴雨高强度短历时的监测需求,当前构建跨尺度山洪监测体系仍具有一定难度。针对山洪监测技术中雨量监测研究现状,评述了国内外雨量计、测雨雷达、卫星遥感、微波链路测雨及降雨融合技术研究进展。暴雨山洪监测技术虽然在不断发展,但单一监测传输手段及信息源将无法满足复杂山区环境的山洪监测要求,通过构建山洪立体监测技术体系,可为山洪过程模拟、洪灾风险评估及山洪预报预警提供实时雨量监测数据和技术支撑。

潮霉素磷酸转移酶的致敏性评价研究

潮霉素磷酸转移酶基因广泛用于转基因生物的基因转化过程中,该基因(hpt)编码的蛋白属于无食用和食物过敏史的处源目的蛋白。根据IFBC-ILSI制定的转基因食品致过敏性评价方法,进行了与已知的过敏蛋白的氨基酸序列相似性比较、消化稳定性实验以及动物模型实验。结果表明,未发现连续8个氨基酸序列相同:该蛋白在80℃加热10min左右时已全部降解,不具有热稳定性:体外模拟消化实验表明,消化20min时,SDS-PAGE和Western Blotting已检测不出Hpt蛋白。实验采用BN大鼠作为过敏模型,ELISA检测特异IgG、IgE以及组胺水平,Hpt蛋白与阳性存在显著性差异(p<0.05),与阴性无显著性差异。综合结果表明,Hpt蛋白潜在致敏性很低。本研究可为进一步开展以hpt基因为标记性基因的作物上市前安全性的评价提供基础数据。

Cr(III)在钝顶螺旋藻中的生物富集及其对钝顶螺旋藻生长的影响

本实验研究了钝顶螺旋藻对Cr(III)的吸收和生物转化以及Cr(III)对钝顶螺旋藻的生长影响,用ICP-MS-HPLC对无机Cr(III)经钝顶螺旋藻吸收后的存在价态进行了分析。结果表明,钝顶螺旋藻对Cr(III)具有良好的富集和生物转化能力,在本实验中总铬富集量可达到173.17mg/g,有机化程度可高达96.99%。ICP-MS-HPLC分析结果表明没有有毒的Cr(VI)的产生。此外,干重测定结果显示低浓度的Cr(III)(<234.38×10-6g/g)促进钝顶螺旋藻的生长,高浓度的Gr(Ⅲ)(>234.38×10-6g/g)则抑制共生长,并导致钝顶螺旋藻形态异常。在一定范围内钝顶螺旋藻能高效富集Cr(III),可作为安全营养的保健食品;钝顶螺旋藻抗高Cr(III)压,吸附高浓度Cr(III)的能力使其可用于环境中Cr(III)污染的去除。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染脱色方法的比较研究

本文对几种SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)快速染脱色方法进行了比较研究,从蛋白质回收,染色时间及其灵敏度的角度对它们的优缺点进行了比较,并且阐述了它们各自的染色机理。与常规考马斯亮蓝染色法相比,这几种方法染脱色的清晰度稍差,但是灵敏度相当,在实践上均是可行的。尤其是CaCl2、KCl法的灵敏度更高,染色时间短,

蜡样芽孢杆菌及其毒素的核酸分子检测技术研究进展

蜡样芽孢杆菌是最常见的食源性致病菌之一,通过产生肠毒素和呕吐毒素对食品安全和人体健康造成极大危害,及时、准确地检测蜡样芽孢杆菌对保障食品质量和防控食源性疾病具有重要意义。近年来,核酸分子检测技术成为新兴研究热点和关键分析手段。本文综述了蜡样芽孢杆菌及其毒素检测中常用的以聚合酶链式反应为基础的核酸变温扩增技术和丰富多样的恒温扩增技术,详细介绍了以核酸适配体为代表的功能核酸筛选方法以及新兴核酸适配体检测技术的研究进展,旨在为蜡样芽孢杆菌及其毒素快速分析与鉴定方法的开发与应用提供参考。

转基因产品中bar和pat基因的SYBR Green I-PCR检测方法研究(英文)

SYBRGreenI是一种在实时定量PCR检测中广泛使用的DNA结合染料。PCR结果可以通过溶解曲线分析来鉴定而不再需要使用传统的琼脂糖凝胶电泳来鉴定,因为PCR特定扩增产物的溶解温度的特异性是类似于琼脂糖凝胶电泳中的扩增条带的特异性。建立了基于扩增产物溶解曲线分析的二重实时定量PCR对转bar和pat基因的作物进行检测的方法。获得了bar和pat基因的特异性扩增产物和他们的特定溶解温度,并且通过几组不同的二重PCR对他们的扩增产物进行了溶解曲线鉴定。还对影响溶解曲线分析的一些因素进行了研究和讨论。结果表明基于扩增产物的溶解温度建立的二重PCR检测方法是可行的,该方法对转bar和pat基因的作物可达到0.9%的检测限。

葡萄柚提取物对红地球葡萄保鲜效果的影响

采用0.01%和0.1%(V/V)两种浓度葡萄柚提取物(GSE)对红地球葡萄进行处理,低温贮藏60天,对其保鲜效果进行了试验研究。结果表明,红地球葡萄经GSE处理可延缓相关微生物病害的发生,抑制霉菌在果实表面蔓延,同时减少水分蒸发,与对照相比明显地延长了贮藏期,其中0.1%(V/V)GSE保鲜效果最为显著。

山洪灾害危险区动态预警指标研究——以冷水江市为例

基于多年山洪灾害调查评价和小流域山洪风险评估成果,以小流域为单元,综合考虑前期降雨和土壤含水量,确定小流域动态预警指标。文章以冷水江市为例,探索以危险区为单元,按照山洪灾害的危险性程度,分析山洪预警指标,并研究确定不同等级危险区的动态预警指标,为实现山洪灾害危险区动态管理提供科学指导。