人膜转运蛋白ABCA1及清道夫受体CLA-1表达上调剂的筛选和活性研究

目的筛选上调人ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和人清道夫受体(CLA-1)表达的新型活性化合物,为抗动脉粥样硬化药物提供先导化合物。方法应用本实验室已经建立的ABCA1和CLA-1表达上调剂的高通量筛选模型对20000个化合物进行筛选,从中获得能上调ABCA1和CLA-1表达的化合物,对其及结构类似物进行活性测定,并进行初步的构效关系研究。结果化合物5033171和5242411具有较好的上调ABCA1和CLA-1表达的活性,在ABCA1上调剂模型上的EC50分别为2.10和3.87μmol/L,在CLA-1上调剂模型上的EC50分别为1.37和1.57μmol/L。构效关系研究结果提示苯并噻唑的6位有长链烷基取代对增加活性有利。结论化合物5033171和5242411是活性很好的ABCA1和CLA-1上调剂。

人高密度脂蛋白受体CLA-1上调剂9179D的分离、结构鉴定和活性研究

目的从微生物代谢产物中分离能够上调人高密度脂蛋白受体(CLA-1)表达的新型活性化合物,并对其活性进行研究。方法应用已建立的CLA-1表达上调剂的模型,对阳性菌株链霉菌104A-9179发酵产物的活性成分进行分离纯化,获得活性化合物9179D;通过理化性质、质谱、紫外和核磁等波谱学数据进行结构鉴定;利用RT-PCR和Western Blot方法检测9179D对HepG2中CLA-1表达的影响;利用流式细胞仪检测其对小鼠巨噬细胞RAW264.7结合DiI-HDL的影响。结果从链霉菌104A-9179发酵产物中得到活性化合物9179D,并确定了其结构为曲占柳菌素D(Trichostatin D);9179D在CLA-1上调剂模型上的EC_(50)为46.02μmol/L,表达活性最高值为934%;9179D能增加HepG2中CLA-1的mRNA和蛋白表达;增加RAW264.7对DiI-HDL的结合。结论得到一个微生物来源的具有强的上调CLA-1的表达活性的化合物-9179D(曲古柳菌素D),属首次报道。

化疗相关性腹泻和便秘的诊治

腹泻和便秘是肿瘤患者化疗常见的并发症,目前国际上尚无满意的治疗方案,对症治疗和护理干预可减少并发症,缓解病痛并提高患者的生存质量。笔者收集并总结近几年国内外文献对化疗相关性腹泻(Chemotherapy induced diarrhea,CID)和化疗相关性便秘(Chemotherapy induced constipation,CIC)的相关报道,总结和探讨CID和CIC的发病机制、诊治和预防。

小剂量化疗药物对胶质瘤母细胞U87的生长抑制作用

目的研究体外小剂量化疗药物尼莫司汀(ACNU)、顺铂(CDDP)、卡铂(CBP)(均抗癌药)持续给药对人胶质母细胞瘤株U87的生长抑制作用。方法不同浓度的ACNU、CDDP、CBP分别作用于U87,24h后撤药(A组)和持续作用于U8772h(B组),用MTT法在24、48、72h分别检测药物的2种作用方式对U87细胞的生长抑制率。结果不同浓度ACNU的2种方式,作用48、72h对U87的生长抑制率差异无显著性(P>0.05);不同浓度CDDP和CBP持续作用48、72h(B组)对U87的生长抑制率显著高于24h撤药组(A组),2组比较差异性显著(P<005)。结论小剂量化疗药物在一定的浓度范围内持续作用,对U87的体外生长抑制作用与药物浓度和作用时间成正比。

重组蛋白AdipoR1-EGFP真核表达质粒的构建和表达

目的构建重组pEGFP-N1-AdipoR1真核表达质粒并于HEK293T细胞中瞬时表达。方法提取HepG2细胞总RNA,逆转录合成cDNA,以其为模板,PCR扩增AdipoR1基因,将其插入到pEGFP-N1质粒中,构建重组真核表达质粒pEGFP-N1-AdipoR1,通过脂质体法转染HEK293T细胞,采用酶标仪测定荧光强度,Western blot方法鉴定融合蛋白Adipo R1-EGFP的表达情况。结果 Western blot结果显示,融合蛋白AdipoR1-EGFP在分子量约70 kD处可见明显的目的条带;同时,与未转染质粒的空白对照组相比,转染pEGFP-N1和pEGFP-N1-AdipoR1的细胞中荧光强度都有明显升高,表明融合蛋白AdipoR1-EGFP在HEK293T细胞中成功表达,并且EGFP的荧光强度测定能很好地反映细胞中融合蛋白的表达水平。结论构建并表达AdipoR1-EGFP融合蛋白,所采用的EGFP融合蛋白表达方法简单高效,重复性好,为今后AdipoR1蛋白的表达及功能研究提供了重要参考。

多枝柽柳内生真菌Talaromyces stollii的次级代谢产物研究

通过硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和反相高效液相色谱等多种分离和纯化方法,从多枝柽柳内生真菌Talaromycesstollii的大米发酵培养物中分离得到了7个次级代谢产物,经ESI-MS、^(1)HNMR、^(13)CNMR和旋光比较等多种波谱技术,分别鉴定为penipyridone D(1),penipyridone E(2),penipyridone F(3),berkeleyamide C(4),chrodrimanin A(5),(S)-pestalasin A(6),peniazaphilin B(7),化合物1~4为少有的苄基吡啶酮类生物碱,首次从蓝状菌属真菌中分离得到。化合物5和6对KLF2具有一定的上调活性。

Krüppel样转录因子在动脉粥样硬化中的作用

动脉粥样硬化是一种涉及脂质代谢、炎症、氧化应激等过程的复杂疾病,是多种严重心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)的病理基础[1-2]。根据《2020年中国心血管健康与疾病报告》,心血管病是导致我国城乡居民总死亡的首要原因。据推算,我国现有心血管病患者约3.30亿,且心血管病的患病率及死亡率仍处于上升阶段,给人们带来了严重的疾病负担[3]。尽管我们已经有了以他汀类药物为代表的治疗动脉粥样硬化等心血管疾病的药物,但仍有较多患者的治疗效果不理想,因此发现新型抗动脉粥样硬化药物具有重大的意义。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂的研究进展

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是一种主要在肝细胞中表达的分泌型丝氨酸蛋白酶。PCSK9能够与低密度脂蛋白受体(LDLR)结合形成复合物,并通过溶酶体途径使LDLR降解,从而减少细胞表面LDLR的数量,最终导致血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平升高。近年来,PCSK9抑制剂成为一个治疗高胆固醇血症及动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)药物研发的新热点。目前全球上市了三款PCSK9抑制剂,包括依洛尤单抗(Evolocumab)、阿利珠单抗(Alirocumab)及小干扰RNA药物Inclisiran(Leqvio)。本文对PCSK9的结构、功能、抑制剂的研究进展进行了综述。

利用荧光偏振方法的IDOL/LDLR蛋白相互作用评价体系的建立

目的 利用荧光偏振方法建立体外低密度脂蛋白受体的诱导型降解因子(IDOL)/低密度脂蛋白受体(LDLR)的蛋白相互作用评价体系。方法 通过PCR扩增获得人IDOL蛋白全长cDNA,并与pET-30a(+)原核表达质粒进行重组,转化至大肠杆菌系统进行表达并纯化。将FITC荧光标记的LDLR多肽片段与His-IDOL共同孵育,利用荧光偏振方法,分别对多肽浓度、蛋白浓度以及反应时间进行优化,建立体外IDOL/LDLR的蛋白相互作用评价体系。结果 将pET-30a-IDOL重组质粒进行大肠杆菌原核表达,获得人全长IDOL蛋白。将His-IDOL重组蛋白进行His Trap柱亲和纯化,并与FITC-LDLR进行反应,最终确定500 nmol/L FITC-LDLR和2μmol/L His-IDOL于25℃、100 r/min振荡、避光孵育1 h为IDOL/LDLR相互作用最适反应体系。结论 利用荧光偏振方法成功构建了IDOL/LDLR蛋白相互作用评价体系,该体系为基于IDOL/LDLR相互作用的抗动脉粥样硬化的小分子抑制剂的开发和评价提供了实验基础。

化合物5242331体外抗动脉粥样硬化的活性研究

目的发现新型抗动脉粥样硬化药物的先导化合物,并进行体外抗动脉粥样硬化活性研究。方法应用ABCA1和CLA-1表达上调剂筛选模型,对2000个化合物进行筛选,获得能上调ABCA1和CLA-1表达的化合物;利用RT-PCR和Westernblot方法研究化合物对目的蛋白的作用;利用巨噬细胞泡沫化实验测定化合物的体外抗动脉粥样硬化作用。结果 5242331在ABCA1和CLA-1上调剂模型上的EC50值分别为1.66和3.00μmol/L;进一步研究发现,5242331不仅能上调肝细胞HepG2中CLA-1的mRNA以及蛋白水平,还能上调巨噬细胞RAW264.7中ABCA1和SR-BI的mRNA以及蛋白水平;5242331能明显减少泡沫化巨噬细胞RAW264.7胞内脂滴量。结论化合物5242331具有较好上调ABCA1和CLA-1活性和较好的体外抗动脉粥样硬化效果,属首次报道。

兴平市灯诱金龟甲种类组成及优势种群发生规律

为了调查陕西省兴平市金龟甲的种类和发生规律,笔者于2015^(-2)017年,在兴平市陈文村(植保站病虫观测场)采用佳多虫情测报灯系统诱集金龟甲,分类鉴定并分析种群发生规律。发现兴平市金龟甲目前共有4科10种,以铜绿丽金龟、赤绒鳃金龟、毛黄鳃金龟为优势种。近三年铜绿丽金龟发生盛期依次是:7月7日至8月3日、6月24日至8月6日、7月3日至8月17日;赤绒鳃金龟发生盛期为:7月2日至8月11日、7月16日至8月16日、7月17日至8月23日;毛黄鳃金龟发生盛期主要为4月中下旬。

兴平市2015-2017年部分鳞翅目昆虫名录

2015-2017年,在兴平市陈文村南——植保站病虫观测场利用佳多虫情测报灯系统诱集鳞翅目昆虫,经整理鉴定,并统计虫量。结果发现:部分鳞翅目昆虫共有24393多头,隶属7科77种。为了初步摸清部分鳞翅目昆虫的发生危害状况,随编写此调查名录,旨在为兴平市鳞翅目昆虫的准确预报和科学有效防治提供依据。

浅析提高《维修电工技能训练》教学效果的方法

职校是培养技能型、应用型人才的摇篮，专业课实训教学在职校教学中占有举足轻重的地位。对于机电类职校，电工实训教学是促进学生获取维修电工所需实际知识、熟悉职业环境、培养学生从事维修电工基本能力的重要渠道。《维修电工技能训练》是机电类职校实践性很强的专业课之一，本文从《维修电工技能训练》的重要性，阐述了采取灵活多样的技能训练方法，来提高《维修电工技能训练》的教学效果。

贝叶斯频谱估计和PIXON算法在二维目标定位中的应用

通过对发射信号和反射信号的相位进行测定发现,随着目标物的位置不同,反射信号的相位偏移也随之发生变化,而利用雷达进行目标定位的基本思想就是从反射波的特征中提取出目标的位置信息。基于这种思想,本文设计了相移式目标定位装置,并对采集到的数据运用贝叶斯频谱估计的方法进行了分析,为进一步提高测量精准度,本文还利用了PIXON算法对结果图进行了图形优化。

关于苹果炭疽叶枯病防治药剂筛选研究

为筛选防治苹果炭疽叶枯病有效药剂,进行了5种杀菌剂对炭疽叶枯病的田间防效试验,结果表明,第4次药后26 d,25%吡唑醚菌酯EC 1500倍液和70%丙森锌WP500倍液对苹果炭疽叶枯病防效分别为93.62%和90.95%;80%代森锰锌WP500倍液和78%波尔.锰锌WP500倍液的防效分别为87.24%和83.83%。以上4处理的防效均显著优于86.2%氧化亚铜WG2000倍液。在苹果炭疽叶枯病发生初期,均匀喷雾,间隔15 d,共喷药4次,可达到理想的防治效果。

ABCA1和SR-B1双重基因上调表达剂5242331的合成

苯并噻唑类化合物5242331是通过高通量筛选得到的小分子ABCA1和SR-B1双重基因上调表达剂,具有较好的抗动脉粥样硬化作用.以4-正丁基苯胺为原料,环合得到2-氨基-6-丁基苯并噻唑中间体1,3-氨基丙腈与4-氯磺酰基苯甲酸酰化得到4-[(N-氰乙基)氨磺酰基]苯甲酸中间体2,再与中间体1缩合合成了化合物5242331,收率为71.6%.

兴平市2019年秋季玉米田草地贪夜蛾性诱监测技术研究

为探索草地贪夜蛾性诱监测技术,检测不同厂家、不同诱捕器、不同诱芯、不同高度对草地贪夜蛾的诱捕效果,特在兴平市夏播玉米田开展监测试验。结果得出,3种不同来源诱芯的诱捕效果:百乐宝诱芯(深圳百乐宝生物农业科技有限公司)优于中捷四方诱芯(北京中捷四方生物科技股份有限公司)优于纽康诱芯(宁波纽康生物技术有限公司);设置高度的诱捕效果比较,桶形诱捕器>孔型诱捕器>漏斗型诱捕器。研究表明,百乐宝桶形诱捕器效果最好,可作为草地贪夜蛾性诱监测防治的可靠依据。

药剂防除冬小麦田阔叶杂草试验

通过麦喜等除草剂不同剂量、不同时期的混配使用,探索其对冬小麦田恶性阔叶杂草的防除效果和对小麦生产的安全性,明确最佳使用量和施用时期,于2011年开始进行了本试验。结果表明:冬、春季均可使用麦喜10 mL+乙羧氟草醚13 g,使它隆15ml+苯磺隆10 g,春季使用使它隆15 mL+2甲4氯35 g,均能有效防除以婆婆纳为主的冬小麦田阔叶杂草,尤其冬前用药,效果更好。

2015年兴平市小麦吸浆虫重发原因及防控措施分析

介绍了2015年兴平市小麦吸浆虫虫害情况,分析了兴平市小麦吸浆虫重发的原因和防控措施。文章认为,兴平市小麦吸浆虫重发的原因除了其自身特性外,与气候条件适宜和耕作、管理方式有利关系密切。4月上、中旬的降雨量是发生的关键。

贝叶斯频谱估计在相移式目标定位中的应用

无线电波在传播过程中,如果遇到障碍物,会出现相位偏移,根据相位偏移量可以测定障碍物的位置。本文首先对能够反映相位偏移的Lissajous模式加以介绍,在实验中,根据目标物对天线发出的电波的相位偏移的影响,建立了一套用于目标探测的装置;然后通过分析天线模式,并根据电磁场的相关原理,建立起用于贝叶斯分析的模型方程;最后,运用贝叶斯频谱估计的方法对采集到的数据进行分析,估计出目标的位置。实验证明,由于在数据分析过程中运用了贝叶斯频谱估计这一先进的数据分析方法,因此该目标定位方法能够以较高的精度测定出目标的位置。通过我们进一步的努力,有望将它应用于地雷探测以及地下管道位置的测定中。