比利时杜鹃花类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因克隆及功能分析

【目的】类黄酮3’-羟化酶(flavanone 3’-hydroxylase,F3’H)是植物花青素合成过程中的关键酶,探究比利时杜鹃花(Rhododendron hybridum Hort)F3’H基因的功能及表达特性。【方法】以比利时杜鹃花不同发育时期的花瓣及盛花期的根、茎、叶为实验材料,从比利时杜鹃花转录本数据库中筛选类黄酮生物合成通路关键酶类黄酮3’-羟化酶基因序列信息并进行生物信息学分析,利用反转录(RT-PCR)技术克隆RhF3’H基因;利用紫外分光光度计测定了比利时杜鹃花花瓣不同时期的花青素含量,利用RT-qPCR技术对不同发育时期花瓣和成熟期的不同组织进行RhF3’H基因表达量分析;采用Gateway技术构建过表达载体35S:RhF3’H-GFP重组载体进行亚细胞定位验证;构建p1302-RhF3’H过表达载体对比利时杜鹃花花瓣进行侵染。【结果】成功获得比利时杜鹃花RhF3’H基因长度为1557 bp,编码518个氨基酸,具有保守的F3’H结构域,属于P450超家族;系统进化树分析显示,比利时杜鹃花RhF3’H与龙眼和荔枝F3’H蛋白亲缘关系最近;RT-qPCR结果显示,RhF3’H在比利时杜鹃花不同花瓣时期和根、茎、叶组织中均有表达,在不同花瓣发育时期中,盛开期和衰败期中RhF3’H基因的表达量较高,与花青素含量结果相一致;亚细胞定位分析显示,RhF3’H主要存在于细胞膜上;成功构建P1302-RhF3’H瞬时过表达载体,相较于CK和p1302,p1302-RhF3’H在杜鹃花花瓣中显著高表达,其花青素含量也显著增加。【结论】RhF3’H基因在花瓣细胞膜中表达,表达模式与花青素积累趋势一致;过表达RhF3’H基因促进了花青素的合成。

交播技术在园林草坪养护中的应用研究

在过渡气候带的园林绿地 ,进行了暖季型草坪秋季交播多年生黑麦草籽的应用试验 ,结果表明 :交播技术可用于马尼拉、狗牙根和矮生百慕大等暖季型草坪上 ,交播时间宜在 10月底前进行 ,交播种子用量多年生黑麦草以 2 0～ 30 g/ m2 为宜。

宁波主城区花境植物应用调查及赏析

通过调查宁波主城区33个花境,总结概括城市花境分布特点、规模与类型,介绍赏析宁波花境植物应用的优秀案例,浅析宁波主城区花境现存问题,为城市园林花境应用推广提供参考。

疫情下线上教学在呼吸内科学见习教学效果评价

目的:探讨新冠疫情期间线上呼吸内科学见习的教学效果评价。方法:对在广州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科进行呼吸系统诊断学见习的2018级医学生进行问卷调查,分析学生对线下、线上教学效果的评价和教学满意度。结果:理论教学在线上和线下教学满意度均较高,无统计学差异;与线上教学相比,学生对线下实践教学和技能教学的满意度更高,具有显著统计学差异。56.33%的学生倾向于线上线下混合教学,31.88%倾向于线下教学,仅有9.61%倾向于线上教学。结论:在新冠疫情进入常态化防控阶段,医学见习线上教学模式可作为传统线下教学模式的有效替代,且有较好的教学效果和满意度,但需要进一步优化疫情期间的教学模式,充分结合线上教学与实践教学的优势。

谈居室植物装饰

绿色植物具有清新空气、杀灭病菌和陶冶情操等作用，室内植物可选择盆栽植物、盆景植物和插花植物。居室内植物的布局和配置宜遵循比例适度、环境适应、色彩协调、品种适当和价格合理五个原则。

三个黑莓品种果实品质与贮藏性分析

文章以浙江地区的Brozos、Chester、Hull三个黑莓品种果实为试验材料,在0℃和室温贮藏条件下,对黑莓果实外观、总酸和总糖含量、氨基酸含量、鞣花酸含量、丙二醛含量、过氧化氢酶活性以及清除羟自由基的能力等生理指标进行分析,研究不同贮藏温度对黑莓果实品质的影响,为今后黑莓的贮藏保鲜提供依据和理论指导。结果表明,在室温条件下,Brozos含有的可滴定酸、人体必需氨基酸、鞣花酸的含量最高,营养成分丰富,营养价值最高;0℃贮藏10天条件下,Chester果实的腐烂率最低,过氧化氢酶活性最大,对低温贮藏具有更强的抗逆性表现,能够在贮藏过程中更好的维持果实营养成分。因此,适当的低温贮藏处理可有效抑制黑莓果实的衰老,更好的维持果实品质和营养成分。

低温胁迫下杜鹃杂交后代优良株系的转录组分析

为探索杜鹃抗寒的分子机制,筛选抗寒相关基因,利用人工模拟低温,以杜鹃杂交后代优良株系繁景-6℃(T)处理和25℃(CK)对照为试验材料,进行转录组测序和数据从头组装及生物信息学分析,通过组装得到Unigenes序列122 654个,功能注释结果显示,有大量Unigenes可以注释到基因本体(GO)和蛋白质直系同源数据库(COG)等数据库上,部分Unigenes无匹配信息,可能为杜鹃特有的基因序列。按GO功能分类,繁景杜鹃中的Unigenes分为细胞组分、分子功能以及生物学过程3类,包括51个分支,其中有大量的Unigenes与代谢进程、催化活性和细胞进程相关。上调差异表达基因有6 347个,下调差异表达基因4 482个。通过对转录结果中差异表达显著的4个转录因子家族中的24个基因,其中,上调12个,下调12个,在低温胁迫下的表达水平验证,发现其与转录结果基本一致,证明该转录组数据可靠。

江南城市发展冷季型草坪的难点及对策

冷季型草坪在美化江南城市环境中起了很大的作用。但病害严重,建坪、养护要求高、费用大。建议采用“按所建草坪主要功能建植不同标准的草坪,并采用相应的养护措施”的策略发展冷季型草坪。

低温胁迫对“繁景”杜鹃生理特性及叶片超微结构的影响

"繁景"杜鹃为杂交后代优良新种,研究其对低温的耐受能力,为宁波及周边城市将其作为绿化植物提供参考。该研究以一年生杂交后代优良株系"繁景"为材料,采用盆栽试验,利用人工降温的方法,研究不同低温(0℃,-3℃,-6℃,-9℃)对其生长状态、生理生化及叶片超微结构的影响。结果表明:在-3℃和0℃的低温胁迫下,叶绿素含量降低缓慢且与处理前变化不显著,在-9℃和-6℃的低温胁迫下,其叶绿素含量要显著低于处理前和对照组,不同低温处理下,叶片光合速率均呈下降趋势,至试验结束时,光合速率与温度成正比。在-9℃和-6℃低温胁迫下,其叶片相对电导率和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量增长最快,且过氧化氢酶(Cata-lase,CAT)、以及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性下降幅度最大,在-3℃和0℃低温胁迫下,MDA的含量增长较明显,但可溶性蛋白,CAT,POD及SOD活性变化不明显。温度降低对其叶片超微结构的影响较大,在0℃和-3℃低温胁迫下,其细胞结构正常;在-6℃低温胁迫下,类囊体结构开始模糊,淀粉粒和嗜锇颗粒变大且增多;在-9℃低温胁迫下,细胞膜开始解体,叶绿体被膜破损缺失严重,空洞化程度严重,部分细胞甚至成为空细胞。综合各指标变化情况,杜鹃优良株系能耐受的较低温度为-6℃。因此,杜鹃该优良株系为较耐寒品种,可作为宁波及周边城市良好的杜鹃花绿化候选材料。

经皮穿刺氩氦刀联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌合并慢性阻塞性肺疾病患者的疗效观察

目的 探讨经皮氩氦刀治疗晚期非小细胞肺癌合并COPD患者的近期及远期疗效。方法 对65例EGFR野生型、ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌合并慢性阻塞性肺疾病的肺癌患者,放疗存在一定的风险,在全身化疗的基础上结合经皮氩氦刀局部治疗,观察其近期及远期效果和不良反应。结果 65例患者经过全身及局部联合治疗后,近期有效率达到了43.08%,疾病控制率（DCR）为89.23%,所有患者的不良反应均为1~2级,经处理后都能完成整个治疗过程。治疗后中位PFS为6个月,中位OS为13个月。结论 对EGFR野生型晚期非小细胞肺癌合并慢性阻塞性肺疾病的肺癌患者,在全身化疗的基础上结合经皮氩氦刀局部治疗可以进一步提高治疗效果。

浙江冷季型草坪枯草团发生规律及其病原菌种类的调查

１９９７～１９９８年对宁波、鄞县、杭州等１１个县、市、区约１２万ｈｍ２ 的冷季型草坪进行调查，结果表明：引起冷季型草坪成团枯死的主要病原菌有６种腐霉菌、４种镰刀菌，３种丝核菌和草叶瘟菌；当年新播草坪大量枯死主要是由腐霉菌引起的幼苗猝倒和茎叶腐烂所致，二、三年生草坪上以镰刀菌和丝核菌引起的枯草团为主。腐霉菌的为害与草的播种期密切相关，从３月上旬至６月上旬，病害为害程度随播种期的推迟而急剧加重。

低温胁迫对“琉球红”杜鹃生理特性的影响

[目的]研究"琉球红"对低温的耐受能力。[方法]试验采用盆栽方法,以"琉球红"杜鹃为试验材料,研究了"琉球红"杜鹃叶片中3种保护酶活性[过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)]、相对电导率、丙二醛(MDA)含量、可溶性蛋白含量等理化指标,在0、-3和-6℃(T_1、T_2和T_3)低温条件下,处理1、2、3、4、5、6 d时的变化情况。[结果]在低温胁迫下"琉球红"杜鹃叶片中MDA含量,可溶性蛋白含量,及"琉球红"杜鹃叶片保护酶CAT、POD和SOD活性先升高,且在低温胁迫4 d时,MDA含量、可溶性蛋白含量和酶活性达到最高,随着低温胁迫时间的增加,MDA含量、可溶性蛋白含量和保护酶活性开始下降,在低温胁迫6 d时达到最低,且杜鹃叶片出现轻微萎蔫情况与对照变化较为明显。试验证明"琉球红"杜鹃在-6℃低温胁迫3 d内保持着正常的生理指标,在低温胁迫3 d后,包括外部形态特征、保护酶活性均发生较明显变化。在低温胁迫下"琉球红"杜鹃通过提高保护酶活性及可溶性蛋白含量等,减少了活性氧(ROS)的积累和膜脂过氧化产物的产生,增强了"琉球红"杜鹃耐低温胁迫的能力,但是随着低温胁迫时间的增加,植物细胞受到不可逆的破坏,导致抗氧化酶活性下降,试验表明,"琉球红"杜鹃能耐受的较低温度为-3℃。[结论]该研究可为宁波及周边城市将"琉球红"作为绿化植物提供参考。

智库理念下呼吸科医生专业提升的信息需求的调研

以广东省各大医院的336名呼吸科医生为研究对象,通过电子调查问卷,了解呼吸科医生目前的信息需求、获取信息的原因、渠道、障碍因素及期望等情况,旨在明确目前医学高校图书馆的现状和改革方向,提出要重视分析医生需求,并通过引入新的理论依据,组建科学的知识管理机制、广纳高素质人才和创建科研团队等措施以进一步改善和推动医学高校图书馆乃至高校智库的建设。

冷季型草坪上致病腐霉菌的研究

1997年和1998年的4～6月间，从浙江东北部沿海的11个县、市、区的冷季型草坪病苗上，共分离鉴定Pythium irregulare,P.mamillatum,P.aphanidermatum,P.ultimum,P.deliense和P.graminicola等6种腐霉菌。接种试验表明，这6种腐霉菌都能引起高羊茅猎狗5号幼苗的猝倒病，并导致幼苗生长不良，其中P.deliense对猎狗6号幼苗的致病性最强。

冷季型草坪枯死规律及其病原的研究

1997～1998两年中从我校8个冷季型草坪上的调查研究结果表明，冷季型草坪成团枯死的主要病原有5种腐霉菌，4种镰刀菌和2种丝核菌。当年新播草坪大量枯死主要是腐霉菌引起的幼苗猝倒和茎叶腐烂所致。腐莓菌的为害同播种期密切相关，从3月上旬至6月上旬，病害为害程度随播种期的推迟而急剧加重，上年10月下旬以后至当年3月上旬之前播种可十分有效地减轻腐霉菌的为害。二、三年生草坪上以镰刀菌和丝核菌引起的枯草团为主。

CBL教学法在呼吸专科进修医师PTLB教学中的实践与思考

目的了解进修医师接受经皮肺穿刺活检术(percutaneous lung biopsy,PTLB)培训的现状以及探索以案例为基础的教学法(case-based learning,CBL)应用于PTLB教学的效果。方法 选择2019年1月至2020年12月在广州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科肿瘤病区进修的65名呼吸内科医师为研究对象,基于CBL教学法对研究对象进行PTLB培训考核,期间展开问卷调查。结果 仅少数学员具备PTLB操作技能(26.2%)以及在单位接受过相关培训(23.1%)。对未掌握该技能的学员调查相关的原因,其中临床工作忙未学习是最常见的原因。基于CBL教学法的PTLB培训教学效果良好,其中理论评分中位值为95.0分,操作评分中位值为90.0分。具备PTLB技能组操作评分、加权总分均显著优于未具备PTLB技能组,差异有统计学意义(P <0.05);两组学员的理论评分差异无统计学意义(P> 0.05)。培训后学员对带教态度、培训内容深度、时长、内容易懂度、教学互动以及技能掌握度均有较高的满意度。结论 基于CBL教学法的PTLB培训教学可行且有效,在此基础上探索整合医学的教学模式可能更符合临床实际且真正满足临床的需求。

中国肺癌患者真实世界免疫检查点抑制剂相关性肺炎的流行病学分析

背景和目的:临床研究中免疫检查点抑制剂相关性肺炎(checkpoint inhibitor-related pneumonitis,CIP)在程序性死亡[蛋白]-1(programmed cell death-1,PD-1)和程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed cell deathligand-1,PD-L1)抑制剂引起的免疫相关不良反应(immune-related adverse event,irAE)致死原因中排第一位,而真实世界CIP的流行病学情况缺乏大宗人群研究报道。本研究旨在了解中国真实世界中肺癌免疫治疗的CIP发病率,并进一步总结其特征、治疗现状和转归。方法:回顾并收集2019年1月—2021年9月在广州医科大学附属第一医院和同济大学附属上海市肺科医院首诊肺癌且接受了免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI)治疗的患者基本临床信息,以及CIP患者肺炎的发生时间、等级、治疗方案和转归。总结CIP在研究队列以及各亚组CIP的发病率、发病特点、危险因素以及CIP患者接受免疫抑制治疗的临床现状以及转归。结果:共纳入2031例免疫治疗患者,CIP发生率为7.2%(147/2031),重症率为2.6%(52/2031),致死率为0.4%(9/2031)。其中CIP人群中重症率为35.4%(52/147),死亡率为6.1%(9/147)。与非CIP患者相比,CIP多见于男性、老年(>65岁)、联合治疗、晚期二线免疫治疗的患者。在各亚组CIP发病率的对比中,男性、老年(>65岁)、鳞癌、联合治疗、抗PD-1单抗组、晚期一线及二线治疗的患者发病率更高。真实世界CIP的中位发病时间为免疫治疗后148 d,具有双高峰的特点,即免疫治疗后60~90 d及150~210 d是发病的双高峰时间段。CIP发病还具有一定的季节性,秋冬季高发。治疗的患者均使用了糖皮质激素作为一线治疗;本研究中CIP的免疫抑制治疗率为76.2%,治疗后97.9%轻症CIP患者能预后良好,81.2%重症患者能在治疗后有较好的预后,有17.3%重症患者因CIP死亡。结论:真实世界肺癌患者免疫治疗时总人群CIP发生率为7.2%,重症率为2.6%,致死率为0.4%;其中CIP人群重症率为35.4%,死亡率为6.1%。CIP中位发病时间有双高峰特点,且秋冬季高发;男性、老年、鳞癌、联合治疗、抗PD-1单抗组、晚期一线及二线治疗的患者CIP发病率较高。大部分CIP患者经过免疫抑制治疗后转归良好。

“长新冠”综合征研究最新进展

自2019年新型冠状病毒感染在全球流行以来,许多感染患者在急性感染期后会出现不同症状,涉及全身多个器官,其症状可能持续很长时间,称为“长新冠”综合征。“长新冠”综合征不等于新型冠状病毒感染后遗症,而是病毒感染后的长期持续症状,主要累及呼吸、循环、神经、消化等多个系统。本文对“长新冠”综合征展开综述,旨在提高临床对“长新冠”综合征的重视,提高对新型冠状病毒感染的治疗效果。

云锦杜鹃不同花期挥发性成分的HS-SPME-GC-MS检测与主成分分析

为了探究云锦杜鹃的挥发性成分,该研究采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术对云锦杜鹃不同花期中的挥发性成分进行定性定量分析,并通过主成分分析法分析其特征挥发性成分。结果表明:四个花期共检测出50种挥发性成分,共分为苯丙酸类/苯环型、萜烯类、醇类、醛类、烃类和其他类六大类组分。对29种主要挥发性物质进行主成分分析,提取了两个主成分,累计方差贡献率达到88.545%。分析发现,β-月桂烯、β-罗勒烯、可巴烯、异喇叭烯、桉树脑、衣兰烯、(+)-表二环倍半水芹烯、(3R-反式)-4-乙烯基-4-甲基-3-(1-甲基乙烯基)-1-(1-甲基乙基)-环己烯与第1主成分呈高度正相关,第2主成分的贡献率为31.455%,其中丁香酚的影响最大,呈高度负相关,这些物质是影响云锦杜鹃香气的关键性成分。在9种高度相关的物质中,萜烯类物质占了7种。综上认为,萜烯类物质是云锦杜鹃主要特征香气成分。