裸露DNA疫苗pCDSj32的构建、鉴定及在小鼠骨骼肌细胞的表达

应用基因工程技术，对本室已经克隆的日本血吸虫成虫３２ｋＤａ蛋白分子的ｃＤＮＡ片段进行ＰＣＲ扩增，扩增产物亚克隆入高效真核表达载体ｐＣＤ，构建成功裸露ＤＮＡ疫苗ｐＣＤＳｊ３２。ｐＣＤＳｊ３２在ＢＡＬＢ／ｃ小鼠骨骼肌细胞得到表达。表达产物可被小鼠抗３２ｋＤａ蛋白分子单抗识别。免疫荧光定位显示，表达产物不但存在于细胞浆，而且可结合于胞膜并被分泌至胞外。

不同剂量日本血吸虫裸露DNA疫苗pCDSj32诱发小鼠保护性免疫力的初步研究

应用已构建的日本血吸虫裸露ＤＮＡ疫苗ｐＣＤＳｊ３２经骨骼肌免疫小鼠，获得了较好的保护性免疫效果。１００μｇ和２００μｇｐＣＤＳｊ３２免疫后，减成虫率分别为５２．４３％和３６．４７％；肝组织减卵率分别为５４．１９％和５７．７９％；并对各组小鼠肝脏虫卵肉芽肿的面积进行了测量。结果表明，ｐＣＤＳｊ３２免疫小鼠后可减少虫荷，降低血吸虫的产卵量，抑制肝脏虫卵肉芽肿的形成。

日本血吸虫DNA疫苗pCDSj32不同免疫次数及末次免疫后不同攻击时间对小鼠保护性免疫力的观察

目的 观察日本血吸虫 DNA疫苗 p CDSj32不同免疫次数及末次免疫后不同攻击时间对小鼠保护性免疫力的影响。方法 分别以 10 0 μg/ 10 0 μl的 p CDSj32经股四头肌注射免疫 BAL B/ c小鼠 ,并分为一次免疫组合三次免疫组。各组于末次免疫后 4wk或 8wk,每只小鼠用 40条日本血吸虫尾蚴攻击感染。 6 wk后剖杀小鼠 ,观察各组小鼠的减成虫率和肝组织减卵率。结果 各免疫组与对照组相比均产生较好的保护免疫效果 ,减成虫率为 35 .6 1%～ 44 .44 % ,肝组织减卵率为 39.6 4%～6 9.0 6 %。结论 DNA疫苗不同免疫次数及末次免疫后不同攻击时间对小鼠抗血吸虫尾蚴攻击感染效果有一定的影响。该疫苗免疫一次及免疫后

多种类型趋化性细胞因子在小鼠胸腺基质细胞系中的表达

目的分析趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 KC、 MCP- 1和 RANTES在小鼠胸腺基质细胞系 MTEC1、 MTDC、 D2SC、 MTECB、 TEC 1C8、 TNC及原代培养胸腺基质细胞的半定量表达情况，并检测重组的趋化性细胞因子纯品 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对小鼠胸腺细胞的趋化活性。方法以β- actin为内对照，用 RT- PCR方法，对上述 5种趋化性细胞因子进行 30个循环 PCR扩增，用凝胶成像系统观察扩增结果 ,并对各电泳带进行积分光密度扫描分析。用 Boyden小室法检测重组趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对全胸腺细胞的趋化活性，并计算其趋化指数。结果 SDF- 1α、 IP- 10、 KC、 MCP- 1和 RANTES在被检测胸腺基质细胞系的表达谱不同，表达强度亦有差异。 SDF- 1α和 MCP- 1在 D2SC和 TEC 1C8中未出现可见扩增条带；在 TEC 1C8中也未见 KC的扩增条带。重组趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对胸腺细胞的趋化指数分别为 3.7、 4.5、 6.2和 2.6。结论不同的胸腺基质细胞系，其趋化性细胞因子的表达谱和表达强度不同， 4种重组趋化性细胞因子对胸腺细胞表现出不同的趋化活性。

血吸虫脂肪酸结合蛋白研究现状

脂肪酸结合蛋白在血吸虫脂代谢中具有重要作用。曼氏血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sm14)已被TDR列为优先用于动物试验的两种血吸虫疫苗之一。日本血吸虫脂肪酸结合蛋白作为疫苗的各项研究正在深入开展。本文着重介绍了两种血吸虫脂肪酸结合蛋白的理化性质、免疫定位、分子生物学及其作为双重疫苗的保护性免疫作用。

甲状腺^(99m)锝显像诊断亚急性甲状腺炎合并Graves病1例

患者女,37岁,15天前无明显诱因出现颈部疼痛、增大、咽部不适,吞咽有异物感。查体：心率114次/分,咽喉部红肿、充血,右侧甲状腺Ⅰ度肿大,质中,压痛明显。实验室检查：血沉51.00 mm/h;甲状腺功能：T3 6.19 nmol/L、T4305.90nmol/L、FT3 16.96pmol/L、FT4 62.39pmol/L、TSH〈0.005uIU/ml。心电图示窦性心动过速。

旋毛虫肌肉幼虫ES和S_3抗原诱发小鼠保护性免疫的研究

迄今为止,国外对旋毛虫抗原诱发保护性免疫及其抗原生化分析的报道较多,但国内有关旋毛虫幼虫排泄物分泌物抗原(ES)和杆细胞颗粒相关抗原(S_3)诱发保护性免疫的研究报道尚少。我们于1990年5月进行了本实验,初步探索旋毛虫幼虫ES和S_3抗原接种小鼠后诱发保护性免疫的情况,为旋毛虫病的免疫预防打下基础。

日本血吸虫DNA疫苗pCDSj32在小鼠皮肤组织内的表达及其保护性免疫效果观察

目的用皮内基因免疫注射的方法定位显示重组质粒ｐＣＤＳｊ３２在皮肤细胞的表达及其诱发小鼠抗日本血吸虫尾蚴攻击感染的保护性免疫效果。方法用生理盐水做媒体，将大量制备的质粒ｐＣＤＳｊ３２溶至１００μｇ／１００μ１，于小鼠尾根部远端１～２ｃｍ处进行皮内注射，４ｗｋ后取注射部位皮肤，石蜡包埋、切片，用间接免疫荧光法和免疫组化技术观察ｐＣＤＳｊ３２在皮肤细胞的表达。对照组和１００μｇ／１００μ１ｐＣＤＳｊ３２单剂量免疫组小鼠各１０只，于免疫后４ｗｋ，分别用４０条日本血吸虫尾蚴攻击感染，计数成虫数和每克肝组织虫卵数。结果ｐＣＤＳｊ３２皮内免疫注射后，可在朗罕细胞、表皮的角质形成细胞、真皮的成纤维细胞和毛囊基底细胞的胞浆内表达，表达产物具有免疫原性。与对照组相比，１００μｇ／１００μ１ｐＣＤＳｊ３２单剂量免疫后４ｗｋ，可产生较好的保护效果，减成虫率达３８．３０％，肝脏组织减虫卵率为５６．０１％。结论首次用皮内基因免疫的方法证明日本血吸虫ＤＮＡ疫苗ｐＣＤＳｊ３２可在皮肤多种细胞内表达，并可诱导小鼠产生较强的抗血吸虫感染的保护力。该免疫方法是继肌肉免疫注射之后又一种颇为有效的基因免疫途径，它将为抗血吸虫感染免疫提供一种模拟生理?

放射性核素骨显像不典型表现248例临床分析

目的探讨放射性核素骨显像不典型表现的临床价值.方法对248例核素骨显像呈不典型表现的病例,分别进行病理活检,或X线、CT、MRI检查,或定期复查核素骨显像等进行随访,评价随访结果.结果 (1)骨显像不典型表现的病例中,有肿瘤病史者骨转移的阳性率为22.4%(47/210),无肿瘤病史者骨转移的阳性率为7.9%(3/38),二者相差显著(P＜0.01);(2)肺癌、乳腺癌、前列腺癌患者中,好发部位的骨转移阳性率为30.5%(29/95),非好发部位则为19.4%(7/36),二者相差显著(P＜0.01);(3)60.4%(150/248)的骨显像表现不典型的病例是通过补充X线、CT、MRI检查或随访而最终明确诊断的;(4)28.0%(10/48)的不典型表现病例随访3个月时病灶无明显变化而6个月或12个月后病灶明显扩大或出现新的病灶.结论肿瘤骨转移非好发部位或无肿瘤病史患者的放射性异常浓聚灶也须高度重视,必要时考虑'双癌';应密切结合X线、CT、MRI检查综合分析;骨显像随访时间一般应为3～6个月以上,必要时可超过12个月.

整合素α_vβ_3放射性配体^(99)Tc^m-TP1326的制备及其正常兔显像研究

目的制备99Tcm-TP1326,鉴定其理化性质,研究其在兔体内的示踪动力学及组织器官分布特点。方法化学合成制备GA(D)GG-Aba-RGD-4CK(TP1326),并以氯化亚锡为还原剂进行99Tcm标记,纸层析法测定标记率;采用体外稳定性实验、血清蛋白结合实验及油/水分配实验鉴定标记物的理化性质;测定标记物经健康大耳兔静脉注射后不同时相血液放射性浓度,利用药代动力学分析软件判断其最佳房室模型,并得出药代动力学参数;经健康兔耳缘静脉注射99Tcm-TP1326,SPECT动态显像,观察主要组织器官的放射性分布变化。结果 99 Tcm-TP1326的标记率为(95.86±0.83)%,比活度为(38.62±0.32)TBq/mmol。室温放置4 h后放化纯度为(91.76±2.75)%;柱层析未见蛋白结合放射峰;油/水分配系数为-(1.76±0.06)。99Tcm-TP1326在健康兔体内动力学符合权重为1/c的二室模型,t1/2α、t1/2β分别为(3.115±0.771)、(76.978±22.460)min。SPECT显像示血池影消退迅速,放射性主要经肾脏清除,肠道、胃区、颈部未见明显放射性浓聚,脑呈低放射性本底。结论 99Tcm-TP1326标记方法简便,标记率高,体内外稳定性好,动力学特性优良,血液清除快,主要通过泌尿系统排泄,是一种具有潜在应用价值的肿瘤αvβ3受体分子显像剂。

^(18)F-FDG PET/CT显像与^(99m)Tc-MDP全身骨显像诊断骨转移的价值

目的评价18F-脱氧葡萄糖(FDG)PET/CT与99mTc-亚甲基二膦酸盐(MDP)ECT全身骨显像对骨转移肿瘤的诊断价值。方法对29例经病理或临床证实的恶性肿瘤患者进行18F-FDGPET/CT显像与99mTc-MDPECT全身骨显像,并评价显像效果。结果26例肿瘤患者18F-FDGPET/CT显像为阳性,其中有17例患者发现骨转移45处;在99mTc-MDPECT全身骨显像中,有20例患者发现骨转移77处。结论18F-FDGPET/CT显像对恶性肿瘤具有较高的诊断价值,而99mTc-MDPECT全身骨显像是诊断骨转移的常规方法。

^(99)Tc^m-RGD-4CK在动物体内的分布及显像

目的探讨^(99)Tc^m-环形精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸九肽(RGD-4CK)在健康小鼠体内的生物分布及在健康家兔体内的动态显像表现。方法采用预锡化法以^(99)Tc^m 直接标记 RGD-4CK,3 MM色谱纸层析测定^(99)Tc^m-RGD-4CK 标记率,并计算其比活度。研究^(99)Tc^m-RGD-4CK 于1、5、20、60、90、120、180和240 min 在健康小鼠体内的生物分布特性;通过 SPECT 显像,结合感兴趣区(ROI)时间-放射性曲线分析,观察240 min 内^(99)Tc^m-RGD-4CK 在健康家兔体内的动态分布变化。结果 ^(99)Tc^m-RGD-4CK的标记率为(97.80±0.28)%,比活度为(11.91±0.04)TBq/mmol。小鼠血液放射性清除迅速,通过肾脏排泄较快,其余组织器官放射性均随时间逐渐降低,而脑放射性水平始终最低。家兔各组织器官放射性均随时间逐渐下降,与同一时间肾、心、肝相比,肺、胃、肌肉放射性呈低水平;1 min 双肾即显影,5 min 心、肝影开始减淡,肺放射性分布均匀,强度低于肝脏,膀胱显影;5 min 后膀胱影持续增浓,20 min 后软组织影逐渐减淡;胆囊始终未显影,腹部放射性呈持续低水平,胃区放射性始终缺损,颈部未见明显放射性浓聚。结论 ^(99)Tc^m-RGD-4CK 制备方法简便,标记率高,体内稳定性好,具有比较理想并符合实际的动物体内动力学表现。

^(18)F-FDGPET/CT显像在113例恶性肿瘤患者临床诊断中的应用

目的评价18F标记的脱氧葡萄糖(18F-FDG)正电子发射断层扫描与CT扫描融合显像(PET/CT)在恶性肿瘤患者临床诊断中的应用。方法对113例恶性肿瘤患者进行18F-FDG PET/CT显像并评价显像效果,所有患者病情均经病理或临床证实。结果18F-FDG PET/CT显像发现113例患者恶性肿瘤及转移病灶387处;PET和CT均有肯定诊断的转移病灶306个。CT还独立发现91例患者的良性病灶296处。结论18F-FDG PET/CT显像对恶性肿瘤及肿瘤转移病灶具有较高的诊断价值。

放射性骨显像在组织工程骨修复骨缺损实验中的应用

目的观察修复兔桡骨大段骨缺损时复合了血管内皮祖细胞(EPCs)的组织工程骨的血管化及成骨情况。方法自体骨髓通过不同方法的体外培养,分别获得EPCs及经成骨诱导的骨髓间充质干细胞(MSCs),与脱钙骨基质(DBM)构建组织工程骨修复兔桡骨大段骨缺损,通过放射性核素骨显像技术评价术后不同时期组织工程骨的血管化进程及成骨情况。结果感兴趣区(ROI)计数和摄取比值显示:术后3d,各组间差异无统计学意义,但低于正常对照。术后2、4、8周,各组均呈逐渐上升的趋势,4周和8周时达到峰值,实验组在各个时相点均高于自身对照及阴性对照组。术后12周,各组均开始下降,其中延迟相结果显示:实验组与自身对照组差异无统计学意义,但二者均高于阴性对照组。术后16周,血池相结果显示:实验组低于自身对照组,与阴性对照组无差异;延迟相结果各组差异无统计学意义。结论放射性核素骨显像对骨修复过程中的血管化及成骨具有良好的监测作用。EPCs可以促进组织工程骨的血管化,加速骨愈合。

易被误诊为多发骨转移瘤的全身骨显像病例分析

目的:分析总结易被误诊为多发骨转移瘤的疾病的全身骨显像特征,为核医学医师鉴别诊断这些疾病提供可借鉴的经验。方法:回顾性研究2008年1月—2014年5月我科以骨骼多发病变为表现的全身骨显像病例,重点分析易被误诊为多发骨转移瘤的病例,总结各类误诊疾病的骨显像特征。结果:多发性骨髓瘤、多发性骨纤维异常增殖症、多发性骨结核、甲状旁腺功能亢进症所致骨病、侵犯骨骼的淋巴瘤、骨髓纤维化、多发性骨嗜酸性肉芽肿等疾病可出现类似于多发骨转移瘤的全身骨显像表现,易被误诊。但分析总结后发现多发性骨髓瘤、多发性骨结核、多发性骨纤维异常增殖症、甲状旁腺功能亢进症所致骨病具有一些不同于骨转移瘤的全身骨显像特征。结论:类似多发骨转移瘤骨显像表现的部分疾病具有一些骨显像特征,这些特征有助于核医学医师鉴别骨转移瘤与上述疾病。

日本血吸虫DNA疫苗的构建及其保护性免疫的研究

为探讨血吸虫ＤＮＡ疫苗保护性免疫效果，首先构建、鉴定和表达日本血吸虫ＤＮＡ疫苗（ｐＣＤ－Ｓｊ３２）。实验结果表明：ｐＣＤ－Ｓｊ３２免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠能诱导产生抗日本血吸虫感染免疫力，减虫率为３５．６％～４４．４％，减卵率为３９．４％～６９．０％；１００μｇＤＮＡ一次肌肉注射，免疫后８周攻击感染组的效果好；ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞、ＩＬ－２、ＴＮＦ和ＩＮＦ－γ可能在血吸虫病免疫功能调控中起重要作用；ｐＣＤ－Ｓｊ３２能诱导宿主产生高滴度特异性抗体，并在体外能介导巨噬细胞产生抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ＡＤＣＣ）免疫效应。结果提示，ｐＣＤ－Ｓｊ３２有可能发展为新的预防血吸虫病的亚单位疫苗。

^(153)Sm-EDTMP治疗多发性骨转移及进行全身骨显像的观察

目的评价153Sm-EDTMP治疗多发性骨转移和进行全身骨显像的效果。方法对68例肿瘤骨转移且有骨痛的患者进行连续3次153Sm-EDTMP治疗后再行全身骨显像,评价其疗效和显像效果。结果疼痛完全缓解者占33.8%,部分缓解者占42.7%,总有效率达76.5%;153Sm-EDTMP骨显像质量比99mTc-MDP更好;不良反应主要为骨髓抑制。结论153Sm-EDTMP使用安全有效,是比较理想的内照射治疗药物和骨显像剂。

应用Dot-ELISA进行日本血吸虫循环抗原检测时其滴度与感染度关系的动态观察

以２０条／只和１００条／只剂量的尾蚴感染家兔，并于第９ｗｋ用吡喹酮对约半数家兔进行一次性灌胃治疗，依此建立日本血吸虫感染模型。用分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体建立直接斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）并应用该法分别检测感染家兔血中３类循环抗原、膜相关抗原（ＭＡＡ），肠相关抗原（ＧＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ），观察循环抗原滴度水平和日本血吸虫感染度之间的关系。结果发现，当用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测３类循环抗原时，２０条尾蚴感染组与１００条尾蚴感染组家兔不论治疗与否，血中３类循环坑原滴度水平无显著性差异。

多发性骨髓瘤肌肉软组织广泛高摄取^(99m)Tc-MDP2例

病例1．男，44岁，多关节肿痛1年余．加重1周。查体：双踝、双膝、双腕、双手掌指及近端指关节明显肿胀，压痛。皮温增高，皮色发红。实验室检查：