中医治疗系统性红斑狼疮研究进展

系统性红斑狼疮(SLE)是一种以大量自身抗体形成为主要特征、累及多系统的自身免疫性疾病。SLE主要发生于青春期至围绝经期女性。中医药在SLE治疗中具有增效、减毒作用,同时在降低继发感染、骨质疏松、情绪障碍等不良反应发生率,提高用药安全性,增加治疗方法多样性等方面有显著优势。目前,中医治疗SLE可采用辨证论治针对性治疗、分期辨证治疗、中成药治疗及中药提取物治疗等。本文就近年来中医治疗SLE的研究进展进行综述。

和胃降逆方对非糜烂性胃食管反流病大鼠5-HT3／5-HT4受体表达的影响(二)

目的:观察和胃降逆方对非糜烂性胃食管反流病大鼠5-羟色胺受体表达的影响。方法:将SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、奥美拉唑组、和胃降逆方高剂量组、和胃降逆方中剂量组、和胃降逆方低剂量组,采用基础致敏联合酸灌注的方法建立内脏高敏感NERD模型;干预2周后取食管组织;Western Blot与RTPCR法测定5-HT3R与5-HT4R的蛋白与基因表达水平。结果:奥美拉唑组、和胃降逆方高、中、低剂量组大鼠食管5-HT3R蛋白表达量均低于模型组(P<0.05);奥美拉唑组、和胃降逆方高、中、低剂量组大鼠食管5-HT4R蛋白表达量与模型组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);和胃降逆方中、低剂量组大鼠食管5-HT3RmRNA表达量明显低于模型组(P<0.01或P<0.05);奥美拉唑组、和胃降逆方高、中、低剂量组食管5-HT4RmRNA表达量与模型组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:和胃降逆方可降低非糜烂性胃食管反流病大鼠5-HT3R的表达量,调节食管-内脏高敏感性。

炎症小体NLRP3在高脂饲料饲喂诱导的NASH大鼠肝、肠中的表达及葛根芩连汤干预研究

目的探讨葛根芩连汤对高脂饲料饲喂诱导的NASH大鼠肝脏、小肠中炎症小体NLRP3相关因子的影响。方法以高脂饮食建立大鼠NASH模型,并于造模同时进行药物干预;实验第8周末留取肝脏、小肠组织,Western blot及RT-PCR法检测炎症小体NLRP3相关因子蛋白及mRNA水平。结果肝脏炎症小体NLRP3中:与空白组相比,模型组P10 mRNA及蛋白均有升高趋势,药物干预后其蛋白表达降低趋势明显(P<0.05)。小肠炎症小体NLRP3中:与空白组相比,模型组P10蛋白表达升高,药物干预后表达下降(P<0.05)。结论高脂饲料饲喂的大鼠,小肠中炎症活化趋势强,炎症小体NLRP3中激活因素与稳定因素的平衡被打破,以炎症小体激活因素活化为主;肝脏中炎症小体亦有活化,但较易形成"高位"新的平衡;葛根芩连汤可减低激活因素活化程度、提高稳定因素活化程度,利于炎症小体内部平衡的恢复。

和胃降逆方对非糜烂性胃食管反流病大鼠5-羟色胺及其受体表达的影响(一)

目的:观察和胃降逆方对非糜烂性胃食管反流病(NERD)大鼠5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)及其受体表达的影响,探讨和胃降逆方对非糜烂性胃食管反流病大鼠的作用机制。方法:将SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、奥美拉唑组、和胃降逆方高剂量组、和胃降逆方中剂量组、和胃降逆方低剂量组,采用基础致敏联合酸灌注的方法建立内脏高敏感NERD模型;干预2周后取血清与食管组织;ELISA法测定大鼠血清及食管中5-HT的含量,HE染色评价大鼠食管病理改变情况,免疫组织化学法测定5-HT3R与5-HT4R的表达水平。结果:和胃降逆方中、低剂量组、奥美拉唑组大鼠血清5-HT含量均低于模型组(P<0.05);和胃降逆方中剂量组、奥美拉唑组大鼠食管5-HT含量低于模型组(P<0.05);和胃降逆方高、中剂量组大鼠食管5-HT3R表达量明显低于模型组(P<0.05)。结论:和胃降逆方可降低NERD大鼠血清及食管5-HT水平,其作用机制可能与降低食管5-HT3R的表达有关。

清肠温中方治疗溃疡性结肠炎84例

目的观察清肠温中方治疗溃疡性结肠炎的临床效果。方法选取2013年8月~2015年2月期间就诊的溃疡性结肠炎患者84例,西医诊断属于轻中度活动期,中医辨证属于寒热错杂、湿热瘀阻证型,停用西药及灌肠等其他治疗方法,单独口服清肠温中方治疗8周,采用自身前后对照研究,比较治疗前后患者的症候疗效、生活质量、疾病活动度和肠镜下黏膜情况。结果 （1）中医证候疗效评定方面：清肠温中方治疗8周后,临床痊愈12例（14.3%）,显效36例（42.9%）,有效23例（27.4%）,总有效71例（84.52%）。治疗前后中医证候平均总积分分别为（12.61±0.51）分、（4.42±0.43）分,治疗后积分较治疗前显著降低（P〈0.01）;（2）生活质量方面：患者的肠道症状积分、全身症状积分、情感功能积分、社会功能积分和生活质量总积分均高于治疗前（P〈0.01）;（3）疾病活动度方面：共有46例患者治疗后复查肠镜,对其进行治疗前后的Mayo评分,治疗前轻度活动期（9例）,中度活动期（32例）,重度活动期（5例）;治疗后临床缓解（22例）,轻度活动期（23例）,中度活动期（1例）,无重度活动期患者,其中临床有效为43例（93.48%）,无效为3例（6.52%）。治疗前后Mayo评分分别为（7.70±2.11）分、（2.44±1.52）分,治疗后较治疗前显著降低（P〈0.01）;（4）黏膜病变疗效方面：对此46例复查肠镜患者使用修正Baron评分系统进行黏膜病变疗效评定,治疗前黏膜病变情况为4分（21例）,3分（15例）,2分（8例）,1分（2例）;治疗8周后4分（2例）,3分（4例）,2分（11例）,1分（24例）,0分（5例）。治疗前后Baron评分分别为（3.20±0.88）分、（1.44±0.96）分,治疗后较治疗前显著降低（P〈0.01）。结论清肠温中方可以减轻溃疡性结肠炎活动期患者的临床症状,改善中医证候;提高患者的生活质量;降低疾病的活动度,对肠黏膜也有良好的修复作用。

温中健脾、清热燥湿法对TNBS/无水乙醇诱导的溃疡性结肠炎(寒热错杂证)模型大鼠Occludin蛋白的影响

目的观察温中健脾、清热燥湿法对TNBS/无水乙醇诱导的寒热错杂证溃疡性结肠炎(UC)大鼠及Occludin蛋白的作用影响并探讨其作用机制。方法70只雄性SD大鼠随机分为7组,除空白组外,其余均用5%TNBS/无水乙醇保留灌肠3 d复制寒热错杂证UC大鼠模型,造模后分别用蒸馏水,清肠温中浸膏高、中、低剂量,美沙拉秦缓释颗粒和乌梅丸颗粒剂灌胃干预10 d,记录大鼠疾病活动指数、结肠黏膜损伤指数(CMDI),观察结肠组织病理改变,免疫组化染色观察Occludin蛋白表达。结果与空白组比较:模型组大鼠体质量明显减轻(P<0.01);便潜血、便质、CMDI、结肠组织病理评分明显升高(P<0.01);结肠Occludin蛋白表达明显减少(P<0.01)。与模型组比较:中药中剂量、乌梅丸和美沙拉秦组体质量均增加((P<0.05或P<0.01);中药中剂量和美沙拉秦组便潜血和便质评分下降(P<0.05),病理组织评分明显降低(P<0.01),Occludin蛋白表达明显增加(P<0.01);美沙拉秦组CMDI评分降低(P<0.05),中药组评分下降但差异尚无统计学意义(P>0.05)。结论温中健脾、清热燥湿法可以减轻TNBS/无水乙醇诱导的寒热错杂证UC大鼠疾病程度,改善体质量、便潜血和便质,减轻结肠黏膜损伤,修复结肠黏膜组织病变并增加Occludin蛋白表达,提高肠上皮细胞间紧密连接完整性,从而起到治疗UC的效果。

温运清利法对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织DAG-PKCε信号通路的作用研究

目的探讨温运清利法对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝组织甘油二酯(diacylglycerol,DAG)/蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)信号通路的影响。方法高脂饮食饲养SD大鼠8周制备NASH模型,造模成功后,将大鼠随机分为模型组、苓桂术甘汤组、茵陈蒿汤组、合方组(苓桂术等与茵陈蒿汤)、罗格列酮组,共5组,每组10只;另有空白组10只。药物治疗4周后,运用自动生化分析仪检测血清生化指标,HE染色、油红O染色观察肝组织病理,ELISA法检测肝组织DAG,RT-PCR检测PKCεmRNA、TNF-αmRNA,Western blot检测PKCε和TNF-α蛋白的表达。结果 (1)各给药组大鼠一般状况、肝组织脂肪变性和炎症反应程度、血清生化指标等均较模型组有一定的减轻;(2)苓桂术甘汤、合方组、罗格列酮组大鼠肝组织DAG较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01);(3)各治疗组大鼠肝组织PKCεmRNA和蛋白含量均显著降低(P<0.05,P<0.01),茵陈蒿汤组、合方组及罗格列酮组大鼠肝组织TNF-αmRNA和蛋白含量显著降低(P<0.05)。结论温运清利法可能是通过下调肝组织DAG,抑制PKCε表达,降低TNF-α水平,从而对肝内脂质代谢、胰岛素抵抗、炎症损伤起到了调节作用,DAG/PKCε通路有可能成为治疗NASH的新靶点。

痛泻安肠方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠NGF/PLC-γ/TRPV1信号通路表达的干预效应

目的观察神经生长因子(NGF)/激活磷脂酶C-γ(PLC-γ)/瞬时受体电位香草酸亚型-1(TRPV1)信号通路在腹泻型肠易激综合征模型大鼠的表达变化及痛泻安肠方的干预效应。方法采用冰醋酸灌肠、球囊直肠扩张联合夹尾刺激的方法制备腹泻型肠易激综合征模型,造模成功后,将60只SD大鼠按随机数字表法分为模型组、痛泻安肠方低剂量组、痛泻安肠方中剂量组、痛泻安肠方高剂量组、得舒特组5组,另有空白组10只。观察各组大鼠治疗前后腹壁撤退反射(AWR)评分、粪便Bristol分级评分和含水量;采用Western Blot检测结肠NGF、PLC-γ、TRPV1蛋白表达,采用Real-Time PCR检测结肠NGF、PLC-γ、TRPV1 mRNA的表达。结果模型组大鼠较空白组内脏敏感性阈值下降(P<0.05或P<0.01),粪便Bristol分级评分和含水量均明显升高(P<0.01);治疗后,痛泻安肠方低、中、高剂量组与得舒特组大鼠内脏敏感性阈值升高(P<0.05或P<0.01),粪便Bristol分级评分和含水量降低(P<0.01),结肠NGF、PLC-γ、TRPV1蛋白表达下降(P<0.05或P<0.01),PLC-γ、TRPV1 mRNA表达降低(P<0.01)。结论痛泻安肠方能降低腹泻型肠易激综合征大鼠内脏高敏感性,其机制可能是通过下调结肠NGF、PLC-γ、TRPV1蛋白表达,降低结肠PLC-γ、TRPV1 mRNA表达,上调内脏敏感性而实现的。

清肠温中方通过miR-675-5p/VDR信号通路调控溃疡性结肠炎Th17/Treg免疫平衡及肠黏膜屏障的机制研究

目的研究清肠温中方调控DSS诱导溃疡性结肠炎(UC)大鼠Th17/Treg免疫平衡及肠黏膜屏障的作用机制。方法 24只SPF级雄性SD大鼠,按体质量依照随机数字表将其随机分为空白组、模型组、清肠温中方组。空白组自由饮用去离子水,同时予去离子水灌胃;模型组和清肠温中方组自由饮用4.5%DSS溶液制备UC模型,同时模型组给予去离子水,清肠温中方组予清肠温中方灌胃。7 d后麻醉大鼠后取血及结肠组织,应用Real time-PCR法检测结肠miR-675-5p、VDR m RNA、RORγt mRNA、Foxp3 m RNA的表达,ELISA法检测血清IL-10、IL-17的表达,免疫组织化学法检测ZO-1、Occludin的蛋白表达及分布。结果与空白组比较,DSS诱导的UC大鼠结肠mi R-675-5p、RORγt mRNA及血清IL-17的表达较空白组明显升高(P <0.05或P <0.01),VDR mRNA、Foxp3 mRNA、ZO-1、Occludin、血清IL-10的表达较空白组明显降低(P <0.05或P <0.01);清肠温中方干预后,大鼠结肠mi R-675-5p、RORγt mRNA、血清IL-17的表达较模型组明显降低(P <0.05),VDR mRNA、Foxp3 mRNA、ZO-1、Occludin、血清IL-10的表达较模型组明显升高(P <0.05或P <0.01)。结论清肠温中方可能通过降低mi R-675-5p的表达,靶向调控VDR信号通路,从而调控溃疡性结肠炎Th17/Treg免疫平衡、修复肠黏膜屏障损伤,达到治疗UC的目的。

清肠温中方对溃疡性结肠炎大鼠干扰素γ诱导蛋白10的影响

目的:研究清肠温中方对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织干扰素γ诱导蛋白10(IP10)的影响。方法:自由饮用4.5%DSS溶液7天制备UC模型,同时给予清肠温中方低剂量、中剂量、高剂量及美沙拉嗪(莎尔福)进行灌胃干预,处死大鼠,取结肠组织,应用酶联免疫吸附法检测结肠白介素-1α(IL-1α)、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(INF-γ)的表达水平,免疫组织化学法检测IP10的蛋白表达及分布。结果:与正常组相比,DSS诱导的UC大鼠结肠炎症因子(IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α、INF-γ)和IP10的表达水平均显著升高,而经过7天的干预后,结肠炎症因子(IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α、INF-γ)和IP10的表达水平明显降低(p<0.01,p<0.05)。结论:清肠温中方能够通过抑制IP10的表达,下调结肠炎症因子(IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α、INF-γ)的水平,从而抑制肠道抑制炎症、修复肠粘膜损伤,达到治疗溃疡性结肠炎的目的。

复方溃结康灌肠液对葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的保护作用

目的研究复方溃结康灌肠液对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的保护作用。方法将大鼠随机均等分为正常组、模型组、复方溃结康灌肠液低剂量组(787.5 mg/kg)、复方溃结康灌肠液中剂量组(1575 mg/kg)、复方溃结康灌肠液高剂量组(3150 mg/kg)、美沙拉嗪组(5 mL/kg),除正常组外,自由饮用4.5%DSS溶液7 d制备溃疡性结肠炎模型,各治疗组给予相应药物行灌肠干预,每日称取大鼠体质量,检测便潜血,评估疾病活动指数(DAI);干预结束后,处死大鼠,取结肠组织,观察大鼠病理损伤及进行结肠组织病理学(HS)评价,同时应用化学比色法来检测髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果与正常组相比,DSS诱导的UC大鼠毛色、活动度、潜血、大便性状等一般情况较差,体质量下降明显,DAI指数最大,病理损伤明显,HS评分最重,MPO活性较正常组更高(P<0.01),经过7 d的干预后,各治疗组均有不同程度的好转,能够降低DAI指数和HS评分,下调MPO活性水平(P<0.01)。结论复方溃结康灌肠液对DSS诱导溃疡性结肠炎大鼠有较好的治疗作用,能够明显改善腹痛腹泻、脓血等临床症状,还能降低结肠炎症细胞的浸润,保护结肠黏膜。

自噬相关蛋白在高脂饲料诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏中的表达及茵陈苓桂术甘汤的干预效应

目的：观察苓桂术甘汤与茵陈蒿汤合方（茵陈苓桂术甘汤）对非酒精性脂肪性肝炎大鼠细胞自噬的影响,初步探讨合方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的作用机制。方法：将SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、茵陈苓桂术甘汤组、苓桂术甘汤组、茵陈蒿汤组,采用高脂饲料法建立NASH模型;高脂饲料饲养8周并同时给药,Western Blot法测定LC3II、LC3I表达量,Western Blot与RT-PCR法测定肝脏p62、ATG5蛋白与基因表达水平。结果：给药后,模型组大鼠肝脏ATG5表达量、LC3II/LC3I比值下降,p62表达量上升（P〈0.05）;与模型组比较,各给药组大鼠肝脏ATG5表达量、LC3II/LC3I比值有不同程度上升,p62表达量下降（P〈0.05,P〈0.01）。结论：茵陈苓桂术甘汤可能通过激活细胞自噬,从而达到改善氧化应激,防治NASH的目的。

苓桂术甘汤与茵陈蒿汤合方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠Nrf2/ARE信号通路的影响

目的:从氧化应激的角度,观察苓桂术甘汤与茵陈蒿汤合方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的干预效应,并通过Nrf2/ARE信号通路探讨合方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的作用机制。方法:将SPF级SD大鼠随机分为正常组,模型组,合方组(6.93 g·kg^(-1)),苓桂术甘汤组(3.465 g·kg^(-1)),茵陈蒿汤组(3.465 g·kg^(-1)),莱菔硫烷组(0.5 mg·kg^(-1)),采用高脂饲料法建立NASH模型;高脂饲料饲养8周并同时给药,取材检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以及血脂总胆固醇(total cholesterol,TC),甘油三酯(triglyceride,TG),高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein,HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein,LDL-C)水平,取部分肝组织进行苏木素-伊红(HE)染色,蛋白质免疫印迹(Western blot)与逆转录PCR(RT-PCR)法测定肝脏细胞质接头蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1),核因子E2-关联因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2),醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase-1,NQO1),血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白与mRNA表达水平。结果:给药后,与正常组比较,模型组大鼠血脂TC,TG,HDL-C,LDL-C及血清ALT,AST水平升高,肝脏脂肪变明显,肝脏Keap1表达量降低,Nrf2,NQO1,HO-1蛋白与mRNA表达量升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组血脂TC,TG,HDL-C,LDL-C及血清ALT,AST水平有不同程度降低,肝脏病理学也有不同程度改善,除茵陈蒿汤组变化不明显外,各给药组大鼠肝脏Nrf2,NQO1,HO-1蛋白与mRNA表达量均有不同程度升高(P<0.05,P<0.01);但对于Keap1的表达无明显作用。结论:苓桂术甘汤以及合方可能通过激活Nrf2/ARE信号通路,从而达到改善氧化应激,防治非酒精性脂肪性肝炎的目的。

李军祥教授治疗非酒精性脂肪性肝炎临床经验

流行病学研究调查显示非酒精性脂肪性肝炎（NAFLD）近年来发病率呈上升趋势,目前不少西药在临床中已观察到可以改善NAFLD,但治疗NAFLD疗效并不理想,并且长期服用安全性等问题仍处于探索阶段。而中医对于NAFLD的治疗具有独特的理论和雄厚的临床基础,在NAFLD的临床治疗中具有丰富的临床经验。

茵陈二陈汤对非酒精性脂肪性肝炎模型细胞JNK1、AP-1蛋白表达的影响

[目的]:探讨茵陈二陈汤对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型细胞JNK1、AP-1蛋白表达的影响。[方法]采用游离脂肪酸500μmol/L(棕榈酸油酸摩尔比例为1:2)刺激干预HepG2细胞,干预24h建立细胞模型,采用茵陈二陈汤含药血清干预模型细胞,干预治疗24h,选用罗格列酮、易善复含药血清作为治疗对照;采用CCK-8法筛选最佳含药血清干预浓度,采用Western blot检测茵陈二陈汤对模型细胞JNK1、AP-1蛋白表达的影响。[结果]与空白组比较,游离脂肪酸刺激24h后,模型细胞内JNK、AP-1蛋白表达水平明显升高;与中药组比较,茵陈二陈汤干预治疗24h后,模型细胞内JNK、AP-1蛋白显著降低。[结论](1)茵陈二陈汤可通过调节JNK1、AP-1蛋白表达,降低肝细胞JNK、AP-1蛋白水平,从而达到治疗作用;(2)茵陈二陈汤对JNK1、AP-1蛋白的影响作用与罗格列酮及易善复效果相近。

茵陈二陈汤对非酒精性脂肪性肝炎模型细胞IRS-1^ser307、PKB^ser473表达的影响

[目的]探讨茵陈二陈汤对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型细胞内IRS-1^(ser307)、PKB^(ser473)蛋白表达的影响;[方法]采用游离脂肪酸500umol/L(棕榈酸:油酸摩尔比例为1:2)刺激干预HepG2细胞,干预24h建立细胞模型,采用茵陈二陈汤含药血清干预模型细胞,干预治疗24h;选用罗格列酮、多烯磷脂酰胆碱含药血清作为治疗观察对照;Western Blot检测茵陈二陈汤对模型细胞内IRS-1^(ser307)、PKB^(ser473)蛋白表达及IRS-1^(ser307)/IRS-1、PKB^(ser473)/PKB的影响。与空白组相比,游离脂肪酸刺激24h后,模型细胞内IRS-1^(ser307)蛋白表达及IRS-1^(ser307)/IRS-1水平明显升高,PKB^(ser473)蛋白及PKB^(ser473)/PKB水平显著下降;与模型组相比,茵陈二陈汤干预24h后,模型细胞内IRS-1^(ser307)蛋白表达(P<0.01)及IRS-1^(ser307)/IRS-1水平(P<0.01)显著降低,PKB^(ser473)蛋白(P<0.05)及PKB^(ser473)/PKB水平(P<0.05)明显升高,且差异具有统计学意义。[结论](1)茵陈二陈汤可通过调节IRS-1^(ser307)、PKB^(ser473)蛋白表达,降低肝细胞IRS-1蛋白活化水平,促进PKB磷酸化,从而达到干预治疗作用;(2)茵陈二陈汤对IRS-1^(ser307)、PKB^(ser473)蛋白的影响作用与罗格列酮及多烯磷脂酰胆碱效果相近。

中医药治疗非酒精性脂肪性肝病专题笔谈

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是指除外酒精和其他明确的肝损害因素所致的,以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征,包括非酒精性单纯性脂肪肝（non-alcoholic simple fatty liver,NAFL）以及由其演变的非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）、脂肪性肝纤维化和肝硬化。