邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对睾丸的毒性作用及机制

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)是目前使用最广泛的增塑剂之一,DEHP具有毒性,长期暴露会对机体的多个系统产生损害,特别是对雄性生殖系统的毒性作用更为明显。DEHP通过诱导氧化应激、调控细胞自噬,促进生精细胞和睾丸间质细胞凋亡、抑制睾酮合成、破坏血-睾屏障、诱导睾丸支持细胞铁死亡以及影响子代雄性的表观遗传等,造成生殖器官的病理损伤。本文就DEHP对睾丸的毒性作用及机制进行综述,拟为男性生殖障碍的防治研究提供新思路。

社区团购团长服务质量对消费者再购买行为的影响研究——有调节的中介模型

通过对消费者进行303份问卷调查,利用SPSS 24.0和AMOS 24.0探究团长服务质量对消费者再购买行为的影响及顾客感知价值的中介作用。研究发现,团长服务质量对消费者再购买行为具有正向影响。团长服务质量及消费者再购买行为的部分中介作用,可通过顾客感知价值进行传导;平台质量调节团长服务质量对消费者再购买行为的直接影响,并在“团长服务质量-顾客感知价值-再购买行为”影响路径的前半段具有正向调节作用。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及Bax表达的影响

目的研究N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及凋亡相关基因Bax表达的影响。方法手术建立大鼠单侧隐睾模型,实验分为隐睾组、隐睾+L-NAME组[术后腹腔注射溶于生理盐水的L-NAME 50 mg/(kg.d)]、隐睾+生理盐水组、假手术组,7 d后采用化学比色法检测睾丸组织NOS活性,流式细胞术(FCM)和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡,RT-PCR和免疫组织化学法检测Bax基因表达变化。结果隐睾组和隐睾+生理盐水组之间检测指标无明显差异;隐睾+L-NAME组隐睾凋亡细胞百分比和生精细胞凋亡指数均低于隐睾组及隐睾+生理盐水组,高于假手术组(P<0.05);Bax mRNA和蛋白表达水平隐睾组及隐睾+生理盐水组最高,假手术组次之,隐睾+L-NAME组最低。结论隐睾生精细胞Bax表达增加,L-NAME可通过下调Bax的表达抑制隐睾生精细胞凋亡。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响

目的 :研究N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 :手术建立大鼠单侧隐睾模型 ,术后分别注射L NAME及生理盐水 ,7d后采用流式细胞术检测 2组大鼠隐睾生精细胞凋亡 ,免疫组化法检测隐睾内Bcl 2和Bax基因表达变化。结果 :实验组隐睾重量较对侧正常睾丸重量减轻的程度低于对照组 ,生精细胞凋亡百分比及Bax表达较对照组低 ,而Bcl 2表达较对照组高。结论 :L NAME可通过调控Bcl 2和Bax的表达抑制隐睾导致的生精细胞凋亡。

免疫组织化学实验技术教学实践与体会

免疫组织化学实验技术课程在医学研究生教学中具有重要地位,如何在限定的学时内让选修该课程的学生掌握其基本实验操作技能,对培养和提高研究生基本科研素质具有重要意义。通过精简理论教学内容,加强实验操作教学,运用现代教育技术优化教学过程,重视实验带教前的准备工作,督促每位学生自己动手进行实验操作,改革课程考核评定体系,取得了满意的教学效果。

热应激对大鼠睾丸Bcl-2和Bax表达的影响

目的研究热应激对大鼠睾丸B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X(Bcl-2 associated X,Bax)表达的影响。方法42天龄24只雄性SD大鼠建立单侧隐睾作为热应激处理的模型,随机选取16只大鼠建立左侧隐睾作为热应激处理的模型,其余8只将左侧睾丸还纳入阴囊后关腹作为假手术组。术后第3天和第7天分别采用RT-PCR和免疫组织化学SABC方法检测热应激处理后睾丸Bcl-2、Baxm RNA和蛋白表达的变化。结果与假手术组睾丸相比,热应激后第7天睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内Bax mRNA和蛋白表达增高,而Bcl-2 mRNA蛋白在热应激后第3天表达明显降低,差异有显著性(P<0.05)。结论热应激能导致睾丸内Bax表达增高,Bcl-2表达降低,从而促进生精细胞凋亡增加。

实验性大鼠隐睾中eNOS的表达与生精细胞凋亡

①目的研究内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的表达与实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的关系。②方法通过手术建立单侧大鼠隐睾模型,术后第7天采用TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组化SABC法及RT-PCR检测隐睾及对侧睾丸eNOS基因表达的变化。③结果术后第7天隐睾侧重量明显减轻,生精细胞凋亡指数较对侧睾丸明显增加;RT-PCR显示隐睾中eNOS mRNA的表达较对侧睾丸增强;免疫组化显示对侧睾丸生精上皮内未见eNOS表达,隐睾侧睾丸生精上皮中有eNOS表达。④结论隐睾生精细胞凋亡明显增加,eNOS参与介导生精细胞凋亡。

显微数码互动系统进行组织学实验教学的体会

结合教研室自身特点,引进显微数码互动系统结合原有的多媒体闭路电视进行组织学实验教学,能提高学生实验课的学习效率,降低教师的工作强度,促使教学水平和教学质量的提高。

L-NAME对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的抑制作用

目的：研究N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：36只雄性SD大鼠戊巴比妥钠(50mg／kg)腹腔内注射麻醉，下腹正中切口切断左侧睾丸引带，用5-0尼龙线将左侧睾丸固定于腹后壁，切断右侧睾丸引带后将右侧睾丸还纳入阴囊后关腹，术后第一天将大鼠随机分为两组，

课程思政融合创新教育的组织学与胚胎学教学改革探索与实践

为提升组织学与胚胎学教学效果,可通过修订教学大纲,在教学目标中增加创新思维与能力培养等素质目标;挖掘课程中蕴含的思政元素,并与创新教育融合;改革课程教学方法,培养学生创新能力;改革课程考核评价方法,引导学生积极参与等措施来实现。实践表明,课程思政融合创新教育不仅能提高学生学业成绩,还能培养学生的科研素养和创新能力,促进教学相长,具有推广价值。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对实验性大鼠隐睾Bcl-2表达的影响

①目的研究一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡过程中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达的影响。②方法 42天龄雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型,随机分为隐睾组、隐睾+L-NAME组、隐睾+生理盐水(溶媒)组、假手术组,每组12只大鼠,隐睾+L-NAME组和隐睾+生理盐水组大鼠术后分别腹腔内注射L-NAME或生理盐水,每天1次,定时定量(50mg/Kg),术后第7天分别采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测各组隐睾Bcl-2mRNA和蛋白表达的变化。③结果与假手术组睾丸相比,隐睾组、隐睾+生理盐水组睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内Bcl-2mRNA和蛋白表达降低,差异有显著性(P<0.05);而隐睾+L-NAME组Bcl-2 mRNA和蛋白与假手术组睾丸无明显差别。④结论 L-NAME可通过调节Bcl-2的表达抑制热应激导致的生精细胞凋亡。

硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠生精功能的影响

目的 :观察硝普钠 (SNP)与L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞DNA及倍体细胞群的影响 ,探讨一氧化氮 (NO)对睾丸生精功能的作用。 方法 :4 0只雄性SD大鼠均分为 4组 ,分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 (NS) ,1次 /d ,共 12d。于最后 1次给药后 2h颈动脉放血处死动物。收集血清于- 70℃冻存 ,放射免疫法测定血清内睾酮含量 ;Greiss法测定血清NOx-(硝酸盐 /亚硝酸盐 )含量 ;流式细胞术(FCM)测定睾丸内各级生精细胞DNA含量 ,计算 1c、2c、4c期细胞的百分比。 结果 :SNP组血清内NOx-含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,睾酮含量低于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞减少 (P <0 .0 1) ;L NAME组血清内NOx-含量低于NS组(P <0 .0 1) ,睾酮含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞增加 (P <0 .0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,血清内NOx-、睾酮的含量及 1c细胞与NS组无显著性变化 (P >0 .0 5 )。 结论 :增加外源性NO可抑制精子的产生 ,而抑制NO生成途径则可促进精子的生成。

硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的 观察硝普钠 (SNP)和L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。 方法雄性SD大鼠分为 4组 :分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 ,每天 1次 ,共 12d。颈动脉放血处死动物。流式细胞术 (FCM)结合TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡。 结果 FCM结合TUNEL法检测发现SNP组亚单倍体峰 (AP峰 )及凋亡指数 (AI)较生理盐水组明显增高 ,L NAME组AP峰及AI显著低于生理盐水组 (P<0 0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,AP峰及AI与生理盐水组无显著性差异 (P >0 0 5 )。 结论 SNP促进生精细胞的凋亡 ,L NAME抑制生精细胞的凋亡 ,其对生精细胞凋亡的调节可能是由一氧化氮 (NO)介导的。

ERK1/2与MMP2在结肠癌中的表达及意义

目的检测ERK1/2及MMP2在结肠癌组织中的表达,探讨其表达的相关性及临床病理学意义。方法收集结肠腺癌标本56例及相应的癌旁结肠黏膜组织,分别应用Western Blotting和免疫组化方法检测ERK1/2及MMP2蛋白的表达。结果与癌旁结肠黏膜组织相比,结肠癌组织中ERK1/2和MMP2蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结肠癌组织中,ERK1/2和MMP2的阳性率分别为80.4%(45/56)和75%(42/56),明显高于癌旁结肠黏膜组织8.9%(5/56)和5.4%(3/56)的阳性率(P<0.05);低分化结肠癌组织中,ERK1/2和MMP2阳性率分别为100%(24/24)和91.7%(22/24),明显高于高、中分化结肠癌组织65.6%(21/32)和62.5%(20/32)的阳性率;Ⅲ、Ⅳ期结肠癌组织中,ERK1/2和MMP2阳性率分别为93.3%(28/30)和90%(27/30),均高于Ⅰ、Ⅱ期的65.4%(17/26)和57.7%(15/26);淋巴结转移无进展生存期(PFS)、<5年的结肠癌组织中,ERK1/2和MMP2阳性率均分别高于无淋巴结转移组织和PFS>5年者,差异显著(P<0.05)。ERK1/2与MMP2在结肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.649,P<0.05)。结论在结肠癌组织中ERK1/2和MMP2的表达增强,且两者的表达呈正相关,其高表达与结肠癌分化程度、临床分期、淋巴结转移及预后密切相关。

高密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞B类Ⅰ型清道夫受体的表达及胆固醇流出的影响

目的:观察高密度脂蛋白(HDL)对THP-1巨噬细胞B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BI)的表达及胆固醇流出的影响。方法:用HDL及氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理THP-1细胞,采用RT-PCR、Western印迹及液体闪烁计数法观察细胞SR-BI的表达及细胞内胆固醇流出的变化。结果:ox-LDL下调THP-1巨噬细胞中SR-BI的表达,而HDL则上调THP-1巨噬细胞中SR-BI的表达;液体闪烁计数法检测发现ox-LDL减少细胞中胆固醇的流出,HDL可以增加细胞胆固醇的流出,且HDL的效应呈浓度依赖性。结论:HDL可能通过上调THP-1巨噬细胞SR-BI的表达,促进巨噬细胞内胆固醇流出。

p-p38MAPK在SD大鼠隐睾中的表达

目的 :探讨丝裂原活化蛋白激酶 (p - p38MAPK)在隐睾所致生精障碍过程中的可能作用。方法 :SD雄性大鼠 4 0日龄时复制单侧隐睾模型 ,免疫组化SP法检测大鼠睾丸中p - p38MAPK的表达。结果 :术后第 7天 ,与正常侧睾丸相比 ,隐睾侧睾丸重量明显减少 ,生精小管内生精细胞排列紊乱 ,生精细胞与精子的数量减少 ,可见较多多核巨细胞 ;p - p38MAPK只见于隐睾侧睾丸内生精上皮及间质细胞 ,在正常侧睾丸内未见表达。结论 :隐睾可导致p38MAPK活化 ,而

硝普钠和N^ω-单硝基-L-精氨酸甲酯对去垂体大鼠生精能力的影响

目的:阐明NO对大鼠生精能力的影响及其作用机制。方法:大鼠去垂体,观察硝普钠(SNP)与N-ω单硝基L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠生精功能的直接作用。用放射免疫法测定血清内卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及睾酮含量;Greiss法测定血清NO-x含量;流式细胞术测定各生精细胞DNA含量,计算1c、2c及4c期细胞的百分比。结果:各组血清LH、FSH和睾酮浓度显著下降或逐渐下降。SNP组血清内NO-x含量显著升高,L-NAME组血清内NO-x含量显著降低;对照组、L-NAME组和SNP+LNAME混合注射组的细胞分布均以1c为主;而SNP组的细胞以2c为主。结论:体内高浓度的糖皮质激素可屏蔽LH和FSH的分泌,进一步抑制睾酮的分泌;SNP与LNAME可通过NO直接影响生精细胞的凋亡。

“卓越医师计划”培养保障体系构建初探

"卓越医师人才教育培养计划"是贯彻落实《国家中长期教育改革和发展规划纲要》(2010-2020年)的重大改革项目,对全面提高我国医学教育教学质量,培养全面发展的医学人才有着十分重要的战略意义。"卓越医师人才教育培养计划"培养保障体系是保证该计划顺利实施的前提。南华大学根据卓越计划培养的要求,结合实际,通过设立专门的管理团队、创新培养模式、改革考核方式等多项具体措施,初步构建了"卓越医师计划"培养保障体系。

隐睾下降固定术后生殖细胞的凋亡及eNOS和iNOS的表达

目的:探讨隐睾下降固定术后生精细胞的凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在隐睾下降固定后生精细胞中的表达。方法:将雄性SD大鼠(22日龄)随机分为隐睾组和假手术组,建立右侧隐睾模型。术后12天将隐睾组大鼠随机分为隐睾对照组和隐睾固定组,建立隐睾下降固定模型。术后第24天脱颈椎处死大鼠,取血清测定NO含量及一氧化氮合酶(NOS)活性,常规组织学切片观察各组大鼠右侧睾丸生精上皮形态,原位末端标记法(TUNEL)结合流式细胞术(FCM)检测各组睾丸生精细胞凋亡情况,Western blot和免疫组化分别检测各组大鼠右侧睾丸组织eNOS、iNOS蛋白表达的变化。结果:隐睾对照组血清中NO浓度、NOS活性以及生精细胞凋亡率最高,隐睾固定组则高于假手术组。Western blot检测发现隐睾固定组中eNOS和iNOS含量均高于假手术组,免疫组化结果显示在假手术组睾丸生精上皮中仅有eNOS和iNOS的弱表达,而隐睾固定组生精上皮中两者均有较强表达。结论:隐睾下降固定术后睾丸生精功能的改善与生精细胞凋亡减少有关。NO是隐睾下降及固定后生精细胞仍过度凋亡的重要生物活性因子。