猪肺炎支原体的持续性感染问题频发,同源重组介导的抗原变异扮演重要角色。解螺旋酶RuvA调节霍利迪连接体变构是参与同源重组的关键步骤。鉴于此,本研究旨在原核表达猪肺炎支原体解螺旋酶RuvA重组蛋白,鉴定其DNA结合活性并制备多克隆抗...猪肺炎支原体的持续性感染问题频发,同源重组介导的抗原变异扮演重要角色。解螺旋酶RuvA调节霍利迪连接体变构是参与同源重组的关键步骤。鉴于此,本研究旨在原核表达猪肺炎支原体解螺旋酶RuvA重组蛋白,鉴定其DNA结合活性并制备多克隆抗体。试验通过分子克隆构建原核表达质粒pET21a-RuvA,经诱导表达和纯化获得RuvA M hp重组蛋白;免疫家兔制备抗RuvA M hp多克隆抗体,再利用间接ELISA和Western blot试验进行效价测定和特异性验证;利用凝胶迁移试验结合表面等离子共振技术分析RuvA M hp的DNA结合活性;利用凝胶迁移试验结合Western blot试验鉴定RuvA M hp的寡聚特性。结果显示:原核表达的RuvA M hp重组蛋白约为26 ku;制备的抗RuvA M hp多克隆抗体效价为1∶256000,且具有良好的特异性;RuvA M hp具有较强的DNA结合活性,对霍利迪连接体的亲和力高达624.4 pmol·L^(-1)(K D),并且主要以八聚体形式与其形成稳定复合物。通过RuvA M hp的原核表达、多克隆抗体制备及活性鉴定,为后续探索RuvA调解同源重组介导猪肺炎支原体抗原变异的分子机制奠定了基础。展开更多
基于多学科团队(multi-disciplinary team,MDT)参与的加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)(ERAS-MDT)构架下建立的All in One(AO)病房,通过外科联合具有综合属性的内科协助外科治疗作为AO病房的主体病房,纳入在专业治...基于多学科团队(multi-disciplinary team,MDT)参与的加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)(ERAS-MDT)构架下建立的All in One(AO)病房,通过外科联合具有综合属性的内科协助外科治疗作为AO病房的主体病房,纳入在专业治疗上需要进行深度介入干预的相应专业组成的辅助病房以及协助外科完成治疗工作的相关专业组成的支持治疗病房,组成综合性独立单元体,其目标是探索多学科协同促进外科患者围手术期加速康复的策略。通过在加速康复AO病房实施LEER模式工作流程(即“少痛”“早动”“早食”“安心”)来实现患者术后加速康复这一共同目标。通过AO病房的治疗,期望增加老年、危重症患者的手术率,减少术后并发症的发生率,缩短外科患者平均住院时间,加快外科病房周转,节约有限的医疗资源,并拓展ERAS的应用领域。从形式和内容上创新了MDT,不仅有利于医院通过内部资源整合为外科纾困解难,也为进一步探索和深化慢病管理和临床专业协同工作模式提供了一种有益借鉴。展开更多
加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)理念的实施有益于外科患者术后加速康复,LEER模式[少痛(less pain)、早动(early move)、早食(early eat)、安心(reassuring)]下的ERAS体系则是为临床更好实施ERAS理念建立的系统、...加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)理念的实施有益于外科患者术后加速康复,LEER模式[少痛(less pain)、早动(early move)、早食(early eat)、安心(reassuring)]下的ERAS体系则是为临床更好实施ERAS理念建立的系统、规范和标准化的工作方法与工作流程。经临床外科和外科联合具有综合属性的全科医学科建立的加速康复All in One病房的初期探索及应用取得了一系列有益结果,均证明LEER模式ERAS不仅能系统、全面、规范地执行ERAS措施,也可以将LEER-ERAS理念拓展应用到加速康复All in One病房共同协助外科患者围手术期的治疗及管理促进患者加速康复。在前期工作取得的成效基础上,将有益于患者治疗后加速康复的ERAS理念延伸、拓展成加速康复医学(enhanced recovery after treatment,ERAT)理念来拓宽加速康复All in One病房的应用范围,包括应用到临床所有的非外科专业科室,其目的是探索和研究如何应用ERAT理念构建医院ERAT临床应用体系来促进患者康复。展开更多
目的探讨自主创新改良的循A-B-D路径(胆囊动脉artery→胆囊床bed→胆囊管duct)腹腔镜胆囊切除术(LC)的技术特点及临床应用价值。方法回顾性分析乐山市人民医院2017年1月至2019年9月收治的2103例行LC的患者临床资料。按照术中手术方法的...目的探讨自主创新改良的循A-B-D路径(胆囊动脉artery→胆囊床bed→胆囊管duct)腹腔镜胆囊切除术(LC)的技术特点及临床应用价值。方法回顾性分析乐山市人民医院2017年1月至2019年9月收治的2103例行LC的患者临床资料。按照术中手术方法的不同分为两组,循A-B-D路径改良LC组879例,经典LC组1224例,术后随访6~24个月。比较分析两组中转开腹率、手术时间、术中出血量、医源性肝外胆管损伤、术后住院时间、术后近期和远期并发症发生率等指标差异。结果循A-B-D路径改良LC组术中医源性胆管损伤发生率[0 vs 0.49%(6/1224)]和远期残余胆囊结石伴胆囊炎发生率[0.23%(1/433)vs 1.51%(8/529)]均低于经典LC组,差异均存在统计学意义(P<0.05),而两组在手术时间、术中出血量、中转开腹率、术后住院时间、术后出血、胆漏、腹腔感染、消化不良症状、腹腔残余感染、胆管炎、胆管狭窄、胆管结石等方面,差异均无统计意义(P>0.05)。结论循A-B-D路径改良LC术作为手术技术的改进在临床应用安全、可靠;作为手术理念的改进及手术步骤的优化,可最大程度避免医源性胆管损伤及残余胆囊结石伴胆囊炎的发生,具有良好的基层应用推广前景。展开更多
文摘猪肺炎支原体的持续性感染问题频发,同源重组介导的抗原变异扮演重要角色。解螺旋酶RuvA调节霍利迪连接体变构是参与同源重组的关键步骤。鉴于此,本研究旨在原核表达猪肺炎支原体解螺旋酶RuvA重组蛋白,鉴定其DNA结合活性并制备多克隆抗体。试验通过分子克隆构建原核表达质粒pET21a-RuvA,经诱导表达和纯化获得RuvA M hp重组蛋白;免疫家兔制备抗RuvA M hp多克隆抗体,再利用间接ELISA和Western blot试验进行效价测定和特异性验证;利用凝胶迁移试验结合表面等离子共振技术分析RuvA M hp的DNA结合活性;利用凝胶迁移试验结合Western blot试验鉴定RuvA M hp的寡聚特性。结果显示:原核表达的RuvA M hp重组蛋白约为26 ku;制备的抗RuvA M hp多克隆抗体效价为1∶256000,且具有良好的特异性;RuvA M hp具有较强的DNA结合活性,对霍利迪连接体的亲和力高达624.4 pmol·L^(-1)(K D),并且主要以八聚体形式与其形成稳定复合物。通过RuvA M hp的原核表达、多克隆抗体制备及活性鉴定,为后续探索RuvA调解同源重组介导猪肺炎支原体抗原变异的分子机制奠定了基础。
文摘基于多学科团队(multi-disciplinary team,MDT)参与的加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)(ERAS-MDT)构架下建立的All in One(AO)病房,通过外科联合具有综合属性的内科协助外科治疗作为AO病房的主体病房,纳入在专业治疗上需要进行深度介入干预的相应专业组成的辅助病房以及协助外科完成治疗工作的相关专业组成的支持治疗病房,组成综合性独立单元体,其目标是探索多学科协同促进外科患者围手术期加速康复的策略。通过在加速康复AO病房实施LEER模式工作流程(即“少痛”“早动”“早食”“安心”)来实现患者术后加速康复这一共同目标。通过AO病房的治疗,期望增加老年、危重症患者的手术率,减少术后并发症的发生率,缩短外科患者平均住院时间,加快外科病房周转,节约有限的医疗资源,并拓展ERAS的应用领域。从形式和内容上创新了MDT,不仅有利于医院通过内部资源整合为外科纾困解难,也为进一步探索和深化慢病管理和临床专业协同工作模式提供了一种有益借鉴。
文摘加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)理念的实施有益于外科患者术后加速康复,LEER模式[少痛(less pain)、早动(early move)、早食(early eat)、安心(reassuring)]下的ERAS体系则是为临床更好实施ERAS理念建立的系统、规范和标准化的工作方法与工作流程。经临床外科和外科联合具有综合属性的全科医学科建立的加速康复All in One病房的初期探索及应用取得了一系列有益结果,均证明LEER模式ERAS不仅能系统、全面、规范地执行ERAS措施,也可以将LEER-ERAS理念拓展应用到加速康复All in One病房共同协助外科患者围手术期的治疗及管理促进患者加速康复。在前期工作取得的成效基础上,将有益于患者治疗后加速康复的ERAS理念延伸、拓展成加速康复医学(enhanced recovery after treatment,ERAT)理念来拓宽加速康复All in One病房的应用范围,包括应用到临床所有的非外科专业科室,其目的是探索和研究如何应用ERAT理念构建医院ERAT临床应用体系来促进患者康复。
文摘目的探讨自主创新改良的循A-B-D路径(胆囊动脉artery→胆囊床bed→胆囊管duct)腹腔镜胆囊切除术(LC)的技术特点及临床应用价值。方法回顾性分析乐山市人民医院2017年1月至2019年9月收治的2103例行LC的患者临床资料。按照术中手术方法的不同分为两组,循A-B-D路径改良LC组879例,经典LC组1224例,术后随访6~24个月。比较分析两组中转开腹率、手术时间、术中出血量、医源性肝外胆管损伤、术后住院时间、术后近期和远期并发症发生率等指标差异。结果循A-B-D路径改良LC组术中医源性胆管损伤发生率[0 vs 0.49%(6/1224)]和远期残余胆囊结石伴胆囊炎发生率[0.23%(1/433)vs 1.51%(8/529)]均低于经典LC组,差异均存在统计学意义(P<0.05),而两组在手术时间、术中出血量、中转开腹率、术后住院时间、术后出血、胆漏、腹腔感染、消化不良症状、腹腔残余感染、胆管炎、胆管狭窄、胆管结石等方面,差异均无统计意义(P>0.05)。结论循A-B-D路径改良LC术作为手术技术的改进在临床应用安全、可靠;作为手术理念的改进及手术步骤的优化,可最大程度避免医源性胆管损伤及残余胆囊结石伴胆囊炎的发生,具有良好的基层应用推广前景。