胃食管返流病食管上皮早期超微结构改变

目的 确定细胞间隙增大是否是人食管酸返流损伤的一种早期表现 .方法 用透射电镜检查 10例正常对照组、12例胃食管返流病 (GERD)患者、10例食管癌患者和 10例食管癌行“隧道式”食管胃吻合术后患者的内镜活检标本 ,用图像分析仪测量每例标本透射电镜照片的细胞间隙 .结果 胃食管返流病患者组 (1.2 7± 0 .77)μm和食管癌患者组的细胞间隙 (1.2 2± 0 .5 5 ) μm均大于正常对照组 (0 .49± 0 .0 8) μm,“隧道式”食管胃吻合术后患者组 (0 .5 5± 0 .11μm)与正常对照组细胞间隙无明显差异 .前两组分别有 9例和 7例细胞间隙≥ 2 .5 μm,而后两组无 1例细胞间隙≥ 2 .5 μm.结论 细胞间隙增大是人食管酸返流损伤的一种早期表现 ;食管癌患者同时存在 GERD;“隧道式”

VEGF165反义RNA对人食管鳞癌细胞影响的实验研究

目的 :观察血管内皮生长因子16 5 (VEGF16 5 )反义RNA对人食管鳞癌细胞EC10 9的影响 ,探讨其治疗食管癌的可行性。方法 :采用亚克隆技术 ,构建并鉴定VEGF16 5 反义RNA的真核表达载体。以重组质粒转染人食管鳞癌细胞EC10 9后 ,将其接种于裸鼠皮下 ,分别利用原位杂交、激光共聚焦、图象分析及微血管计数等方法 ,观察转染前后EC10 9细胞的生物学性状和致瘤性。结果 :成功地构建了VEGF16 5 反义RNA的真核表达载体 ,并在EC10 9细胞中获得表达。转染细胞中VEGF16 5 的表达下降 75% ,其生物学性状不受外源基因表达的影响 ,但其在裸鼠皮下的致瘤性和和瘤组织中血管的生成明显下降。VEGF16 5 反义RNA转染组、空载体转染组和对照组中肿瘤的体积 ,分别为 (82 0± 112 .5)mm3 、(793 0± 10 3 5)mm3 和 (7850± 950 )mm3(P <0 .0 1) ;微血管的密度分别为 (8.5± 1.2 ) /mm2 、(44.3± 9.4) /mm2 和 (46.4± 12 .6) /mm2 (P <0 .0 1)。结论 :VEGF16 5反义RNA能够明显减少食管鳞癌细胞内VEGF16 5 的表达 ,具有抑制肿瘤生长和血管生成的作用 ,可望用于实体肿瘤的辅助治疗。

人食管上皮酸反流损伤的早期超微结构改变

目的 细胞间隙增大是兔食管上皮酸反流损伤的一个特征,它是一种只有在透射电子显微镜下才能很好观察到的早期形态学改变。本研究的目的是确定此种改变是否也是人食管酸反流损伤的一种早期表现。 方法 用透射电镜检查10例正常对照组,12例胃食管反流病(GERD)患者(经24h pH监测和压力测定诊断为GERD)的内镜活检标本(标本均取自食管下端5cm内、内镜下无异常的粘膜),用图象分析仪测量每例标本透射电镜照片的细胞间隙。 结果 胃食管反流病患者组的细胞间隙(1.27±0.77)μm大于正常对照组细胞间隙(0.49±0.08)μm,P<0.01,前者有9例有细胞间隙≥2.5μm,而正常对照组无一例有细胞间隙≥2.5μm。 结论 细胞间隙增大是人食管酸反流损伤的一种早期表现。

循证医学理念在外科学教学中的应用

循证医学有别于传统医学模式,它是将最佳的医学研究成果与临床经验和病人自身价值三者相结合,是临床医学的一个新范式。通过外科教学的实践,比较了传统医学模式与生物心理社会医学模式下不同的教学方式,指出深掘循证医学的伦理学意蕴,纠正把循证医学当作临床医学的一个分支来理解的误区,结合中国伦理本位的传统,在外科学的教学中建立循证医学的思考模式,有利于更新在传统的临床医学模式中树立的权威、思维方式、行为习惯、价值取向等,对造就新型医学人才有重要意义,探讨了现代外科教学方式的路径。

伦理学原则在胸外科互动式教学中的应用

在医学生的胸外科实习中采取互动式教学方法,可以引发学生的求知兴趣,给学生充分的思维空间,选择典型病例,培养学生临床思维能力,让学生与教师互动起来,活跃教学气氛,加强学生与教师之间的沟通,提高教学质量。

血管内皮生长因子_(165)核酶的合成及其体外活性

目的 探讨抗血管内皮生长因子1 65(VEGF1 65)核酶的设计合成及其生物学活性 .方法 利用计算机辅助设计针对 VEGF1 65的锤头状核酶 ,构建核酶的自剪切转录载体p GEMRz2 12 ,体外转录合成核酶 Rz2 12及其相应的底物VEGF1 65m RNA,在无细胞体系中观察核酶对靶 RNA的切割作用 .结果 构建的自剪切转录载体在转录的过程中发生了自身剪切 ,并释放出目的核酶 Rz2 12 ,该核酶具有切割VEGF1 65m RNA的作用 .结论 计算机辅助设计的 VEGF1 65锤头状核酶体外可有效切割靶 RNA。

半人工合成手性多西紫杉醇对肺腺癌细胞株A549的细胞毒性及放射增敏作用

目的:探讨半人工合成手性多西紫杉醇对人肺癌细胞株A549的细胞毒性及放射增敏作用。方法:半人工合成手性多西紫杉醇,测定其对A549细胞的生长抑制作用,观察其对A549细胞的形态学影响及其放射增敏作用和对动物荷瘤模型的作用。结果:不同浓度半人工合成紫杉醇对A549细胞均有抑制作用,可引起A549细胞G2/M期阻滞,抑制荷瘤小鼠模型肿瘤的生长,其中空白对照组、单纯药物组、单纯放射组和联合处理组的肿瘤体积分别为(7780±1050)mm3、(4610±950)mm3、(5540±1035)mm3和(560±112.5)mm3,各组间有明显差异。结论:半人工合成紫杉醇对A549细胞株具有明显的抑制作用,且与射线照射有协同作用。

浅论临床教学实践中素质教育与创新性人才的培养

为规范医学教育临床教学实践活动的管理,保护医学教育临床教学实践过程中患者、教师和学生的合法权益,保证医学教育教学质量,针对目前临床教学实践中的问题,指出医学教育中,素质教育的关键理念是促进学生的知识、能力、素质协调发展,不但要培养学生具有独立思考、勇于探索、实事求是、开拓创新的医学科研素养,而且要培养学生自觉丰富心灵、完善人格,具备良好的医德素养。强调在临床教学实践中构建融掌握知识、培养能力和提高素质为一体的全方位、立体化的教学模式。

复张性肺水肿的治疗

目的 探讨复张性肺水肿 (RPE)的诊治和预防方法。方法 回顾性分析了 1978～1998年间所治疗的 9例 RPE。结果 其中 7例发生于自发性气胸 (7/140 ) ,2例发生于胸腔积液 (2 /4 6 )复张后。2例无临床症状 ,仅在胸片上有肺水肿征象。经治疗 ,8例痊愈 ,1例死亡。结论 RPE的诊断治疗并不困难 ,预后良好。但如果延误诊治 ,可引起呼吸窘迫综合征或多器官功能衰竭 ,死亡率较高。在治疗病程较长的肺萎陷时 ,应逐步减压使肺缓慢复张 ,以预防 RPE的发生。

抗VEGF_(165)核酶对人肺腺癌细胞生物学特性的影响

目的 探讨抗血管内皮生长因子 165 (VEGF165)核酶对人肺腺癌细胞生物学特性的影响。方法 设计合成针对VEGF1652 12位点的锤头状核酶 (vascularendothelialgrowthfactorribozyme ,VRz)及其突变体 (mutantVRz ,mVRz) ,体外检测核酶的剪切活性。采用亚克隆技术 ,构建腺病毒介导的抗VEGF165核酶真核表达载体pAdVRz ,用重组腺病毒感染人肺腺癌细胞A5 49,分别采用Northernblot印迹杂交、流式细胞仪、透射电镜和激光共聚焦等技术 ,观察感染前后A5 49细胞的生物学性状的改变。结果 成功地合成了具有明显剪切活性的抗VEGF165核酶VRz及其重组腺病毒表达载体rpAdVRz ,并在A5 49细胞中获得表达。重组腺病毒感染细胞的VEGF165表达减少了 87% ,而生物学性状不受外源基因表达的影响。结论 抗VEGF165核酶能够显著抑制人肺腺癌细胞内VEGF165的表达 ,为进一步进行肺癌的抗血管治疗提供了实验基础。

抗血管内皮生长因子多位点核酶的合成及其体外切割作用

目的:设计合成血管内皮生长因子多位点核酶,探 讨其对靶RNA的切割作用.方法:利用计算机辅助设计针对 VEGF165的3个单位点核酶(Rz1,Rz2,Rz3)和联合型多位 点核酶(Rz123),构建其自剪切转录载体,观察多位点核酶对 靶RNA的切割作用.结果:构建的多位点核酶自剪切转录载 体在体外转录中,顺式核酶发生了自身剪切,并释放出正确的 目的核酶,多位点核酶可切割靶RNA,且效率高于单一核酶, 其切割效率分别为(37±10)%(Rz1),(51±8)%(Rz2), (68±15)%(Rz3)和(88±11)%(Rz123).结论:抗血管内 皮生长因子多位点核酶体外可联合切割靶RNA,具有较高的 生物活性.

重组人干扰素α2a和GFE-1多肽融合基因的克隆、表达及活性测定

目的:构建IFN-α2a-GFE-1融合蛋白基因表达载体,获得高质量生物产品。方法:应用聚合酶链式反应技术(PCR)对干扰素(IFN)α2a3'端酶切位点进行改造,人工合成编码能特异性高效结合肺组织的GFE-1寡核苷酸片段,二者连接后克隆入pGEM3Zf质粒,进行序列分析,将融合蛋白基因克隆入pBV220表达载体,在大肠杆菌中表达,对IFN-α2a-GFE-1表达产物纯化、鉴定及体外活性检测。结果:利用PCR的方法成功地改造了IFN-α2a3'端酶切位点,成功的将GFE-1多肽与IFN-α2a3'端连接,构建了IFN-α2a-GFE-1融合蛋白的基因克隆载体pGEM3Zf-GFE-1,DNA测序完全正确。构建了IFN-α2a-GFE-1融合蛋白基因原核表达载体pBV220-IFN-α2a-GFE-1,经温度诱导在大肠杆菌中有效表达。纯化了IFN-α2a-GFE-1融合蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳检测纯度大95%,比活性达5.8×109U/mg。结论:IFN-α2a-GFE-1融合蛋白基因的成功克隆、表达、纯化和活性测定,为研制一种具有导向性治疗肺癌、肺纤维化等疾病的有效药品奠定基础。

核酶在肺癌基因治疗中的应用

核酶是一类具有酶活性的RNA分子 ,可序列特异性地切割靶mRNA ,从而有效抑制目的基因表达 ,且可重复使用 ,催化效率高 ,在抑制肺癌的发生。

siRNA与人工半合成手型多西紫杉醇对A549多药耐药细胞的协同抑制作用

目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)与人工半合成多西紫杉醇对人肺腺癌细胞A549耐药细胞系(A549/CDDP)的协同抑制作用。方法:采用化学合成的方法,合成手型多西紫杉醇,设计针对多药耐药基因1(MDR1)序列的siRNA,克隆入psiRNA中(psiRNA-MDR)。用半合成多西紫杉醇和转染psiRNA-MDR两种方法对培养的A549/CDDP细胞和荷瘤小鼠瘤体进行处理,观察其对A549/CDDP细胞生长的抑制作用。结果:siRNA/MDR1明显抑制A549/CDDP细胞MDR1表达;半合成多西紫杉醇可增加A549细胞凋亡,对A549组细胞、A549/CDDP组细胞和A549/CDDP-psiRNA/MDR组细胞的抑制率分别为75%、39%和87%;后两组裸鼠移植瘤体积分别为(7814±1005)mm3、(6632±1203)mm3和(540±121.4)mm3,均有显著差异。结论:siRNA与人工半合成手型多西紫杉醇对多药耐药肺癌细胞有明确的协同抑制作用。

反义CⅡTA基因对鼠异位气管移植慢性免疫排斥反应的抑制作用

目的:构建携带鼠MHCⅡ类分子反式激活因子(MHC classⅡmolecule transactivator,CⅡTA)反义RNA的腺病毒载体,观察腺病毒介导该基因对小鼠异位气管移植慢性免疫排斥反应的抑制作用。方法:设计鼠CⅡTA mRNA为模板的反义片段,构建可表达反义片段的腺病毒载体(AdEasy-1系统),经HEK293细胞包装产生含反义片段重组腺病毒Ad-asCⅡTA,扩增、纯化。建立小鼠异位气管移植模型,用包装后的腺病毒注射并感染移植体周围,观察其对免疫排斥反应的抑制作用。结果:成功包装出含CⅡTA反义基因的重组腺病毒;重组腺病毒可感染气管移植体,Ad-asCⅡTA感染组移植气管组织炎症反应和纤毛上皮变性坏死等较对照组明显减轻。结论:重组腺病毒表达的小鼠反义CⅡTA基因能通过对MHCⅡ类分子的抑制而抑制异位气管移植的慢性免疫排斥反应。这为气管移植治疗气管肿瘤和气管狭窄等疾病奠定了一定的实验基础。

血管内皮生长因子与肺癌(文献综述)

肺癌的生长、转移和预后与血管内皮生长因子 (VEGF)和血管生成有密切的关系 ,抑制血管形成是近年来治疗肺癌的新策略。本文就 VEGF的分子特征、功能和在肺癌治疗中的作用作一综述。

手术为主的综合疗法治疗小细胞肺癌

目的:探索以手术为主的综合疗法对小细胞肺癌的适应症,方法及临床效果。方法:回顾性总结分析845例小细胞肺癌治疗的临床资料:其中573例广泛期病变采用化疗或(和)放疗;局限期病变272例:单纯化(放)疗50例;先手术后化疗48例;先化疗后手术再化或(和)放疗174例;比较分析、评价不同方法的疗效。结果:广泛期病变1、2、3年生存率分别为13.0%、6.8%、0;局限期病变:化疗组和手术后化疗组1、3、5年生存率分别为74.2%、31.2%、4.3%和75%、46.6%、31.9%,二组间1年生存率无显著性差异(P>0.05),3、5年的生存率差异显著(P<0.05);而先化疗、后手术、术后化(放)疗组1、3、5、10年生存率分别为88.4%、58.9%、46.5%、11.5%,明显优于前两组(P<0.05);术前所用化疗方案与周期对生存时间无明显影响。术式包括肺叶切除、全肺切除、支气管(肺动脉)袖式切除重建,肺叶和全肺切除的5、10年生存率明显优于袖式切除,肺叶切除优于全肺及袖式切除。颅内、肝脏或骨髓转移仍为影响本组小细胞肺癌长期生存的主要原因。结论:小细胞肺癌对化疗、放疗均敏感,广泛期病变无手术适应症,应采用以化(放)疗为主的保守治疗。而局限期小细胞肺癌则应积极选用以手术为主、辅助术前、术后化(放)疗的综合方法,可获得较为满意、甚至长期生存的临床效果。

RNAi沉默VEGF的表达及其治疗肺癌的初步研究

目的:以RNAi干涉的方法沉默VEGF在肺癌细胞中的表达,为肺癌的RNAi基因治疗提供实验依据。方法:以VEGF为靶点,利用siRNA设计原则,设计VEGF-siRNA,构建pSilencerTM-3.1-VEGF的干涉载体,稳定转染入肺癌细胞株A549中,检测VEGF在细胞中的表达及稳定转染pSilen-cerTM-3.1-VEGF肺癌细胞系A549对内皮细胞血管形成的影响,体内观察pSilencerTM-3.1-VEGF肺癌细胞荷瘤小鼠的肿瘤生长情况。结果:pSilencerTM-3.1-VEGF-2明显抑制了肺癌细胞系A549中VEGF的表达,稳定转染pSilencerTM-3.1-VEGF-2的肺癌细胞株A549体外生长没有发生变化,但是其对内皮细胞的血管生成有明显的抑制作用,体内荷瘤小鼠结果显示,与肺癌细胞株A549荷瘤小鼠比较,pSilencerTM-3.1-VEGF-2-A549荷瘤小鼠中肿瘤的生长明显缓慢(P<0.05),生存期明显延长(P<0.05)。结论:我们成功构建了pSilen-cerTM-3.1-VEGF的干涉载体,稳定转染pSilencerTM-3.1-VEGF的肺癌细胞株A549中能够明显抑制VEGF的表达,抑制内皮细胞小管形成,延长了荷瘤小鼠的生存期。

临床路径实施中的护理干预

临床路径在我国医院管理中的推广和应用已得到一定程度的重视和关注,其中有一部分文献强调在临床路径实施中护理工作的重要性。本文对近年来国内有关临床路径应用的文献进行回顾和分析,结合目前医院发展面临的新形势,着重分析和总结了护士在提高护理质量管理和临床路径实施中的重要作用,同时也提出了一些护理干预措施,以便借鉴,以期临床路径在国内有更好的发展前景。