八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导离体兔肺动脉反应性变化的影响

目的与方法：为探讨胆囊收缩素（ＣＣＫ）缓解内毒素休克时肺动脉压增高的作用机制，应用离体血管环技术观察ＣＣＫ对内毒素主要成分脂多糖（ＬＰＳ）诱导兔肺动脉反应性变化的影响。结果：ＬＰＳ（４μｇ／ｍＬ，２ｈ）引起离体肺动脉对α受体激动剂苯肾上腺素（ＰＥ）的收缩反应增强，降低对乙酰胆碱（ＡＣｈ）介导的内皮依赖性舒张反应；ＣＣＫ－８（０１μｇ／ｍＬ和０５μｇ／ｍＬ）逆转了ＬＰＳ的上述作用；ＣＣＫ－８（０５μｇ／ｍＬ，２ｈ）本身对正常肺动脉舒缩反应无明显影响。结论：ＣＣＫ通过保护肺内皮细胞、增强肺动脉内皮依赖性舒张反应而拮抗收缩反应，可能是发挥抗肺动脉压增高的机制之一。

过氧亚硝基阴离子对离体兔肺动脉反应性变化的影响

探讨过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO^-)对离体兔肺动脉反应性变化的影响。用离体血管环技术观察ONOO^-孵育后肺动脉对钙离子载体A23187、ADP、ACh、硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)和苯肾上腺素(phenylephrine,PE)的反应性张力变化。结果显示:(1)ONOO^-孵育后肺动脉对A23187、ADP和ACh引起的舒张反应明显降低,ONOO^-抑制内皮依赖受体依赖或受体非依赖性舒张反应有量效关系;(2)ONOO^-孵育可剂量依赖性抑制肺动脉对SNP的舒张反应;(3)0.5 mmol/L ONOO^-孵育后肺动脉对PE的收缩反应明显增强,而1.0和2.0mmol/L ONOO^-导致肺动脉的收缩反应明显降低;(4)溶剂对肺动脉的反应性无明显影响,dec ONOO^-对PE和ADP的反应性影响不大,但可增强A23187、ACh和SNP的舒张反应。结果表明,ONOO^-可改变离体肺动脉的反应性。

过氧亚硝基阴离子致大鼠肺微血管壁通透性增高的研究

目的 :探讨过氧亚硝基阴离子 (ONOO-)对肺微血管内皮屏障功能的影响和在急性肺损伤发生中的意义。方法 :向SD大鼠气管内推注不同浓度的ONOO-、分解ONOO-或溶剂 2h后 ,检测肺微血管壁通透性变化和肺组织病理学变化 ,并检测ONOO-引起正常肺匀浆MDA含量变化。结果 :ONOO-推入气管后 ,肺系数、肺湿干重比以及肺含水量和伊文思兰含量明显增高呈现剂量效应关系 ;并可导致肺泡明显萎陷、肺泡壁毛细血管明显扩张充血及局灶性出血 ,内皮细胞肿胀、核深染及脱落。ONOO-造成正常肺匀浆MDA含量增加。结论 :外源性ONOO-气管推注后可导致明显的肺微血管内皮屏障功能障碍 ,提示肺内源性ONOO-生成增多时可能参与介导急性肺损伤的发生。

过氧亚硝基阴离子诱导离体兔肺动脉舒张反应的特性

实验用离体血管环张力测定技术 ,观察过氧亚硝基阴离子 (ONOO )对离体预收缩的兔肺动脉的舒张反应、肺动脉内皮细胞对舒张反应的影响 ,并初步探讨其病理意义。结果显示 ,ONOO 可剂量依赖性引起离体预收缩兔肺动脉舒张。分解的ONOO 也有舒张作用 ,但其舒张效应明显低于ONOO 的作用。比较观察表明 ,ONOO 的舒张效应显著低于硝普钠 (SNP)和乙酰胆碱 (ACh)。与内皮完整的肺动脉比较 ,ONOO 对去内皮肺动脉的舒张作用明显增强 ,剂量依赖性舒张反应曲线明显左移。肺动脉对ONOO 重复作用时的舒张反应有递减趋势。在本实验条件下 ,ONOO 舒张前后的肺动脉 ,对ACh的舒张反应无明差异。结果表明 ,ONOO 对肺动脉的舒张作用较弱 ,此作用受到内皮细胞的抑制性调节并有快速去敏性。

应用颅内高压复制脑死亡动物模型

目的 建立颅内高压致脑死亡动物模型。方法 向颅内硬脑膜外隐囊内灌注３ ～４ ｍｌ 生理盐水后，描记颅内压（ｉｎｔｒａｃｒａｎｉａｌ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ，ＩＣＰ） 、平均动脉血压（ ｍｅａｎ ａｒｔｅｒｙ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ，ＭＡＰ） 、脑干听觉诱发电位（ｂｒａｉｎ ｓｔｅｍａｕｄｉｔｏｒｙ ｅｎｖｏｋｅｄ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ＢＡＥＰ） 、脑电、心电变化和呼吸波形，观察瞳孔大小、对光反射、角膜反射和眼底血流以及脑大体病理变化。结果 在颅内高压下 ， 动物的主要改变有：ＩＣＰ 一直高于 ＭＡＰ； 大脑电沉默；ＢＡＥＰ 波幅降低，潜伏期后延，并迅速消失；心率短暂加快，Ｓ－ Ｔ 段压低，ＱＲＳ 波增宽，偶发室性早搏，心跳变慢、呈停止趋势。静脉滴注适量去甲肾上腺素可维持心跳和血压；自主呼吸骤停，继而呈吸气性呼吸困难，呼吸迅速消失，呼吸暂停试验确证自主呼吸不可逆停止。结论 颅内高压性脑死亡模型较好的模拟了法医实践中原发性脑死亡状况。

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导肺动脉内皮细胞凋亡的抑制作用

目的 :探讨八肽胆囊收缩素 ( CCK 8)对脂多糖 ( LPS)诱导培养的肺动脉内皮细胞 ( BPAEC)凋亡的影响。方法 :培养的 BPAEC用 L PS、CCK 8、CCK 8非特异性受体阻断剂丙谷胺分别或共同处理后 ,继续培养 2 4小时。用流式细胞术和核荧光染色方法检测细胞凋亡 ,用生物化学方法检测培养上清中乳酸脱氢酶( L DH)活性和丙二醛 ( MDA)含量 ,用流式细胞术定量检测过氧亚硝基阴离子 ( ONOO-)含量。结果 :LPS可诱导 BPAEC凋亡和坏死明显增多 ,培养上清中 MDA含量增高 ;CCK 8抑制 BPAEC凋亡和 MDA含量的增高 ,此作用为 CCK 8受体非特异性阻断剂丙谷胺翻转 ;CCK 8可抑制 L PS诱导 BPAEC生成 ONOO-增多 ;CCK 8和丙谷胺对 LPS诱导的 BPAEC坏死无明显影响。结论 :CCK 8可抑制 L PS诱导的 BPAEC凋亡 ,此作用由其受体介导 ,并与 CCK

内毒素诱导肺动脉内皮细胞生成过氧亚硝基阴离子的意义

目的 :探讨牛肺动脉内皮细胞 (BPAEC)产生过氧亚硝基阴离子 (ONOO )的能力及其作用。方法 :用流式细胞免疫荧光技术 ,定量检测内毒素主要成分脂多糖 (LPS)诱导培养的BPAEC中ONOO-生成标志物硝基酪氨酸 (NT)的含量 ,观察ONOO-对BPAEC形态变化的影响。结果 :LPS可剂量依赖性诱导BPAEC产生ONOO-明显增多 ,并为氨基胍部分翻转 ;ONOO-可导致BPAEC明显回缩 ,胞体变小 ,细胞间隙增宽。结论

内源性过氧亚硝基阴离子介导脂多糖导致肺动脉内皮细胞损伤

在培养的牛肺动脉内皮细胞(bovine pulmonary artery endothelial cells,BPAECs)水平上,观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对BPAECs诱生过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO^-)能力及内皮源性ONOO^-在LPS致BPAECs损伤中的作用。结果显示:(1)LPS剂量依赖性地引起BPAECs诱生ONOO^-生成标志物硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NT)的荧光强度(即ONOO^-)明显增多,NT阳性细胞数和百分率也明显增多或增高(P<0.05);iNOS选择性抑制剂氨基胍(AG)明显抑制LPS诱生ONOO^-增多(P<0.05),而NT阳性细胞数和百分率分别减少或降低,但无明显差异。(2)在LPS作用下BPAECs培养上清中的MDA含量和LDH活性明显增多和增高,呈现剂量依赖性效应。加AG后MDA含量明显降低(P<0.001),LDH活性呈降低趋势。(3)LPS可诱导BPAECs凋亡明显增多,用EB荧光染色后可见细胞染色质浓集、核变小等凋亡征象。AG可导致LPS引起的BPAECs凋亡明显减少,但仍明显高于溶剂组。LPS可导致BPAECs线粒体呼吸抑制及膜电位下降。上述结果表明,LPS可引起BPAECs生成ONOO^-增多,ONOO^-参与介导LPS所致BPAECs过氧化损伤与细胞凋亡。

过氧亚硝基阴离子介导内毒素致肺血管损伤及胆囊收缩素的保护作用

本文探讨过氧亚硝基阴离子 (ONOO- )在内毒素致肺血管损伤中的介导作用和八肽胆囊收缩素 (CCK)的保护作用及其机制。结果发现 ,内毒素主要成分脂多糖 (LPS)可诱导大鼠肺组织生成ONOO- ,ONOO- 能导致肺微血管壁通透性明显增加和肺脏严重病理变化 ;ONOO- 可引起离体肺动脉反应性异常改变 ,LPS也可产生类似变化 ;ONOO- 有较弱的舒血管作用并受到内皮细胞的抑制性调节 ;LPS诱导培养的牛肺动脉内皮细胞 (BPAEC)产生增多的ONOO- 参与介导内皮细胞本身的损伤 ;CCK能拮抗LPS对BPAEC的损伤效应 ,此作用由CCK受体介导 ,并与抑制ONOO-生成有关。结果提示 ,清除ONOO- 或减少ONOO- 生成可为防治内毒素引起的急性肺损伤等病理过程提供新对策 ;CCK是一种有应用前景的细胞保护因子。

黄芩甙对过氧亚硝基阴离子致肺损伤的保护作用

近年来过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ－）已成为一氧化氮（ＮＯ）化学及ＮＯ在多种与氧化应激有关的病理过程中作用机制的研究热点。作者新近证实，内毒素休克时，肺内有ＯＮＯＯ－生成；大鼠气管内推入外源性ＯＮＯＯ－可剂量依赖性导致肺氧化损伤，干扰肺血管内皮屏障功能...

内源性NO在LPS和TNFα诱导离体兔肺动脉反应性变化中的作用

目的 :探讨脂多糖 (Lipopolysaccharide ,LPS)和肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactoralpha ,TNFα)所致离体肺动脉反应性张力变化与肺动脉源性一氧化氮 (nitricoxide ,NO)的关系。方法 :离体兔肺动脉环用LPS +TNFα、LPS或溶剂孵育 2h和 6h ,检测肺动脉对乙酰胆碱 (ACh)、硝普钠 (SNP)和苯肾上腺素 (PE)的累积剂量反应 ,以及一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂氨基胍 (AG)和Nω 硝基 L 精氨酸 (L NNA) ,NOS底物L 精氨酸 (L Arg)预孵育后肺动脉对PE的收缩反应。结果 :LPS +TNFα孵育 6h后 ,肺动脉对ACh的舒张反应明显低于溶剂组 ,而LPS 2h和LPS +TNFα 2h组该舒张反应无明显变化。LPS +TNFα 2h组对PE的收缩反应呈降低趋势 ,6h时收缩反应明显降低 ,并为AG和L NNA翻转。L Arg可防止AG的抑制效应。LPS 2h和 6h组收缩反应与溶剂组大致相同。与溶剂组相比 ,LPS 2h和 6h、LPS +TNFα 2h组肺动脉对NO供体SNP的舒张反应增强。结论 :LPS

过氧亚硝基阴离子与肺损伤

NO与O_2发生快速反应生成ONOO^-,ONOO^-经过变构、质子化和均裂反应生成ONOO^(-*)、ONOOH、ONOOH~*、HO~·和NO_2~·等多种氧化剂,从而介导了多种与氧化应激有关的病理过程。ONOO^-可灭活肺泡Ⅱ型上皮细胞的Na^+通道,妨碍肺泡内液重吸收,促进肺泡水肿产生,抑制其能量代谢与PS合成,直接破坏PS结构,引起肺组织脂质与蛋白质过氧化,参与介导了肺缺血-再灌注损伤与急性肺损伤。

NO:ONOO^-……,氧化应激的新通路

过氧亚硝基阴离子(ONOO^-)是NO与O_2^-的快速反应产物。与O_2^-和NO相比,ONOO^-与其共轭酸ONOOH具有明显的氧化作用,并能衍生其它的氧化剂。ONOO^-参与介导内毒素休克、缺血-再灌注损伤及脑缺血的氧化损伤。

过氧亚硝基阴离子与线粒体损伤

ＮＯ与Ｏ－２·共存时可生成ＯＮＯＯ－。ＯＮＯＯ－具有强氧化性，并能衍生多种氧化剂，引起细胞损伤。线粒体既是细胞生成ＯＮＯＯ－的重要部位，也是ＯＮＯＯ－的关键靶位。ＯＮＯＯ－干扰线粒体有氧氧化、破坏线粒体钙稳态、削弱线粒体的抗氧化防御体系，导致线粒体功能障碍。

过氧亚硝基阴离子致肺内微血管壁通透性增高的实验研究

过氧亚硝基阴离子（Ｐｅｒｏｘｙｎｉｔｒｉｔｅａｎｉｏｎ，ＯＮＯＯ－）是一氧化氮（ＮＯ）和超氧阴离子（Ｏ·２）的快速反应产物。与ＮＯ和Ｏ·２相比，ＯＮＯＯ－具有明显的氧化性，并能衍生多种其它的氧化剂。在急性肺损伤（ＡＬＩ）发病过程中，肺内的ＮＯ与Ｏ·２...

过氧亚硝基阴离子的舒血管作用及其机制研究进展

早在证实一氧化氮(NO)为内皮源性舒张因子的主要功能形式的前两年,Blough和Zafiriou就发现,NO与超氧阴离子(O_2^-)反应生成过氧亚硝基阴离子(Peroxynitrite anion,ONOO^-)。Beckman等首次证实,在生理条件下NO与O_2^-反应也能生成ONOO^-。ONOO^-通过其质子化共轭酸衍生OH样物质。从而,以NO和O_2^-为代表的活性氮和活性氧之间的相互作用,互相调节及其在生理状态和病理过程中的生物效应成为近年来的研究新热点。ONOO^-的舒血管作用及其机制的研究进展颇快。本文就此领域的研究动态综述如下。

内源性一氧化氮在内毒素引起的肺动脉高压和肺损伤中的作用

本实验观察了家兔静脉内注入内毒素的主要成分脂多糖（ＬＰＳ）后平均动脉血压（ＭＡＰ）、肺动脉压（ＰＡＰ）及入、出肺血ＮＯ含量的变化，并观察了静脉内预注入ＮＯ生成抑制剂Ｎω硝基Ｌ精氨酸（ＬＮＮＡ）及诱生型ＮＯ生成抑制剂氨基胍（ＡＧ）后ＰＡＰ和肺损伤的变化。结果观察到：家兔ＬＰＳ注入后，ＭＡＰ均明显下降，ＬＰＳ注入后０５、１、１５、２ｈＰＡＰ明显增高（Ｐ＜００５）。ＬＰＳ注入后ＰＡＰ的高峰期（１ｈ）入肺血ＮＯ含量明显降低，出肺血ＮＯ无明显变化。与对照组相比，ＬＰＳ注入后３ｈ出肺血ＮＯ含量和５ｈ入、出肺血ＮＯ含量均明显增多。相关分析表明，兔ＬＰＳ注入前和ＬＰＳ注入后１ｈＰＡＰ与入肺血ＮＯ含量呈明显的负相关，而ＬＰＳ注入后３ｈ和５ｈ两者相关不明显。静脉预注入ＬＮＮＡ后，ＬＰＳ处理组的动物ＰＡＰ明显增高，入、出肺血丙二醛（ＭＤＡ）含量也明显增高，动物生存率明显降低。肺组织光镜下可见肺萎陷和小血管淤血加重，白细胞明显增加。静脉预注入ＡＧ后，ＬＰＳ处理组的动物ＭＡＰ在３～５ｈ明显增高，此时ＰＡＰ无明显改变，但５ｈ时血中ＭＤＡ含量明显减低，５ｈ时与ＬＰＳ组相比肺萎陷和小血管淤血减轻，白细胞也明显减少。以上结果?

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导大鼠肺组织NF-κB活性增高的抑制作用

目的与方法 :为探讨八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)防治内毒素引起急性肺损伤的分子作用机理 ,用电泳迁移率变动分析技术 (EMSA) ,观察CCK - 8对脂多糖 (LPS)诱导核转录因子κB(NF -κB)活性变化的影响 ,用光密度扫描电泳谱带峰面积积分值表示NF -κB活性 ,观察肺组织的病理学变化。结果 :LPS入血可以明显引起大鼠肺组织的NF -κB活性 16 39 92± 198 6 3(P <0 0 1) ,显著高于对照组 (5 93 5 6± 89 34) ,此作用为预先静脉注入CCK - 8部分逆转 ,NF -κB活性低至 82 3 91± 97 32 (P <0 0 1) ,CCK - 8可减轻LPS引起的肺组织病理学变化。结论 :CCK -8对LPS激活肺组织NF

大鼠肢体缺血再灌注所致脑损伤及其机制探讨

目的 :观察肢体缺血 -再灌注对脑的损伤作用 ,并探讨其可能的机制。方法 :SD大鼠随机分为正常(N)、假手术 (S)、后肢单纯缺血 (I)及缺血 -再灌注 (I-R)各时间点组。通过夹闭腹主动脉末端 4h、开放 2 - 2 4h复制I、I-R组模型。光、电镜观察脑的病理变化 ;反转录多聚酶链反应及免疫组化染色法 ,观察脑组织iNOS表达的变化及过氧亚硝基阴离子 (ONOO-)的硝基化产物硝基酪氨酸 (NT)的生成与分布 ;比色法测定脑组织MDA含量及SOD活性。结果 :①I-R组脑组织水肿 ,神经元受损较重 ,S、I组未见异常 ;②S、I、I-R组iNOS均有表达 ,I -R 6h表达量最大。I-R组大脑皮质、海马等区可见弥散分布的NT阳性神经元 ;③I -R 6h组MDA含量显著高于N、S、I组 ,SOD活性显著低于这些组 (P <0 0 5 ) ;而N、S、I组之间无显著差别。结论 :肢体I -R能引发脑损伤 ,脑内高表达的iNOS-NO

CCK-8抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞NF-κB活性的cAMP-PKA通路研究

目的:用cAMP激动剂forskolin和PKA抑制剂H-89,探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞(PIM s)核因子-κB(NF-κB)活性的cAMP-PKA信号通路机制。方法:分离纯化大鼠PIM s。用电泳迁移率改变分析(EMSA)法检测大鼠PIM s中NF-κB活性,用W estern b lotting分析IκB-α蛋白水平。结果:正常对照组大鼠PIM s核内未检测到与特异性寡核苷酸探针相结合的NF-κB,LPS组细胞内NF-κB活性明显高于正常对照组(P<0.01),胞浆中IκB-α水平显著低于正常对照组(P<0.01)。CCK组和Fsk组细胞内NF-κB活性和胞浆中IκB-α含量均无明显差异(P>0.05)。CCK+LPS组和Fsk+LPS组,细胞内NF-κB活性均低于LPS组(P<0.05),IκB-α含量均高于LPS组(P<0.01)。LPS+CCK+H-89组NF-κB活性高于CCK+LPS组(P<0.01),而IκB-α蛋白水平低于CCK+LPS组(P<0.01)。结论:cAMP-PKA信号通路的活化可抑制LPS诱导的大鼠PIM s细胞内NF-κB活性升高和IκB-α蛋白水平的降低,CCK-8的抗炎作用是通过激活cAMP-PKA信号通路进而抑制NF-κB活性来实现的。