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小鼠内源性逆转录病毒Gag抗原在胰岛的表达及单克隆抗体的制备
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作者 李瑜 张雯 +4 位作者 袁昱 李姝亭 王哲 贲亚琍 戴飏 《基础医学与临床》 2023年第1期59-67,共9页
目的探究一种新发现的与1型糖尿病(T1D)相关的T细胞抗原[内源性逆转录病毒(ERV)的组特异性抗原(Gag)]与T1D发病的关系。方法首先对一个从非肥胖糖尿病(NOD)模型小鼠胰岛获得的Gag抗原(Gag 194)的氨基酸序列进行分析[多肽位置:193-210(VS... 目的探究一种新发现的与1型糖尿病(T1D)相关的T细胞抗原[内源性逆转录病毒(ERV)的组特异性抗原(Gag)]与T1D发病的关系。方法首先对一个从非肥胖糖尿病(NOD)模型小鼠胰岛获得的Gag抗原(Gag 194)的氨基酸序列进行分析[多肽位置:193-210(VSRLRGRRDPPAVDSTTS)],确定Gag 194多肽作为靶点,制备单抗;然后,再利用ELISA和Western blot检测单抗的特异性;最后,在免疫组织化学实验中检测不同年龄的T1D敏感的NOD小鼠与抗性的C57BL/6小鼠胰腺Gag抗原表达的差异性。结果成功制备了5株(1F4C8、2D4C6、3C3B9、4D6B3、5F9E4)IgG2b亚型的小鼠ERV Gag单抗;5株单抗的敏感性及特异性具有差异;其中,生物素化后的3株单抗(1F4C8、2D4C6、5F9E4)能特异识别NOD小鼠胰腺中表达的ERV Gag抗原且该抗原的表达可在3周龄的NOD小鼠检测到,Gag抗原多表达在NOD小鼠胰岛β细胞区域内,而非淋巴细胞浸润的区域。此外,C57BL/6小鼠的胰腺Gag抗原的表达为阴性。结论在NOD小鼠幼年时期ERV Gag抗原就已经开始表达,该抗原的表达可能受其特异的基因调控。 展开更多
关键词 1型糖尿病 非肥胖糖尿病(NOD)小鼠 内源性逆转录病毒 单克隆抗体 组特异性抗原Gag
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呋喃丹多克隆抗体的制备与初步应用 被引量:4
2
作者 贲亚琍 朱德锐 +3 位作者 胡芹芹 李娜 熊丽 刘德立 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期175-179,共5页
以呋喃丹为原料,在强碱性(pH〉12)下水解生成呋喃酚,与对硝基苯氯甲酸酯和6-氨基己酸反应,合成呋喃丹半抗原,即6-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸(BFNH).通过活性酯法将半抗原与载体BSA偶联制备的呋喃丹人... 以呋喃丹为原料,在强碱性(pH〉12)下水解生成呋喃酚,与对硝基苯氯甲酸酯和6-氨基己酸反应,合成呋喃丹半抗原,即6-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸(BFNH).通过活性酯法将半抗原与载体BSA偶联制备的呋喃丹人工免疫抗原免疫家兔获得了抗呋喃丹多克隆抗体,免疫抗原BFNH-BSA和包被抗原BFNH-OVA的结合比分别为18∶1和5∶1.采用辛酸-硫酸铵二步沉淀法纯化兔Ⅱ抗体,抗体最高效价为5.12×10^6,重、轻链分子量分别约为55和22 ku.通过间接竞争ELISA鉴定抗体质量,测得在10^-7~0.01 mg/mL范围内,抑制率与标准农药浓度的线性关系显著,呋喃丹残留最低检测限为10^-7mg/mL,与5种结构相似的氨基甲酸酯类的交叉反应率低于10%.并初步应用于果蔬样品呋喃丹残留的快速检测. 展开更多
关键词 呋喃丹 多克隆抗体 ELISA 应用检测
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心元胶囊对超负荷所致心衰心肌细胞收缩力和相关基因表达的影响 被引量:8
3
作者 贲亚琍 周风生 朱达琍 《四川中医》 北大核心 2005年第4期11-12,共2页
目的:探讨心元胶囊对超负荷所致心衰的心肌细胞收缩功能和相关基因表达是否具有改善作用。方法:为了治疗超负荷所致心衰的心肌细胞,把心元胶囊加在通过牵张而产生超负荷的心肌细胞中,加药后培养3天,测量超负荷所致心衰心肌细胞收缩力和... 目的:探讨心元胶囊对超负荷所致心衰的心肌细胞收缩功能和相关基因表达是否具有改善作用。方法:为了治疗超负荷所致心衰的心肌细胞,把心元胶囊加在通过牵张而产生超负荷的心肌细胞中,加药后培养3天,测量超负荷所致心衰心肌细胞收缩力和α-肌球蛋白重链(α- MHC)含量。结果:心肌细胞收缩百分比、收缩速度、±dL/dt和α- MHC基因表达增加,表明心元胶囊具有改善心肌细胞收缩力的作用。结论:心元胶囊是一种能有效地改善充血性心力衰竭的中药复方颗粒。 展开更多
关键词 相关基因表达 心肌细胞 心元胶囊 超负荷 收缩力 心衰 充血性心力衰竭 肌球蛋白重链 中药复方颗粒 C基因表达 改善作用 收缩功能 细胞收缩 加药后 百分比
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农药人工抗原合成方法的设计与优选 被引量:9
4
作者 贲亚琍 朱德锐 刘德立 《农药》 CAS 北大核心 2008年第1期10-14,共5页
农药人工抗原的合成直接影响后期制备抗体的质量,对于建立农药分子特异、灵敏的免疫分析方法具有关键性作用。综述了国内外农药人工抗原合成过程中的农药分子半抗原的设计原则、合成方法,人工抗原的设计、优选及影响因素等方面的研究进... 农药人工抗原的合成直接影响后期制备抗体的质量,对于建立农药分子特异、灵敏的免疫分析方法具有关键性作用。综述了国内外农药人工抗原合成过程中的农药分子半抗原的设计原则、合成方法,人工抗原的设计、优选及影响因素等方面的研究进展。并对农药残留免疫分析技术存在的问题和应用前景进行了讨论。 展开更多
关键词 农药 人工抗原 合成方法 设计 优选
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肺炎链球菌耐药性研究进展和现代抗生素研发趋势 被引量:12
5
作者 贲亚琍 刘德立 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第17期114-115,共2页
关键词 肺炎链球菌 耐药性 抗生素
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肺炎链球菌HMGS基因克隆及同源模建 被引量:2
6
作者 贲亚琍 崔古贞 +1 位作者 张青叶 刘德立 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第1期82-83,共2页
目的构建肺炎链球菌HMGS同源模建。方法采用基因工程技术克隆肺炎链球菌HMG-CoA合成酶(HMGS)基因,测序获得HMGS基因序列,以粪肠球菌HMGS(IX9E)为模板,通过SYBYL7.0软件构建同源模建。结果成功地构建了肺炎链球菌HMGS同源模建。结论获得... 目的构建肺炎链球菌HMGS同源模建。方法采用基因工程技术克隆肺炎链球菌HMG-CoA合成酶(HMGS)基因,测序获得HMGS基因序列,以粪肠球菌HMGS(IX9E)为模板,通过SYBYL7.0软件构建同源模建。结果成功地构建了肺炎链球菌HMGS同源模建。结论获得的肺炎链球菌HMGS基因序列与IX9E的基因有53%同源序列;可以为根据肺炎链球菌HMGS同源模建寻找结构类似物来开发新药奠定基础。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 HMGS 克隆 同源模建
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叶蝉散人工抗原中间产物2-异丙基苯甲酰氯的合成
7
作者 贲亚琍 陆文昌 刘德立 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期295-298,共4页
根据叶蝉散分子结构的特点,对叶蝉散人工抗原的合成进行了3步实验设计,即以叶蝉散为原料,在强碱性(pH>12)下水解生成2-异丙基苯酚,再加入三光气反应生成活性中间体2-异丙基苯甲酰氯,然后再与6-氨基己酸合成2-苯异丙基-N-(5-羧基戍烷... 根据叶蝉散分子结构的特点,对叶蝉散人工抗原的合成进行了3步实验设计,即以叶蝉散为原料,在强碱性(pH>12)下水解生成2-异丙基苯酚,再加入三光气反应生成活性中间体2-异丙基苯甲酰氯,然后再与6-氨基己酸合成2-苯异丙基-N-(5-羧基戍烷)氨基甲酸酯。此研究成功地进行2步化学反应,并获得2步化学反应产物:2-异丙基苯酚和2-异丙基苯甲酰氯,从而为叶蝉散多克隆抗体和单克隆抗体的制备提供帮助。 展开更多
关键词 叶蝉散 人工抗原 合成
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肺炎链球菌HMG-CoA合成酶基因克隆和表达
8
作者 贲亚琍 崔古贞 刘德立 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第5期450-454,共5页
目的克隆、表达肺炎链球菌3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme Asynthase,HMGS)。方法采用基因工程技术克隆肺炎链球菌HMGS基因,对T226进行反突变,构建重组表达载体pET-HMGSm并表达HMGS。结果序列分... 目的克隆、表达肺炎链球菌3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme Asynthase,HMGS)。方法采用基因工程技术克隆肺炎链球菌HMGS基因,对T226进行反突变,构建重组表达载体pET-HMGSm并表达HMGS。结果序列分析表明该基因与文献中报道的肺炎链球菌HMGS基因(No.AF290098)相比较有98.5%的同源性,存在18个核苷酸的差异,其中有2个核苷酸的不同导致编码的氨基酸改变,分别是Asn259→Ser,Ala349→Val,该基因编码蛋白由398个氨基酸组成。结论优化重组HMGS表达条件,在18℃0.4 mmol/L IPTG诱导表达4 h,用Ni-NTA层析柱分离纯化得到46 kDa特异性蛋白。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶 克隆 表达
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肺炎链球菌HMGS和HMGR有利于寻找抑制先导化合物
9
作者 贲亚琍 崔古贞 刘德立 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第11期1134-1137,共4页
目的对肺炎链球菌3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶和还原酶(HMGS和HMGR)进行动力学和功能研究。方法克隆表达肺炎链球菌HMGS和HMGR,检测洛伐他汀对它们的抑制作用,分别以HMGS酶促反应的产物和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)作为底... 目的对肺炎链球菌3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶和还原酶(HMGS和HMGR)进行动力学和功能研究。方法克隆表达肺炎链球菌HMGS和HMGR,检测洛伐他汀对它们的抑制作用,分别以HMGS酶促反应的产物和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)作为底物检测几种苗头化合物对HMGR的抑制性。结果洛伐他汀对HMGR有抑制作用,对HMGS无抑制作用,HMGS酶促反应的产物和HMG-CoA在HMGR检测苗头化合物抑制性的筛药反应中效果相似。结论 HMGS酶促反应的产物可以代替HMG-CoA进行苗头化合物初筛,可降低筛药成本,利于寻找新型高效抑制先导化合物。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶 抑制先导化合物
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肺炎链球菌HMG-CoA合成酶动力学研究
10
作者 贲亚琍 崔古贞 刘德立 《广西医科大学学报》 CAS 2010年第4期493-496,共4页
目的:在克隆表达肺炎链球菌HMG-CoA合成酶(HMGS)的基础上,对HMGS进行动力学研究。方法:采用紫外分光光度法,以乙酰-CoA作为底物,检测乙酰乙酰-CoA在300 nm处吸收值的变化。结果:肺炎链球菌HMGS的最适pH 9.75、最适温度37℃、最适MgCl2... 目的:在克隆表达肺炎链球菌HMG-CoA合成酶(HMGS)的基础上,对HMGS进行动力学研究。方法:采用紫外分光光度法,以乙酰-CoA作为底物,检测乙酰乙酰-CoA在300 nm处吸收值的变化。结果:肺炎链球菌HMGS的最适pH 9.75、最适温度37℃、最适MgCl2浓度为10 mol/L,粗酶提取物的比活为0.76μmol/min.mg-1,分离纯化后的比活为3.24μmol/min.mg-1,比活提高4.26倍。结论:在37℃、pH 9.755、mol/L MgCl2的最适反应条件下,肺炎链球菌HMGS的Vmax和Km值分别为4.69μmol/min.mg-1和213μmol。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 HMGS 酶特性鉴定
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适应地区性护理人才需求的教学改革研究 被引量:1
11
作者 贲亚琍 《河北联合大学学报(医学版)》 2012年第2期287-288,共2页
1983年我国恢复高等护理教育以来,至今已有300多所医学院校开设了护理专科和本科专业,不少医学院校还成立了护理学院。随着人们健康意识的加强,高学历护理人才供不应求,成了众单位抢着要的"香饽饽"。《中国主要城市白领薪酬报告》显示... 1983年我国恢复高等护理教育以来,至今已有300多所医学院校开设了护理专科和本科专业,不少医学院校还成立了护理学院。随着人们健康意识的加强,高学历护理人才供不应求,成了众单位抢着要的"香饽饽"。《中国主要城市白领薪酬报告》显示,北京白领2005年平均年薪5.7万元, 展开更多
关键词 地区性 护理人才 教学改革
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聚磷菌生物除磷机理研究进展 被引量:17
12
作者 朱德锐 贲亚琍 +1 位作者 韩睿 刘德立 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期62-65,共4页
废水中过量磷酸盐是引起水体富营养化的主要原因之一,生物除磷是一项新型的水处理技术。聚磷菌生物在多聚磷酸盐的合成和降解过程中发挥重要作用。文章综述了目前聚磷菌生物除磷的生化机理,聚磷过程中涉及的主要酶类及磷酸盐转运过程相... 废水中过量磷酸盐是引起水体富营养化的主要原因之一,生物除磷是一项新型的水处理技术。聚磷菌生物在多聚磷酸盐的合成和降解过程中发挥重要作用。文章综述了目前聚磷菌生物除磷的生化机理,聚磷过程中涉及的主要酶类及磷酸盐转运过程相关基因的表达调控。 展开更多
关键词 聚磷菌 聚磷酸盐激酶 磷酸盐转运 双因子调节系统
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米非司酮抗糖皮质激素活性的探讨 被引量:3
13
作者 朱达琍 贲亚琍 +1 位作者 董长垣 张运利 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2005年第1期93-95,99,共4页
目的 :探讨米非司酮与糖皮质激素受体的相互作用关系及抗糖皮质激素作用。方法 :以3 H 地塞米松(3 H DEX)作为示踪物 ,采饱和竞争抑制分析法测定米非司酮与大鼠肝胞浆糖皮质激素受体的相对结合亲和力 ;以培养的大鼠胸腺细胞作为模型 ,采... 目的 :探讨米非司酮与糖皮质激素受体的相互作用关系及抗糖皮质激素作用。方法 :以3 H 地塞米松(3 H DEX)作为示踪物 ,采饱和竞争抑制分析法测定米非司酮与大鼠肝胞浆糖皮质激素受体的相对结合亲和力 ;以培养的大鼠胸腺细胞作为模型 ,采3 H 胸腺嘧啶脱氧核苷 (3 H TdR)掺入法 ,研究米非司酮糖皮质激素和抗糖皮质激素活性。结果 :米非司酮可与大鼠肝脏糖皮质激素受体结合 ,较低浓度范围内就可抑制地塞米松与糖皮质激素受体结合 ,与地塞米松相比较 ,米非司酮的相对结合亲和力 (RBA)为 (344 .4 1± 5 7.4 1,5 0 ) %抑制浓度 (IC50 )为 (4.2 1± 1.0 2 )nmol·L-1。在很低浓度时地塞米松就可明显抑制3 H TdR掺入培养的胸腺细胞DNA ,而米非司酮对3 H TdR掺入无明显影响 ,但在高浓度时对3 H TdR掺入有一定的抑制作用。同时米非司酮能拮抗地塞米松诱导的3 H TdR掺入抑制作用。结论 :米非司酮具有一定的糖皮质激素作用和抗糖皮质激素作用 ,但其糖皮质激素样作用比较弱。 展开更多
关键词 米非司酮 抗糖皮质激素活性 饱和竞争抑制分析法 糖皮质激素受体
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学校与医院“定岗双元”合作培养护理专业人才的课程构建 被引量:6
14
作者 邓荆云 贲亚琍 +2 位作者 马慧芳 余薇 周咏 《护理学杂志》 2012年第18期68-71,共4页
目的通过改革护理专业学校与医院"定岗双元"合作培养护理人才的课程构建,向社会输送优秀护士,为医院专科护士的培养打下基础。方法学校与医院签订合作协议,双方在专业论证、承担临床课程教学、实训基地建设、课程构建、学生... 目的通过改革护理专业学校与医院"定岗双元"合作培养护理人才的课程构建,向社会输送优秀护士,为医院专科护士的培养打下基础。方法学校与医院签订合作协议,双方在专业论证、承担临床课程教学、实训基地建设、课程构建、学生就业等方面广泛合作,构建的课程体系分为通识教育课程模块、专业基础课程模块、专业主干课程模块、专业方向课程模块和实践课程模块5大模块。并对2008~2011级护理专业"定岗双元"的学生实施院校合作培养。结果学生对教师课堂教学组织、教学效果、结合临床与大纲、拓展前沿知识的评分为(7.92±1.45)~(8.97±1.69)分,为较好水平;2008级学生均通过2011年的全国护士执业资格考试,毕业后全部被医院录用。用人单位对毕业学生留院临床工作的综合评价良好。结论院校"定岗双元"合作培养的课程构建使学生、学院和医院多方受益。"定岗双元"教学课程改革能构建就业导向型课程体系,将教学质量的测评与国家、行业标准相衔接。 展开更多
关键词 护理专业 定岗双元 合作教学 课程构建
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米非司酮与孕激素受体及糖皮质激素受体结合力的研究 被引量:2
15
作者 朱达琍 朱长虹 贲亚琍 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第24期1-2,共2页
目的探讨米非司酮的抗孕激素及抗糖皮质激素作用。方法用放射配体结合实验测定米非司酮与猕猴子宫胞浆孕激素受体及大鼠肝胞浆糖皮质激素受体的结合力(BA)。结果米非司酮和孕酮与孕激素受体的BA分别为175.58%±19.20%、100%,50%抑... 目的探讨米非司酮的抗孕激素及抗糖皮质激素作用。方法用放射配体结合实验测定米非司酮与猕猴子宫胞浆孕激素受体及大鼠肝胞浆糖皮质激素受体的结合力(BA)。结果米非司酮和孕酮与孕激素受体的BA分别为175.58%±19.20%、100%,50%抑制浓度(IC50)分别为(17.20±1.20)nm o l/L、(30.20±2.31)nm o l/L,两者相比,P均<0.01;米非司酮和地塞米松与糖皮质激素受体的BA分别为344.41%±57.41%、100%,IC50分别为(4.21±1.02)nm o l/L、(14.50±1.89)nm o l/L,两者相比,P均<0.01。结论米非司酮具有强的抗孕激素作用和一定的抗糖皮质激素作用。 展开更多
关键词 米非司酮 孕酮 地塞米松 孕激素受体 糖皮质激素受体
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呋喃丹免疫半抗原的合成与应用
16
作者 朱德锐 贲亚琍 +4 位作者 胡芹芹 陆文昌 熊丽 刘盛华 刘德立 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期610-614,共5页
以呋喃丹、对硝基苯氯甲酸酯和6-氨基己酸合成呋喃丹半抗原:6-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸(BFNH).将半抗原与载体蛋白(BSA,OVA)偶联制备呋喃丹人工免疫抗原和包被抗原.利用BFNH-BSA免疫家兔获得抗呋喃丹的多... 以呋喃丹、对硝基苯氯甲酸酯和6-氨基己酸合成呋喃丹半抗原:6-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸(BFNH).将半抗原与载体蛋白(BSA,OVA)偶联制备呋喃丹人工免疫抗原和包被抗原.利用BFNH-BSA免疫家兔获得抗呋喃丹的多克隆抗体,并通过间接ELISA法测定抗体的效价.结果表明,家兔抗血清效价达1.28×106.采用正辛酸-硫酸铵二步沉淀法纯化抗体,纯化后抗体效价达到1.024×107,经10%SDS-PAGE分析,重、轻链分子量分别约为55kD和22kD. 展开更多
关键词 呋喃丹 免疫 半抗原 多克隆抗体.
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胰岛间充质干细胞通过外泌体内源性反转录病毒抗原诱导NOD鼠自身免疫反应
17
作者 龚业莉 欧阳礼辰 +2 位作者 张雯 贲亚琍 戴飏(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期661-665,671,共6页
目的:探讨Ⅰ型糖尿病(T1D)NOD小鼠胰岛组织中诱导自身免疫反应的初始抗原及其特异性免疫反应。方法:分离NOD小鼠胰岛细胞进行体外培养,检测胰岛细胞表达间充质干细胞(MSCs)标记分子的情况,同时检测胰岛组织中MSCs和淋巴细胞的分布。收... 目的:探讨Ⅰ型糖尿病(T1D)NOD小鼠胰岛组织中诱导自身免疫反应的初始抗原及其特异性免疫反应。方法:分离NOD小鼠胰岛细胞进行体外培养,检测胰岛细胞表达间充质干细胞(MSCs)标记分子的情况,同时检测胰岛组织中MSCs和淋巴细胞的分布。收集胰岛MSCs的培养上清,并分离外泌体,将外泌体与NOD小鼠脾细胞混合共培养,检测IFN-γ的释放及B细胞增殖情况。Western blot及RT-PCR检测内源性反转录病毒(ERV)的核抗原(Gag)在胰岛MSC或其外泌体中的表达。结果:体外培养小鼠胰岛组织可生产大量MSCs,这种原代培养的细胞表达Sca-1和CD105分子。培养上清含外泌体,且该外泌体能刺激部分B细胞增殖并激活T细胞分泌IFN-γ。抗原成分分析表明NOD鼠而非B6鼠的胰岛MSC及其外泌体表达ERV Gag抗原,且该抗原基因的表达仅局限于胰岛的CD45-Sca-1+MSC,而非浸润胰岛的CD45+淋巴细胞。结论:NOD鼠胰岛干细胞分泌的外泌体表达ERV Gag抗原,并具有强的免疫原性,提示外泌体可能模拟类病毒诱导胰岛局部的免疫刺激应答,为进一步研究ERV在诱发T1D发病中的机制奠定基础。 展开更多
关键词 NOD鼠 胰岛间充质干细胞 外泌体 内源性反转录病毒 自身免疫
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中职教学计划调整的实践探索
18
作者 田静波 贲亚琍 《职业教育研究》 2013年第2期162-164,共3页
为了进一步深化教学改革,全面了解和掌握当前中职教学改革和教学发展状况,江汉大学卫生职业技术学院教改工作小组进行了教学改革专题调研,总结了教学改革取得的成绩和不足,并对中职教学计划进行了调整。本文对有关情况进行了归纳、整理。
关键词 中职 教学计划 调整
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The Difference of Sensitivity between BXPC-3 and K562 Cells by Treatments with Combination of Indole-3-acetic Acid and Horseradish Peroxidase
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作者 贲亚琍 刘德立 《Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science)》 SCIE EI CAS 2006年第4期95-98,共4页
The difference of sensitivity to indole- 3-acetic acid ( IAA ) combined with horseradish peroxidase (HRP) in K562 and BXPC- 3 cells was investigated. The cell proliferation was determined by MTF assay. The cell cy... The difference of sensitivity to indole- 3-acetic acid ( IAA ) combined with horseradish peroxidase (HRP) in K562 and BXPC- 3 cells was investigated. The cell proliferation was determined by MTF assay. The cell cycle and apoptosis of K562 and BXPC-3 cells were examined by a fluorescence flow cytometer (FCM) and terminal deoxynacleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) respectively. The experimental results show that IAA and HRP could inhibit BXPC- 3 cell proliferation greatly compared with K562 cell during the first 48 h . The cell cycle was arrested predominantly at G2/ M phase in K562 and BXPC- 3 cells. The cell apoptosis of K562 and BXPC- 3 was induced by IAA/ HRP. There was a significant difference between the two cell lines since BXPC-3 cells were more sensitive than K562 cells by treatments with combination of IAA and HRP. 展开更多
关键词 indole- 3-acetic acids horseradish peroxidase BXPC- 3 cell K562 cell apoptosis
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抗SARS-CoV-2卵黄抗体的制备与活性研究
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作者 翟荣云 吴玉娟 +3 位作者 许庆安 张玮莹 贲亚琍 樊明文 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2024年第10期1183-1189,共7页
目的:运用卵黄抗体(IgY)技术制备高效的抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)IgY并检测其免疫学活性。方法:使用SARS-CoV-2灭活疫苗免疫蛋鸡,运用冻融水稀释法、硫酸铵沉淀法和透析法从鸡蛋中提取IgY进行浓缩及纯化并优化IgY提取方法。采用SDS-P... 目的:运用卵黄抗体(IgY)技术制备高效的抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)IgY并检测其免疫学活性。方法:使用SARS-CoV-2灭活疫苗免疫蛋鸡,运用冻融水稀释法、硫酸铵沉淀法和透析法从鸡蛋中提取IgY进行浓缩及纯化并优化IgY提取方法。采用SDS-PAGE对IgY的提取及纯化效果进行表征,BCA法检测纯化后蛋白的浓度、间接ELISA法检测抗体对重组SARS-CoV-2 S1蛋白、N蛋白的效价及其热稳定性。对Balb/c小鼠分别给予15 d常规剂量IgY及30 d大剂量IgY口服及滴鼻处理,采用ELISA法测定小鼠血清对IgY免疫反应性及小鼠体内部分炎症指标IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α表达情况,明确IgY安全使用剂量。结果:纯化后IgY SDS-PAGE表征条带正确,IgY提取及纯化效果好。纯化后的IgY效价在免疫完成后第2周达到最高,在200μg/mL时重组SARS-CoV-2 S1蛋白和N蛋白的效价高达1∶256。IgY抗体经25~60℃的温度处理4 h后活性仍基本保持稳定。常规剂量IgY未引起小鼠明显免疫反应。长期大剂量口服及滴鼻IgY时,IgY浓度为20 mg/mL处理组小鼠血清IL-1β、IL-6、IFN-γ及TNF-α分泌显著增加。结论:IgY技术具有快速获得针对不同抗原的高效IgY的潜力,且经其制成的IgY具有良好的热稳定性及生物安全性,但长期使用时IgY剂量应避免超过50 mg/kg,以免加重肾脏处理负担。 展开更多
关键词 IgY技术 卵黄抗体(IgY) 活性 SARS-CoV-2 被动免疫 预防 辅助治疗
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