脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y Y5受体反义基因减肥降脂作用关系的研究

目的:探讨脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y(NPY)Y5受体反义基因减肥降脂作用的关系。方法:建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型,侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、错义寡核苷酸或生理盐水,观察肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂的变化,采用RT-PCR技术检测腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平。结果:①高营养饮食诱导下,肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠,腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达:水平则显著高于正常大鼠;②NPYY5受体反义寡核苷酸干预后,肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低,腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平则显著低于肥胖对照大鼠。结论:侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著降低肥胖大鼠的体脂、血脂,其机制可能与腹膜后脂肪组织TNF-α基因的表达下调有关。

基于LabVIEW的数据采集及测试系统设计

为了使用户更方便地得到准确的信号数据,设计了一套数据采集及测试系统。利用图形化编程语言LabVIEW 2010、NI USB 6221数据采集卡以及SG1645Q多功能函数信号发生器设计出一个虚拟数字电压表的测试系统。该系统运行稳定,精度高,能达到信号采集以及数据测量显示的要求。

超声引导下前锯肌浅面和前锯肌深面阻滞在胸腔镜手术镇痛中的研究

目的对比研究超声引导下前锯肌浅面阻滞(Shallow serratus plane block,SSPB)和前锯肌深面阻滞(Deep serratus plane block,DSPB)在胸腔镜手术中的镇痛效果。方法选择2019年1月1日~6月20日于余姚市人民医院行择期胸腔镜手术的患者60例,所有患者均为ASA(美国麻醉医师协会)Ⅰ~Ⅱ级,按照随机法平均分为超声引导下SSPB联合静脉自控镇痛泵组(P组)和超声引导下DSPB联合静脉自控镇痛泵组(C组)。P组患者于术前行超声引导下SSPB阻滞,C组患者行超声引导下DSPB阻滞,15 min后测定两组患者的神经阻滞范围,两组患者手术结束后均使用静脉自控镇痛(PCIA)泵镇痛。分别对两组患者术后1 h、6 h、12 h、18 h和24 h的伤口疼痛情况进行视觉模拟(VAS)评分,记录镇痛泵输注总量、患者自控追加按压次数以及术后不良反应发生率。结果15 min后DSPB组阻滞平面可达T3~T8脊神经支配节段,SSPB组阻滞平面可达T2~T9脊神经支配节段;两组静息和咳嗽时VAS评分在术后1 h、6 h、12 h及18 h时均无明显差异(P>0.05);两组24 h时VAS评分比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后镇痛泵输注镇痛药物总量、追加按压次数比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组术后恶心、呕吐、皮肤瘙痒的发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论DSPB联合PCIA泵在胸腔镜术后可发挥良好的镇痛效果。

加强继续教育 提高图书馆员综合素质

建立一支高素质的图书馆队伍,是现代图书馆建设和持续发展的必然要求,提高图书馆员的综合素质必须实施继续教育。本文根据图书馆工作的实际,阐述对馆员综合素质的要求与继续教育的内容,并提出了继续教育的途径和措施。

浅谈如何提高图书馆纸质文献利用率

图书馆纸质文献利用率低的情况日趋严重,除了与数字资源爆炸式发展有关外,图书馆和读者自身也存在一些影响因素。提出了积极开展图书宣传工作、强化图书馆员服务意识、适时调整图书类别及其数量、加强图书管理、引导读者借阅等提高图书馆纸质文献利用率的措施。

刍议高校图书管理数字化模式的必要性和可行性

高校图书管理数字化模式的建设是高校馆藏资源高效利用的最为有效的方式之一,因而在实际高校图书馆的建设中,都将数字化模式的发展作为本馆建设发展的目标,同时数字化建设也是越来越完善。作为一项系统的工程,高校图书管理数字化有其复杂性,但是毫无疑问也有其必要性,也有其可行性。从图书管理的数字化建设的背景出发,来探讨数字化建设必要性和可行性是一中较为合理的思路,可以有效的促进图书馆数字化建设。

双侧海马注射神经肽Y Y2受体反义基因对大鼠学习记忆影响的初步探讨

目的:探讨神经肽Y Y2(NPY Y2)受体在大鼠学习记忆中的作用。方法:双侧海马插管,注射Y2受体的反义、错义寡核苷酸或生理盐水,采用跳台法记录训练期的错误次数(学习成绩)、记忆测试期的潜伏期和错误次数(记忆成绩)。结果:注射Y2受体反义寡核苷酸组大鼠训练期的错误次数较对照组无显著性差别,而记忆测试期的潜伏期较对照组显著缩短,错误次数显著增加,提示该组大鼠记忆能力受到显著损害。结论:NPY Y2受体参与了大鼠的记忆形成过程。

JNK-c-Jun/AP-1信号通路介导血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞增殖

目的:探讨JNK-c-Jun/AP-1信号转导通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球系膜细胞(MC)增殖及细胞周期调控中的作用。方法:应用3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法及流式细胞术测定MC增殖和细胞周期的变化。应用凝胶电泳迁移率(EMSA)和非放射性激酶活性检测法检测系膜细胞内活化蛋白-1(AP-1)及c-Jun氨基末端激酶(JNK)活性。结果:AngⅡ可呈时间依赖性地诱导MC内JNK活化,AngⅡ刺激30min后,JNK活性达到高峰,1h几乎恢复至正常水平;AngⅡ刺激后MC内AP-1活性显著增强,3H-TdR掺入量明显增加,S期和G2/M期细胞数显著增多;JNK特异性抑制剂SP600125显著抑制AngⅡ诱导AP-1活化及MC增殖。结论:AngⅡ→JNK/SAPK→c-Jun/AP-1信号通路在MC增殖中发挥一定的作用。JNK特异性抑制剂SP600125能部分抑制AngⅡ诱导的AP-1活化及细胞增殖,从而可能具有一定的治疗作用。

阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子-κB活化与肾小管间质损害的关系

目的 :探讨阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子 - κB(NF- κB)活化及其与蛋白尿、肾小管间质损害和趋化因子表达之间的关系。方法 :阿霉素肾病模型采用尾静脉注射阿霉素 (6 m g/kg)制备。应用免疫组化和图像分析系统观察肾皮质区小管间质损害程度、NF- κB活化及单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)表达。结果 :阿霉素肾病大鼠出现大量蛋白尿及明显的皮质区肾小管间质损害。肾皮质区 NF- κB活化及 MCP- 1表达显著增强 ,且与蛋白尿及肾小管间质损害程度显著相关。结论 :NF- κB活化介导了非免疫性慢性肾小球肾炎时皮质区肾小管间质损害及诱导趋化因子的产生。

重组leptin干预对营养性肥胖大鼠血清胰岛素、C-肽、内源性leptin含量及ob基因表达水平的影响

目的:探讨重组leptin侧脑室注射后,营养性肥胖大鼠模型腹膜后脂肪组织obese基因表达、内源性leptin含量以及血清胰岛素、C肽的变化,以期进一步探讨leptin中枢干预对肥胖大鼠leptin抵抗、胰岛素抵抗的改善作用。方法:(1)应用高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型,用ELISA双抗体夹心法和放免法测定血清中leptin及胰岛素、C肽的含量;(2)应用RT鄄PCR技术检测各组大鼠脂肪组织中obese基因的表达水平。结果:(1)肥胖组大鼠经leptin干预后血清胰岛素和C肽明显降低,与正常各组之间无显著性差异;肥胖对照组、生理盐水组血清胰岛素、C肽较正常组明显升高。(2)肥胖大鼠经重组leptin干预后,脂肪组织obmRNA含量明显低于肥胖对照组、肥胖生理盐水组;其与正常对照组、正常leptin、生理盐水干预组之间无显著性差异。(3)肥胖对照组、肥胖生理盐水组大鼠血清leptin含量明显高于肥胖leptin干预组以及正常对照组、正常各干预组;肥胖leptin干预组与正常对照组、正常各干预组之间无显著性差异。(4)各组大鼠脂肪组织中obmRNA含量与其血清leptin含量、呈显著正相关关系。大鼠血清leptin含量与血清胰岛素、C肽浓度呈显著正相关。结论:侧脑室给予leptin可以显著减少肥胖大鼠脂肪组织中ob基因的表达以及血清leptin、胰岛素和C肽的含量。

姜黄素对肾毒血清肾炎大鼠肾组织超微结构及细胞增殖的影响

目的 探讨姜黄素对实验性肾炎组织病理以及增殖细胞核抗原 (PCNA)的影响。方法雄性SD大鼠 72只随机分成 3组 ,正常对照组 :注射生理盐水 ;模型组 :尾静脉注射兔抗鼠肾毒血清0 5ml/d ,连用 2d ,腹腔注射二甲亚砜 0 5ml·kg 1·d 1;姜黄素组 :尾静脉注射兔抗鼠肾毒血清 0 5ml/d ,连用d ,同时腹腔注射姜黄素 5 0mg·kg 1·d 1。分别于第 3、7、14、2 8d处死大鼠 ,取肾组织分送常规病理、免疫组化及透射电子显微镜检查。结果 姜黄素组肾小球细胞数明显少于模型组 ;间质炎细胞浸润亦较模型组明显减少 ;14d后小管间质损伤指数也低于模型组。电镜显示 ,姜黄素可明显阻止肾小球上皮细胞足突融合以及基膜增厚 ,抑制系膜细胞、内皮细胞增殖 ,减少肾组织内炎细胞浸润 ,尤其是对间质单核样细胞浸润的减少作用更为明显 ;免疫组化也证实姜黄素应用 7d后即可降低PCNA表达。结论 姜黄素能明显改善肾炎时肾小球超微结构的改变 ,并抑制系膜细胞、内皮细胞增殖 ,减轻小管间质损伤及肾组织内炎性细胞的浸润。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对人肾小管上皮细胞转分化及胶原合成的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在人肾小管上皮细胞转分化及胶原合成中的作用。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞HK2分为2组(1)对照组;(2)IGF-Ⅰ组培养液中加入终浓度分别为25、50、100、200μg/L的IGF-Ⅰ。用倒置显微镜观察细胞形态变化,以RT-PCR检测HK2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原Ⅰα和胶原ⅢαmRNA表达的变化。ELISA方法检测培养上清中胶原Ⅰ的浓度。结果IGF-Ⅰ刺激使HK2细胞由椭圆形变为梭形。不同浓度的IGF-Ⅰ作用于HK2细胞48h后,α-SMA、胶原Ⅰα和胶原ⅢαmRNA水平显著升高(P<0.05);ELISA结果显示,100及200μg/LIGF-Ⅰ组中HK2细胞分泌的胶原Ⅰ显著增加(P<0.05)。结论IGF-Ⅰ在体外能够诱导人肾小管上皮细胞转分化,并促进其胶原的合成。

Podocin在大鼠微小病变肾病模型中的表达和分布

目的 :观察podocin在大鼠氨基核苷嘌呤霉素 (PAN)肾病模型中的表达和分布 ,探讨其在蛋白尿发生中的可能作用。 方法 :建立大鼠PAN肾病模型 ,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变 ,免疫荧光染色图像分析以及半定量RT PCR的方法 ,分别检测不同时间点 (1、3、1 0、2 0天 )大鼠肾组织中podocin的表达。 结果 :①PAN注射后第 1、3、1 0、2 0天大鼠肾小球podocin的表达强度分别为 :4 5 0 3± 5 1 0、33 35± 6 4 1、1 3 5 8± 3 73、4 2 34± 6 6 5 ,显著低于正常对照组 (5 4 95± 6 2 5 ,P <0 0 1 ) ,其中第 1 0天的表达强度最低。podocin的表达与尿蛋白排泄量呈负相关 (r=- 0 786 ,P <0 0 1 ) ;②podocin在正常大鼠肾小球沿毛细血管袢呈均匀连续的线样分布 ;模型第 1天podocin在肾小球局部呈颗粒状分布 ;第 3天呈弥散性的颗粒状分布 ;第 1 0天呈粗大的颗粒状分布 ;第 2 0天podocin的分布逐渐恢复为线样 ;③PAN注射后第 1、3、1 0、2 0天大鼠肾小球podocinmRNA的表达分别为正常对照组的 1 2、1 5和 1 4倍 ,第 2 0天大鼠肾小球podocinmRNA水平恢复正常。 结论

姜黄素对大鼠肾毒血清肾炎肾组织细胞外基质积聚的影响

目的 :观察姜黄素是否抑制肾炎大鼠肾组织Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)的积聚而对肾脏起保护作用。方法 :72只雄性SD大鼠随机分成 3组 ,每组 2 4只。对照组尾静脉及腹腔注射生理盐水作对照 ;模型组尾静脉注射肾毒血清0 .5ml/d ,连用 2d ,腹腔注射二甲亚砜 0 .5ml·kg-1·d-1;姜黄素组尾静脉注射肾毒血清 0 .5ml/d ,连用 2d ,同时腹腔注射姜黄素 5 0mg·kg-1·d-1。分别于第 3、7、14、2 8天各处死 6只大鼠 ,部分肾组织福尔马林固定、石蜡包埋后进行免疫组织化学染色。结果 :对照组大鼠肾小球基膜Ⅳ型胶原以及FN染色弱阳性。模型组大鼠肾小球Ⅳ型胶原和FN沉积的范围随着病程的进展逐渐增多 ,与相应时间对照组比较有显著差异 (P <0 .0 1)。姜黄素组肾小球Ⅳ型胶原和FN沉积的范围亦随时间的发展逐渐扩大 ,然而Ⅳ型胶原较同期模型组比较染色范围却明显缩小 (P <0 .0 1) ,而FN于 7d后才比模型组减少 (P <0 .0 1)。结论

CD2AP、F-actin在肾病大鼠中的表达及意义

目的:观察CD2-associatedprotein(CD2AP)、肌动蛋白微丝(F-actin)在氨基核苷肾病大鼠肾小球中的表达变化及其意义。方法:通过建立大鼠氨基核苷肾病模型,采用免疫组织化学、蛋白质印迹技术观察CD2AP在不同时点肾病大鼠肾小球中的表达和分布变化,采用荧光技术检测肾小球F-actin含量的变化。结果:①肾小球足细胞CD2AP的表达在肾病模型建立的早期即有下调;在肾病大鼠蛋白尿的高峰期,CD2AP的表达明显下降(P<0.01);在肾病大鼠的疾病恢复期,CD2AP的表达逐步恢复正常。②肾小球足细胞CD2AP表达量的变化与肾病大鼠24h尿蛋白的变化呈负相关(r=-0.865,P<0.01)。③在肾病大鼠蛋白尿的高峰期,肾小球F-actin含量明显下降(P<0.05)。④肾小球CD2AP蛋白表达量和肾小球F-actin荧光定量变化呈正相关(r=0.873,P<0.01)。结论:①CD2AP、F-actin的表达变化在蛋白尿的发生机制中有着重要作用。②CD2AP可能是判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。

Bcl-2、Bax基因表达改变与禁食诱导的脂肪细胞凋亡研究

目的 :研究禁食对大鼠体重及外周脂肪湿重的影响 ,探讨禁食减脂减重与脂肪细胞凋亡的关系。方法 :禁食 48h,用DNA提取物凝胶电泳证实脂肪细胞凋亡的存在 ,逆转录 (RT) - PCR探讨 Bcl- 2与 Bax基因的表达。结果 :1禁食能明显降低大鼠体重 ,组间比较具有显著的统计学意义 (P<0 .0 0 1) ;2禁食能减少外周脂肪组织湿重 ,但统计学意义不显著 (P>0 .0 5 ) ;3DNA提取物凝胶电泳结果证实脂肪细胞发生了凋亡 ;4外周脂肪组织中 Bcl- 2基因表达减少 ,Bax表达增加 ;5生殖器周脂肪组织对细胞凋亡的敏感性高于腹膜后。结论 :降低 Bcl- 2与 Bax的比值 ,诱导脂肪细胞凋亡可能是禁食减脂减重的重要机制。

外源性结缔组织生长因子对肾小管上皮细胞的转分化和胶原合成效应

目的大量研究表明内源性结缔组织生长因子(CTGF)在肾小管间质纤维化(TIF)进程中发挥了重要作用,为进一步阐明外源性CTGF的作用机制,该实验探讨了重组人结缔组织生长因子(rhCTGF)刺激对人肾小管上皮细胞(HK2)转分化和胶原合成的作用。方法rhCTGF 5 ng/mL刺激HK2细胞,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,同时在刺激后0,3,6,12,24,48 h各点收集细胞,RT-PCR检测上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原Iα1(Col Iα1)和胶原IVα1(Col IVα1)mRNA表达变化。结果rhCTGF 5 ng/mL刺激使HK2细胞形态由椭圆形转为梭形,下调E-cadherin mRNA表达,上调-αSMA mRNA表达,但对Col Iα1和Col IVα1mRNA表达没有影响。结论外源性CTGF能导致HK2细胞转分化,但不能促进其胶原合成。

加速型肾小球硬化动物模型的建立

目的 建立一种病变稳定、制作周期短、重复性好、最接近人类肾小球硬化病理改变的动物模型。方法 在摘除一侧肾脏的基础上 ,通过两次尾静脉注射柔红霉素 ,定期观察血、尿及肾脏组织病理学改变。结果 模型组大鼠于用药后第 4周时 ,出现水肿、大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症 ,病理形态上开始出现典型的节段性肾小球硬化 ;第 9周时血清肌酐、尿素氮水平显著升高 (P<0 .0 5 ) ,80 %的肾小球出现节段性硬化。结论 此模型制作周期短 ,各项指标均符合肾小球硬化的病理及临床特征。

Resistin基因在肥胖易感大鼠与肥胖抗性大鼠脂肪组织中表达差异的研究

目的探讨高脂饮食诱导下肥胖易感(Obesity鄄prone,OP)大鼠与肥胖抗性(Obesity鄄resistance,OR)大鼠白色脂肪组织中Resistin基因mRNA表达的差异。方法25只雄性SD大鼠,以高脂高能量鼠料饲养2周后,按体重增值大小分组,增重最多9只为OP组,增重最少9只为OR组,余7只为正常对照组(C组),OP、OR大鼠继续饲以高脂高能量鼠料4周,对照组改饲标准鼠料。观察各大鼠体重变化、脂肪组织湿重、血脂、血糖、血清胰岛素等,并采用NorthernBlot技术分析脂肪组织中Resistin基因的mRNA表达水平。结果①高脂高能量鼠料诱导下,OP组大鼠体重、附睾周围及腹膜后脂肪组织湿重明显高于C组,OR组则显著低于C组,但各组间血脂、血糖、血清胰岛素水平并无显著差异(P>0.05);②OP组大鼠附睾周围和腹膜后脂肪组织中ResistinmRNA表达水平均显著高于C组与OR组,OR组则低于C组,且附睾周围脂肪组织中ResistinmRNA表达水平显著高于腹膜后脂肪组织。结论OP与OR大鼠外周脂肪组织存在Resistin基因mRNA表达的差异,其差异与大鼠发生肥胖的易感程度有关。

注意缺陷障碍动物模型的行为学特征检测

目的:以国外常用的注意缺陷障碍动物模型SHR大鼠为观察对象,观察注意缺陷障碍动物模型的行为学特征。方法:实验于2003-12/2004-01在南京医科大学动物实验中心完成,清洁级SHR大鼠(注意缺陷障碍组)和WKY大鼠(对照组)各10只,鼠龄4周,均为雄性,体质量70～90g,两组之间差异不显著。利用开场试验观察记录大鼠穿越的格子数、大鼠直立次数、理毛次数,以及粪便数,làt迷宫观察大鼠穿越角落的频数及直立和斜搭在墙上的频率,跳台试验记录每只大鼠受到电击后跳上平台的次数,以此作为学习成绩。24h后重新测试,在铜栅通电的情况下,直接将大鼠置于橡皮台上,记录第1次跳下橡皮台的潜伏期和5min内的错误次数作为记忆的成绩。结果:10只SHR大鼠和10只WKY大鼠均进入结果分析。①白天及夜晚开场中SHR大鼠穿越格数及直立次数均较对照组WKY大鼠显著增多(白天:72.10±15.44,37.50±9.59,29.40±15.19,10.30±8.55;夜晚:83.70±11.78,49.00±7.94,42.00±18.12,14.10±10.45,P<0.001)。②SHR大鼠在Làt迷宫中30min内,穿越角落频数、直立次数、理毛次数均较对照组WKY大鼠显著增加(128.30±29.38,151.90±46.51,14.00±5.03;46.10±22.97,36.00±26.31,7.90±4.12,P<0.001或P<0.05);将其分为0～10min,10～20min、20～30min3个时间段来分析,发现随着时间的延续,SHR和WKY大鼠穿越角落频数逐渐减少,但各个时间段内SHR大鼠穿越角落频数仍较对照组WKY大鼠显著增加(63.80±15.5,36.10±13.34,28.40±8.34;26.40±11.01,13.30±12.18,6.40±4.97,t=6.13,3.99,7.15,P均<0.01),SHR和WKY大鼠直立次数随着时间的延续也逐渐减少,但各个时间段内SHR大鼠直立次数仍较对照组WKY大鼠多(67.30±20.49,46.60±21.58,38.00±14.31;18.80±12.04,11.60±12.21,5.60±4.38,t或t’=6.41,4.46,6.85,P均<0.01)。③跳台实验结果显示,SHR和WKY的学习能力差异无显著性,记忆测试时SHR大鼠的潜伏期与WKY大鼠也未见显著差别,但SHR大鼠的错误次数显著高于WKY大鼠(1.42±1.00,0.56±0.73,t=2.19,P<0.05)。结论:利用开场实验、Làt迷宫及跳台实验等多方法结合,可以简单有效的从多动、注意障碍、学习记忆等方面对注意缺陷障碍模型进行行为学检测。