2818例未产女性孕前体成分特点的现况分析

目的了解未产女性孕前体成分的分布特征,为孕前女性优生保健提供指导。方法选取2020年1月至2023年8月于我院就诊的2818例孕前未产女性作为研究对象,采用生物电阻抗的方法进行体成分检测。结果2818例孕前未产女性平均年龄(28.55±3.27)岁,平均体质量指数(BMI)(22.46±3.59)kg/m^(2)。高达70.09%(1975例)的孕前女性体脂百分比高于正常值,体脂百分比正常者仅占28.57%(805例)。根据体成分特征进行分型,高体脂正常肌肉型占比最高为39.78%(1121/2818),其次为高体脂低肌肉型24.80%(700/2818),而正常体脂正常肌肉型仅占14.02%(395/2818)。按年龄分组分析,肥胖相关指标(BMI、内脏脂肪面积、腰围、臂围)在不同年龄组间有显著差异(P<0.05),表现为25~<30岁组年龄段最低,之后随年龄增加而增加。低肌肉型(骨骼肌占比<90%)的孕前女性占比在各年龄段中均超过50%。BMI≥24 kg/m^(2)(39.57%,55/139)和腰围≥80 cm(51.80%,72/139)的孕前女性在≥35岁年龄段比例最高(P<0.05)。相关性分析显示,BMI与体脂百分比、内脏脂肪面积、腰围、臂围之间呈显著正相关(r>0.80,P<0.001)。结论孕前未产女性主要表现为高体脂百分比体型,尤其年龄≥35岁的女性,以腹型肥胖为主。积极开展孕前女性体成分分析有助于更精准地识别潜在肥胖人群、降低超重/肥胖对育龄期女性健康以及母婴健康的远期影响,便于为孕前优生保健提供指导。

放疗致卵巢早衰小鼠动物模型的构建

目的探讨应用放疗建立卵巢早衰小鼠动物模型的方法并验证其可行性。方法给予8周龄C57BL6雌性小鼠单次全身X射线辐照,按照辐照剂量不同分为0Gy、2Gy、4Gy、6Gy组,每组5只。记录各组放疗后第7天小鼠的体重、卵巢湿重、激素水平、卵泡计数及全身各脏器形态学的变化。观察并分析0Gy、4Gy组放疗后14d、21d、28d、42d的上述指标。结果放疗后第7天,2Gy、4Gy及6Gy组双侧卵巢湿重均较0Gy组显著下降,4Gy及6Gy组血清FSH水平显著升高,2Gy、4Gy、6Gy组卵巢内原始卵泡数、生长卵泡数均显著下降(P均<0.05);肝脏、脾脏、子宫内膜均出现了相应组织学改变。与0Gy组比较,4Gy组小鼠随着辐照时间延长,卵巢湿重逐渐下降,血清FSH水平逐渐升高,血清E2水平则逐渐降低(P<0.05);卵巢内原始卵泡数和生长卵泡数逐渐减少至完全耗尽,至42d时卵巢内仅见闭锁卵泡。结论给予C57BL6小鼠4Gy最低适宜剂量,放疗后7d至14d能够成功建立小鼠卵巢早衰模型,且造模时间短、成功率高、死亡率低,为临床卵巢早衰患者的基础研究提供了稳定可靠的动物模型。

长期低剂量氯氰菊酯对小鼠卵巢功能的影响

目的 探讨长期低剂量氯氰菊酯(CYP)暴露对小鼠卵巢功能的影响。方法 研究分为体内实验和体外实验。体内实验,将15只体重为17~19 g的3周龄ICR雌性小鼠随机分为3组,每组5只,予以0.02 mg·kg^(-1)·d^(-1)CYP的为极低剂量组,予以0.2 mg·kg^(-1)·d^(-1)CYP的为低剂量组,予以0.01%无水乙醇的为对照组,连续处理6个月。于第6个月观察小鼠动情周期,检测血清卵泡刺激素(FSH)和抗苗勒管激素(AMH)水平,分离单侧卵巢组织进行卵泡计数。体外实验,3周龄ICR雌鼠腹腔注射10 U孕马血清促性腺素(PMSG)46~48 h后获取未成熟卵丘-卵母细胞复合体(COCs),分别置于0μmol/L CYP+体外成熟(IVM)培养液(对照组)、100μmol/L CYP+IVM培养液(极低剂量组)和200μmol/L CYP+IVM培养液(低剂量组)中处理16~18 h后,计数MⅡ卵母细胞,并分析各组卵母细胞第一极体(PB1)排出率、活性氧(ROS)及线粒体膜电位情况。结果 体内实验结果显示,与对照组比较,极低剂量组和低剂量组小鼠体重、子宫系数未见明显改变,卵巢系数稍有减少,但差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,低剂量组小鼠动情周期紊乱,血清FSH水平显著升高[(17.53±4.04)U/L vs.(5.67±0.52)U/L,P<0.05],AMH水平显著下降[(0.47±0.15)ng/ml vs.(1.41±0.24)ng/ml,P<0.05],窦卵泡数显著减少[(22.80±4.49)个vs.(84.00±14.98)个,P<0.05],其余各级卵泡数比较无显著性差异(P>0.05)。体外实验结果显示,与对照组比较,低剂量组卵母细胞PB1排出率和卵母细胞线粒体膜电位显著下降(P<0.05),卵母细胞内ROS水平显著升高(P<0.05)。结论 长期低剂量(0.2 mg·kg^(-1)·d^(-1))CYP暴露可通过影响卵母细胞的发育导致卵巢储备功能下降。

血清外泌体miR-17-5p对早发性卵巢功能不全患者Treg细胞的作用及机制研究

目的探索早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)患者血清外泌体miR-17-5p与调节性T(regulatory T,Treg)细胞的关系及其在POI发生中的机制。方法采用病例对照研究,收集2019年1月至2020年12月期间于南京医科大学第一附属医院妇科内分泌门诊确诊的32例中国汉族特发性POI患者为POI组,32例同期行健康体检且月经规律的中国汉族女性作为正常组。应用实时定量PCR验证血清外泌体miR-17-5p相对表达量。收集健康成年女性外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)与提取的POI患者或正常组女性血清外泌体共培养72 h及转染miR-17-5p模拟物72 h(记为miR-17-5p模拟物组),同时以PBS为阴性对照,应用流式细胞术检测PBMC中Th1、Th17和Treg细胞比例。通过miR-17-5p模拟物/抑制剂转染体外诱导诱导型Treg(induced Treg,iTreg)细胞,应用流式细胞仪检测细胞增殖/凋亡情况,生物信息分析miR-17-5p的靶基因。结果与正常组相比,POI组血清外泌体miR-17-5p的相对表达量明显升高(P<0.001)。POI外泌体与PBMC共培养后Treg细胞比例[(0.93±0.40)%]低于阴性对照组[(3.77±0.89)%,P=0.005]。miR-17-5p模拟物组PBMC中的Treg细胞比例[(4.30±1.91)%]显著低于阴性对照组[(11.97±1.82)%,P=0.007],而Th1细胞及Th17细胞比例变化均无统计学意义(均P>0.05)。过表达/抑制miR-17-5p均不影响iTreg细胞的诱导效率(均P>0.05)。过表达miR-17-5p后iTreg细胞凋亡比例[(16.31±1.27)%]显著高于阴性对照组[(13.01±1.80)%,P=0.035]。与miR-17-5p抑制物阴性对照组[(11.42±0.23)%、(87.60±0.70)%]相比,miR-17-5p抑制物组iTreg细胞凋亡比例[(7.97±0.71)%,P=0.001]显著降低,iTreg细胞增殖比例[(88.83±0.25)%,P=0.045]显著增加。生物信息分析提示转换生长因子受体2基因可能是miR-17-5p的靶基因。结论POI的血清外泌体miR-17-5p表达明显上调,其可能通过抑制iTreg细胞增殖、促进iTreg细胞凋亡导致外周血中Treg细胞比例下降,参与POI的发生。