心力衰竭相关新基因的筛选和分析

目的分析心力衰竭潜在的相关基因以及相关机制。方法从基因表达综合数据库中下载数据集GSE18703,使用R软件中“limma”包分析差异表达基因(DEGs)。对DEGs进行基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,以探索心力衰竭相关的生物学功能和信号通路。使用Cytoscape软件构建蛋白质相互作用(PPI)网络,识别心力衰竭发病机制相关的关键基因,用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠H9C2心肌细胞模型进行转录水平的验证。通过h TFtarget数据库分析关键基因的转录因子网络,以探究心力衰竭的发生机制。结果共筛选出292个DEGs,其中上调基因140个,下调基因152个。GO分析显示,DEGs主要富集于细胞外区、细胞外空间、血液微粒等细胞成分以及嗅觉转导、血管平滑肌收缩、代谢途径等通路。KEGG通路分析发现,DEGs主要富集于环磷酸鸟苷(cGMP)-蛋白激酶G(PKG)信号通路、肥厚型心肌病和扩张型心肌病等信号通路。通过PPI网络,筛选出6个关键基因,分别是Gprc6a、C3、Anxa1、Oxt、Gpr4和Avpr1b,并发现有528个转录因子对这6个关键基因进行转录调节。qPCR结果显示,心力衰竭情况下Anxa1和Gpr4的mRNA表达差异有统计学意义,进一步验证了以上筛选结果。结论通过生物信息学分析方法发现了6个与心力衰竭相关的关键基因,有助于更好地了解心力衰竭的发生机制和探索新的治疗靶点。

热量限制缓解血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大作用

目的探讨热量限制(caloric restriction,CR)对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的大鼠心肌细胞肥大的影响及可能机制。方法将H9c2细胞分为6组:正常对照组、AngⅡ组(1μmol/L)、热量限制组(CR)、CR+AngⅡ组、NF-κB抑制剂组(CR+AngⅡ+Ss)、NF-κB激动剂组(CR+AngⅡ+Bet)。将各组细胞进行相应的药物处理后,用CCK-8法检测细胞活力;鬼笔环肽染色检测心肌细胞表面积;细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、髓过氧化物酶(MPO)及氧化应激指标(ROS、SOD、MDA)的检测采用相应试剂盒;RT-qPCR法检测心肌细胞中肥大相关基因(ANP、BNP、β-MHC)与焦亡相关基因(NLRP3、ASC、GSDMD、caspase1、IL-18与IL-1β)的mRNA表达;Western blot法检测心肌细胞中NLRP3、ASC、GSDMD、caspase1以及NF-κB的蛋白表达水平。结果(1)AngⅡ可诱导H9c2心肌细胞表面积及肥大标志基因(ANP、BNP、β-MHC)的mRNA表达量较对照组显著增加,而这种改变在CR干预下被减弱。(2)CR能逆转AngⅡ诱导的肥大心肌细胞中ROS、MDA、LDH、MPO含量的增加及SOD含量的减少。(3)与AngⅡ组相比,CR处理使AngⅡ诱导的肥大心肌细胞中焦亡相关基因NLRP3、ASC、GSDMD、caspase1及NF-κB的mRNA表达量与蛋白表达量明显降低。(4)NF-κB抑制剂水杨酸钠(Ss)使NLRP3、GSDMD的mRNA表达水平较CR+AngⅡ组进一步降低,而NF-κB激动剂白桦脂酸(BA)则逆转了CR的这种保护作用。结论CR可以明显缓解AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大,CR的心肌细胞保护作用可能与调控NF-κB途径介导的细胞焦亡有关。

小鼠心肌梗死后补体系统激活与炎症反应的相关性研究

目的:探讨心肌梗死后补体系统激活的作用。方法:采用结扎冠状动脉左前降支的方法,复制心肌梗死小鼠模型,分为心肌梗死组(MI,n=25)与假手术组(Sham,n=12),术后7d超声心动图检测心功能;心肌组织HE染色观察炎症细胞浸润、Masson染色和天狼猩红染色观察胶原沉积与纤维化程度;Real-time PCR定量检测心肌组织中C3a与C5a的mRNA表达水平,并对C3a、C5a mRNA表达量与射血分数(EF)之间作相关性分析。结果:术后7d,MI组小鼠的生存率为68.0%,明显低于Sham组(P<0.05);MI组的LVAWs、EF、FS均明显降低(P<0.05);HE染色可见MI组有大量炎性细胞浸润,Masson染色与天狼猩红染色发现胶原纤维沉积、纤维化面积增加(P<0.01);C3a与C5a的mRNA表达量增加,且这两项指标均与EF之间呈负相关。结论:心肌梗死后补体系统被激活,补体系统的活化程度与射血分数的降低有关,提示补体系统可能通过调控心肌组织的炎症反应和纤维化过程,成为加重心脏病理损伤的重要因素。

扩张型心肌病患者血清抗β_1肾上腺素受体自身抗体生物学效应

目的研究扩张型心肌病(DCM)患者血清中抗β1肾上腺素能受体(β1-AR)自身抗体的生物学效应及其作用机制。方法采用酶联免疫吸附测定(SA-ELISA)技术,检测39例DCM患者和97例正常人血清标本中的抗β1-AR自身抗体;利用亲和层析法纯化抗体阳性和阴性血清中的IgG,观察抗β1-AR自身抗体对乳鼠心肌细胞搏动频率和成年大鼠心肌细胞腺苷酸环化酶活性的影响。结果DCM患者血清中抗β1-AR自身抗体的阳性率和抗体滴度明显高于正常人;纯化的抗β1-AR自身抗体IgG既可增加乳鼠心肌细胞的搏动频率,又可增强成鼠心肌细胞腺苷酸环化酶的活性,使cAMP产生量增加。结论DCM患者血清中的抗β1-AR自身抗体对心脏的β1-AR具有激动剂样正性变时效应,该自身抗体可能通过β1AR-Gs-AC-cAMP-PKA信号通路起作用。

心力衰竭大鼠血清抗β_1肾上腺素受体自身抗体的产生与生物学效应的研究

目的:建立心力衰竭大鼠模型,探讨心力衰竭发生发展过程与抗β1肾上腺素受体(β1AR)自身抗体产生的关系,并观察该抗体的生物学效应及其信号转导通路。方法:采用缩窄腹主动脉法制备心力衰竭大鼠模型;应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,检测心力衰竭大鼠血清中的抗β1AR自身抗体;利用亲和层析法纯化心力衰竭大鼠抗体阳性血清中的IgG,观察该抗体IgG对乳鼠心肌细胞搏动频率和成年大鼠心肌细胞腺苷酸环化酶活性的影响。结果:(1)心力衰竭大鼠血清中抗β1AR自身抗体的阳性率(82.8%)和抗体滴度[1∶(67.3±2.4)]明显高于假手术组5%,[1∶(17.3±2.0)](P<0.01);(2)纯化的抗体IgG既可增加乳鼠心肌细胞的搏动频率,还可增强成鼠心肌细胞腺苷酸环化酶的活性,使cAMP产生量增加。结论:心力衰竭可以诱导大鼠血清中抗β1AR自身抗体的产生,该抗体具有激动剂样正性变时效应,可增强腺苷酸环化酶活性。提示该自身抗体可能通过β1AR-Gs-AC-cAMP-PKA信号通路对心脏产生病理损害。

冠心病患者血清抗G-蛋白偶联受体自身抗体的分布特性

目的探讨冠心病患者血清中抗G-蛋白偶联受体自身抗体的分布特征。方法选择冠心病患者131例,正常健康体检者100名,采用链酶亲和素-酶联免疫吸附试验(SA-ELISA)测定其血清中抗G-蛋白偶联型β1AR、Μ2R、α1AR自身抗体。结果①冠心病患者血清抗G-蛋白偶联型β1AR、Μ2R、α1AR自身抗体的阳性率分别为20.6%(27/131)、16.8%(22/131)、39.7%(52/131),明显高于正常对照组的7.0%(7/100)、8.0%(8/100)、15.0%(15/100)(P<0.05);②冠心病组抗β1AR、Μ2R、α1AR自身抗体阳性患者的平均抗体滴度分别为1:(87.3±3.1)、1:(92.5±2.4)、1:(101.2±2.6),明显高于正常对照组的1:(14.6±2.7)、1:(21.4±2.2)、1:(26.6±3.8)(P<0.01)。结论冠心病患者血清中不仅存在抗G-蛋白偶联型β1AR、Μ2R和α1AR自身抗体,而且抗体阳性率和滴度也明显高于正常对照组,提示这些自身抗体的出现及其介导的自身免疫反应可能参与冠心病的病理生理过程。

风湿性心脏病患者血清抗β_1肾上腺素受体自身抗体的生物学效应

目的探讨风心病患者血清中抗β1肾上腺素能受体(β1AR)自身抗体的生物学效应。方法①应用SA-ELISA方法,检测风心病患者(60例),正常人(97例),以及心衰大鼠(33只)和对照大鼠(20只)血清标本中的抗β1AR自身抗体;②亲和层析法纯化风心病患者、心衰大鼠抗体阳性血清中的IgGs;③观察抗β1AR自身抗体IgGs对乳鼠心肌细胞搏动频率的影响;④测定抗β1AR自身抗体IgGs对成年大鼠心肌细胞腺苷酸环化酶活性的影响。结果风心病患者血清中抗β1AR自身抗体的阳性率和抗体滴度分别为43%和1∶(98.3±1.6),均显著高于正常人的4%和1∶(14.6±2.7),P<0.01,类似的结果见于心衰大鼠[85%,1∶(67.3±2.4)]与对照大鼠[5%,1∶(17.3±2.1)](P<0.01)之间;纯化的风心病患者、心衰大鼠抗β1AR抗体IgGs均可增加乳鼠心肌细胞的搏动频率,且在6 h内不脱敏;还可增强成年大鼠心肌细胞的腺苷酸环化酶活性,使cAMP产生量增加。结论风心病患者血清中的抗β1AR自身抗体具有激动剂样刺激效应,即具有正性变时效应(不易脱敏)、可增强腺苷酸环化酶活性。提示抗β1AR自身抗体可能是风心病患者神经体液调节功能紊乱的原因之一。

高血压患者血清抗α_1肾上腺素受体自身抗体的分布特征及其缩血管作用

目的探讨高血压患者血清中抗α1肾上腺素受体自身抗体(α1-AA)的分布特征及其病理意义。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,检测86例高血压患者与100名健康对照者血清中α1-AA的滴度和阳性率;利用亲和层析法纯化α1-AA阳性和阴性患者血清中的IgGs,观察该抗体IgGs对大鼠离体胸主动脉血管环张力的影响。结果高血压患者血清中α1-AA的阳性率和平均抗体滴度分别为49%和1∶(93.5±2.4),明显高于健康对照组的9%和1∶(16.6±3.8),差异有统计学意义(P<0.01)。纯化的抗体阳性IgGs(10-9～10-5mol/L)能够浓度依赖性增加大鼠离体胸主动脉血管环的张力[收缩幅度从(19.3±2.2)%增加到(137.5±4.6)%,P<0.01],这种作用与α1-肾上腺素受体(AR)激动剂去氧肾上腺素的缩血管效应相类似,并且呈现非血管内皮依赖性,同时可被α1-AR拮抗剂哌唑嗪所阻断,以及被α1抗原肽段中和。结论高血压患者血清中α1-AA的分布呈高阳性率与高滴度的特征,该抗体具有激动剂样增加离体胸主动脉血管环张力的作用,并且为非内皮依赖性,可能是通过与血管平滑肌细胞的α1-AR结合所实现。

虚拟仿真实验在生理学实验教学中的应用

虚拟仿真实验是教育教学与现代信息技术深度融合的产物,也是医学实践教学发展的必然趋势。文章通过在生理学实验教学中将虚拟仿真实验平台与传统实验有机结合的教学实践,探讨这种新的教学模式对丰富实验课的教学形式和教学内容、提高生理学实验课教学效果、促进教学相长方面的应用价值。

文献引导式教学在医学生理学中的应用

培养高素质创新型人才是现代医学教育的重要目标。文章探讨了文献引导式教学模式在医学生理学教学中的应用。在传统课堂教学的基础上,通过精选与课程知识密切联系的前沿科研文献,引导学生阅读与讨论,以加深学生对理论知识的理解与掌握,并且拓展科学思维和视角,促进学生自主学习能力和科研创新能力的培养与提高。

β肾上腺素能受体激动剂与心肌细胞凋亡

β肾上腺素能受体是调节心脏功能的主要受体。激动剂与受体结合后调节心脏功能,以适应各种应激和活动。但长期高水平的激动剂刺激受体可引起心脏的病理损害,导致心肌细胞凋亡。现就β肾上腺素能受体激动剂介导心肌细胞凋亡的蛋白激酶A(PKA)、钙/钙调磷酸酶Ⅱ(Ca2+/CaMKⅡ)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)等信号转导通路进行综述。

当代高校教师应具备的基本素质

高校作为高级人才的摇篮 ,教师素质的高低 ,直接决定着所培养人才的质量。所以 ,当代高校教师应具备良好的思想道德素质 ,扎实的专业基础知识 ,广博的学识 ,强烈的创新意识 ,熟练掌握现代教育技术和较强的科研能力 ,以更好地履行教书育人的神圣职责。

浅谈机能实验教学与学生能力的培养

机能实验教学是培养学生科研意识、提高学生实践动手能力的重要环节,对学生系统掌握实验学知识、科研方法,提高其思维能力和创新能力有着十分重要的意义.加强学生自学能力、动手操作能力、科学思维能力和科学能力的培养,是强化素质教育的重要方面.

抗M_2胆碱能受体抗体对大鼠血管舒张功能的影响

目的探讨抗M2胆碱能受体抗体（M2-AA）在体内长期存在对大鼠血管功能的影响。方法以合成的M2受体抗原肽段建立主动免疫大鼠模型,SA-ELISA法检测M2-AA的含量,亲和层析法提纯免疫鼠血清中的M2-AA IgGs,并建立M2-AA被动免疫大鼠模型,检测被动免疫模型的离体血管舒张功能。结果主动免疫后M2肽段组血清M2-AA含量明显高于溶剂对照组（P〈0.01）;被动免疫后M2-AA（＋）组血清M2-AA含量持续保持在较高水平（P〈0.05）;在（0.1~10）μmol/L乙酰胆碱作用下,M2-AA（＋）组大鼠的胸主动脉出现血管舒张功能浓度依赖性降低,而（0.001~1）μmol/L酸化硝普钠对血管的舒张功能无影响。结论 M2-AA在体内长期存在,可引起内皮依赖性的血管舒张功能浓度依赖性降低,提示M2-AA可能是导致内皮功能受损的一种因素。

462名中老年教工B超诊断分析

为了解高校教职工的健康状况，我校对４６２ 名４５ 岁以上的教工进行了 Ｂ 超检查，结果检出各种疾病的检出率为３０ ．５ ％ 。对其中发病率较高的两种疾病进行了分析，提出了预防措施。

医疗纠纷产生的原因与防范对策

当前我国医疗纠纷的投诉逐年呈上升趋势。卫生人负责任心不强，医患之间缺乏沟通、卫生立法滞后，医疗事故鉴定程序不合理是产生医疗纠纷的主要原因。防范对策是：①加强卫生立法、执法工作，创造良好的卫生法制环境；②加强医德医风建设，促进医院管理进一步规范化、法制化；③加强医患交流，尊重病人自主权；④实行医疗风险保险制度；⑤深入开展卫生法制宣传工作，提高医患双方的法制观念。

抗血管紧张素ⅡAT1受体抗体对大鼠脾脏T淋巴细胞的促增殖作用

目的观察抗AT1受体（AT1R）抗体对培养的大鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性的影响。方法以人工合成的AT1R细胞外第二环肽段（AT1R—ECⅡ）为抗原主动免疫Wistar大鼠，利用亲和层析法提纯免疫大鼠血清中含有抗AT1R抗体的IgGs；培养大鼠脾淋巴细胞，刀豆蛋白A（ConA）诱导其活化和增殖，分别给予不同浓度的提纯IgGs（0．01、0．1、1umol／L）和血管紧张素Ⅱ进行干预，通过CCK-8法测定脾淋巴细胞增殖情况，并确定抗AT，R抗体的作用位点。结果ConA刺激48h后，大鼠脾淋巴细胞CCK-8吸光度显著高于空白对照组（0．38±0．05比0．27±0．02，P〈0．05）；不同浓度的IgGs剂量依赖性促进脾脏T淋巴细胞增殖（A值分别为0．53±0．03、0．71±0．04和0．94±0．05），与血管紧张素Ⅱ的作用相类似（A值为0．73±0．14、1．52±0．17和2．14±0．12）；AT1R特异性阻断剂Losartan和AT，R—ECⅡ均可显著减弱含抗AT1R抗体IgGs的促增殖效应（A值由0．71±0．04分别降为0．54±0．02，P〈0．01；0．52±0．04，P〈0．01）。结论抗AT1R抗体具有受体激动剂样效应，通过特异结合AT1R—ECⅡ剂量依赖性增强离体脾T淋巴细胞增殖活性。

以精神障碍为主要症状的脑血管病临床分析

脑血管病日益增高的发病率带来了症状的多变性。其中有少数患者只表现为精神症状。在临床工作中易被家属和基层的医生忽视，从而延误诊治。因此，通过对2年内的18例以精神症状为主要表现的脑血管癌进行临床分析，认为精神症状和梗死部位有密切的关系。及早处理效果良好，可提高患者的生存质量。

抗β1肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体长期存在对大鼠心肌组织钙调蛋白激酶Ⅱδ亚型表达的影响

目的 通过动物实验研究,观察抗β1肾上腺素受体细胞外第二环抗体(抗β1AR-ECⅡ抗体)长期持续存在对心肌组织钙调蛋白激酶Ⅱδ亚型(CaMK Ⅱδ)表达的影响.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA法)筛选血清抗β1AR-ECⅡ抗体阴性的健康成年雄性Wistar大鼠,通过背部皮下定期给人免疫佐剂和针对β1肾上腺素受体细胞外第二环(β1AR-ECⅡ)抗原多肽的混合物建立主动免疫模型,定期采用ELISA法检测免疫过程中大鼠血清中抗β1-AR-ECⅡ抗体水平及大鼠心功能的变化情况;利用荧光法检测心肌组织caspase-3活性;采用Western-blot法检测大鼠心肌组织中CaMK Ⅱδ的表达情况.结果 用β1AR-ECⅡ抗原肽段长期主动免疫大鼠可导致心功能下降及心肌组织凋亡的增加,同时伴随有大鼠心肌组织中CaMKⅡδ表达增加,并具有时间依赖性.结论 抗β1AR-ECⅡ抗体长期存在可导致大鼠心肌组织CaMKⅡδ表达的增加,CaMKⅡδ可能是抗β1AR-ECⅡ抗体诱发心肌细胞凋亡,进而导致心功能障碍过程中的关键信号分子.