游仆虫中心蛋白在大肠杆菌中的高效表达和多克隆抗体制备

中心蛋白是一种在微管组织中心的复制和分离中起着重要作用的蛋白质。为了进一步进行中心蛋白结构和功能的研究 ,我们克隆了单细胞真核生物游仆虫中心蛋白基因并构建了重组表达质粒pGEX 6P EoCen ,其在大肠杆菌BL2 1中经IPTG诱导后获得了大量的可溶性表达 ,融合蛋白表达水平达到了细菌总蛋白的 32 6 %。GST抗体进行Westernblotting检测结果为阳性。经GST亲和层析和superdex 75凝胶层析后得到 90 %以上电泳纯的蛋白。用纯化后的蛋白免疫大鼠产生抗血清 ,经ELISA检测抗体效价达 1∶2 5 6

中心蛋白研究进展

中心蛋白是一种约20kD的酸性钙结合蛋白,含4个EF手性结构。它在进化上极其保守,尤其是其EF手性结构区域。氨基端是变化最大的区域。目前还没有关于中心蛋白晶体结构的报道。中心蛋白是微管组织中心(MTOC)的主要成分,参与MTOC相关联的纤维的收缩,并在MTOC的生物合成过程中起重要作用。

功能化高分子磁性载体的制备及选择性吸附稀土离子

悬浮聚合法制备含四氧化三铁微粒的甲基丙烯酸羟乙酯聚合物,再由环氧化和氨基化反应得到功能化高分子磁性载体(FPMC),采用酸渗实验、红外光谱和X-光电子能谱(XPS)等对产物进行性能表征;研究FPMC对RE3+离子(RE=La,Eu,Y)的选择性吸附作用,进而探讨稀土离子浓度对载体FPMC吸附效果的影响。

功能化介孔磁性载体的制备及对铜离子的吸附

具有纳米结构的介孔磁性载体在分离、生物医药、重金属离子的回收等方面具有广泛的应用前景.本文以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为模板剂,合成了以四氧化三铁磁性粒子为核外包有介孔二氧化硅膜(简称硅膜)的核壳式介孔磁性纳米复合物,并以3-氨基-丙基-三乙氧基硅烷(3-APTES)为表面功能化基团、连接到磁性Fe3O4粒子表面.通过傅立叶红外光谱、透射电镜、热重分析、比表面积等测试手段对磁性载体进行了表征.应用结果表明这种表面包硅功能化的介孔磁性载体对铜离子具有良好的吸附作用.

八肋游仆虫中心蛋白N-端半分子与Tb^(3+),Ca^(2+)的结合(英文)

用分子生物学方法表达、纯化了游仆虫中心蛋白及N-端半分子,用铽荧光探针法、离子竞争法研究了pH7.4,0.01mol·L-1Hepes条件下中心蛋白与铽、钙的结合性质。结果表明中心蛋白有4个铽结合部位,其中2个为高亲合结合部位、2个为低亲合结合部位。具有2个低亲合结合部位的中心蛋白半分子与铽结合的条件常数是(2.13±0.10)×105L·mol-1,与钙结合的条件常数是(7.52±0.02)×102L·mol-1。

游仆虫第一类肽链释放因子在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定

为对肽链释放因子结构与功能进行研究 ,进而探讨纤毛虫这类生物中遗传密码表达特殊性的机理 ,利用PCR技术和基因重组技术构建了游仆虫第 1类肽链释放因子eRF1a及C端带 6个组氨酸的eRF1a(His) 6的两个重组表达质粒pBV2 2 1 eRF1a和pBV2 2 1 eRF1a(His) 6.在大肠杆菌DH5α中 ,通过 4 2℃高温诱导 3h ,eRF1a和eRF1a(His) 6获得了可溶性表达 .eRF1a(His) 6的表达水平达到可溶性细菌总蛋白约 8% ,经Ni NTA亲和层析和HitrapQ离子交换层析 ,得到纯度较好的eRF1a(His) 6.

茚三酮比色法测定磁性载体固定微生物含量的研究

研究利用磁性载体固定微生物处理废水的效果,首先必须测定载体表面固定微生物的含量.通过采用茚三酮比色法来间接测定微生物的含量,确定了该方法的最佳吸收波长、最佳消解时间和冷却时间、缓冲溶液的最佳pH值.研究表明在最佳条件下,细菌裂解液显色反应的吸光值与细菌含量呈显著的正相关.

锌锶共掺杂TiO_2多孔涂层的抗菌及生物相容性

为改善钛的抗菌性能和生物活性,采用微弧氧化(MAO)技术在纯钛表面制备了锌掺杂TiO_2涂层(M-Zn)、锶掺杂的TiO_2涂层(M-Sr)和锌锶共掺杂TiO_2涂层(M-Zn/Sr)。利用扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射仪(XRD)对制备的涂层的组织结构和成分进行分析;采用平板计数法研究了涂层的抗菌性能;利用细胞荧光染色和甲基噻唑基四唑(MTT)的方法探究了细胞在材料表面的生长状况。结果表明:形成的TiO_2涂层都是典型的多孔结构,主要由金红石和锐钛矿相组成,锌、锶的掺杂对涂层形貌影响不大。M-Zn/Sr涂层中锌、锶的原子数分数分别为7.9%和1.7%。M-Zn及M-Zn/Sr涂层大肠杆菌展现了良好的抗菌性能,抗菌率接近100%。M-Zn、M-Sr和M-Zn/Sr均能促进成骨细胞增殖,M-Zn/Sr涂层具有抗菌和细胞增殖的双重功能。

Ag-TiO_2纳米棒阵列的抗菌性和光催化性能研究

目的制备一种高抗菌性和高光催化活性的Ag掺杂TiO_2(Ag-TiO_2)纳米棒阵列。方法通过磁控溅射与水热复合处理法,在钛箔片表面制备出Ag掺杂TiO_2(Ag-TiO_2)纳米棒阵列,酸化处理过的试样在500℃下煅烧2 h。采用X射线衍射(XRD)进行物相分析,利用场发射扫描电子显微镜(SEM)、场发射透射电子显微镜(TEM)、能量分散谱仪(EDS)观察试样的表面、截面形貌、微观结构和组成,并探究其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌性能和对亚甲基蓝的光催化降解能力。结果该工艺下制备的Ag-TiO_2纳米棒大小均匀,取向明显,主要由锐钛矿型TiO_2相组成。Ag-TiO_2纳米棒对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有优异的杀菌效果,杀菌率几乎达到100%。Ag-TiO_2纳米棒能有效地提高亚甲基蓝的降解率。结论磁控溅射与水热复合处理法在钛箔片表面成功制备出Ag-TiO_2纳米棒阵列,此阵列具有优异的杀菌能力、高抗菌和光催化降解性能。

交替口译员现场认知压力之应对策略

依据丹尼尔·吉尔的口译精力分配模型及走钢丝假说,结合近年专业受训译员口译录像实例,针对交替传译译员现场的错译、漏译现象,分析口译过程中的译员压力诱因及可采用的应对策略,以预防或降低译员认知压力对译文质量的负面影响,从而提升口译员的现场表现,优化口译质量。

禽流感病毒H5N1亚型RNA聚合酶蛋白表达纯化及晶体生长

通过使用原核表达载体大量表达H5N1病毒RNA聚合酶亚基PA_C257,PB1_N25,再经过GST亲和层析和Sephadex G-200层析柱纯化,获得了高纯度的蛋白复合体。采用悬滴气相扩散法筛选蛋白晶体,在1～1.5 mol/L乙酸钠和pH7.9条件下获得了理想的晶体,为解析禽流感病毒RNA聚合酶三维结构并进一步认识其生物功能奠定了基础。

肉桂的组成及其在化妆品中的应用

介绍了肉桂的基本情况及主要化学组成,肉桂含有挥发油、黄酮、多糖、萜类、木脂素、香豆素、矿物质等多种成分,其中挥发油为其主要成分;总结了肉桂与化妆品行业相关的抗氧化、抑菌、美白、皮肤保护等功效;分析了肉桂在化妆品的应用现状及安全性,并提出了肉桂在化妆品中的应用展望。

肝癌高表达抗原MAGEC2 CTL表位肽的鉴定

目的:观察肝癌高表达抗原MAGEC2的改造表位是否有HLA-A2限制性抗肿瘤能力。方法:通过Net CTL 1.2、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分选取MAGEC2的HLA-A2限制性表位;替换MAGEC2抗原锚定位点氨基酸获得改造肽;结合力实验检测候选表位与T2细胞表面HLA-A2分子的结合能力,ELISPOT实验和胞内因子染色检测候选表位肽诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)分泌干扰素γ(IFN-γ)的能力,体外细胞毒实验检测诱导CTL的能力。结果:P248、P248-1Y、P356、P356-1Y、P356-2L和P356-1Y2L具有较好的结合力,且P248-1Y和P356-1Y2L等改造肽与HLA-A2的结合力高于原肽。胞内因子染色和ELISPOT实验结果显示,表位肽P248、P248-1Y、P356和P356-1Y2L诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力,且P248-1Y和P356-1Y2L诱导特异性T细胞免疫分泌的IFN-γ略高于原肽(P<0.05)。细胞毒实验结果显示表位肽P248、P248-1Y、P356和P356-1Y2L对Hep G2细胞均有一定的杀伤作用,且P248-1Y和P356-1Y2L特异性CTLs对Hep G2细胞杀伤率高于原肽特异性CTLs(P<0.05)。结论:MAGEC2抗原改造表位P248-1Y和P356-1Y2L分别与天然表位P248和P356相比有更高的HLA-A2分子亲和力,保留了原有的免疫原性,并且改造肽抗肿瘤免疫效应强于天然表位。P248-1Y和P356-1Y2L是优秀的MAGEC2抗原的HLA-A2限制性CTL候选表位,可以成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位。

高职医学免疫学信息化教育教学模式探索

在大数据时代,要加强信息与医学教育教学的深度融合,推进医学教学改革。利用移动智能终端设备、4G网络或无线网络,应用软件和网络平台,能随时随地充分利用碎片时间进行学习与讨论,实现在线实时交流及教育教学资源共享。探索实行"课前—课堂—课后"3阶段教学模式,组织多种形式的信息化教学活动,突显学生主体地位,提高教师和学生信息素养水平,促进学生全面发展,提升综合素质。

P356-1Y2L表位刺激BALB/c小鼠的特异性抗肿瘤免疫

目的检测MAGEC2衍生的免疫原性肽在小鼠体内抗肿瘤免疫效果。方法测定P356-1Y2L免疫BALB/c小鼠后诱导CTL以及分泌IFN-γ的能力,用MAGEC2衍生的表位免疫荷瘤小鼠,检测其抑制肿瘤生长的能力及观察小鼠的生存能力。结果P356-1Y2L免疫BALB/c小鼠引发CD8+T淋巴细胞的强烈增殖和活化,且能分泌较多的IFN-γ,并且可以有效的杀伤靶细胞。用P356-1Y2L免疫荷瘤小鼠,能够抑制小鼠肿瘤生长并延长小鼠的生存期。结论免疫原性肽P356-1Y2L能够在BALB/c小鼠中引发特异性CTL反应,成为癌症治疗性多肽疫苗的候选表位。

沙棘叶化学成分及药理作用研究进展

沙棘(Hippophae rhamnoides L.)作为一种传统的药食同源植物,其不同部位都有着悠久的用药历史。沙棘叶中含有丰富的化学成分,不同的组分还具有调节代谢、预防心血管和癌症等多种疾病的功效。对沙棘叶中的化学成分进行分离和表征,有助于更好地理解沙棘叶对疾病的作用机制。此外,阐明沙棘叶药理活性的物质基础也将对沙棘产业化的研究提供新的思路。

当前医学生思政认知中存在的问题及课程思政方式创新

课堂教学的中心是学生。当前,高校人才培养模式改革深入推进。在这一背景下,应创新思想政治教育模式,大力推进课程思政,增强思想政治教育的针对性和实效性,使大学生思想政治教育更加贴近实际,以取得预期效果。为此,要对受教育对象的认知规律、认知特征进行深入研究,做到有的放矢,促进高校思想政治教育质量的提升。

“双碳”背景下暖通空调节能技术精细化设计

1引言为满足双碳目标,应开展对暖通空调节能系统的精细化设计,将其能耗降低,实现资源利用率的提高[1]。2暖通空调节能技术研究背景在双碳背景下,暖通空调设计需要进行一定的改变,达成能耗降低的目标[1]。在工作中,需要开展对于不同气候、不同建筑类型节能低碳技术的研发,也将其全面推广,同时,需要达成绿色建筑的规模化发展。还要将建筑用能结构予以优化。设计人员在工作中应以能耗控制为目标采取精细化、性能化设计。

小学美术大单元学历案的实践探索——以“拼泥板”单元教学为例

大概念视域下的美术大单元学历案是教师基于学生立场开发的一种单元教学方案,包含学习主题、单元概览、学习任务等板块。笔者以湘美版美术三年级下册《拼泥板》为核心内容,整合五年级上册《快乐陶吧》内容,构建了“拼泥板”大单元学历案,以此推进学生深度学习,提高学生的美术学科关键能力。

病原微生物与免疫学教学方法探讨

依据病原微生物与免疫学知识结构的特点,通过分析教学中存在的问题并采取相应措施。转变单纯的理论教学,教学手段多样性,注重试验教学,激发学生兴趣,开拓综合思维能力,提高教学质量。通过教学实践活动,对教学内容、教学情感、教学方法等教学元素不断总结,有利于教师自身素质的提高同时,而且对培养专业技能的高素质医学人才帮助甚大。