唐古特白刺质膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因的克隆与表达分析

土壤中过多的Na+会导致植物产生盐害,严重影响植物的生长和发育。质膜型Na+/H+逆向转运蛋白SOS1介导植物细胞内过量的Na+外排,在植物抵御盐胁迫过程中起着重要的作用。唐古特白刺隶属于蒺藜科白刺属,是中国特有的盐生植物,主要生长于西北地区的荒漠或盐渍化荒漠,具有极强的抗逆能力。应用简并RT-PCR及RACE技术克隆获得唐古特白刺Na+/H+逆向转运蛋白NtSOS1基因(GenBank登录号KC292267)。序列分析显示,该cDNA全长4 008bp,包含3 492bp的开放阅读框,编码分子量为127.59kDa的蛋白质。疏水性分析预测NtSOS1基因编码蛋白N端具有11个跨膜结构域,C端具有一个面向胞质的长亲水尾部,包含保守环核苷酸结合区域、自我抑制基序及磷酸化位点等多个活性调控结构域。NtSOS1氨基酸序列与葡萄、霸王、拟南芥等植物的SOS1序列同源性较高,分别可达71.77%,68.94%,62.65%。系统发育分析表明NtSOS1基因为质膜型Na+/H+逆向转运蛋白,与液泡型Na+/H+逆向转运蛋白属于不同分支。半定量RT-PCR结果显示冷、热、盐和干旱胁迫都可以诱导NtSOS1基因的表达,同时,NtSOS1基因随着盐处理浓度增加呈现出先上升(0～300 mmol/L)后下降(400mmol/L)的趋势。结合植物的生境特点和NtSOS1表达模式分析,该基因表达水平的升高可能在唐古特白刺适应恶劣生境的过程中发挥积极作用。本研究的开展为利用NtSOS1基因进行作物与牧草改良并深入研究唐古特白刺抗逆分子机制奠定了基础。

唐古特白刺蛋白激酶基因NtCIPK2超表达载体构建及紫花苜蓿转化研究

环境因素如高盐、干旱或冷冻等严重制约着豆科重要牧草紫花苜蓿的生长发育和产量。根据已发表的盐生植物唐古特白刺蛋白激酶基因NtCIPK2的序列信息(序列号KC823044),利用PCR方法扩增其编码区cDNA,连接pMD-19Tsimple载体并测序,测序结果表明所克隆的DNA片段长度为1362bp,与GenBank上公布的序列完全一致。在此基础上构建植物超表达载体pPZP221-NtCIPK2,采用CaCl2冻融法将该表达载体转入农杆菌GV3101中,然后通过农杆菌介导的方法转化紫花苜蓿的下胚轴,形成愈伤组织后经庆大霉素筛选培养,最终获得7株抗性幼苗。对抗性幼苗进行庆大霉素基因的PCR检测,结果表明,NtCIPK2基因成功整合到紫花苜蓿基因组中,进一步对其进行外源基因的RT-PCR检测,发现只有3株幼苗中的外源基因实现了过量表达,这可能是由于基因插入位点的差异引发的基因沉默所致。本研究的开展为进一步分析转化植株在各种逆境胁迫条件的表现及其遗传稳定性,培育具有多重抗逆能力的苜蓿品种,促进苜蓿产业发展奠定基础。

塔里木河下游尉犁县景观格局变化分析

【目的】分析塔里木河中下游尉犁县1990～2005年的生态格局变化。【方法】以景观生态学的理论和方法为指导，借助现代3S技术和数理统计软件、图形处理软件，以多时相的遥感影像矢量化图为基础，利用GIS的数据输入、输出、管理和空间叠加分析等功能。【结果】可以看出自1990年以来，尉犁县以荒漠为基质，以农田和草地为主要嵌块体的景观分布格局基本未发生改变。【结论】景观多样性指数、均匀度指数减少，景观的异质性程度下降，优势度指数增加，景观愈来愈由少数景观斑块类型所控制。

miR-181b在结肠炎相关结肠癌发生过程中的表达

背景:miR-181b与多种肿瘤的形成相关,但其在结肠炎相关结肠癌中的表达情况尚不明确。目的:探索miR-181b在结肠炎相关结肠癌发生过程中的变化,并初步筛选其下游可能的靶基因。方法:联合使用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)制备结肠炎相关结肠癌小鼠模型。以实时荧光定量PCR(qP CR)检测不同时期小鼠结肠组织miR-181b表达。利用全基因组表达谱芯片结合miRNA靶基因预测软件TargetS can、PicTar和miRDB初步预测miR-181b的下游靶基因,并以qPCR法检测结肠炎相关结肠癌小鼠中靶基因的表达。结果:miR-181b表达在结肠炎相关结肠癌形成过程中逐渐升高,但单独使用AOM或DSS均不会改变miR-181b水平。结合全基因组表达谱芯片和miRNA靶基因预测软件初步筛选出miR-181b可能的下游靶基因为Ipmk、E2f5、Klf6、Prkcd、Bai3和Hic2,qPCR法显示Ipmk、Prkcd、Bai3、Hic2表达明显低于对照组。结论:miR-181b表达随结肠炎相关结肠癌的发展而升高,该变化与单纯慢性炎症无关。

基于气候、地貌、生态系统的景观分类体系——以新疆地区为例

景观分类是景观生态学研究的重要内容之一,既是景观结构与功能研究的基础,又是景观规划、管理等应用研究的前提条件,目前尚没有具有适普性的景观分类体系。提出了景观生态学的一种发生学分类方法,即景观带——基于气候的一级指标(温度带,反映纬度地带性)、景观区——基于干旱指数的二级指标(干湿区,反映经度地带性)、景观类——基于垂直地貌的三级指标(山地和平原,反映垂直地带性)、景观型——基于自然生态系统和人工生态系统的四级指标(反映自然生态系统特征和人类活动)的四级景观分类体系。并利用该体系对新疆地区进行了景观分类,将新疆地区划分为3个景观带、4个景观区、2个景观类、11个景观型。该分类体系与地理景观学派除在自然景观分类系统不同之外,将人工景观指标引入了景观发生学分类。为研究景观分类提供了一种思路和方法,这种分类方法对新疆地区景观的成因、景观演变规律、景观恢复与修复标准等提供了背景参考。

壳多糖酶3样蛋白l联合相关标志物检测在胰腺癌诊断中的应用

目的评估检测血清壳多糖酶3样蛋白l(CHI3L1)、CA199、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、补体3(C3)、补体4(C4)代谢水平在胰腺癌临床诊断中的应用价值,以期筛选最优的胰腺癌诊断模型。方法收集101例患者血清,包括70例胰腺癌患者及31名健康对照。分别测定血清中CHI3L1、CA199、C3、C4及HDL-C、LDL-C代谢水平,对结果进行统计分析。结果胰腺癌患者血清中CHI3L1、CA199、C3、C4、HDL-C、LDL-C的水平显著高于正常人(P<0.05);胰腺癌患者血清中CHI3L1的水平与患者是否接受抗肿瘤治疗具有显著性差异(P<0.05),而与性别、年龄及是否转移等临床病理特征无明显差异(P>0.05);ROC曲线表明:血清CHI3L1、CA199、C3、C4、HDL-C、LDL-C水平对胰腺癌均具有一定的诊断价值;多指标联合分析提示:联合检测血清CHI3L1、CA199、C3、HDL-C(AUC=0.964)与CA199(AUC=0.896)及CA199、C3、HDL-C多因素联合检测(AUC=0.923)比较具有更高的诊断价值(P<0.05)。结论血清中CHI3L1、CA199、C3、C4、HDL-C、LDL-C表达水平对胰腺癌均具有一定的诊断价值;而CHI3L1、CA199、C3、HDL-C联合检测可作为胰腺癌最优的诊断模型。

CA199、IL-10、CHI3L1联合检测在胰腺癌诊断中的价值

目的探讨血清糖类抗原(CA)199、白细胞介素(IL)-10及壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)检测在胰腺癌诊断中的价值。方法选取诊断明确的胰腺癌患者40例作为胰腺癌组,肺癌患者40例(肺癌组)作为其他肿瘤对照,胰腺炎患者40例(胰腺炎组)作为炎症对照,同期健康体检者40例作为健康对照组。纳入研究者共160例。采用化学发光法测定CA199水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清CHI3L1和IL-10水平,比较胰腺癌组与其他各组血清CA199、IL-10、CHI3L1水平。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析CA199、IL-10及CHI3L1检测在胰腺癌诊断中的价值。结果与健康对照组比较,胰腺癌组血清CA199、IL-10及CHI3L1水平均升高(P<0.05)。单项指标检测中,CA199对胰腺癌的诊断特异度最高,为95.0%,曲线下面积(AUC)为0.908。IL-10对胰腺癌的诊断灵敏度最高,为87.5%,AUC为0.936;CHI3L1诊断胰腺癌的AUC为0.820。3项指标联合检测的特异度、灵敏度分别为97.5%、97.5%,AUC为0.996。结论血清CA199、IL-10和CHI3L1联合检测在胰腺癌的诊断中具有较高的价值。

1α,25-二羟基维生素D3抑制人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性

目的探讨1α,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性的影响及作用机制。方法1,25(OH)2D3(100 nmol/L)干预和溶剂对照处理SW480细胞48 h;用双荧光素酶报告系统检测β-catenin的转录活性;Western blot检测1,25(OH)2D3干预后β-catenin在细胞核/质内的定位变化;用RT-qPCR和Western blot检测β-catenin和FOXM1 mRNA及蛋白水平。采用siRNA敲降SW480细胞中FOXM1后,检测1,25(OH)2D3干预后β-catenin转录活性的变化。结果1)在SW480细胞中,1,25(OH)2D3能显著降低β-catenin的转录活性(P<0.05),但不影响β-catenin mRNA和蛋白表达水平;2)1,25(OH)2D3上调SW480细胞中FOXM1蛋白水平的表达(P<0.05);3)敲降SW480细胞中FOXM1降低1,25(OH)2D3对β-catenin转录活性的抑制作用(P<0.05)。结论1,25(OH)2D3通过上调FOXM1的表达,发挥抑制β-catenin转录活性的作用。

血清同型半胱氨酸、血浆纤维蛋白原与尿微量白蛋白联合检测预测脑梗死风险评估临床研究

目的:探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、血浆纤维蛋白原(FIB)与尿微量白蛋白(MAU)联合检测在脑梗死风险评估中的临床应用价值。方法:收治110例脑梗死患者为实验组,健康体检者90例为对照组,测定所有研究对象的血清Hcy、血浆FIB与MAU含量,并进行统计分析。结果:实验组血清Hcy含量明显高于对照组(P<0.05),实验组血浆FIB显著高于对照组(P<0.01),实验组MAU明显高于对照组(P<0.05)。结论:对于可能患有脑梗死的高危人群定期检测Hcy、FIB、MAU,以早期预测脑梗死发生,对脑梗死防治具有重要的临床应用价值。

CHI3L1在胰腺癌中的表达水平及其与患者预后的关系

目的分析壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)在胰腺癌中的表达水平及其与患者预后的关系。方法将2019年6月至2020年8月西安交通大学第一附属医院收治的70例胰腺癌患者作为胰腺癌组,70例肺癌患者作为肺癌组,70例健康体检者作为健康体检组。以酶联免疫吸附法测定CHI3L1在三组血清中的表达水平,以免疫组化法测定CHI3L1在肺癌组织、胰腺癌癌旁组织、胰腺癌组织中的表达水平,以Western Blot法测定CHI3L1在肺癌细胞株A549和胰腺癌细胞株PANC-1中的表达水平。利用TCGA数据库分析胰腺癌患者CHI3L1表达与生存时间的关系。结果胰腺癌组、肺癌组、健康体检组的血清CHI3L1表达水平分别为(281.40±37.89)、(115.70±9.11)、(104.00±8.17)ng/mL;胰腺癌组的血清CHI3L1表达水平高于肺癌组、健康体检组,差异具有统计学意义(P<0.0001)。在胰腺癌癌旁组织和肺癌组织中,CHI3L1呈低表达,在胰腺癌组织中,CHI3L1的表达显著增加,且定位于细胞质。CHI3L1在胰腺癌细胞株PANC-1中的表达水平高于肺癌细胞株A549,差异具有统计学意义(P<0.01)。CHI3L1高表达组的生存时间短于CHI3L1低表达组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论CHI3L1在胰腺癌患者血清、组织和细胞中均呈高表达,高表达患者表现出较差的生存情况。

胰腺癌细胞中CHI3L1低表达对肿瘤生长的抑制作用及其机制

目的探讨壳多糖酶3样蛋白1(chitinase-3-like-protein-1,CHI3L1)的表达对胰腺癌细胞的生物学行为和肿瘤生长的影响及可能的机制。方法人胰腺癌细胞株PANC-1分为两组,分别感染抑制CHI3L1表达的shRNA慢病毒获得PANC-1/shRNA-CHI3L1(实验组),或感染空载对照病毒获得PANC-1/vector(对照组);划痕愈合实验观察抑制CHI3L1蛋白表达对胰腺癌细胞PANC-1迁移能力的影响;通过Western blot检测两组感染细胞中CHI3L1、细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2关联基因X(Bcl-2-associated X,Bax)蛋白的表达水平。分别接种PANC-1/shRNA-CHI3L1(实验组)和PANC-1/vector(对照组)肿瘤细胞于裸鼠皮下,每3 d测量肿瘤大小,并计算存活率。结果与对照组相比,实验组PANC-1细胞株中CHI3L1的表达明显降低(P<0.001);实验组PANC-1细胞迁移能力显著下降(P<0.0001),PANC-1细胞中的ERK、NF-κB及其磷酸化水平也明显降低(P<0.01),而Bax的表达显著升高(P<0.0001)。沉默了CHI3L1基因后,实验组小鼠肿瘤生长速度减缓,生存时间明显延长,且与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胰腺癌细胞中CHI3L1的表达下调,抑制了胰腺肿瘤的生长。

浅谈企业并购中的财务风险及规避

企业并购是现代企业非常重要的发展战略之一,能够为企业创造竞争优势,但同时也存在着巨大的风险。本文就企业并购中的财务风险进行分析并提出相应的规避对策。

浅议企业内部会计管理制度

单位内部会计控制制度是我国的法律法规在各单位的具体体现,是各单位根据国家会计法律、法规,结合本企业经营管理的特点和业务管理的需要而制定的。通过加强内部会计控制,建立健全各项内部会计控制制度并贯彻执行,使企业财务管理水平不断提高,会计工作得到不断规范和加强。

事业单位内部控制与内部审计面临的问题及应对策略

在我国，建设内部控制相对于国外整体起步要晚很多，在国外内部控制建设遵循的是企业先行，机关事业单位随后的原则，我国行政事业单位建设内部控制也遵循了这一原则。自2014年1月1日起《行政事业单位内部控制规范（试行）》（以下简称《内部控制规范》在我国全面开始实施，这一规范的实施对提高行政事业单位内部管理水平、强化风险管控、规范内部控制、保障资产安全、推进反腐倡廉建设具有重要的作用。

乳腺癌4T1细胞中过表达鼠白介素-10对宿主抗肿瘤免疫应答的影响

目的研究鼠白介素-10(mIL-10)对BALB/c小鼠三阴性乳腺癌4T1细胞生长以及荷瘤小鼠抗肿瘤免疫应答的影响。方法将重组质粒pLenti-CMV-mIL-10-GFP-puro以及pLenti-CMV-GFP-puro分别与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集病毒上清感染4T1细胞,从而获得过表达mIL-10的细胞株即4T1/mIL-10(实验组)以及4T1/GFP(对照组);酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)以及流式细胞术(flow cytometery,FCM)检测感染效率及细胞中mIL-10的表达水平;细胞计数检测细胞的增殖能力;应用FCM检测细胞表面CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ类抗原(MHCⅡ)、程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PDL1)的表达。将4T1/GFP、4T1/mIL-10细胞分别皮下注射至BALB/c小鼠,建立小鼠乳腺癌皮下移植瘤模型即未治疗组和mIL-10治疗组,观察肿瘤生长情况,绘制生长曲线,并使用流式细胞仪检测肿瘤组织中T细胞的变化。结果成功构建过表达mIL-10的4T1细胞,ELISA以及FCM检测结果表明,与对照组比较,实验组的mIL-10表达水平显著增加(P<0.05)。与对照组比较,实验组细胞的增殖以及表面分子CD86、MHCⅡ分子、PDL1的表达无显著差异(P>0.05)。动物实验模型表明,与未治疗组比较,mIL-10治疗组肿瘤组织中CD8^(+)T/CD4^(+)T的比例以及CD8^(+)T细胞IFN-γ的表达水平明显增加,肿瘤生长受到抑制(P<0.05)。结论mIL-10能够促进宿主抗肿瘤免疫应答,从而抑制乳腺癌的生长。

浅议会计委派制度的利与弊

介绍了政府部门或产权单位采用会计委派制度参与企业单位内部财务管理的优点和缺点。

谈企业财务管理的几项基础工作

企业财务管理的好坏,直接影响到企业的生存与发展,从建立科学的、现代化的企业财务机制入手,介绍了企业财务管理的几项基础工作。

项目化教学方法在中学数学教学中的实践与探索

伴随我国社会与经济的迅速发展,不但为现代教育体系的丰富与完善提供了必要条件,而且对于提升教师的教学思想与教学方法有较大益处。初中数学学科作为培育学生逻辑思维与核心素养的主要课程,如若教师继续采用传统的教学方法,只会导致学生学习兴趣的下降,对学生的全面发展不利。然而将项目化教学方法与初中数学学科相结合,一方面能够打破教师的思维束缚,在课堂教学中体现学生的主体地位;另一方面还可以为学生创建全新的项目化数学学习任务,在增强课堂教学成效的同时,也能够帮助学生养成良好的学习习惯,从而推动学生综合素质的发展。

充分发挥内部审计在事业单位提升组织价值的作用

事业单位是履行社会公共服务职能的重要窗口，事业单位的存在是为了提升我国经济、社会、文化、科技等一系列建设工作总体水平。本文重点谈谈在事业单位运作能力、职能履行能力全面提高的要求下，内部审计工作的具体作用，以及如何围绕这一核心问题强化事业单位内部审计工作，以供参考。

尿液Tenascin-C测定在膀胱肿瘤患者筛查中的应用

目的:分析TN-C在可疑膀胱肿瘤患者尿液中的含量,探讨尿液TN-C含量与膀胱肿瘤及肿瘤分级之间的关系。方法:收集可疑膀胱肿瘤患者及健康志愿者尿液,离心后取上清液,用ELISA试剂盒测定其TN-C含量,并对数据进行统计学分析。结果:可疑膀胱肿瘤患者尿液中TNC含量显著高于健康志愿者;尿液TN-C含量作为初步诊断膀胱肿瘤的灵敏度和特异度分别是0.9635和0.9452;膀胱肿瘤患者,尿液TN-C含量与肿瘤分级呈正相关。结论:尿液TN-C含量可作为膀胱肿瘤患者初步诊断的一个参考因素,且与肿瘤分级呈正相关,但需排除炎症性疾病等。