抗丙型肝炎病毒锤头结构核酶的计算机设计

目的设计可位点特异切割丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５’非编码区（５’ＮＣＲ）和Ｃ区的多位点核酶（ＲＺ）．方法根据“锤头结构”ＲＺ的设计原理，以ＨＣＶＨ（１ａ）株５’ＮＣＲ和Ｃ区ＲＮＡ为靶序列，计算机预测其二级结构，运用能量最低化程序，选择理论上理想的ＲＺ切割位点，并比较５株ＨＣＶ序列ＲＺ切点两翼的同性．结果在ＨＣＶ５’ＮＣＲ和Ｃ区１２４个自然切割位点（ＣＵＸ和ＧＵＸ）中选出２１３（ＣＵＣ），２６０（ＧＵＡ），４０７（ＧＵＣ）和４９８（ＣＵＵ）４个切割位点，不同株之间切点两翼ＲＺ结合序列同源性为１００％．结论计算机可作为抗病毒ＲＺ设计的辅助工具；ＨＣＶ上述４个位点可能是最理想的切割位点．

丙型肝炎疫苗研究的新理念、挑战与策略

丙型肝炎病毒（HCV）感染是引起慢性肝病的主要原因之一,严重危害人类健康,目前抗病毒治疗的标准方案为聚乙二醇干扰素α（PEG-IFN-α）联合利巴韦林,其有效率仅为50%70%,且疫苗研究进展缓慢,已成为严峻的公共卫生问题。近10多年来,对HCV感染发病机制、保护性免疫应答和病毒持续感染机制的认识取得了很大进展,中和抗体以及CD4＋和CD8＋T细胞在内的强烈的T细胞免疫应答已被证明与HCV的清除相关,这将是研制丙型肝炎疫苗的希望所在。当前HCV疫苗的研究主要集中在多肽疫苗、核酸疫苗、病毒载体疫苗、重组多表位疫苗、以抗原递呈细胞为载体的树突状细胞（DC）疫苗等,已有多种疫苗正在研制并进行进入临床试验前的测试。我们结合多年来对HCV的研究基础,通过与国内外同行交流,提出变＂单纯预防＂为＂防治结合,以诱导持续免疫应答和维持病毒抑制状态为基本目标＂的HCV疫苗研究新理念,发展以诱导细胞免疫为主的预防和治疗性疫苗,尤其是既能在体内有效激发HCV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应,又能维持CD4＋记忆T细胞功能的治疗性细胞疫苗。本文综述关于HCV保护性免疫应答及持续感染的机制,HCV疫苗研究新理念,目前面临的挑战以及研究策略。

长期HBV携带者IFN-γ的诱生和TNF-α的检测

应用免疫放射量度分析和ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法分别检测了６８ 例长期ＨＢＶ携带者 ＰＢＭＣ诱生ＴＮＦ－γ和ＴＮＦ－α的含量．结果表明：①ＨＢＶ无症状携带者和肝炎携带者诱生ＩＦＮ－γ 活性显著低于正常对照（Ｐ＜ ０． ０５或 ０． ０１），②肝炎携带者血清和培养上清中 ＴＮＦ－α的含量均高 于正常对照和无症状携带者，而无症状携带者诱生ＴＮＦ－α的含量又比对照组低；③各组的ＩＦＮ－γ 和 ＴＮＦ－α之间相关性检验无显著意义。提示：长期ＨＢＶ携带者诱生 ＩＦＮ－γ和 ＴＮＦ－α的能力异常， 可能是导致ＨＢＶ长期携带原因之一。

加强危重型肾综合征出血热的救治研究进展

肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是由汉坦病毒(hantaan virus,HV)引起的以发热、出血及肾脏损害为特征的自然疫源性疾病,病程中易合并顽固性休克、急性肾衰竭、呼吸衰竭及多脏器功能障碍综合征,住院病死率高。本文针对HFRS患者特殊的病理生理学特点,借鉴重症医学发展带来的先进救治理论和技术,研究合理使用液体疗法、机械通气、肾脏替代治疗、血流动力学监测等诊疗手段救治危重型HFRS患者的经验。

丙型肝炎病毒锤头结构核酶的细胞内免疫

目的:探讨预先转染丙型肝炎病毒(HCV)核酶(Rz213)的人肝癌细胞对HCV再转染的抑制作用.方法:应用从前构建的HCV锤头结构Rz(Rz213),通过脂质体介导的基因转染方法,转染人肝癌细胞(HHCC),经G418筛选转染Rz213的基因克隆,应用luc报告基因的表达活性,观察该细胞克隆对靶基因(pCMVNCRluc)转染的抑制作用.结果:G418筛选能使Rz213在转染细胞内有效表达RzRNA,转染Rz的多克隆细胞能有效地阻断靶基因的再转染.结论:我们构建的Rz213真核表达载体能在HHCC细胞内有效表达,预先转染发挥细胞内免疫作用,可防止HCV感染.

创口净抗菌作用的体外研究

目的:了解创口净对常见菌的抗菌作用。方法:测定创口净在体外破伤风梭菌、产气夹膜梭菌,绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌试验,并与常用消毒剂比较分析。结果:创口净对破伤风梭菌和产气夹膜梭菌的最小抑菌浓度与大肠杆菌均为1.6μg·ml-1,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.78μg·ml-1,而绿脓杆菌为12.5μg·ml-1;创口净在2.5min就能杀灭绝大多数细菌,而75%乙醇、0.1%新洁尔灭、0.05%洗必泰所需时间更长。结论:创口净可有效地杀灭常见致病性厌氧菌和非厌氧菌,为一种高效、快速的广谱抗菌剂,可用于各种创伤感染的预防和治疗。

传染病学临床教学改革的思考

21世纪是以知识经济为主导的时代.面对知识经济的挑战,各医学院校在课程设置、联合办学、培养模式、教学内容、考试方式等方面进行了一定的改革尝试.各临床学科也在寻求新的教学方法,力求在有限的课时内,让学生了解较多的医学知识,培养学生自学能力,主动适应新世纪的发展需要.

抗丙型肝炎病毒5'非编码区核酶自剪切真核表达载体的构建

引言丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因变异率高，病毒准种多，使ＨＣＶ疫苗的研制遇到一定困难，目前的抗病毒治疗和免疫治疗也不令人满意．核酶（Ｒｚ）作为抗病毒基因治疗的重要策略之一，已在多种病毒显示出潜在的应用价值．抗ＨＩＶＲｚ是目前研究最多、取得效果也最好的抗...

提高肝脏免疫功能认知,加强肝病细胞治疗研究

肝脏是一个重要的免疫器官,具有独特的免疫微环境,参与全身固有免疫应答和适应性免疫反应。肝脏通过肝-肠轴与系统免疫密切相连,又是免疫损伤的靶器官;肝脏在抗嗜肝病毒免疫中发挥着重要作用,但导致病毒感染慢性化机制尚不完全清楚。肝病细胞治疗包括以细胞功能替代为主的肝(干)细胞输入治疗;以抗病毒抗肿瘤为主的免疫细胞治疗和对遗传性肝病进行的以细胞为载体的基因治疗。间充质干细胞的多向分化潜能和免疫调节特性成为肝病细胞治疗的热点,体外高效扩增技术使自然杀伤细胞治疗肝癌成为可能。

病毒性肝炎基因治疗的研究和面临的挑战

病毒性肝炎是目前严重危害人类健康的最常见的世界性感染性疾病之一,迄今仍无有效的抗病毒药物,抗病毒基因疗法作为一种新的治疗手段,可望从病因上解决病毒性肝炎的治疗问题,本文结合我们自己的研究综述抗肝炎病毒基因疗法的研究现状和面临的挑战,重点介绍抗肝炎病毒核酶和DNA免疫的研究。

T淋巴细胞亚群的检测及其临床意义

T 淋巴细胞亚群的检测是细胞免疫检测的最新指标之一。本文综述了目前T 淋巴细胞分类的研究概况及其功能,以及功能与表现型之间的关系。重点介绍了外周血T 淋巴细胞亚群的检测方法及临床意义,并对该检测作了初步评价。

回顾与思考——丙型肝炎防治研究三十年

丙型肝炎的防治研究约有三十余年,取得了辉煌成果:HCV的发现和证明创造了人类发现新生命的先河;重视HCV分子生物学、感染免疫及发病机制等基础研究,是传染病学研究的基本规律;聚乙二醇干扰素联合利巴韦林标准化抗病毒治疗获得成功,尤其对中国人持续病毒学应答率高达80%以上,是细胞因子成功临床应用的典范;直接抗病毒药物或联合应用使临床治愈所有丙型肝炎患者成为可能,这是一个最成功的借鉴;持续病毒感染并在一定条件下维持免疫稳态是机体与病毒相互作用的结果,丙型肝炎疫苗研究还将继续。

慢性乙型肝炎病毒携带者外周血单个核细胞体外抗原诱导的抗体反应

目的 了解慢性乙型肝炎病毒 (HBV)携带者外周血单个核细胞 (PBMC)在体外对抗原诱导的抗体应答反应 .方法 选择 18例无症状 HBV携带者 (ASC)和 18例慢性乙型肝炎患者 (SC) ,同时选择 15例自愿者作正常对照 ,分离PBMC,在体外应用血源乙肝表面抗原 (HBs Ag)和重组乙肝核心抗原 (r HBc Ag)刺激 ,检测相应特异性抗体的产生 .结果 1无症状 HBV携带者和慢性乙型肝炎患者均有不同程度的抗体应答 ,分别有 5 0 %和 72 %的患者可产生抗 - HBs,但与正常对照组 (86 % )相比明显低下 (P<0 .0 1) ;2 r HBc Ag可以诱导慢性 HBV携带者 PBMC产生抗 - HBc,同时亦可诱导抗 -HBe的产生 .结论 抗体应答水平低下可能是慢性乙型肝炎病毒携带者不能清除病毒的原因之一 .

抗Thy－1单克隆抗体的免疫抑制作用

从体内、体外研究了抗Ｔｈｙ－１单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的免疫抑制作用。结果表明：（１）体外抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ在补体参与下能够杀伤小鼠胸腺细胞，无补体时能抑制ＣｏｎＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖反应；（２）在体内，可以抑制小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖、但不影响ＬＰＳ诱导的Ｂ淋巴细胞增殖反应。结果说明：抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ的免疫抑制作用可能包括补体依赖性细胞毒作用和通过Ｔｈｙ－１分子对Ｔ淋巴细胞功能的抑制。

丙型肝炎病毒体外细胞培养和动物模型的研究进展

缺乏理想的HCV传代细胞和小动物模型,限制了HCV的研究。近年来,国内外学者在HCV基因片段转染的细胞模型,体外敏感细胞系的筛选,感染方式的探索,以及小动物的选择和感染等方面做了许多工作,取得了一定的进展。本文就此及存在的问题予以综述。

丙型肝炎病毒cDNA与荧光素酶融合基因可调控逆转录病毒载体的构建

目的 构建丙型肝炎病毒(HCV)cDNA与荧光素酶(Luc)融合基因可调控逆转录病毒载体,以建立容易检测的HCV体外细胞模型。方法 利用基因重组技术,将HCV5’非编码区(5’NCR)和/或核心(C)区基因克隆于pGEM-Luc-DNA载体,使其与Luc基因相融合,然后再将融合基因插入可调控逆转录病毒载体(PBPSTR1)。结果pCEM-HCVl和pBPSTRl-HCV经酶切鉴定,HCV5’NCR和/或C区cDNA已与Luc基因融合,并被克隆于pBPSTRl。结论 通过体外分子克隆技术可使HCV基因cDNA带上Luc报告基因,并可克隆于逆转录病毒载体,为建立易检测的HCV细胞模型和进一步抗病毒基因治疗以及药物的筛选奠定了基础。

乙型肝炎病毒长期携带机理的研究进展

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染后，导致病毒长期携带的机理还不清楚。本文综述了近年来的研究进展，并结合作者的研究从ＨＢＶ的分子生物学特性，ＨＬＡ系统和机体免疫功能状态分析了ＨＢＶ长期携带的机理。着重从病毒突变体的产生逃避宿主免疫系统的作用，机体对ＨＢＶ病毒抗原形成完全或不完全免疫耐受，对ＨＢＶ特异性免疫功能低下和抗－ＨＢｓ产生不足，以及免疫调节功能紊乱等方面探讨了机体不能彻底清除ＨＢＶ，形成长期病毒携带的机理。

创口净抗菌作用的研究

为了解创口净的抗菌作用及其机理,对创口净作了抗菌效价测定和常见病原菌的抑菌试验,并与常用消毒剂作比较分析。结果表明,创口净能有效地杀灭多种病原菌,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.04μg/ml,绿脓杆菌为12.5μg/ml,大肠杆菌和少量常见病原菌均在1.6μg/ml左右。且在用药后2.5min就能杀灭绝大多数细菌,比75％乙醇、0.1％新洁尔灭和0.05％洗必泰更为优越。耐药诱导试验和临床试用证明,一般病原菌对创口净不易产生耐药性。电镜观察发现,创口净能破坏细菌菌膜,使其通透性增加,从而杀灭细菌,这可能是创口净抗菌作用的机理之一。因此,创口净可作为一种高效、快速的广谱抗菌剂,用于各种创伤感染的预防和治疗。