实验用封闭群金黄地鼠mtDNA D-环核苷酸组成与变异分析

对兰州、上海、北京和武汉4个封闭群共98只金黄地鼠线粒体DNA(mtDNA)D-环进行分析.结果表明:实验用封闭群金黄地鼠mtDNA D-环序列中,T、C、A、G碱基含量分别为30.9%2、5.2%、29.5%、14.4%,其中A+T为60.4%、G+C为39.6%,G+C含量明显低于A+T;发现的167个多态位点中,113个转换、52个颠换、2个位点既有转换也有颠换,分别占多态位点数的67.7%、31.1%1、.2%,没有插入/缺失同时出现的位点,表明我国实验用封闭群金黄地鼠个体间多态性丰富,群体间无明显变异.

产纤维素酶真菌菌株的分离筛选及产酶条件优化

【目的】由于真菌的纤维素酶系较全,且可分泌至胞外,易分离,所以试验致力于筛选高产纤维素酶真菌菌株.【方法】利用羧甲基纤维素钠培养法、刚果红染色法、纤维素酶活性测定法从样品中分离筛选出产纤维素酶菌株,同时结合菌落形态观察、显微镜观察和ITS序列同源性分析进行鉴定.【结果】通过初筛,筛选出15株Hc值较大的产纤维素酶真菌菌株,再经过液体发酵复测羧甲基纤维素酶活和滤纸酶活,筛选出一株产纤维素酶活最高的菌株B-2-3,经鉴定B-2-3为烟曲霉（Aspergillus fumigatus）,其羧甲基纤维素酶活为2 341.76U/mL,滤纸酶活为398.18U/mL.经过产酶条件优化,确定其最适产酶条件为温度25℃、接种量4μL、蛋白胨0.5~0.6g/L、CMCNa 0.3~0.35g/L、pH 6.5.【结论】筛选出一株产纤维素酶活较高的烟曲霉菌株B-2-3.

产纤维素酶细菌的分离筛选与鉴定

通过筛选获得高产纤维素酶细菌菌株,为纤维素酶制剂研制及纤维素酶工程菌构建提供试验材料。采用刚果红平板从牛羊粪便及腐败的玉米秸秆和木屑中分离产纤维素酶菌株,以DNS法测定酶活,根据酶活复筛产纤维素酶分离菌株;观察分离菌株的形态、染色与培养特性;应用16S rDNA通用引物扩增菌株基因组DNA,测序结果提交GenBank数据库进行Blast比对分析和相似性搜索,作出复筛菌株种的鉴定。结果表明:分离获得16株纤维素酶产量较高的细菌菌株,均为革兰氏阳性菌,菌体呈短杆状、具中央芽孢,经16S rDNA序列比对分析和相似性搜索,鉴定为10株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、6株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。

马立克氏病鸡组织中PRNP基因表达量分析

【目的】探明PRNP基因表达量与鸡马立克氏病发病之间的关系.【方法】从甘肃省康乐县某养鸡场采集马立克(MD)病鸡组织样品,通过RT-PCR检测MDV致瘤相关基因Meq和pp38以及病理组织学观察将样品分为MD肿瘤病变鸡、MD无病变鸡与健康鸡,最后通过荧光定量PCR方法分析3组中PRNP基因mRNA水平的相对表达量的差异.【结果】MD无病变鸡中PRNP基因的表达规律与健康鸡基本一致,但与MD肿瘤病变鸡完全不同;除脑外,MD病鸡组织PRNP基因的表达量均高于健康鸡,其中肿瘤病变组织PRNP基因的表达量显著高于无病变组织(P<0.05),而且PRNP基因在MD病鸡肿瘤病变组织与健康鸡组织的表达差异与肿瘤病变程度有关.【结论】PRNP基因的表达量与MDV感染存在相关性,PRNP基因在MD肿瘤组织中过表达,且PRNP基因的差异表达与肿瘤病变程度有关.

朊样蛋白Doppel的研究进展

传染性海绵状脑病(Transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)是由朊蛋白(Prion protein,PrP)引起的一种致命的神经退行性疾病,最早于18世纪中期在欧洲地区羊群中发现羊瘙痒病,目前已在人和多种哺乳动物发现了传染性海绵状脑病。现在普遍认为当人和哺乳动物的正常细胞型朊蛋白(Cellular isoform of prion protein,PrP)发生错误折叠转变为痒病型朊蛋白(Scrapie isoform of prion protein,PrP)后导致传染性海绵状脑病的发生[1]。

散养‘青脚麻鸡’群暴发马立克病的病理变化观察

通过发病情况调查、临床症状观察、病理学检查及AGP和PCR诊断技术,对甘肃省康乐县某鸡场散养育成‘青脚麻鸡’群发生的疑似马立克病进行了诊断和病理学研究.结果表明:鸡群生长到8周龄开始发病、死亡,表现出典型的马立克病临床症状;病理剖检主要表现为除肺脏外大部分内脏实质器官产生大小不等形状不规则的肿瘤结节;病理组织学变化为各组织器官可见弥漫性的淋巴细胞浸润,但肿瘤细胞的异形性不明显;AGP试验为阳性;特异性PCR检测扩增出约804bp的特异性meq基因片段,符合预期的片段大小.应用上述诊断技术确诊该鸡场‘青脚麻鸡’群暴发的是急性内脏型马立克病.

紫外/氯工艺中磺胺类药物的转化:机理和毒性评价

磺胺类药物(sulfonamides,SAs)是一种常用的抗菌药物,由于在水生环境中经常被发现,因此备受关注。本文研究了紫外/氯(UV/Cl)工艺中3种磺胺类药物的转化过程及其产物毒性变化,并与氯化、紫外/过氧化氢(UV/H_(2)O_(2))工艺进行比较。结果显示,磺胺类药物在UV/Cl工艺中转化效率最高,氯类自由基在其中起到关键作用。在不同pH条件下,磺胺类药物在UV/Cl工艺中的转化效率会随pH值的增加而降低,但在pH值接近pKa值时突然升高,推测该现象与反应活性成分和SAs形态的变化有关。此外,对转化产物毒性的进一步研究发现,UV/Cl工艺的转化产物毒性最低(发光菌抑制率为6.99%—12.06%),但是未能显著降低SAs原溶液的毒性,并且由于氯代产物的出现,磺胺噻唑在转化后表现出更高的毒性。

公路桥梁施工过程中的质量控制与管理分析

人们生活水平的不断提高,出行的次数也越来越多,大众对于公路桥梁的质量、美观程度、安全性等多个方面都非常关注,并提出诸多要求。伴随着时间不断推移,国家针对公路桥梁工程也加大了投资的力度,公路桥梁事业也如火如荼的开展当中。因此,本篇文章主要对公路桥梁施工过程当中的质量控制与管理进行认真的分析,希望能够在进一步提高公路全程施工管理能力等多个方面起到一些参考和帮助。

让爱为教育事业领航

师爱是平凡而伟大的，只有爱孩子才能教育孩子，以爱动其心方能赢得收获；教师必须兼顾全体对象，为了一切学生，为了学生的一切；全身心的投入，爱护、关心、帮助每一位学生，正成为全体学生的贴心人。

螺旋CT导引下肺部肿瘤射频热消融治疗的应用研究

目的 通过对肺肿瘤射频热消融（RFA）治疗效果的观察，评价其技术特点、安全性和疗效。方法 30例肺肿瘤患者共46个肿瘤接受了RFA治疗（其中肺部原发性肿瘤20例，转移瘤10例），在CT引导下将消融电极刺入到距肿瘤边缘组织1cm处，根据病灶大小，将子针打开至合适直径，达到靶温度后，持续7～15min。对患者进行1～9个月的随访，通过胸部X线片和增强螺旋CT观察治疗效果。结果 30例患者46个肿瘤，共做消融灶123个，治疗区域坏死率为100％。（1）随访1个月30例，46个肿瘤瘤体完全消融41个，占89.13％；部分消融5个，占10.87％。（2）随访3～9个月26例，40个肿瘤病灶完全缓解（CR）33个，部分缓解（PR）4个，无变化（NC）2个，进展（PD）1个，总有效率达925％（37／40）。结论 RFA治疗肺部肿瘤疗效肯定、安全，是1种应用前景较好的方法。

鸡Akt基因mRNA SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为快速检测鸡细胞的增殖能力,利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术,建立鸡Akt基因mRNA的定量分析方法。根据GenBank中原鸡Akt基因和鸡β-actin基因序列,设计合成特异性引物,应用RT-PCR技术从DF-1细胞中扩增出目的基因的DNA片段,并将纯化后的PCR产物与pMD18-T载体连接后转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒pMD18-Akt和pMD18-β-actin。分别以重组质粒pMD18-Akt和pMD18-β-actin为标准品建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测的标准曲线。结果显示,建立的RT-PCR标准曲线具有良好的线性关系和特异的单个峰,能够对样品进行稳定可靠的定量检测。采用本方法检测DF-1-PrP和DF-1-count细胞系的Akt基因的相对表达量,前者为1.656 9×103,后者为2.257 4×102,DF-1-PrP细胞系的Akt基因表达量明显高于DF-1-cont细胞系(P<0.01),说明PrPC及Akt在DF-1细胞系中的表达量呈正相关。结果表明,本研究建立的鸡Akt RT-PCR检测方法能够通过对Akt基因的转录量进行检测而评价鸡细胞的增殖能力。