椎间盘退变相关焦亡基因的综合分析

背景:椎间盘退变早期诊断和治疗尤为重要,髓核细胞焦亡在早期椎间盘退变过程中发挥着重要作用,但髓核细胞焦亡相关分子在早期椎间盘退变中发挥的作用及相关分子标志物仍不明确。目的:探讨焦亡相关差异表达基因在椎间盘退变过程中的诊断及治疗价值。方法:整合GEO数据库椎间盘退变的公开数据集进行差异分析,与之前报道的33个焦亡基因取交集;使用基因本体论、京都基因和基因组百科全书对椎间盘退变焦亡相关基因进行通路富集分析,并使用基因集富集分析对椎间盘退变数据集进行富集分析;构建椎间盘退变样本中的免疫细胞谱,并将差异表达的细胞焦亡相关基因与免疫细胞进行相关性分析;构建蛋白质互作网络,筛选Hub基因以鉴定蛋白质相互作用网络中与椎间盘退变相关的关键基因;整合数据集绘制差异表达焦亡基因的受试者工作特征曲线,计算曲线下面积,探索目标基因的临床诊断价值;qRT-PCR验证正常人髓核细胞与椎间盘退变人髓核细胞之间焦亡相关基因的表达差异。结果与结论:①获得4426个与椎间盘退变相关的差异表达基因,交集后获得14个差异表达的焦亡相关基因;②基因本体论、京都基因和基因组百科全书分析揭示了重要的富集途径,主要与炎症、细胞周期、感染和NOD样受体通路相关;基因集富集分析显示氨基酸代谢、P53转录调节等通路在椎间盘退变患者中显著富集;免疫浸润分析提示椎间盘退变的发生发展与免疫细胞密切相关;③共筛选出5个Hub基因,分别为IL-1β、Caspase-1、AIM2、Caspase-5、NLRC4;④椎间盘退变关键生物标志物的获取及鉴定:将GEO两个数据集与焦亡基因取交集后发现NLRP3具有显著表达差异,受试者工作特征曲线显示NLRP3具有临床诊断意义;⑤qRT-PCR显示IL-1β、Caspase-5和NLRC4等Hub基因在椎间盘退变的髓核细胞中表达显著增加(P<0.05),Caspase-1、AIM2以及NLRP3表达无差异(P>0.05);⑥提示细胞焦亡在椎间盘退变发生发展过程中发挥重要作用,其中焦亡相关基因NLRP3、IL1-β、Caspase-5、NLRC4具有早期诊断和治疗价值。

基于网络药理学和分子对接探究金匮肾气丸治疗椎间盘退变的作用机制

目的:基于网络药理学和分子对接探究金匮肾气丸治疗椎间盘退变的作用机制。方法:通过中医药百科全书(ETCM)检索金匮肾气丸所含药物,得到活性成分和药物作用靶点。通过GeneCards数据库检索“椎间盘退变”相关靶点,取药物和疾病靶点的交集,绘制药物成分-靶点-通路网络图。利用STRING绘制蛋白质-蛋白质相互作用网络图,筛选核心靶点。通过基因本体论(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析分析核心靶点富集信息及潜在通路。使用MOE软件对药物活性成分及核心靶点进行分子对接预测。结果:(1)获得金匮肾气丸有效活性成分共125种,包括水苏糖、β-谷甾醇、泽泻醇A等;(2)金匮肾气丸与椎间盘退变的共同靶点共97个,关键靶点有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt Serine/Threonine Kinase 1,AKT1)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3,CASP3)、白细胞介素(Interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)等;(3)金匮肾气丸治疗椎间盘退变主要涉及营养水平反应、胞外模拟反应、细菌来源分子的反应等生物学过程,膜筏、细胞质的囊泡腔、分泌颗粒腔等细胞组分,氧化还原反应、有机酸结合、羧基酸结合等分子功能,以及结核、美洲锥虫病、缺氧诱导因子-1等信号通路;(4)分子对接显示核心成分与关键靶点的结合能力稳定。结论:金匮肾气丸中的活性成分水苏糖、β-谷甾醇、泽泻醇A等,通过关键靶点AKT1、IL-6、IL-1β、TNF等参与结核、美洲锥虫病、缺氧诱导因子-1等信号通路的调控,从而治疗椎间盘退变。

数字标记点质心跟踪法在骨盆位移测量中的应用

目的：评价数字标记点质心跟踪法在骨盆位移测量中的可靠性。方法：选择健康成人尸体骨盆标本6例,保留主要的韧带和关节囊,骨盆关键部位粘贴标记点;双足站立位,0~500 N垂直分级载荷下,CCD采集骨盆形变图像;基于Image J软件,采用数字标记点质心跟踪法测量冠状面上S1椎体的垂直位移及矢状面上骶骨相对于髂骨的角位移。结果：骨盆形变前后标记点图像具有良好的相关性,相关系数达到0.983;相对误差达到1.11‰。双足站立位,骨盆垂直载荷-位移曲线基本呈线性变化;侧位观察,骶骨相对于髂骨呈现屈曲运动,其载荷-角位移曲线呈非线性变化。500 N垂直载荷下,S1椎体垂直位移为（0.835 6±0.283 0）mm,骶骨相对于髂骨的角位移为（0.584±0.221）°。结论：基于Image J软件数字标记点质心跟踪法用于测试骨盆的位移,其测试方法简单、测试精度高,在生物力学上可以得到很广泛的应用。

以《腰腿足痛》篇为例探讨《临证指南医案》的研读

《临证指南医案》包含了叶天士诸多治则治法及用药经验,是中医临床必读书目之一,但是初读此书者常叹其入门、精深之难。此书之难读,不仅在于其深奥灵活的医案内容,也在于其洒脱随性的书写格式。腰腿足痛是临床常见的症状,《临证指南医案·腰腿足痛》虽然篇幅不长,但是蕴含叶天士丰富的治法,并且其内容及书写格式十分具有代表性。通过总结“腰腿足痛”篇辨证和方药规律,探索叶天士针对该类疾病的治疗特色;并以该篇为例,探讨全书阅读难点及可行的解决方法,为学者提供研究思路。

骨肉瘤细胞外体培养中仿血管发生现象

目的对骨肉瘤血管产生机理进行初步的研究,观察骨肉瘤细胞是否有仿血管发生的能力。方法应用Ⅰ型胶原蛋白凝胶的三维培养基对骨肉瘤细胞进行培养,观察骨肉瘤细胞在三维培养基中是否可形成血管样结构,并运用电镜、光镜观察这些血管样结构的形态学构成。结果电镜、光镜下观察到骨肉瘤细胞在Ⅰ型胶原蛋白凝胶的三维培养基中能够形成血管样结构。结论骨肉瘤细胞体外能够自身形成血管样结构,具有仿血管发生的能力。

闭合复位经皮克氏针内固定治疗儿童肱骨髁上骨折

目的 评价闭合复位后经皮克氏针交叉固定治疗此类骨折的临床疗效。方法 回顾性分析 18例儿童肱骨髁上不稳定型骨折病人经全麻下行闭合复位 ,经皮克氏针交叉内固定的治疗效果及并发症的分析。结果 平均随访 10个月 (6～ 12个月 ) ,所有骨折术后 4周骨痂愈合良好 ,拔除克氏针。术后 8周肘关节功能恢复。 1例暂时性尺神经麻痹病人术后 12周时神经功能完全恢复。 2例早期肌间隔综合征病人复位固定后症状消失 ,无肘关节畸形和永久性神经血管损伤发生。

肿瘤血管生成与骨肉瘤研究进展

肿瘤新生血管生成在肿瘤的生长和转移过程中起着重要作用,研究肿瘤血管生成机制可望从根本上改善肿瘤患者的预后。本文综述了骨肉瘤的肿瘤血管生成调节机制、肿瘤微血管密度、影像学检测及骨肉瘤抗血管生成治疗的研究进展。

无创可延长假体的临床应用

骨肉瘤是一种好发于儿童及青少年的恶性肿瘤,超过1/3的骨肉瘤患者的年龄不足10岁.近年来,随着化疗的开展,保肢治疗成为四肢恶性骨肿瘤外科手术的发展趋势.但在临床上,儿童四肢恶性骨肿瘤保肢治疗是一大难题.由于儿童骨骼未发育成熟,对侧肢体仍继续生长,肿瘤广泛切除保肢手术后往往带来肢体不等长.这不仅外形难看,而且给患儿的生活带来不便,还可引起骨盆倾斜、脊柱侧弯、非正常应力所致关节损害等一系列并发症.过去对累及生长板的儿童膝关节周围恶性骨肿瘤患者下肢肢体不等长预计超过4cm,大多采用截肢术及旋转成形术.

四肢长管骨钢板内固定后再骨折的原因分析

目的探讨四肢长管状骨钢板内固定术后发生钢板边缘再骨折的原因。方法回顾性分析7例钢板内固定术后钢板边缘发生再骨折的时间、暴力、部位,术中发现、治疗方法及效果。结果7例均为轻度暴力导致再骨折。再骨折发生时间在内固定后平均16.6个月(8～47个月),原骨折均已临床愈合。再骨折均发生在靠近骨干的末位螺丝钉处,该螺钉均穿透2层骨皮质。术中发现钢板下骨质均有萎缩,骨量下降。经再次手术内固定(5例髓内钉,2例钢板螺钉),并随访1～2年,骨折均重新愈合。结论钢板边缘末位螺丝钉孔处再骨折的发生,主要与钢板两端应力集中有关。采用长钢板及末位螺钉仅穿透一侧皮质的技术,可有效缓解该处的应力集中。

距下关节三维运动测量方法学比较

目的 :探讨测量距下关节三维运动的简便、有效方法 ,为临床研究距下关节的运动及其损伤提供新的思路。方法 :选用青壮年新鲜小腿 -足标本 8个 ,以机械方法测量跟骨在笛卡尔坐标系内的三维位移 ,通过矩阵转换和函数方程 ,利用位移计算距下关节的三维运动角度。此外 ,在后足运动的极限位置对标本行螺旋CT扫描 ,三维重建 ,分析距下关节各平面活动范围。比较两种测量结果。结果 :两种方法测量距下关节水平面、冠状面运动 ,结果无显著性差异。结论 :机械测量较简便、经济 ,且精度较高 ;而影像学测量存在较大的观察误差 ,但作为一种无创的检查方法 ,有必要进行深入的研究。

人工假体在膝关节周围恶性骨肿瘤保肢术中的应用

目的 探讨人工假体在膝关节周围恶性骨肿瘤保肢术中的应用价值。方法 对 2 5例膝关节周围恶性骨肿瘤患者行骨肿瘤的广泛切除和人工假体置换术 ,对其中 7例胫骨近端恶性骨肿瘤患者同时行腓肠肌、比目鱼肌肌瓣移植。结果 18例患者术后随访 13～ 99个月 (平均为 35个月 ) ,按Enneking法评定功能 ,≥ 2 3分9例 ,15～ 2 2分 7例 ,<15分 2例 ,优良率达到 89%。膝关节平均活动度为伸 0°、屈 90°～ 15 0°。 1例于术中发生主要血管损伤 ,1例发生肌瓣坏死及骨筋膜室综合征。结论 人工假体是一种治疗膝关节周围恶性骨肿瘤较好的保肢方法 ,能降低局部并发症及提高临床疗效。

基于索引表和二分图的Web服务操作发现

在通用的Web服务描述语言基础上,提出一种基于倒排序索引表和二分图匹配的两阶段服务操作发现方法。第1个阶段利用倒排序索引表得到相关服务,获取服务操作的输入和输出参数,用户根据需要选取期望的输出参数作为服务请求。第2个阶段采用二分图匹配方法对服务请求进行服务操作匹配,发现所需的Web服务操作。实验结果表明,该方法能提高服务发现的准确性和灵活性,并提供功能相同的备选服务操作。

垂直冲击下L1应力分布的有限元研究

目的利用有限元法动态分析L1在垂直冲击作用力下应力分布及应力变化规律。方法建立胸腰椎(T11-L3)的三维非线性有限元模型,并验证模型的有效性。模拟体外实验,予以100J能量垂直冲击有限元模型,利用Abaqus 6.9显式动力学求解器Explict进行求解,分析L1的应力分布特点及变化规律。结果建立了有效的胸腰椎三维非线性有限元模型。在垂直冲击作用下L1应力随时间变化而变化,应力最大值部位随时间变化而变化,应力最大部位出现在椎弓根基底部、关节突关节及峡部,椎弓根基底部应力最大值出现在椎弓根基底部的外下方,应力在此集中并沿椎体壁向前方传递;在椎体后上方出现明显的应力峰值,在椎体前上方应力随时间变化不明显,无明显应力峰值出现。结论所建立的完整胸腰椎三维非线性有限元模型有效,可进行动态分析;椎体后上方应力峰值的出现可能是椎体爆裂性骨折椎管内占位骨折块形成的原因。

应用于癌症基因表达数据的OMB双向聚类算法

癌症基因表达数据的聚类分析可以为癌症的早期诊断和精确的癌症亚型分型提供依据。针对癌症基因表达数据的特点,提出一种称为OMB(Override Matrix Bicluster)的双向聚类算法。OMB算法分别在基因表达数据矩阵的行和列上搜索低于阈值的行和列,用删除添加算法产生一个子矩阵;构建与基因表达矩阵大小相同的覆盖矩阵,标识矩阵中上一次迭代产生的子矩阵的位置;在标识出来的矩阵中,重复贪婪迭代搜索找到K个聚类结果。Matlab实验结果表明OMB算法对具有重叠结构的癌症基因表达数据具有更好的聚类效果。

Vascular Channel Formation by Osteosarcoma Cells in Vitro: Vasculogenic Mimicry

Objective: To observe whether there is evidence for vascular channel formation by osteosarcoma cellsin vitro and to illustrate mechanism of vasculogenic mimicry in osteosarcoma.Methods: Osteosarcoma cell lines (U-2OS) were tested for their ability to form tubular networks in three-dimensional culture containing type I collagen. The structures of the tubular networks were observed under a phase contrast microscope and an electron microscope.Results: Observation under light microscopy and electron microscopy showed that high aggressive osteosarcoma cells line (U-2OS) formed networks containing channels when grown in three-dimensional culture containing type I collagen in the absence of endothelial cells or fibroblasts.Conclusion: These observations strongly suggest that aggressive osteosarcoma cells may generate vascular channels that facilitate tumor perfusion independent of tumor angiogenesis and have the ability of vasculogenic mimicry. Key words osteosarcoma cells line - vasculogenesis mimicry - angiogenesis - 3-dimensional cultures This study was supported in part by the National Natural Sciences Foundation of China (No. 30271314).

下腰椎爆裂性骨折不同手术方案的选择

目的探讨下腰椎爆裂性骨折损伤特点和不同手术方法的选择。方法本组22例下腰椎爆裂性骨折,分为两类:合并有椎管内占位,采用后路减压+椎弓跟螺钉内固定手术12例,其中4例结合伤椎椎体增强;单纯爆裂性骨折不合并椎管内占位10例,其中6例采用经皮闭合复位内固定手术,4例采用后路切开复位内固定手术。术前术后X线片测量伤椎前缘高度、伤椎平均高度、Cobb角,CT片测量椎管内占位率。以美国脊髓损伤协会(ASIA)损伤分级标准(AIS)评定神经功能,以腰视觉模拟量表评分(VAS)及Oswestry功能障碍指数(ODI)评分评估患者功能改善情况。结果所有病例均顺利完成手术,随访24~56个月,平均(32.9±11.4)个月。伤椎前缘高度术前(23.8±5.3)mm,术后2周(31.9±3.4)mm及末次随访(30.2±4.0)mm(P<0.05);伤椎平均高度术前(24.3±4.6)mm,术后2周及末次随访(30.3±2.9)mm、(29.7±3.1)mm,差异有统计学意义(P<0.05);Cobb角术前(9.2°±9.6°),术后2周(18.5°±7.0°)及末次随访(16.3°±7.3°),差异有统计学意义(P<0.05);椎管内占位面积由术前平均43.6%(30%~70%)减少到7.72%(0%~15%),差异有统计学意义(P<0.05);AISA分级提高0~1级;术后2周及末次随访腰痛VAS评分及ODI评分较术前明显改善(P<0.01)。结论下腰椎爆裂性骨折系不稳定骨折,早期接受手术治疗可以达到较好的恢复效果。术式的选择取决于脊柱稳定性、神经损伤、椎管内占位情况及合并症等。

变频器在煤矿主通风机系统中的应用

煤矿企业不但是产能大户,也是耗能大户,尤其是主通风机整体24小时运转、功率较大,怎样才能达到通风需求又能最大限度节能,是相关人员探究的重要课题。本文将变频器应用在主通风机系统中,从技术方面证明变频器不但实现了节能降耗,还确保了风机稳定、灵活的运行。

髋臼周围肿瘤切除腓骨移植重建骨盆环的稳定性实验研究

目的评价髋臼周围肿瘤切除后腓骨移植重建骨盆环的稳定性。方法选择健康成人尸体骨盆标本6具,按照En-necking对骨盆肿瘤Ⅱ型切除标准行髋臼周围切除,采用双排腓骨移植附加钢板(Plates)、椎弓根棒(PR组)、侧棒(LR)、骶髂棒(SIR)4种内固定重建骨盆环;模拟双足站立位,施加0～500N垂直分级载荷,CCD采集骨盆图像,基于ImageJ软件采用数字标记点质心跟踪法对重建后的骨盆进行检测,并与正常骨盆相同载荷下位移进行对照分析。结果双足站立位,垂直载荷下4种重建工况骨盆以健侧股骨头为支点在冠状面向患侧产生线性下移及旋转运动。500N载荷下,LR及Plates重建骨盆S1椎体垂直位移及冠状面上的旋转角度没有发生突变,其冠状面旋转及轴向稳定与完整骨盆没有明显差异;而SIR重建骨盆的稳定性及对称性严重破坏。结论生理载荷下,髋臼周围肿瘤切除后腓骨移植Plates及LR重建具有与完整骨盆近似的轴向及旋转稳定力学性能。

扩髓的带锁髓内钉治疗复杂的粉碎性股骨干骨折

目的评价扩髓的带锁髓内钉在复杂粉碎性股骨干骨折中的应用价值.方法采用扩髓的带锁髓内钉治疗26例复杂的粉碎性股骨干骨折.结果26例平均随访18(16～20)个月,骨折全部愈合,下肢功能良好,其中1例因过早负重导致短缩畸形.结论扩髓的带锁髓内钉治疗复杂的粉碎性股骨干骨折具有创伤小,出血少,固定牢靠,能早期活动,促进骨折愈合的特点,疗效甚好.