lncRNA HCP5靶向miR-409-3p对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨lncRNA HCP5靶向mlR-409-3p对皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR法检测CSCC细胞(SCC13、A431、HSC-5)中HCP5和miR-409-3p的表达情况,筛选用于实验的CSCC细胞。将抑制HCP5表达的质粒si-HCP5及其对照(si-NC)、过表达miR-409-3p的miR-409-3p模拟物及其对照(miR-NC)、抑制HCP5和miR-409-3p的si-HCP5+anti-miR-409-3p及其对照(si-HCP5+anti-miR-NC)分别转染SCC13细胞。采用CCK-8法和Transwell实验检测SCC13细胞增殖、迁移、侵袭能力,Western blot法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证HCP5和miR-409-3p的靶向关系。结果:SCC13细胞中HCP5表达最高,miR-409-3p表达最低(P<0.05)。抑制HCP5表达后SCC13细胞增殖能力降低,细胞迁移数和侵袭数减少,CycIinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-409-3p后SCC13细胞增殖能力降低,细胞迁移数和侵袭数减少,CycinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示lncRNA HCP5和miR-409-3p存在靶向关系。抑制miR-409-3p表达可减弱HCP5低表达对SCC13细胞增殖以及迁移、侵袭能力的影响(P<0.05)。结论:抑制HCP5可通过靶向促进miR-409-3p表达来抑制CSCC细胞增殖、迁移和侵袭。

新型抗组胺药奥洛他定的研究进展

奥洛他定是新型第二代抗组胺药,具有抗组胺、抗炎、抗神经递质、稳定肥大细胞膜的作用,选择性高、亲和力强,起效快,不良反应少见,临床上不仅用于治疗荨麻疹、湿疹、皮炎、银屑病和多形红斑等瘙痒性皮肤病,也可用于治疗过敏性鼻炎、过敏性眼结膜炎等,该药在临床上具有广阔的应用前景。

栅栏状包膜神经瘤1例

患者男,27岁。下唇边缘皮疹4年余。皮肤科情况:下唇边缘可见一肤色圆顶丘疹,界清,质中,表面光滑,缓慢增大,无自觉症状。皮损组织病理示:真皮内可见数个结节状的肿瘤团块,界清,外有不完整包膜。瘤体内见多数呈轻度波状的神经束,胞核梭形,部分呈栅栏状排列,束间可见裂隙形成及黏液性基质。免疫组化示:团块内细胞S-100弥漫(+),周围包膜EMA(+)。诊断:栅栏状包膜神经瘤。

生殖器丘疹样棘层松解性皮病ATP2C1基因突变检测

目的:检测1例散发性生殖器丘疹样棘层松解性皮病患者ATP2C1基因突变。方法:提取患者、其父母及100名无亲缘关系健康对照的外周血以及患者皮损组织DNA,PCR扩增ATP2C1基因28个外显子和侧翼序列,并进行测序。结果:检测到患者血样及皮损组织DNA均存在ATP2C1基因第1570位碱基发生突变T→C,父母及对照未发现突变。结论:ATP2C1基因17号外显子的突变可能是本患者的发病原因。生殖器丘疹样棘层松解性皮病可能与Hailey病组成一个连续病谱。

斑驳病合并咖啡斑1例

患者女，23岁。全身散在白斑及棕色斑23年。皮肤科情况：额前中线部位可见境界清楚的禾规则形乳白色斑片，其上头发根部、眉毛呈白色。下颏、躯干前部、四肢可见大小不一形状不规则乳白色斑片，其间有岛屿状正常色素斑及咖啡斑。躯干、四肢正常皮肤间散在分布大小不一的咖啡斑。直径〉15mm的咖啡斑数量9个。双侧腋窝、腹股沟散在分布直径1～5mm的色素斑（Crowe’s征）。诊断：斑驳病。

仅累及黑发的斑秃1例

1临床资料 患者男，53岁.因“片状脱发伴逐渐加重2周”来本院就诊。患者于2周前无明显诱因枕部头发片状脱落，且脱发均为黑发，白发未累及，脱发区面积逐渐扩大。

蒙古斑并发白癜风1例

患儿男,2岁9个月。因腰骶部和臀部灰青色斑片2年余,臀部白斑1年余,于2017年1月16日来我院就诊。患儿出生时腰骶部及臀部即有片状灰青色斑片,随年龄增长无明显变化。1年余前无明显诱因左侧臀部出现指腹大白色斑片,面积逐渐扩大至手掌大,白斑上逐渐出现岛屿状肤色斑片,无痛痒等不适。

斑驳病合并咖啡斑1例

0216Q开关激光治疗咖啡斑的临床初步研究王辉（中国医科院皮肤病医院激光科），林彤，吴秋菊…／／中国激光医学杂志．-2014，23（5）．

局限于生殖器的汗孔角化症1例

患者男,32岁。阴茎局限性斑块8年余,无自觉症状。皮肤科情况:龟头可见一境界清楚的暗红色环形斑块,中央有轻度萎缩,可见角质性隆起边缘。龟头皮损边缘取材后组织病理检查示:表皮角质层可见数个角化不全柱(角质样板层),其下方颗粒层消失,可见散在角化不良细胞。诊断:局限于生殖器的汗孔角化症。

阿维A治疗不全型毛囊闭锁四联征一例

患者男,19岁,以双腋窝、腹股沟、肛周皮疹1年余,加重3个月伴疼痛来我院就诊.患者1年余前无明显诱因肛周出现散在丘疹、硬结,皮疹逐渐扩展至腹股沟及双腋窝,自觉轻度疼痛.近3个月皮疹加重,双腋窝出现散在脓肿、窦道,部分破溃,自觉明显疼痛,遂于2013年3月16日来我院就诊,诊断为聚合性痤疮,门诊予异维A酸胶囊10 mg每日2次、罗红霉素胶囊150mg每日2次口服,2个月后双腋窝、腹股沟、肛周皮疹无明显好转.既往面部、躯干有寻常痤疮病史5年,此次在我院门诊治疗后,面部及躯干的寻常痤疮皮损改善,余无特殊.

间变性淋巴瘤激酶阴性的原发皮肤间变性大细胞淋巴瘤一例

患者女，64岁。因全身多发结节、红斑、溃疡6个月于2016年12月13日来河南省人民医院皮肤科就诊。6个月前发现腹部多处花生大小皮下结节，质硬，无不适，结节表面皮肤逐渐发红并出现破溃，渗黄色黏液，无明显疼痛，部分皮损可自行愈合，留有暗红色斑片。2个月前溃疡逐渐增多、增大，累及四肢、头面部，偶有发热，体温最高38.5 ℃，曾于当地医院予抗感染治疗后无明显缓解。

系统应用糖皮质激素治疗白癜风

白癜风是一种常见的色素脱失性皮肤病，发病机制复杂且不完全清楚，治疗方式多样但疗效欠佳。研究表明，系统应用糖皮质激素通过其抗炎、免疫抑制等作用可以控制白癜风的进展、促进皮损复色，其治疗方法包括低剂量每日口服疗法、间歇疗法、冲击疗法，以及联合外用药、光疗、外科治疗等。系统应用糖皮质激素需根据白癜风类型、发展时期选择适宜的治疗方法，才能达到最佳疗效、减少不良反应。

中外白癜风诊疗指南及共识比较

本文从白癜风分型、分期、病情评估、药物治疗及非药物治疗等方面比较了欧洲、美国、日本、韩国、中国等地区和国家的白癜风诊疗指南或共识,概要分析各指南及共识中推荐的白癜风疗法和强调理念的异同,以帮助临床医生为白癜风患者提供合适的个体化治疗方案。

CRISPR-Cas9诱导KRT5基因突变的HaCaT细胞对共培养人黑素细胞的影响研究

目的探究敲减角质形成细胞KRT5基因对共培养黑素细胞黑素含量的影响,以解释屈侧网状色素沉着症(DDD)的色素增加性皮损形成的机制。方法通过成簇的规律间隔的短回文重复序列-相关蛋白9(CRISPR-Cas9)技术获得KRT5基因杂合突变的HaCaT细胞,将转染非靶向单向导RNA:Cas9蛋白复合物的HaCaT细胞设为对照组,分别与人原代黑素细胞HEMn体外共培养。免疫荧光观察共培养细胞中细胞角蛋白及黑素小体表达;差异胰酶消化获得不同共培养组中黑素细胞,检测细胞内黑素含量。免疫组化检测1例KRT5突变DDD患者皮损和正常对照皮肤中黑素细胞特异性前黑素小体蛋白17(Pmel17)的表达改变。结果Sanger测序显示,实验组HaCaT细胞KRT5基因第1外显子起始密码子发生杂合突变(c.1delA),对照组HaCaT细胞KRT5基因未发生突变。Western印迹显示,实验组HaCaT细胞KRT5蛋白表达水平(0.60±0.05)显著低于对照组(1.00±0.00,t=32.38,P=0.001)。HEMn细胞与实验组HaCaT细胞共培养体系中Pmel17标记的黑素小体较与对照组共培养体系增多,且细胞内黑素含量增加52.5%,差异具有统计学意义(t=-3.48,P=0.025)。KRT5突变DDD患者皮损组织中Pmel17表达量较正常对照皮肤增加。结论本研究通过CRISPR-Cas9诱导KRT5基因突变的HaCaT细胞,与黑素细胞在体外建立共培养细胞模型,验证了其对共培养黑素细胞的影响,为进一步研究角质形成细胞与黑素细胞相互作用机制以及皮肤色素异常的发病机制提供了初级研究模型。

慢病毒介导shRNA沉默Nicastrin基因的人永生化角质形成细胞模型构建

目的 构建Nicastrin（NCT）基因的RNA干扰慢病毒表达载体，并在人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）上鉴定其沉默效率，构建NCT基因稳定下调的人永生化角质形成细胞模型，为后续研究NCT基因下调对角质形成细胞的生物学行为影响奠定实验基础。方法 设计3个靶向NCT基因特异性短发卡RNA（shRNA）表达序列并连接到慢病毒表达质粒pGLV3/H1/GFP ＋ Puro中，成功构建慢病毒重组表达质粒，并通过测序鉴定。将构建的重组表达质粒与包装质粒共转染293T细胞，产生慢病毒颗粒，并测其滴度。将HaCaT细胞分为空白组（未感染病毒）、阴性对照组（NC组，感染空载病毒LV3-shNC）和干扰组（感染NCT-shRNA1、2、3慢病毒）。流式细胞仪检测慢病毒转染效率，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、Western印迹检测靶基因的沉默效率，筛选出沉默效果最佳的干扰序列。结果 测序表明，NCT-shRNA慢病毒重组表达质粒构建成功。重组表达质粒与包装质粒共转染293T细胞后产生的慢病毒颗粒滴度为109 TU/ml。慢病毒感染HaCaT细胞后，流式细胞仪检测，慢病毒转染效率大于95%。qRT-PCR结果，与NC组相比，干扰组NCT mRNA表达量明显下降，其中NCT-shRNA1组NCT基因沉默效果最佳，干扰效率达到75%。Western印迹结果，与NC组相比，shRNA1组NCT蛋白表达抑制率为71.7%。结论 成功筛选出高效NCT-shRNA干扰序列，构建NCT-shRNA慢病毒重组表达载体，并构建NCT基因稳定下调的人永生化角质形成细胞模型。

节段型白癜风的研究进展

节段型白癜风是白癜风的一种亚型，沿皮神经节段分布。与其他类型白癜风相比，其在临床表现、发病机制和治疗等方面均有其自身特点。临床上具有发病早、皮损不对称、进展迅速的特点，很少向其他部位蔓延，很少伴有其他自身免疫病。病因及发病机制尚不明确，目前有神经学说、遗传学说、免疫学说及三步骤理论等。节段型白癜风的一线治疗是避免诱发因素，局部外用糖皮质激素、钙调神经磷酸酶抑制剂、维生素D3衍生物等，快速进展期可考虑系统给予小剂量糖皮质激素；二线治疗为窄谱中波紫外线、准分子激光或氦氖激光等；三线治疗是复色仍不理想，考虑手术治疗。

nicastrin基因沉默的斑马鱼模型构建及其色素异常机制的初步研究

目的探讨nicastrin(nct)基因对斑马鱼黑素细胞生物学功能的影响。方法利用吗啉代寡核苷酸(MO)技术针对斑马鱼nct基因mRNA设计nct-MO序列,同时设计对照MO序列(ctrl-MO),并构建5′端为MO靶序列的增强绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA,通过显微注射的方式将nct-MO或ctrl-MO与EGFP mRNA共注射入斑马鱼胚胎中,验证nct-MO的沉默效率,观察其表型变化。以野生型斑马鱼作为空白对照组,实时荧光定量PCR检测黑素合成notch信号通路相关基因mitfa、tyr、tyrp1a、tyrp1b、dct、pmela、notch1a、notch1b、hey1 mRNA表达水平的变化。多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果斑马鱼受精后8 h,ctrl-MO+EGFP mRNA组斑马鱼胚胎中均有绿色荧光表达,而nct-MO+EGFP mRNA组及空白对照组胚胎均未见绿色荧光。受精后48 h,nct-MO组幼鱼尾部色素沉着区面积占比(0.169±0.083)低于ctrl-MO组(0.258±0.042,t=3.202,P=0.005),且nct-MO组色素分布紊乱。实时荧光定量PCR显示,nct-MO组、ctrl-MO组、空白对照组间pmela、tyrp1a、hey1基因mRNA相对表达量差异有统计学意义(均P<0.05),mitfa、tyr、tyrp1b、dct、notch1a、notch1b mRNA相对表达差异无统计学意义(均P>0.05);nct-MO组pmela、tyrp1a相对表达水平(0.708±0.028、0.558±0.136)低于ctrl-MO组(1.023±0.142、1.016±0.134,均P<0.05)。结论nct基因可能通过调控斑马鱼黑素合成影响黑素细胞生物学功能。

Notch信号通路在皮肤病的研究进展

Notch信号通路是一条进化上十分保守的信号转导系统.Notch受体与相邻细胞的配体相互作用转导细胞信号,从而影响细胞的增殖、分化和凋亡.较多文献表明,Notch信号通路在维持皮肤正常生理功能以及炎症性皮肤病、自身免疫性皮肤病、皮肤肿瘤、色素性皮肤病等多种皮肤病中发挥重要作用.尽管目前临床应用尚不成熟,Notch信号抑制剂和激活剂有希望为皮肤病的治疗提供新思路.

银屑病瘙痒机制的研究进展

瘙痒是银屑病患者常见的临床症状,易造成患者的痛苦,降低患者生活质量。除神经系统、免疫系统、血管系统以及皮肤之间的相互作用外,其他相关因子也可能参与了银屑病瘙痒机制。深入探索银屑病瘙痒机制,能为银屑病瘙痒的治疗提供新的思路和方法,从而更加针对性地治疗银屑病患者的瘙痒症状。

化脓性汗腺炎的生物制剂治疗进展

化脓性汗腺炎是一种发生在腋窝、腹股沟、臀部、肛周等皮肤褶皱部位的慢性复发性炎症性皮肤病。该病好发于年轻女性,主要的临床表现为疼痛性炎性结节、脓肿、破溃以及窦道和瘢痕形成。该病病程长且反复发作,严重影响患者的生活质量。化脓性汗腺炎还可与其他代谢性疾病或心血管疾病并发,缩短患者的寿命。化脓性汗腺炎的确切发病机制目前仍不清楚,学术界认为包括遗传因素在内的多种因素起综合的致病作用。目前化脓性汗腺炎的治疗手段限于抗感染以及其他对症治疗措施,故而治疗效果有限。现主流观点认为异常激活的免疫系统,包括异常升高的TNF-α、IL-17、IL-12、IL-23等细胞因子,可能在其发病过程中发挥着重要作用。随着对化脓性汗腺炎病理生理过程的了解,以及对于并发其他炎症性疾病的患者进行生物治疗有效性的观察,对化脓性汗腺炎的生物治疗获得了广泛的关注。基于多项临床试验的结果,美国FDA批准了抗TNF-α单克隆抗体阿达木单抗作为治疗化脓性汗腺炎的唯一生物制剂。同时,以上述炎症细胞因子为靶标的其他生物制剂也在中重度化脓性汗腺炎的治疗中显示了良好的疗效和安全性。本文在简单介绍化脓性汗腺炎的基础上,主要对化脓性汗腺炎所涉及的免疫因子的靶向生物治疗进展作一综述。