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基于分子生物实验员工作岗位专业核心课程改革创新实践的研究
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作者 贾钧辉 邵瑞莲 +2 位作者 徐欢 张雪玉 韩璐 《中文科技期刊数据库(引文版)教育科学》 2023年第12期12-14,共3页
核酸检测技术迅速发展,尤其是农业分子育种领域迭代出新,核酸检测人员快速激增。结合企业分子生物实验员工作任务,天津生物工程职业技术学院与天津精耐特基因生物技术有限公司、天津康普森检验检测有限公司进行深度校企合作,开发《分子... 核酸检测技术迅速发展,尤其是农业分子育种领域迭代出新,核酸检测人员快速激增。结合企业分子生物实验员工作任务,天津生物工程职业技术学院与天津精耐特基因生物技术有限公司、天津康普森检验检测有限公司进行深度校企合作,开发《分子生物应用技术》和《分子生物实验员岗位能力》数字化教学资源,解决生物产品检验检疫专业核心课程缺乏可视化教学资源的教学困难。 展开更多
关键词 分子生物实验员 课程改革 活页式教材 虚拟仿真 产教融合
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生防枯草芽孢杆菌B579芽孢形成关键基因的研究
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作者 贾钧辉 《安徽农业科学》 CAS 2014年第19期6152-6154,共3页
[目的]克隆生防菌芽孢形成关键基因spo0A启动子Pspo0A,并检测其特性。[方法]从生防菌B579 DNA中,经PCR扩增芽孢形成关键基因spo0A启动子Pspo0A,插入载体pGFP,构建重组表达质粒pGFP-Pspo0A。[结果]重组表达质粒经双酶切和PCR鉴定,证明构... [目的]克隆生防菌芽孢形成关键基因spo0A启动子Pspo0A,并检测其特性。[方法]从生防菌B579 DNA中,经PCR扩增芽孢形成关键基因spo0A启动子Pspo0A,插入载体pGFP,构建重组表达质粒pGFP-Pspo0A。[结果]重组表达质粒经双酶切和PCR鉴定,证明构建正确,测序,结果与GenBank中的序列同源性为98%。[结论]该方法获得了含有绿色荧光蛋白基因和芽孢形成关键基因Spo0A的重组质粒,为进一步研究生防菌B579芽孢形成规律奠定了基础。 展开更多
关键词 生防菌 枯草芽孢杆菌 芽孢
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两步控制策略优化生防菌B579芽孢生成条件 被引量:4
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作者 张艳春 贾钧辉 +4 位作者 郑宇 陈芳 曾明洁 骆健美 王敏 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第13期7685-7687,共3页
[目的]优化生防菌-枯草芽孢杆菌B579芽孢生成的发酵条件,提高芽孢浓度。[方法]采用2步控制策略,即发酵的第1阶段(菌体生长阶段,0~10 h)促进细胞生长,发酵的第2阶段(菌体对数生长后期,芽孢生成阶段,10~30 h)促进芽孢生成,分别考察了... [目的]优化生防菌-枯草芽孢杆菌B579芽孢生成的发酵条件,提高芽孢浓度。[方法]采用2步控制策略,即发酵的第1阶段(菌体生长阶段,0~10 h)促进细胞生长,发酵的第2阶段(菌体对数生长后期,芽孢生成阶段,10~30 h)促进芽孢生成,分别考察了培养基初始葡萄糖浓度、发酵pH、第2阶段摇床转速、第2阶段发酵温度对芽孢生成的影响。通过单因素试验确定其水平,在单因素试验基础上进行正交试验优化,确定获得高浓度芽孢的最佳发酵条件。[结果]培养基初始葡萄糖浓度是影响芽孢生成的显著因素,芽孢生成的最佳发酵条件为培养基初始葡萄糖浓度5 g/L,发酵pH7.0,第1阶段的发酵温度37℃,摇床转速180 r/min,约10 h后进入第2阶段,发酵温度提高到40℃,摇床转速调节为200 r/min。发酵30 h,最终获得的芽孢浓度为(9.43±0.15)×108CFU/ml,芽孢生成率为90.99%,分别是优化前的6.70和2.43倍。[结论]利用两步控制发酵策略可提高生防菌B579芽孢浓度,建立的发酵工艺为生防菌剂的大规模生产奠定了基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 生防细菌 芽孢 两步控制策略 发酵
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Optimization of Sporulation Conditions of Biocontrol Bacteria B579 by Two-step Control Strategy 被引量:1
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作者 张艳春 贾钧辉 +4 位作者 郑宇 陈芳 曾明洁 骆健美 王敏 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第2期249-252,共4页
[Objective] For preparing the biopesticide of Bacillus subtilis B579 with high spore concentration,the sporulation conditions were optimized.[Method] Two-step fermentation control strategy was used,in which,the first ... [Objective] For preparing the biopesticide of Bacillus subtilis B579 with high spore concentration,the sporulation conditions were optimized.[Method] Two-step fermentation control strategy was used,in which,the first phase(0-10 h)was to improve cell growth,and the second phase(10-30 h)was to promote spore formation.Four factors including initial glucose concentration,fermentation pH,temperature(in the second phase)and shaking speed(in the second phase)were optimized using the methods of single factor test and orthogonal experiment.[Result] The initial glucose concentration showed a significant effect on sporulation.The optimal conditions for the spore formation of B.subtilis B579 were as follows:initial glucose concentration 5 g/L,fermentation pH 7.0,the temperature for the first phase 37 ℃,and the shaking speed for the first phase 180 r/min,the temperature for the second phase 40 ℃,and the shaking speed for the second phase 200 r/min;in addition,the first phase was 10 h and the second phase of fermentation was conducted for 30 h.Under such conditions,the spore concentration and spore formation rate could reach 9.43×108 CFU/ml and 90.99%,respectively,which represented 6.70-fold and 2.43-fold increase compared with those before optimization.[Conclusion] The spores concentration of biocontrol agent was improved using two-step control strategy,which provided the basis for biopesticide production in large scale. 展开更多
关键词 Bacillus subtilis Biocontrol bacteria SPORULATION Two-step control strategy FERMENTATION
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生防枯草芽孢杆菌B579补料分批发酵工艺优化 被引量:5
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作者 贾钧辉 郑宇 +3 位作者 杨青娟 张艳春 申雁冰 王敏 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第1期35-39,共5页
本论文对生防枯草芽孢杆菌B579补料分批发酵工艺进行了优化,提高了菌体浓度和最终芽孢浓度,为生防菌剂的大规模生产奠定了基础。为获得较高的最终芽孢浓度,分别优化了葡萄糖补加时机、浓度控制范围以及发酵过程pH。利用7 L发酵罐,当葡... 本论文对生防枯草芽孢杆菌B579补料分批发酵工艺进行了优化,提高了菌体浓度和最终芽孢浓度,为生防菌剂的大规模生产奠定了基础。为获得较高的最终芽孢浓度,分别优化了葡萄糖补加时机、浓度控制范围以及发酵过程pH。利用7 L发酵罐,当葡萄糖浓度降至3.0 g/L时开始连续补加葡萄糖至3.0-6.0 g/L,发酵过程控制pH为7.0,培养24 h菌体浓度达到3.9×1010CFU/mL,继续培养至40 h芽孢浓度达到2.8×1010CFU/mL,分别是分批发酵的7.5倍和7倍。发酵过程葡萄糖浓度对菌体生长和芽孢形成有较大影响,过高的葡萄糖浓度会抑制芽孢的生成,发酵过程控制合适的葡萄糖浓度有利于菌体浓度和芽孢浓度的提高。 展开更多
关键词 生防菌 枯草芽孢杆菌 芽孢 补料分批发酵
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巴斯德醋酸杆菌AC2005乙醇脱氢酶基因克隆与蛋白序列分析
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作者 张科平 郑宇 +2 位作者 贾钧辉 骆健美 王敏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期265-267,420,共4页
以具有优良醋酸发酵性能的巴斯德醋酸杆菌AC2005基因组DNA为模板,利用PCR的方法分别克隆了编码乙醇脱氢酶亚基Ⅰ和乙醇脱氢酶亚基Ⅱ的基因adhA和adhB。序列分析表明,adhA与GenBank已报道的序列(accessio nnumber:D13893.1)具有94%的同源... 以具有优良醋酸发酵性能的巴斯德醋酸杆菌AC2005基因组DNA为模板,利用PCR的方法分别克隆了编码乙醇脱氢酶亚基Ⅰ和乙醇脱氢酶亚基Ⅱ的基因adhA和adhB。序列分析表明,adhA与GenBank已报道的序列(accessio nnumber:D13893.1)具有94%的同源性,氨基酸序列同源性达98%;adhB与GenBank已报道的序列(accession number:D13893.1)同源性为93%,氨基酸序列同源性达97%。利用TMHMM 2.0软件,对乙醇脱氢酶跨膜结构进行了分析,发现乙醇脱氢酶亚基Ⅰ和乙醇脱氢酶亚基II均为膜结合蛋白。利用Swiss-Model在线软件模拟了巴斯德醋酸杆菌AC2005乙醇脱氢酶亚基I的三维立体结构。该研究对该酶的结构和功能的进一步分析提供了基础。 展开更多
关键词 巴斯德醋酸杆菌 乙醇脱氢酶 基因克隆 序列分析
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