糖尿病足合并类鼻疽伯克霍尔德菌感染64例临床特征、药敏特点和治疗分析

目的 总结糖尿病足(DF)合并类鼻疽伯克霍尔德菌(BP)感染的临床特征、药敏特点和治疗方法。方法 回顾分析2012年1月至2022年3月海南医学院第二附属医院收治的64例DF合并BP感染病人的临床表现、微生物抗菌药物敏感性及治疗手段。结果 64例DF合并BP感染病人中,60例有发热症状、34例有白细胞升高、均有C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)升高、14例合并肝或脾脓肿、30例出现肝功能不全、20例出现肾功能不全、18例合并感染性休克。64株BP对大多数常见的抗生素敏感性较差,但均对亚胺培南、美罗培南和复方磺胺甲唑敏感。所有病人均使用胰岛素积极控制血糖,大多数静脉应用碳青霉素烯类抗菌素约6周,出院后继续使用复方磺胺甲唑治疗。最终22例治愈,30例好转,8例未愈,4例死亡。死亡病例均合并多器官功能障碍。结论 DF合并BP主要表现为发热、CRP和PCT明显升高、合并肝或脾脓肿和肝肾功能不全,易出现感染性休克。对高度怀疑BP感染病人应多次进行培养,并及早静脉应用碳青霉素烯类抗菌素可能有助于改善预后。

外泌体治疗糖尿病足溃疡方法探索

背景:外泌体(Exosomes),可由多种类型的细胞分泌的多泡内涵体,通过与细胞膜的融合将其中的递质转移到另一细胞,从而实现跨细胞信息传递并调节胞间信号传导,发挥多种生物学功能。外泌体在组织修复中具有优秀的效果。然而外泌体的临床应用也存在着一定的问题,一方面,靶向性不足;另一方面,外泌体外用存在效果不佳,失效的速度快的特点。在此,我们寻找到一种合适的载体对外泌体进行靶向增强以及延长作用时间。本文对我们所使用的研究方法进行简要阐述,以期为相关的研究提供一定的参考及借鉴。

合并原发性血小板增多症糖尿病患者羟基脲治疗中发生糖尿病足溃疡1例分析

目的探讨合并原发性血小板增多症的糖尿病患者羟基脲治疗诱发糖尿病足溃疡的特点,并分析负压封闭引流术联合富血小板凝胶外敷治疗的效果。方法回顾性分析1例经羟基脲治疗原发性血小板增多症后诱发糖尿病足溃疡患者的临床资料及治疗情况。结果患者男性86岁,20年前确诊糖尿病,4年前确诊原发性血小板增多症、予羟基脲片剂口服治疗,3年前开始有四肢末梢麻木感,并伴反复左踝部破溃。入院时左侧踝关节外侧可见约5 cm×5 cm伤口,有少许分泌物,局部红肿及触痛明显,双下肢重度水肿,下肢活动受限,双侧足背动搏动减弱,下肢触觉、痛温觉减退,无肌肉萎缩。踝部腱反射检查示踝反射减退。双足大脚趾前端震动感觉检查示中度深感觉障碍,发生神经性溃疡中度风险。踝关节正侧位X线检查示,左踝关节退行性变,周围软组织肿胀、积气。入院经常规降糖、抗感染、营养神经、抗血小板聚集、调血脂、降压、左踝部局部清创、伤口换药及止痛治疗后,血糖控制尚可,左踝部溃疡未见明显好转。考虑为长期口服羟基脲引起的糖尿病足溃疡,予停用羟基脲,改用芦可替尼治疗原发性血小板增多症,给予负压封闭引流术联合富血小板凝胶外敷治疗。治疗15 d后,创面表现为100%红色组织,有新鲜肉芽组织覆盖,溃疡范围较前显著缩小。患者出院继续门诊伤口换药治疗,1个月余溃疡完全愈合。结论服用羟基脲有可能导致糖尿病患者出现糖尿病足并发症,对于常规治疗溃疡愈合不佳的糖尿病足溃疡合并血液系统疾病患者,应考虑羟基脲所致;停用羟基脲后,给予负压封闭引流术联合富血小板凝胶外敷治疗溃疡效果较好,可显著缩短伤口愈合时间。

合并骨质疏松且无低血镁的Gitelman综合征1例

目的探讨Gitelman综合征(GS)合并重度骨质疏松的临床特点、诊断和治疗,加深对该病的认识。方法2017年2月海南医学院第二附属医院内分泌科住院的GS合并重度骨质疏松且无低血镁1例,复习文献,总结该病特点。结果该病主要表现为严重低钾血症、多处骨关节疼痛,易误诊。予积极补钾、抗醛固酮、抗骨质疏松治疗,有效缓解了病情。结论GS虽然尿钙低,无低血镁,但也可以合并骨质疏松。因此,对存在多关节疼痛的GS病人,应及时进行双能X线骨密度检查早期筛查骨质疏松。对于此类病人,积极给予补钾、抗醛固酮及抗骨质疏松治疗可提高疗效。

条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠构建及鉴定

目的构建并鉴定条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为研究DEPTOR基因在糖尿病发生机制的研究提供动物模型。方法将引进的条件性胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶小鼠与DEPTOR^(loxp/loxp)小鼠进行杂交繁殖,并对子代进行基因型鉴定,获得基因型为DEPTOR^(loxp/-)Cre^(+/-)的小鼠;再让DEPTOR^(loxp/-)Cre^(+/-)的小鼠与DEPTOR^(loxp/loxp)小鼠杂交获得DEPTOR^(loxp/loxp)Cre^(+/-)小鼠;基因型为DEPTOR^(loxp/loxp)Cre^(+/-)的小鼠即为本实验所需要构建模型小鼠。3周龄时通过PCR法鉴定小鼠的基因型;8周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导Cre重组酶表达后,免疫荧光验证DEPTOR基因敲除效果。结果从引进这两种小鼠开始繁殖10个月,共获得基因型为DEPTOR^(loxp/loxp)Cre^(+/-)的小鼠10只,PCR结果证实小鼠的基因型符合DEPTOR^(loxp/loxp)Cre^(+/-)。免疫荧光结果提示敲除效果明显。结论利用Cre/loxp系统,本研究成功构建并鉴定了条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为在动物水平研究DEPTOR基因在糖尿病发病机制中的作用提供研究平台。

原发系膜增生性肾小球肾炎合并肾小管酸中毒一例

肾小管酸中毒是一种肾小管-间质疾病,是临床上少见的低钾血症的原因之一。目前原发系膜增生性肾小球肾炎合并肾小管酸中毒的相关报道较少。该文报道1例以反复多尿、四肢乏力10年,再发1 d为主诉的34岁男性患者。该患者10年前出现夜尿多、低钾血症,尿蛋白、血白蛋白、估算肾小球滤过率均无异常。5年前出现下肢水肿、尿蛋白阳性,肾活组织检查示原发系膜增生性肾小球肾炎。1 d前再次出现下肢水肿、低钾血症,尿酸化功能试验提示肾小管酸中毒,予补钾、利尿、应用激素等治疗,有效缓解了病情。该例提示原发系膜增生性肾小球肾炎可合并肾小管酸中毒,应注意避免漏诊,在处理肾小管酸中毒的同时及时给予激素治疗有较好的效果。

lncRNA ZFAS1吸附miR-34b-5p抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)锌指结构反义转录本(ZFAS)1、miR-34b-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响。方法将HK-2细胞分为对照组(Con,5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG,25 mmol/L葡萄糖)、HG+pcDNA组、HG+pcDNA-ZFAS1组、HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-34b-5p组、HG+pcDNA-ZFAS1+miR-NC组、HG+pcDNA-ZFAS1+miR-34b-5p组。试剂盒检测白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR(RT-qPCR)检测ZFAS1和miR-34b-5p表达水平。双荧光素酶报告实验确定ZFAS1和miR-34b-5p的靶向关系。结果高糖诱导后HK-2细胞凋亡率、培养液中IL-6和TNF-α水平显著升高,ZFAS1表达显著降低,miR-34b-5p表达显著升高(P<0.05)。过表达ZFAS1后,高糖诱导的HK-2细胞培养液中IL-6和TNF-α水平显著降低,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。抑制miR-34b-5p表达后,高糖诱导的HK-2细胞培养液中IL-6和TNF-α水平显著降低,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。ZFAS1靶向负性调控miR-34b-5p表达。过表达miR-34b-5p能够降低ZFAS1过表达对高糖诱导的HK-2细胞损伤的影响(P<0.05)。结论lncRNA ZFAS1通过吸附miR-34b-5p可减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤。

利用Cre/lox P系统构建胰岛β细胞特异性敲除PDHA1基因的小鼠模型

背景:研究表明,2型糖尿病啮齿类动物模型及人体的丙酮酸脱氢酶复合体表达量降低,PDHA1基因缺陷也是导致丙酮酸脱氢酶复合体酶活性改变最常见的原因。目的:构建并鉴定胰岛β细胞特异性敲除PDHA1基因小鼠,为后续探究PDHA1基因在糖尿病发病机制方面作用提供模型基础。方法:实验方案经南方医科大学伦理委员会批准。利用Cre/lox P系统理论,将PDHA1^loxp/loxp小鼠与胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的小鼠进行数代杂交,3-4周龄小鼠通过PCR法鉴定筛选基因型,子2代中基因型为PDHA1^loxp/loxpCre^+/-小鼠即为实验所需要构建的模型小鼠。取4周龄PDHA1^flox/floxCre^+/-小鼠(βKO小鼠组)与Cre^+/-小鼠(对照组)各5只,给予相同的水和饲料,待8周龄时连续7d注射腹腔注射他莫昔芬50mg/kg诱导PDHA1基因敲除,观察3周后腹腔注射麻醉,取胰腺组织、脂肪组织、肝脏组织。采用q PCR法、Western Blot法、免疫组织化学法鉴定PDHA1基因敲除效果,观察小鼠表型。结果与结论:(1)PCR基因扩增筛选出基因型为PDHA1^loxp/loxpCre^+/-小鼠;(2)q PCR法检验小鼠胰腺、脂肪、肝脏组织,证实敲除效果具有组织特异性,胰岛中βKO组小鼠PDHA1 mRNA的相对表达较对照组明显下降;(3)Western Blot检测及免疫组织化学法观察显示,βKO组小鼠PDHA1蛋白表达较对照组小鼠明显降低,证实敲除PDHA1基因效果明显;(4)结果说明,利用Cre/loxP系统成功构建胰岛β细胞特异性敲除PDHA1基因的小鼠模型,为动物水平上探究糖尿病发病机制提供新的靶点。

中学语文朗诵教学渗透中华优秀传统文化的策略

本文从朗诵的取材、朗诵的指导、朗读的形式等方面,论述在中学语文朗诵教学中渗透中华优秀传统文化的策略:立足教材,朗诵中华优秀传统文化经典篇章;深入文本及外延,领悟中华优秀传统文化的核心内涵;丰富朗诵手段,感受中华优秀传统文化的多层次魅力。

沉默DEPTOR表达促进胰岛细胞释放胰岛素

背景:mTOR复合物是调控胰岛β细胞质量与功能的关键蛋白,Deptor是复合物中的共有组分,Deptor的丢失是否会影响胰岛β细胞的胰岛素分泌功能,目前尚缺乏相关研究。目的:利用si RNA干扰技术沉默小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞DEPTOR基因的表达,探讨其对胰岛素瘤细胞分泌功能的影响及背后的机制。方法:设计合成3对针对DEPTOR基因的si RNA序列,利用脂质体法将si RNA转染至NIT-1细胞。实验组设为6组:(1)空白转染组(NIT-1细胞,转染复合液仅加Lipofectamin);(2)阴性对照转染组(NC-FAM);(3)阳性对照转染组(GAPDH);(4)si RNA deptor 1组(脂质体介导的转染复合+si RNA deptor385);(5)si RNA deptor 2组(脂质体介导的转染复合+si RNA deptor766);(6)si RNA deptor 3组(脂质体介导的转染复合+si RNA deptor1275)。荧光显微镜下观察转染效率;QPCR检测DEPTOR m RNA的相对表达量;ELISA胰岛素试剂盒检测NIT-1细胞胰岛素分泌情况;Western blot检测DEPTOR下游关键蛋白的表达。结果与结论:(1)在荧光显微镜下观察,si RNA能有效转入到NIT-1细胞内,呈绿色点状荧光;(2)PCR检测干扰后DEPTOR m RNA的相对表达量,发现设计合成3对si RNA序列中有两对si RNA序列(si DEPTOR385and si DEPTOR766)对DEPTOR基因有干扰效果,干扰效果与阴性对照差异有显著性意义(P<0.05);(3)ELISA胰岛素测定结果显示,在NIT-1细胞中沉默DEPTOR后,有效转染组细胞的胰岛素分泌显著升高(P<0.05);(4)Western-blot检测结果显示,Deptor下游关键蛋白S6、4EBP-1磷酸化明显增加,AKT磷酸化略有减少;(5)结果说明,利用RNAi技术在NIT-1细胞上可以有效地沉默DEPTOR基因的表达,并促进细胞胰岛素的分泌,该现象可能与mTORC1通路的激活相关。

PD-1抗体调节糖尿病大鼠CD8^(+)T细胞和Treg平衡促进糖尿病足溃疡愈合的疗效研究

目的:探讨PD-1抗体治疗糖尿病大鼠足溃疡的疗效及其作用机制。方法:将30只6~8周龄健康Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只,三组大鼠足部人为造成溃疡创口。采用流式细胞术计数三组大鼠脾脏中CD8^(+)T细胞和调节性T细胞;Image J对创口照片进行分析计算伤口愈合率;HE染色和组织病理学分析溃疡创口处皮肤愈合情况;ELISA测定大鼠足部溃疡创口组织中TNF-α和IL-1β的水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠CD8^(+)T细胞计数明显下调,Treg细胞计数明显升高(P<0.05);模型组大鼠足部溃疡创口愈合不佳,没有形成完整的新生表皮组织和肉芽组织,未见胶原沉积;模型组大鼠创口处组织中TNF-α和IL-1β的水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,治疗组大鼠CD8^(+)T细胞计数明显回升,Treg细胞计数明显回落(P<0.05);治疗组大鼠足部溃疡创口愈合良好,有较为完整的新生表皮组织、肉芽组织和一定的胶原沉积;治疗组大鼠创口处组织中TNF-α和IL-1β的水平明显降低(P<0.05)。结论:应用人源化PD-1抗体治疗糖尿病大鼠足溃疡具有明显的疗效。

糖尿病足患者网膜素-1和血管内皮生长因子水平与局部高压氧治疗后溃疡创面修复效果的关系

目的 观察糖尿病足患者网膜素-1、血管内皮生长因子(VEGF)水平变化,探讨其与局部高压氧治疗后溃疡创面修复效果的关系。方法 2021年10月—2022年9月海南医学院第二附属医院诊治糖尿病足患者120例,均在胰岛素强化治疗基础上采用局部高压氧治疗足部溃疡创面。治疗2周评价溃疡创面修复效果,计算治愈率,并将患者分为治愈组和未治愈组。比较2组性别、年龄、合并症及高压氧治疗前白细胞计数、血红蛋白、血脂、肝功能、血肌酐、血糖、C反应蛋白水平;分别于治疗前及治疗2周后检测网膜素-1、VEGF水平;绘制ROC曲线,评估治疗前网膜素-1、VEGF预测局部高压氧治疗后糖尿病足创面修复效果的效能;多因素logistic回归分析局部高压氧治疗后糖尿病足创面治愈的影响因素;应用限制性立方样条模型分析治疗前网膜素-1、VEGF与糖尿病足创面未治愈率是否存在非线性相关性。结果 (1)治疗2周治愈25例,显效46例,有效26例,无效23例,治愈率为20.83%,未治愈率为79.17%。(2)治愈组糖尿病病程、糖尿病足病程均短于未治愈组(P<0.05),Wagner 4级比率、空腹血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、总胆固醇、C反应蛋白水平均低于未治愈组(P<0.05),年龄,体质量指数,男性及有吸烟、饮酒史比率,合并高血压、冠心病、脑卒中比率,治疗前白细胞计数、血红蛋白、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、肝功能、血肌酐水平与未治愈组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)治愈组、未治愈组治疗2周网膜素-1水平[(151.45±19.76)、(130.76±21.59)μg/L]高于治疗前[(139.34±22.34)、(121.72±20.98)μg/L](t=1.886,P=0.048;t=2.641,P=0.005)、VEGF水平[(90.68±18.34)、(68.32±17.08)ng/L]高于治疗前[(72.06±17.39)、(53.06±16.81)ng/L](t=3.325,P=0.001;t=5.987,P<0.001);治愈组治疗前及治疗2周网膜素-1水平高于未治愈组(t=3.687,P<0.001;t=4.336,P<0.001)、VEGF水平高于未治愈组(t=4.993,P<0.001;t=5.736,P<0.001)。(4)治疗前网膜素-1、VEGF分别以132.51μg/L、58.46 ng/L为最佳截断值,单独及联合预测局部高压氧治疗后糖尿病足创面治愈的AUC分别为0.753(95%CI:0.666~0.827,P<0.001)、0.773(95%CI:0.687~0.844,P<0.001),0.852(95%CI:0.764~0.902,P<0.001),灵敏度分别为69.47%、67.37%、78.95%,特异度分别为80.00%、76.00%、76.00%;二者联合预测局部高压氧治疗后糖尿病足创面治愈的AUC大于单独评估(Z=2.061,P=0.041;Z=2.009,P=0.044)。(5)治疗前网膜素-1(OR=0.412,95%CI:0.274~0.619,P=0.009)、VEGF(OR=0.360,95%CI:0.230~0.565,P<0.001)是局部高压氧治疗后糖尿病足创面治愈的影响因素。(6)治疗前网膜素-1、VEGF与未治愈率呈非线性剂量-反应关系(χ^(2)=7.300,P=0.027;χ^(2)=14.900,P<0.001);网膜素-1≤120.00μg/L时与未治愈率呈负相关(β=-0.650,95%CI:0.298~0.915,P=0.022),VEGF≤55.00 ng/L时与未治愈率呈负相关(β=-0.549,95%CI:0.187~0.641,P=0.031)。结论 网膜素-1、VEGF水平增高可促进局部高压氧治疗对糖尿病足溃疡创面的修复,网膜素-1≤120.00μg/L、VEGF≤55.00 ng/L者应用局部高压氧治疗不易达到预期效果。

糖尿病足患者血清网膜素-1和血管内皮生长因子水平与Wagner分级的相关性

目的 观察糖尿病足患者血清网膜素-1(omentin-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平变化,探讨其与糖尿病足Wagner分级的相关性。方法 糖尿病足患者120例为糖尿病足组,其中Wagner分级2级48例,3级37例,4级35例;2型糖尿病患者120例为2型糖尿病组,同期体检健康者120例为对照组,采用ELISA法检测3组血清omentin-1、VEGF水平,并进行比较。比较不同Wagner分级糖尿病足患者血清omentin-1、VEGF水平及糖尿病病程、糖尿病足病程和空腹血糖、糖化血红蛋白等实验室指标,采用Spearman相关法分析糖尿病足患者血清omentin-1、VEGF水平与Wagner分级的相关性,采用多因素logistic回归分析糖尿病足患者Wagner分级的影响因素。结果 糖尿病足组血清omentin-1[(130.46±21.52)μg/L]、VEGF[(63.27±18.63)ng/L]水平均低于2型糖尿病组[(160.32±20.45)μg/L、(390.42±46.21)ng/L]、对照组[(198.37±25.64)μg/L、(102.35±25.30)ng/L](P<0.05),2型糖尿病组血清omentin-1水平低于对照组(P<0.05),VEGF水平高于对照组(P<0.05)。Wagner分级2级、3级、4级糖尿病足患者血清omentin-1、VEGF水平均依次降低(P<0.05),糖尿病病程、糖尿病足病程均依次增长(P<0.05),糖尿病周围神经病变比率及空腹血糖、糖化血红蛋白、白细胞计数、三酰甘油、C反应蛋白、降钙素原水平均依次升高(P<0.05)。糖尿病足患者血清omentin-1、VEGF水平与Wagner分级均呈负相关(r=-0.472,P<0.001;r=-0.442,P<0.001)。血清omentin-1(OR=0.377,95%CI:0.228~0.622,P<0.001)、VEGF(OR=0.353,95%CI:0.196~0.637,P<0.001)是糖尿病足患者Wagner分级的影响因素。结论 糖尿病足患者血清omentin-1、VEGF水平降低,Wagner分级越高,血清omentin-1、VEGF水平越低;omentin-1、VEGF可能成为评估糖尿病足患者病情严重程度的指标。

二十四节气在高中语文课堂的多学科融合

感受节气,体验传统的节气文化二十四节气在古代是劳动人民耕作的主要依据,蕴含了人们对于自然事物的独特感知,是人和自然和谐相处的一种象征。二十四个节气轮回流转,有的事物正在出现,有的事物开始凋零,这也是生命美的一种体现。要想让学生充分了解到节气的相关知识,感受传统文化的魅力之处,教师就要有目的、有意识地将这一知识点融入语文课堂教学中。

微课的教学价值及共享

共享是实现微课教学价值的一条有效途径。微课的共享应该是全方位的,从制作素材的共享到制作方法、经验、制作软件以及微课成品的共享,都应纳入到微课的共享研究之中。