参苏饮含药血清对小鼠巨噬细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的:研究参苏饮含药血清对脂多糖(LPS)和聚肌胞(POLY I∶C)刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264.7表达Toll样受体3(TLR3),Toll样受体4(TLR4)及其下游信号转导通路髓样分化蛋白(MyD88),肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6),Toll样受体相关分子(TRAM)和Toll样受体相关的干扰素活化子(TR IF)mRNA的影响。方法:用LPS(5μg.mL-1),POLY I∶C(50μg.mL-1)分别刺激RAW 264.7细胞株,同时给予参苏饮含药血清(11.2,6.7,4.0,2.4,1.5 g.kg-1.U-1)进行干预,ELISA法测定细胞培养上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-β(IFN-β)的含量。先计算参苏饮IC50,然后再以IC50(11,5,2.5,4.9 g.kg-1.U-1)做为药物剂量进行干预,荧光定量PCR方法测定TLR3,TLR4和下游通路相关指标mRNA的表达,分析评价参苏饮含药血清清热解毒药效学作用的现代药理学基础。结果:参苏饮含药血清对POLY I∶C刺激的TLR3及其下游通路的MyD88和TRAM有抑制作用,对LPS刺激的TLR4的病理性升高无抑制作用,但对TLR4下游通路TRAM和TR IF mRNA的表达有明显的抑制作用。以上综合作用引起炎症因子TNF-α和IFN-β的降低。结论:参苏饮清热解毒的药效学作用可能与抑制TLR3,MyD88,TRAM和TR IF等细胞因子的表达有关。

桂枝汤含药血清对小鼠巨噬细胞Toll样受体3、4型及其下游信号转导通路元件的影响

目的:研究桂枝汤含药血清对LPS和Poly(I:C)刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7的Toll样受体(TLR)及其下游主要信号转导通路元件的影响,从mRNA和蛋白水平探讨桂枝汤含药血清防治感染性疾病的免疫学基础。方法:用LPS或Poly(I:C)分别刺激RAW264.7细胞,加桂枝汤含药血清干预24h后,取细胞上清液测定炎症因子TNF-α和IFN-β的含量;荧光定量PCR方法测定TLR3、TLR4和下游信号转导通路元件MyD88、TRAF-6、TRAM和TRIF mRNA的表达;Western blotting法分析TLR3、TLR4蛋白的表达;细胞免疫荧光法分析MyD88、TRAF-6蛋白表达的强弱。结果:桂枝汤含药血清可显著降低LPS刺激诱导的MyD88、TRAM和TRIF的高表达;Poly(I:C)刺激后,桂枝汤含药血清显著降低TLR3、MyD88和TRAM的高表达。结论:桂枝汤能直接作用于TLR3,抑制其高表达,阻断TLR3胞内信号转导的MyD88依赖和非依赖两条途径,抑制相关基因表达产物TNF-α、IFN-β过度分泌,具有TLR3拮抗剂样作用。桂枝汤也可直接作用于接头蛋白MyD88、TRAM和TRIF,影响TLR4信号转导的MyD88依赖和非依赖性途径,抑制TNF-α、IFN-β的过度分泌。

人参白虎汤治疗糖尿病药效及其机理研究

目的探讨人参白虎汤对实验性高血糖大鼠血糖的影响及其可能机制。方法四氧嘧啶尾静脉注射复制高血糖大鼠模型,以血糖、糖化血红蛋白、红细胞内山梨醇含量和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MAD)为主要指标,观察人参白虎汤对糖尿病大鼠血糖及糖代谢的影响。结果人参白虎汤可明显降低大鼠血糖值(P<0.05或P<0.01),降低糖化血红蛋白与红细胞山梨醇含量(P<0.05或P<0.01),升高糖尿病大鼠血清SOD活性,降低MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论人参白虎汤具有较好的降糖和抗氧化作用,其降糖机理可能与其抗氧自由基、保护胰岛β细胞等作用有关。

黄连解毒汤含药血清对Toll样受体34、型及其下游信号转导通路的影响

目的:研究黄连解毒汤含药血清对细菌脂多糖和双链RNA病毒核酸类似物聚肌胞刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264.7 Toll样受体(TLR)及其下游主要信号转导通路的影响。方法:用脂多糖、聚肌胞分别刺激RAW264.7细胞,同时给予黄连解毒汤含药血清进行干预,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α和IFN-β的含量,荧光定量PCR方法测定TLR3、TLR4和下游信号转导通路髓样分化因子88(MyD88),肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6),TOLL样受体相关分子(TRAM)和TOLL样受体相关的干扰素活化子(TRIF)mRNA的表达,Western blotting法分析TLR3、TLR4蛋白的表达,同时用细胞免疫荧光法分析MyD88,TRAF-6蛋白表达的强弱,在mRNA水平和蛋白水平探讨黄连解毒汤对Toll样受体的作用机理。结果:黄连解毒汤含药血清显著降低LPS诱导的TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM和TRlF的高表达(与单纯LPS刺激组比较,P<0.05或P<0.01);Poly(I:C)刺激后,黄连解毒汤含药血清仅对TRAM利TRIF的表达有明显的降低作用(P<0.01)。结论:黄连解毒汤能阻断TLR4高表达,阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖和非依赖两条途径(以阻断非依赖途径为主),抑制相关基因表达产物TNF-α、IFN-β过度分泌,具有TLR4拮抗剂样作用。黄连解毒汤也可直接作用于接头蛋白TRAM和TRIF,影响TLR3信号转录的MyD88非依赖性途径,抑制IFN-β的过度分泌。

冰片对大鼠脑微血管内皮细胞ICAM-1表达量的影响

目的 :研究冰片对大鼠脑微血管内皮细胞ICAM -1表达量的影响。方法 :采用自由落体撞击硬脑膜致伤方法制成大鼠脑挫裂伤模型 ,将大鼠伤侧脑皮质制成石蜡切片 ,运用免疫组化学染色技术观察空白对照组 (C组 :只灌服石蜡油 )、冰片组 (B组 :灌服等量冰片石蜡油 )、脑外伤组 (M组 :脑挫裂伤组 )和脑外伤加冰片组 (M +B组 :脑挫裂伤大鼠灌服冰片石蜡油 )大鼠脑皮质微血管内皮细胞 (EC)膜表面细胞间粘附分子 -1 (ICAM -1 )量的表达 ,并进行半定量分析。结果 :C组EC无表达或有少量表达 ,服用冰片不能使I CAM -1表达增强 ,脑外伤后ICAM -1表达有明显增强 (P <0 .0 0 1 ) ,及脑外伤大鼠服用冰片可使ICAM -1表达明显减弱。结论 :证明冰片促血脑屏障 (BBB)开放与ICAM -1无关 。

人参皂苷Rg1对人胃癌BGC-823的抑制作用研究

目的:研究人参皂苷Rg1对体外培养的人胃癌细胞株BGC-823活性、增殖、凋亡蛋白Bax-2c、aspase-3及形态学影响,并探讨其可能机制。方法:取对数生长的细胞,加入不同浓度人参皂苷Rg1加以干预,生长曲线法、MTT法、蛋白质含量分别观察人参皂苷Rg1对BGC-823细胞活性、增殖的影响,荧光定量PCR法测定凋亡蛋白Bax-2c、aspase-3 mRNA含量变化,形态学方法观察人参皂苷Rg1促BGC-823细胞凋亡作用。结果:人参皂苷Rg1 40、60、80 mg/L不同剂量均不同程度抑制细胞的增殖,且有明显的量-效、时-效关系;人参皂苷Rg1对BGC-823细胞具有明显的细胞毒作用,其IC50为29.56 mg/L;人参皂苷Rg1可明显减少肿瘤细胞内蛋白含量,提高细胞内Bax-2、caspase-3 mRNA含量,提高经人参皂苷Rg1作用后,凋亡细胞皱缩,胞浆稀少或缺乏,淡红色;染色质凝聚,成深紫色;细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒。结论:人参皂苷Rg1可明显抑制细胞增殖,降低细胞活性,表现出较好的抗肿瘤活性,其作用机制可能与抑制肿瘤细胞蛋白质合成、促进BGC-823细胞凋亡有关。

桂枝汤对小鼠巨噬细胞株分泌炎症因子的影响

目的:研究桂枝汤对脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子的影响。方法:用脂多糖刺激RAW264.7细胞株,同时给予桂枝汤含药血清进行干预,24h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子NO、TNFα-和IFNβ-的含量,分析评价桂枝汤含药血清对上述炎症因子含量的影响。结果:桂枝汤含药血清可剂量依赖性地降低NO、TNFα-和IFN-β的病理性增加。结论:桂枝汤可能通过降低NO、TNFα-和IFNβ-炎症因子等环节达到其抗炎作用。

2型糖尿病动物模型的研究进展

目的综述近年来2型糖尿病动物模型的几种建立方法。方法主要对2型糖尿病动物模型建立的方法与技术进行综述和评价。结果2型糖尿病动物模型主要可分为自发性2型糖尿病动物模型、实验性2型糖尿病动物模型、基因敲除复制2型糖尿病模型和胰岛素抵抗的细胞模型等四种。结论上述四种动物模型的建立方法各有优缺点,实验性2型糖尿病动物模型价格低廉,可操作性强,并且在一定程度上符合人类糖尿病形成的病理过程,成为目前研究2型糖尿病的最主要动物模型。

冰片促血脑屏障开放与一氧化氮含量改变的关系初探

目的 :探讨内皮细胞型一氧化氮合成酶 (e NOS)与冰片促血脑屏障 (BBB)开放作用的关系。方法 :采用链菌素亲生物素 -过氧化氢酶法 (S- P法 )染色和抗 e NOS抗体的免疫组化方法 ,观察正常与脑外伤情况下服用冰片后大鼠脑微血管内皮细胞 (EC)中 e NOS表达量的变化。结果 :脑外伤时 ,因 EC受损 ,e NOS表达减弱 ,冰片可增加生理、病理状态下大鼠脑微血管内皮细胞中 e NOS的表达量。结论 :NO与冰片促

Toll样受体4的研究及现状

Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体,在天然免疫反应中具有重要的作用。TLR4细菌脂多糖(li-popolysaccharide,LPS)是介导信号跨膜转导的主要受体,对于革兰氏阴性菌的感染性炎症至关重要。近年来,有关TLR4介导的信号转导及其TLR4与疾病的关系受到人们的关注。本文就TLR4的信号转导、TLR4与LPS的关系进行了综述,并介绍了TLR4与相关疾病之间的关系,对TLR4的研究意义进行了肯定。

棕榈酸对C2C12细胞Toll样受体及其炎症因子表达的影响

目的:探讨棕榈酸(PA)刺激对C2C12细胞Toll样受体(TLRs)及其炎症因子表达的影响,初步分析TLRs介导的免疫性炎症与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:不同浓度PA与C2C12细胞体外共培养16h,测定细胞葡萄糖消耗量以确定IR细胞模型成型情况。荧光定量PCR法测定IR细胞TLR1～5mRNA表达情况,ELISA法测定细胞培养液中炎症因子TNF-α、IFN-β的含量。结果:PA刺激能明显降低C2C12细胞的葡萄糖消耗量,表现为IR。PA并可诱导C2C12细胞TLR2、TLR4 mRNA高表达,使TNF-α、IFN-β分泌增加,而对TLR1、TLR3、TLR5mR-NA表达无明显影响。结论:TLR2、TLR4信号转导通路及其启动的炎症反应可能参与了PA诱导IR形成的病理过程。

“暴露-反应-机制”三联研究模式学术思想及其中医药领域应用

以药效为核心的中药有效物质基础与机制研究是中药现代化研究的重点问题,药代动力学、药理学、分子生物学等不同学科交叉研究的不足使该问题的解决受到一定的限制,中药化学、药理学研究的孤立成果不利于中药及其复方的现代化系统研究进程。本文在前期工作基础上,从学术思想创新及科研方法实践角度,提出了"暴露-反应-机制"三联研究模式,并就其形成的学术背景、科学概念及研究内容等方面进行了论述,可望为中药的效/毒作用物质基础、作用机制研究提供创新性学术思想,为中医药现代化研究提供创新性研究方法。

蒺藜提取物治疗2型糖尿病药效及其机制研究

目的:观察蒺藜提取物(NO.JL201)对自发性2型糖尿病模型KKAy小鼠空腹血糖(FPG)、血胰岛素(Ins)、TNF-α、IFN-β含量及其胰岛细胞TLR3、TLR4mRNA含量的影响,初步探讨其可能降糖机制。方法:KKAy小鼠随机分为模型组、JL201大(20mg/kg BW)、中(10mg/kg BW)、小(5mg/kg BW)剂量组和阳性药二甲双胍组(400mg/kg BW)。每周测定体质量,食、水量和FPG。给药4周后取血,测定小鼠FPG和Ins,计算小鼠Ins敏感性,Real time-PCR法测定胰岛细胞TLR2、TLR4 mRNA含量。结果:JL201不同剂量不同程度地减少了小鼠的进食、饮水量,明显降低KKAy小鼠的FPG(P<0.05或P<0.01)、降低血清Ins含量(P<0.05或P<0.01),明显升高KKAy小鼠胰岛素敏感性(P<0.05),减少TNF-α、IFN-β的血中分泌量。JL201同时可降低胰岛细胞TLR2、TLR4mRNA含量。结论:JL201有较好的降血糖、增强胰岛素敏感性等作用,并能明显改善多饮、多食的临床症状,其作用可能与降低胰岛细胞TLR2、TLR4mRNA含量、抑制炎症有关。

桑叶降糖有效部位及其作用机制的研究进展

桑叶为桑科植物桑（Morusalba L．）的干燥叶。《本草纲目》记载：“桑叶乃手足阳明之药，汁煎代茗，能止消渴，明目长发”。桑叶是我国传统中药，含有多种功能性成分，如矿物质、维生素、食物纤维、氨基酸、植物甾醇、黄酮类、生物碱类物质、多糖等。研究表明，桑叶的多糖、黄酮、生物碱类物质均有不同程度的降血糖作用。MITCHELI等在临床上用桑叶提取物治疗糖尿病取得一定疗效，证明桑叶提取物临床上降低血糖、稳定血糖效果显著。

钟声蛋白样受体的研究及现状

目的:整理钟声蛋白样受体(Toll样受体,TLRs)研究资料,为中药抗炎免疫药物的作用靶点研究提供思路与方法。资料来源:主要搜集近10年来国内外学者公开发表的对Toll样受体的研究成果,对其进行整理与分析。资料选择:综述Toll样受体的发现、分布、结构特征,尤其是其效应细胞配体、信号转导途径及功能研究资料,综合分析其研究现状。结果:目前的研究主要集中在对Toll样受体信号转导通路的基础研究上,而对药物的研究却极为匮乏。结论:对Toll样受体信号转导通路的进一步研究可能会为某些疾病的防治提供科学依据,同时为中药抗炎免疫药物作用靶点的研究提供新的思路与方法。

内蒙古元宝山煤矿环境地质问题及防治措施

元宝山煤矿资源储量大，开采历史长，矿山地质环境问题十分突出，已严重影响了当地人民群众居住环境和工农业生产，成为制约当地经济发展的重要问题。按照划分防治区、确定防治工作重点等方法，对不同的矿山地质环境采取不同的防治措施，可以有效改变当前突出的矿山地质环境问题。

关于农民地位与脱贫问题的思考

我国目前存在的城乡二元经济结构,使城乡之间的差异和矛盾日益凸现。对农民的歧视,使农民不可避免地降为"二等公民",这是导致农民贫困的重要原因。因此,要使农民尽快摆脱贫困,增加收入,其根本措施就是消除对农民的歧视,提高农民的社会地位。当前,迫切需要解决的是消除对农民在金融、公用基础设施建设、社会保障、户籍、教育、就业等领域的歧视,给农民以平等的国民待遇。

环境纠纷行政处理的现状与制度设想

环境纠纷的存在本身并不是问题,有问题的是既有的纠纷处理体系是否有化解纠纷的能力。随着环境污染和生态破坏所导致的环境纠纷日益严重,环境纠纷行政处理制度作为解决环境民事纠纷的手段以其独特的优势,为世界各国所重视。与环保先进国家相比,我国环境纠纷行政处理制度还比较落后,使得我国环境纠纷的处理格外困难。因此,借鉴环保先进国家的经验,检视我国环境纠纷行政处理的现状,厘清其存在的不足与缺陷,探讨构建环境纠纷行政处理制度的合理性,并结合我国具体国情对这一制度的构建进行理论探索,以期这一制度能高效、公正地运行,就成为目前解决环境纠纷,促进环保问题解决的极为迫切的重大课题。

内蒙古自治区地质档案资料管理与服务信息化实践

本文介绍了内蒙古自治区地质档案资料管理与服务系统的开发、建设、管理和应用。该系统包括资料管理、接待管理、借阅服务、借阅办理、系统管理五个子系统,建成运行以来,全面提升了内蒙古信息院地质资料的管理水平,经济效益和社会效益非常明显,有力地提升了地质档案馆的管理水平。