初诊超高龄多发性骨髓瘤患者硼替佐米基础方案治疗的生存预后分析

背景多发性骨髓瘤(MM)是一种高度异质性疾病,超高龄老年MM患者是一类特殊群体,其治疗决策和一般评价缺乏一定的循证医学依据,在衰弱评估方面也有一定争议。目的分析以硼替佐米为基础方案治疗初诊超高龄MM患者的一般临床特征和生存预后的影响因素,同时评价超高龄MM患者一般状况的最佳评估模式。方法回顾性分析2013年11月—2023年1月于首都医科大学附属北京朝阳医院石景山院区收治的29例初诊超高龄MM患者病例资料,通过首都医科大学附属北京朝阳医院病案系统进行生存随访,随访截至2023-04-01,本研究结局终点为总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)。根据治疗方案将患者分为两药治疗组(n=18)和三药治疗组(n=11),比较两组患者临床和遗传学特征。采用老年评分系统(GA)评分、英国骨髓瘤研究联盟风险状况(MRP)评分和梅奥(Mayo)评分评估患者的衰弱状态,并进行疗效评价。采用Kaplan-Meier法绘制MM患者OS和PFS的生存曲线,不同影响因素的生存曲线比较采用Log-rank检验,采用多因素Cox比例风险回归分析探讨MM患者OS和PFS的影响因素。结果随访中位PFS为8.70(1.90~43.87)个月,中位OS为17.23(2.00~72.83)个月。至末次随访,共21例(72.41%)患者出现疾病进展(PD)或复发,12例(41.38%)患者死亡;一线治疗客观缓解率(ORR)为82.76%(24/29),部分缓解(PR)率为51.72%(15/29),非常好的部分缓解(VGPR)率为24.14%(7/29),完全缓解(CR)率为6.90%(2/29)。两组初诊超高龄MM患者CR率、VGPR率、PR率、ORR比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。多因素Cox比例风险回归分析结果显示,MRP衰弱(HR=0.213,95%CI=0.049~0.924,P=0.039)、血清校正钙升高(HR=0.153,95%CI=0.041~0.570,P=0.005)和维持治疗(HR=4.301,95%CI=1.219~15.169,P=0.023)是初诊超高龄MM患者PFS的独立影响因素;维持治疗(HR=4.372,95%CI=1.049~18.221,P=0.043)是初诊超高龄MM患者OS的独立影响因素。结论含硼替佐米两药或三药治疗方案对初诊超高龄MM疗效和预后影响无明显差异,血清校正钙升高和维持治疗是影响生存的独立预后因素;MRP评分可用于评估初诊超高龄MM患者预后。

硬骨素在骨生成中的作用

硬骨素（sclerostin,SO）是硬化性骨化病（sclerosteosis,SOST）基因表达的一种蛋白产物。近年来,研究发现SO在骨生成发生机制方面具有重要的作用。研究发现在胚胎发生期间矿化骨中存在SOSTmRNA表达,在出生之后,骨细胞中SO蛋白和SOST mRNA表达均被严格地限制。在成骨细胞培养的矿化阶段,SOST mRNA表达水平有不同变化,其表达水平的差别与骨小梁的缺乏、存在及大小相关。还发现SOST mRNA表达与骨重建,细胞凋亡和细胞更新是紧密连锁的。

人胎儿雪旺氏细胞的体外培养及形态学研究

周围神经损伤和修复一直是临床重视的课题。近年研究表明,雪旺氏细胞(Schwann cell.SC)是维持神经再生微环境最基本的因素,SC能分泌、表达20多种具有生物活性的蛋白质,对神经细胞胞体的营养、轴突的再生、髓鞘的形成起着促进、诱导、调控作用,并产生细胞外基质和细胞粘附分子等。因此,SC培养、SC分泌神经营养蛋白的纯化、实验的种植及临床应用越来越受到重视。为完成自体静脉、人羊膜基底膜、SC和神经生长因子(NGF)的复合体桥接周围神经缺损的实验研究(资料待发表),

707株常见致病菌药物敏感度分析

随着抗生素在临床广泛使用,细菌耐药性已成为临床上普遍注意的问题。为提供治疗依据,使临床医师了解常见致病菌对常用抗生素的耐药情况,更合理地选用抗生素,我室将1989年内从病人的痰、分泌物、尿、血标本中共检出707株致病菌的药敏结果进行了分析,结果报告如下。

人TSHR A亚单位重组腺相关病毒2/9载体的构建及鉴定

目的构建人促甲状腺素受体(TSHR)A亚单位重组腺相关病毒2/9杂合载体(rAAV2-9-hTSHR289-IRES-ZsGreen),为研究格雷夫斯病建立理想动物模型和探索基因预防提供更佳手段。方法以 Eco RⅠ和 Bam HⅠ将腺相关病毒骨架质粒 pAAV-IRES-ZsGreen和含hTSHR289的pDC315质粒双酶切,回收酶切病毒骨架质粒及目的片段进行连接,产物转化JM109感受态细菌,获取重组腺相关病毒骨架质粒pAAV-hTSHR289-IRES-ZsGreen。经酶切电泳、测序鉴定后,将pAAV-hTSHR289-IRES-ZsGreen、辅助质粒pHelper、包装质粒pAAV-2/9(AAV2-Rep,AAV9-Cap)采用磷酸钙法转染293AAV细胞系,获取大量rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen,经纯化后荧光显微镜下观察其包装效率,rQ-PCR法测定病毒滴度。将rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen感染HEK293细胞,ELISA法检测不同时间点hTSHR289蛋白表达水平。结果重组腺相关病毒骨架质粒pAAV-hTSHR289-IRES-ZsGreen经双酶切及测序鉴定,质粒构建正确;荧光显微镜下观察显示转染293AAV细胞72 h,病毒包装效率达92%~94%,rQ-PCR法测定的rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen病毒滴度为1×10^13 vg/mL;ELISA法显示rAAV2/9介导的 hTSHR289 蛋白表达96 h明显高于72 h及48 h。结论成功构建rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen重组腺相关病毒载体并能有效转染和表达。

双靶点嵌合抗原受体-T细胞治疗复发难治多发性骨髓瘤患者疗效和安全性的Meta分析

背景嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫疗法已在多发性骨髓瘤(MM)中取得较好的疗效,最常见的靶点为B细胞成熟抗原(BCMA)。单靶点CAR-T细胞免疫疗法的缺点是会导致疾病抵抗和复发,可能与抗原逃逸有关。为此,改进开发了双靶点CAR-T细胞治疗复发难治多发性骨髓瘤(RRMM),此方面尚缺乏系统的临床分析。目的对RRMM患者应用双靶点CAR-T细胞免疫疗法治疗的有效性及安全性进行Meta分析。方法计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中国知网、万方数据知识服务平台、维普网7个数据库中有关双靶点CAR-T细胞治疗RRMM的单组率研究,检索时限为建库至2023-02-06。由2名研究人员使用自制的数据表单来提取收集数据,并采用非随机对照试验方法学评价指标进行文献质量评价。采用R Studio软件进行数据分析。结果共纳入9篇文献,包括200例既往接受过多线治疗的RRMM患者。双靶点CAR-T细胞疗法根据不同靶点可分为4类:BCMA+CD19、BCMA+CD38,BCMA+跨膜剂与钙调节亲环素配体的相互作用者(TACI)、BCMA+人信号淋巴细胞激活分子家族成员7(CS1),其中BCMA+CD19靶点的研究较多。根据输注形式不同CAR-T细胞疗法可分为4类:双特异性CAR-T细胞、联合或序贯输注两种不同CAR-T细胞、双顺反子结构、共转导。Meta分析显示,双靶点CAR-T细胞治疗RRMM的总缓解率(ORR)为90.0%(95%CI=0.849~0.943),完全缓解率(CRR)为54.6%(95%CI=0.416~0.673),微小残留病(MRD)阴性率为75.6%(95%CI=0.489~0.952),髓外病变(EMD)总缓解率为55.1%(95%CI=0.234~0.851),最后一次随访时的复发率为29.7%(95%CI=0.141~0.454),最后一次随访时的生存率为75.6%(95%CI=0.554~0.915),3~4级细胞释放因子综合征(CRS)发生率为16.4%(95%CI=0.094~0.245),神经毒性(ICANS)发生率为4.0%(95%CI=0~0.120)。敏感性分析提示结果稳定。Egger's检验结果显示,ORR(P=0.03)及EMD总缓解率(P=0.02)提示存在一定的偏倚风险;CRR(P=0.53)、MRD阴性率(P=0.79)、最后一次随访时的复发率(P=0.71)、生存率(P=0.98)、3~4级CRS发生率(P=0.90)、ICANS发生率(P=0.30)提示不存在发表偏倚。结论双靶点CAR-T细胞免疫治疗RRMM显示出良好的疗效和安全性,未来需要多中心、大样本、更长随访期的研究来进一步评估其疗效和安全性。

50种分枝杆菌标准株分枝菌酸指纹谱特征性研究

目的:构建50种分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸(MA)指纹图谱库,并对该库指纹图谱进行比较研究。方法:选择50种标准分枝杆菌,经过接种、培养、皂化及酸化,提取到MA。MA衍生化后,采用高效液相色谱法(HPLC)进行分析,得到相应的指纹图谱。依据谱图的峰族数、相对保留时间及相对峰高详细分析与比对其特征性,并对所选92个临床分离株用本法进行鉴定。结果:通过对分枝杆菌MA的色谱分析,构建了50种分枝杆菌标准菌株的MA指纹谱库。图谱可分为3组,即单族峰型、两族峰型、三族峰型。每组分别包括10、23及17种。在92个临床分离株中,有89株的鉴定结果与已知结果一致,一致率为96.74%。结论:本研究所构建的指纹图谱全部具有特征性,对分枝杆菌的种间鉴定具有一定的参考价值。

基于分枝菌酸分析法鉴定分枝杆菌临床株

非结核分枝杆菌（NTM）病具有与结核病临床表现相似的全身中毒症状和局部损害,在无菌种鉴定的情况下,与结核病难以区别。NTM与TB对抗结核药物的敏感性大不相同,不同的NTM对药物的敏感性也不相同,根据不同菌种化疗方案应有所不同。

智利葡萄酒,打破边界,不断探索——专访葡萄酒大师赵凤仪

2018年10月25日,由智利葡萄酒协会主办的90+活动于北京千禧大酒店举行。参展的40家智利酒庄各自甄选了4款极致佳酿,而这些酒款均是在世界级大赛中获得90以上高分的葡萄酒!90+专题讨论会中,葡萄酒大师赵凤仪、Steven Spurrier和中国首位侍酒师大师吕杨光临现场,分享他们对现代精酿智利葡萄酒的印象。

人TSHR A亚单位重组腺相关病毒体内外表达研究

目的探讨人TSHR A亚单位重组腺相关病毒(rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen)能否在小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3)及小鼠体内表达及其表达效率。方法以rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen感染NIH3T3,Western blotting检测目的基因蛋白表达;分别以不同剂量rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen注射雌性BALB/c小鼠,免疫荧光法检测TSHR A亚单位蛋白在各个器官的表达,免疫放射法测定血清TSHR抗体(TRAb)滴度。结果感染rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreenNIH3T3细胞48 h及72 h后均有目的蛋白表达,与24 h相比较明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);荧光显微镜下可见腿部骨骼肌、心肌、肝脏、脾脏有不同程度的TSHR289表达;放免法测定结果显示,注射剂量越大,血清TRAb抗体滴度越高,但只有高剂量和对照组之间有统计学差异(P<0.05)。中剂量和高剂量肌内注射在第4、8、12周小鼠体内均有抗体反应,但以第4周最强,4~8周逐渐减弱,抗体持续时间可达12周。结论rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen可在体外及小鼠体内高效表达,并具有较强免疫原性,可能成为制备Graves病模型的一种重要手段。

电针长耳兔夹脊穴对实验性坐骨神经损伤的影响初探

目的:创伤性神经损伤是临床常见病,多发病,本组实验模拟坐骨神经损伤,以复合生物材料制备人工神经桥接兔坐骨神经,观察电针对神经缺损的作用。方法:采用健康白兔18只,分为两组,每组9条坐骨神经,一组为治疗组,另一组为观察组。治疗组每日电针一次,每次二十分钟,治疗时间6周。结果:术后两周16只白兔不同程度出现患足肿胀,足跟溃疡。第五周治疗组6只白兔出现蹦跳现象;而观察组白兔足溃疡面积增大,不进食,肢瘫无恢复,提前死亡。结论:在治疗组电针对周围神经损伤修复有效。

耐性肽hCDR1诱发小鼠狼疮样病变的研究

目的探讨基于人dsDNA抗体分子互补决定区1(CDR1)的耐受肽(tolerizing peptide)hCDR1作为致病原诱发小鼠狼疮样病变的可能。方法 6-8周龄B6D2F1雌性小鼠40只,随机分为hCDR1 20μg组、100μg组、500μg组、阴性对照组和阳性对照组。完全弗氏佐剂乳化hCDR1,足跖及尾根部多点皮下注射免疫h CDR1组小鼠,间隔3周,不完全弗氏佐剂乳化hCDR1加强免疫1次;阴性对照组用不含hCDR1的佐剂皮下免疫,阳性对照组小鼠接受DBA/2小鼠脾脏及胸腺单细胞悬液尾静脉注射形成慢性移植物抗宿主样狼疮鼠(SLE-c GVHD)。尿蛋白试纸监测小鼠每周蛋白尿变化。首次免疫后9周采血,检测血液常规;ELISA法检测血清中h CDR1抗体、dsDNA抗体、组蛋白抗体及总IgG抗体;留取肾脏,直接免疫荧光检测肾脏免疫复合物沉积情况;HE染色观察肾脏病理改变。结果 hCDR1 100μg组和500μg组小鼠出现狼疮样改变。与阴性对照组相比,100μg组小鼠和500μg组小鼠血清dsDNA抗体、组蛋白抗体OD值增加(P<0.05);外周血血小板减少(P<0.05),白细胞增加(P<0.05);75%小鼠出现狼疮样肾脏改变,表现为尿蛋白阳性,肾小球增生以及肾小球基底膜IgG免疫复合物的沉积。20μg剂量组小鼠及阴性对照组小鼠未出现狼疮样改变。结论 hCDR1具有免疫原性,可以作为致病原诱发B6D2F1小鼠出现狼疮样病变。

Rab25在非小细胞肺癌厄洛替尼获得性耐药中的作用

目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)厄洛替尼获得性耐药中的作用。方法传代培养PC9及其厄洛替尼耐药PC9/ER细胞,采用CCK-8法检测PC9/ER细胞的耐药指数。应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,q PCR)及Western blot检测对比同等厄洛替尼浓度(0.1、0.2、0.3μmol/L)处理条件下,Rab25在两种细胞中的mRNA及蛋白表达差异,并以免疫荧光法定位Rab25在细胞中的分布。用小干扰RNA(siRab25)转染PC9/ER细胞,并以流式细胞仪及CCK-8法分别检测Rab25敲减后PC9/ER细胞的增殖指数(proliferation index,PI)及厄洛替尼IC50值的变化。结果 PC9/ER细胞的耐药指数是68.82±21.42。相同厄洛替尼浓度处理48 h后,PC9/ER细胞Rab25 mRNA及蛋白水平均高于PC9细胞(P<0.05),增高的Rab25蛋白主要表达于细胞膜。而且PC9/ER细胞Rab25蛋白水平随厄洛替尼处理浓度(0.1、0.2、0.3μmol/L)递增而增高。siRab25在PC9/ER细胞中成功转染后,转染组的厄洛替尼IC50值及PI均明显低于对照组(P<0.05)。结论Rab25在NSCLC厄洛替尼获得性耐药细胞中高表达,起着促进耐药的作用。

养老机构老年人智慧护理需求的研究进展

本文对养老机构老年人智慧护理需求的相关概念、发展历程、现状及影响因素进行综述,并总结出养老机构老年人智慧护理需求的干预措施,旨在改善养老机构老年人智慧护理照护体验。

NEDD4促进非小细胞肺癌继发厄洛替尼耐药

目的探讨NEDD4(neural precursor cell expressed developmentally downregulated protein 4)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)继发厄洛替尼耐药中的作用。方法以HCC827细胞及耐厄洛替尼的HCC827(HCC827/ER)细胞为工具,CCK-8法检测HCC827/ER细胞的耐药指数;实时荧光定量PCR(quantitative real-time,q PCR)及Western blot检测厄洛替尼处理48 h后,NEDD4 mRNA和蛋白在两种细胞中的表达及PI3K/AKT信号通路活化情况。NEDD4小干扰RNA(si NEDD4)转染HCC827/ER细胞,比较处理前后HCC827/ER细胞的厄洛替尼IC50变化以及PI3K/AKT信号通路活化情况。裸鼠成瘤实验在活体水平上进一步验证NEDD4在NSCLC继发厄洛替尼耐药中的作用。结果HCC827/ER细胞的耐药指数为(118.23±23.77);HCC827/ER细胞NEDD4 mRNA和蛋白以及PI3K/AKT信号通路活化水平均高于HCC827细胞;HCC827/ER细胞成功转染si NEDD4后,转染组的PI3K/AKT信号通路活化水平降低,且厄洛替尼IC50值明显低于对照组(P<0.05)。裸鼠成瘤实验中转染组肿瘤对厄洛替尼的敏感性明显增加,与阴性对照组比较,药物处理组肿瘤生长受到明显的抑制。结论NEDD4通过激活PI3K/AKT信号通路促进NSCLC继发厄洛替尼耐药。

含脂质体阿霉素方案治疗复发难治性多发性骨髓瘤伴继发髓外病变患者的临床研究

目的:探讨复发/难治性多发性骨髓瘤(relapsed/refractory multiple myeloma,RRMM)患者伴继发髓外病变(secondary extramedullary disease,sEMD)后应用脂质体阿霉素(liposomal doxorubicin,LPD)治疗的疗效、无进展生存期(progression-free survival,PFS)与安全性,以及RRMM患者出现sEMD的总生存期(overall survival,OS)及预后因素。方法:回顾性分析2015年1月至2020年1月就诊于首都医科大学附属北京朝阳医院西院的40例RRMM伴sEMD、接受LPD治疗患者的临床资料。记录患者初诊基线特征,继发sEMD的临床表现。观察其应用LPD的疗效、不良反应与PFS;并根据sEMD临床特点对其进行亚组分析,多因素分析得出sEMD-OS预后因素。结果:多因素分析显示国际分期系统(international stage system,ISS)Ⅲ期为继发EMD的危险因素。所有患者完成中位5(3~9)个疗程的LPD治疗,2个疗程总体反应率(overall response rate,ORR)为60.0%,13例完成6个疗程及以上化疗,ORR为100%;3级以上不良反应率为5%;预计中位PFS(median PFS,mPFS)为8.0个月(95%CI:7.5~8.5),界标分析示LPD≥6个疗程组相比于<6个疗程组PFS延长(P=0.093)。预计sEMD中位OS(median OS,mOS)为22.0个月(95%CI:18.2~25.8),1年OS率为73.6%,2年OS率为38.2%。多因素回归分析显示,非骨旁sEMD与乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)>250 U/L为sEMD-OS的独立预后因素。结论:含LPD方案治疗RRMM继发EMD短期疗效好,安全性高。非骨旁sEMD及LDH>250 U/L预后不良,此类患者需寻求其他治疗策略。

纤维结合蛋白在创伤愈合中的动态研究──“偎脓长肉”作用机制研究之四

本文选用３２只家兔，制造感染创面模型。观察在创伤愈合中血浆纤维结合（Ｆｎ）和创面Ｆｎ含量的动态变化，以及外用中药对其影响。实验结果表明，血浆Ｆｎ与创面愈合时间呈显著性正相关。创面Ｆｎ则为显著性负相关。外用中药可使创面Ｆｎ明显增高，且与对照组有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。提示，外用中药是创面Ｆｎ的良好调节剂；在创面愈合中可提高创面Ｆｎ含量，进而增强局部抗感染和损伤修复能力而达到加速创伤愈合。

三元重要不等式的推广及应用

文[1-2]对a^2+b^2≥2ab进行了推广,分别得到了结论:λa^2+1/λb^2≥2ab(λ>0),-λa^2+1/-λb^2≥2ab(λ<0),这两个结论将取等条件a=b推广到了λ^2a^2=b^2,扩大了不等式运用的范围.自然而然,我们会想到能否对a^3+b^3+c^3≥3abc作类似的推广?下文给出a^3+b^3+c^3≥3abc的推广及应用.

帕博利珠单抗联合安罗替尼四线治疗EGFR基因敏感突变阳性肺腺癌1例

中国晚期肺腺癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因敏感突变比例约为45.7%。EGFR基因敏感突变阳性的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者在EGFR-酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)治疗和化疗失败后治疗选择有限,寻找有效的治疗方案是临床的迫切需求。我们报道1例82岁的EGFR基因敏感突变阳性晚期肺腺癌女性患者,在奥希替尼、化疗及安罗替尼单药治疗均失败后,通过帕博利珠单抗和安罗替尼的联合治疗,截至2021年1月12日已获得超过21个月的无进展生存期,耐受性良好。