细菌分离物B619与松材线虫病关系的初步研究

在无菌条件下 ,用从松材线虫虫体上分离到的细菌分离物B61 9、无菌线虫以及它们的混合物对无菌黑松苗进行了接种试验。结果发现 ,用无菌线虫或细菌分离物B61 9接种的无菌苗不发病 ,而把二者混合后接种则使无菌苗发生萎蔫。这表明松材线虫携带的细菌与松材线虫的致病性有关 ,二者在致病性上极可能存在着协同作用关系。因此 。

牛心朴和苦楝果提取物对桑天牛产卵及卵孵化的抑制作用

使用一定浓度的牛心朴总生物碱苦楝果提取物处理的构树枝条作为天牛成虫的食物 ,比较了其对桑天牛产卵量及卵孵化率的影响。在室温下 ,将成对的天牛放在盖有铁纱网的直径 2 5cm高 2 5cm的塑料桶中进行试验。在 15d试验中 ,用 30 0 μg·mL- 1 的牛心朴总生物碱、10 0 0 μg·mL- 1 的苦楝果提取物处理枝条的两处理组的各 7对天牛其日平均产卵量分别为 3 5 3± 4 18个和 6 73± 3 82个 ,而对照组 7对天牛的日均产卵量为 13 73± 2 90个。经t—检验处理组与对照组之间在日均产卵量方面差异极为显著。 30 0 μg·mL- 1 的牛心朴总生物碱和 10 0 0 μg·mL- 1 的苦楝果提取物对桑天牛卵孵化有显著影响。其影响表现在两方面 :(1)孵化率降低。成虫取食 30 0 μg·mL- 1 牛心朴总生物碱和 10 0 0 μg·mL- 1 苦楝果提取物处理的构树枝条后产的卵最终孵化率分别为 77 36 %、87 12 %。而对照组的最终卵孵化率为 99 5 %。 (2 )其孵化期延长。牛心朴处理组的最终孵化期为 17天、苦楝果处理组的最终孵化期为 15d、而对照组的最终孵化期为 11d。

抗生素对松材线虫病的影响

利用某些抗生素的内吸性 ,筛选出可使黑松幼苗组织抑制B61 9菌的抗生素溶液浓度 ;进行了抗生素对松材线虫病影响的试验 ,在非无菌条件下 ,用松材线虫对幼苗接种 ,结果表明用抗生素溶液培养的幼苗未发生萎蔫 ,而用无菌水培养的幼苗均出现萎蔫病状 ;同时试验后检查抗生素溶液培养的幼苗 ,发现其组织内均有活线虫存在。这一结果不仅进一步说明了松材线虫病是一种由松材线虫和细菌共同侵染引起的复合侵染病害 ,而且首次用试验证明了通过控制致病细菌的方法可以控制松材线虫病。该结果为开发防治松材线虫病及早期诊断的新方法、培育抗松材线虫病的转基因松树新品种。

印楝提取物对桑天牛产卵量及卵孵化率的影响

使用一定浓度的印楝提取物 (NeemEC)处理的构树枝条作为天牛的食物 ,研究了其对桑天牛产卵量及卵孵化率的影响。在室温下 ,将成对的天牛放在盖有铁砂网的直径 2 5cm高的塑料桶中进行实验。用含印楝素 50× 1 0 -6g/mL的印楝提取物处理枝条 ,处理组天牛 ( 7对 )在 1 5d试验中 ,其每天对平均产卵量为2 0 0± 1 56个 ,而对照组每天平均产卵量为 1 0 33± 3 33个。经T—检验处理组与对照组之间差异显著。用含印楝素 1 0 0× 1 0 -6g/mL的印楝提取物处理枝条 ,在 1 5d试验中 ,处理组 7对天牛从第 5d开始死亡 ,至第 8d全部死亡 ,按实际成活天数计算 ,其每天每对平均产卵量为 1 0 0± 1 4 1个 ,而对照每天每对平均产卵量为 1 3 73± 2 90个。经T—检验两者之间差异显著。取食含印楝素 50× 1 0 -6g/mL的印楝提取物处理枝条后天牛产的卵需经 1 9d达到其最终孵化率 ,33 33% ;而对照组 9d达到最终孵化率 98 96%。在进行了 2 4d的选择取食试验中含印楝素 1 0 0× 1 0 -6g/mL的印楝提取物处理枝条 ,1 0对对照组天牛每天每对平均取食量为 3 53± 0 38g,而处理组天牛每天每对平均取食量 3 4 2± 0 60 g。经T—检验两者差异不显著。这说明桑天牛不能分辩含印楝提取物的食物 ,即印楝提取物对桑天牛不具拒食性。?

苦豆碱防治松材线虫病的林间试验

在国家自然科学基金的资助下，我们在筛选到天然化合物—苦豆碱具有对松材线虫极强的杀线活性［１］的基础上，进一步进行了用苦豆碱防治松材线虫病的多次林间试验，发现苦豆碱制剂具内吸性，能成功地控制松树中松材线虫的繁殖，使病松树得以康复。在林间试验证实苦豆碱剂...

松材线虫携带细菌部位的电镜观察

对活体松材线虫样品进行处理 ,用透射电镜对松材线虫各部分进行切片和详细观察 ,未能在线虫体内的任何部位观察到细菌。然而 ,用较少脱水步骤的扫描电镜样品处理方法处理活体松材线虫 ,用扫描电镜在线虫体表观察到了许多细菌 ,这些细菌形态一致、杆状、长 1 .48～1 .73μm、直径 0 .49～ 0 .62 μm。

松萎蔫病病原的研究

为了探讨松萎蔫病与松材线虫的关系,笔者研制了一种简单试验装置"冷闸",使接种的线虫被隔离在松树接种枝内而不能迁移。用该装置进行接种试验的结果表明:在松材线虫被局限于接种枝内而不能移动到寄主其他部位的情况下,接种无菌松材线虫与致病荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens(GcM5-1A),以及该致病细菌体外培养的无细胞滤液,同样能诱发该病。该致病细菌又从接种无菌线虫和致病细菌后病死寄主中分离到并被鉴定,证明符合柯赫法则。致病荧光假单胞菌GcM5-1A体外培养的无细胞滤液接种试验结果说明,该致病菌株培养物中的内吸性毒素导致了寄主的萎蔫和死亡。由此,松萎蔫病经实验证实为首例由细菌和线虫互惠共生复合体引起的植物病害。

苦楝果提取物对桑天牛产卵量及卵孵化率的影响

以用一定浓度的苦楝果提取物处理的构树枝条作为天牛的食物 ,研究了其对桑天牛产卵及卵孵化的影响。在室温下用苦楝果提取物 5 0 0mg/kg处理枝条 ,处理组天牛 ( 7对 )在1 5天试验中 ,7对天牛日平均产卵量为 8.5 3± 2 .35个 ,而对照组 7对天牛日平均产卵量为1 5 .80± 0 .98个。经T检验处理组与对照组之间差异极显著。用 2 5 0、1 0 0 0、2 0 0 0mg/kg的苦楝果提取物处理枝条 ,在 1 5天试验中 ,7对天牛日平均产卵量分别为 8.0 6± 2 .90、6.73± 3.82、5 .2 0± 1 .74个 ,而对照组 7对天牛的日平均产卵量为 1 3.73± 2 .90个。经T检验它们与对照之间差异极显著。取食含苦楝果提取物 2 5 0、1 0 0 0、2 0 0 0mg/kg处理枝条后 ,天牛产的卵分别需经 1 2、1 5、1 9d达到其最终孵化率 94.2 1 %、87.1 2 %、43.5 8% ;而对照组 1 1d达到最终孵化率 99.5 0 %。

松材线虫携带的一株荧光假单胞细菌致萎毒素的初步分离

用荧光染色显微生测法检测液体培养基的无细胞滤液毒性,研究从松材线虫虫体上分离鉴定的荧光假单胞GcM5-1A菌株在寄主体外培养的产毒现象。结果表明:GcM5-1A液体培养的无细胞滤液对黑松细胞的毒性随培养天数增加而增强,培养到第4天时,无细胞滤液的毒性开始进入相对稳定期。因此,在进行该菌株毒素的分离鉴定工作中,可将4d作为其培养时间。使用DM-36透析膜对培养4d的GcM5-1A无细胞滤液透析后的毒性测定结果显示:其膜内和膜外组分生测毒性分别与对照培养基的无细胞滤液毒性之间的t检验差异显著,证明其透析膜内、膜外组分均有毒性。该结果表明:GcM5-1A菌株的毒素不是单一化合物,而是由比较多的物质组成,其中含有大分子物质,如蛋白质、多肽、酶等;也有小分子有机化合物。

苦豆草生物碱对松材线虫的抑制作用

分别用槐果碱、苦参碱、槐胺碱、苦豆碱、野靛碱、N-甲基野靛碱、莱曼碱和总碱配制成生物碱浓度为1×10-4g/mL的PDA培养基,并在培养基上接种灰葡萄孢菌后再接种松材线虫,观察、记录松材线虫繁殖的情况。结果表明,苦豆碱、野靛碱和总碱对线虫的抑制繁殖作用都较强,其中,苦豆碱能完全抑制线虫的繁殖,且能引起线虫的死亡。对测定的生物碱的分子结构及对松材线虫的活性的分析进一步验证了关于双稠哌啶类生物碱对松材线虫的活性与其分子结构中的官能团对之间关系的假说。

苦豆草总生物碱对树木生长的促进作用

s: Effects of total alkaloids of Sophora alopecuroides (KSH) on growth of height and trunk diameter of one year old poplar trees (I-69)were studied by trunk injecting 6mL\5kg -1 of the testing tree weight. The net growth of trunk diameter at ground level of the treated trees, which were injected with KSH at 2×10 -2 , 1 7×10 -2 ,5 8×10 -3 mol\5L -1 , increased significanly and statistically in comparison with that of the control, and there was close positive correlation between the KSH concentration and the net growth of the trunk diameter. Growth of the tree height only shown in the concentration of 5 8×10 -3 mol\5L -1 , which was significantly and statistically increased in comparison with that of the control. The net growth of the tree height was inhibited in the groups at 1 1×10 -5 , 5 5×10 -5 , 2 8×10 -4 mol\5L -1 of NNA, whereas the net growth of trunk diameter at ground level of the treated trees treated with NNA shown significantly increase only at the lowest concentration of 1 1×l0 -5 mol\5L -l .The net growth of the tree height and the net growth of trunk diameter were promoted and inhibited respectively at the concentration of 2 9×10 -5 mol\5L -1 of GA. The results of the experiments with three years poplar trees indicted that injecting KSH of 5 8×10 -2 mol\5L -1 could significantly stimulate the net growth of trunk diameter at ground level of the treated trees during the testing period. The results of measuring the wood grown in the experiment period shown that there was no significant difference between the basic density of the treated wood and that of the control. It indicated that treatment of KSH could not only accelerate tree growth, increase significanfiy wood volume, but also there was no significant decrease in weight of dry materials.

昆虫带电特性及影响因子

本文对大袋蛾等昆虫的带电特性进行了定量测量 ,同时 ,由昆虫自身带电和与环境相互作用带电分析 ,给出了昆虫自身带电的分形特性。测定了在不同介质上静止爬行和振翅对大袋蛾雄蛾带电量。

松材线虫与其携带细菌之间的相互影响

笔者研究了从松材线虫体上分离的2 株强致病菌和1 株弱致病菌与松材线虫的相互影响。结果表明:强致病菌荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens) GcM5 1A菌株、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)ZpB1 2A菌株能够明显地促进无菌松材线虫的产卵量增加、繁殖速度加快和成虫虫体生长;同时,松材线虫也能促进强致病菌荧光假单胞菌GcM5 1A菌株、恶臭假单胞菌ZpB1 2A菌株的繁殖。而泛菌(Pantoea sp.)ZM2C菌株完全抑制了无菌松材线虫的繁殖,无菌松材线虫对泛菌ZM2C菌株的繁殖亦具有显著抑制作用。由此说明松材线虫与其携带的某些致病菌之间存在互惠共生现象,松材线虫携带的致病菌并不是偶然的污染,它们之间的互惠共生现象是在长期共生进化中形成的。笔者还讨论了互惠共生现象在松材线虫致病过程中的作用。

松材线虫携带的一株细菌分离及其致病性

从患松材线虫病致死的黑松和马尾松病树组织及松褐天牛虫体中分离的松材线虫虫体上均分离到同一细菌菌株 .经致病性、革兰氏染色、菌体形态、培养性状和生理生化反应等测定 ,将致病菌株鉴定为洋葱伯克霍尔德氏菌 .ATBExpression自动鉴定仪的鉴定结果与上述结果相同 .在分离过程中该菌出现频率较高 ,说明是松材线虫携带的主要细菌 .人工接种试验结果显示 ,用无菌线虫或洋葱伯克霍尔德氏菌菌株分别接种的黑松无菌苗不发病 ,而用二者混合接种则使无菌苗迅速发生褐变和萎蔫 .林间利用 6年生黑松进行的接种试验结果证明 ,用无菌松材线虫和洋葱伯克霍尔德氏菌菌株混合接种的黑松与使用野生松材线虫接种的黑松都 10 0 %的患病 .单独用无菌松材线虫接种有 4株发病 ,6株没有发病 .其中发病黑松中不仅分离到了松材线虫 ,也分离到了细菌 ,而没有患病的 6株黑松中仅分离到少量松材线虫 .这说明在野外条件下接种的松材线虫可以通过某种途径重新获得细菌 ,导致了接种的黑松患病 .而接种后无菌松材线虫没能获得细菌的那些黑松就没有患病 ,说明单独无菌松材线虫不能使黑松患病 .这些结果说明松材线虫携带的细菌与松材线虫的致病性有关 .因此 ,可以把松材线虫病看作是线虫和细菌共同侵染引起的一种植物复合侵染病害 .

性信息素加病毒诱芯技术的风洞试验

性信息素加病毒诱芯技术的风洞试验赵博光，杨秀莲，柯立明（南京林业大学南京２１００３７）关键词自传播技术，性信息素，核型多角体病毒，风洞，大袋蛾Ｉｇｎｏｆｆｏ将有目的地利用昆虫本身传播昆虫病原生物以控制害虫种群的方法，定义为自传播法或自传播技术［１］。...

苦豆草中抑制杉炭疽菌分生孢子萌发的物质

预试验发现苦豆草地上部分乙醇提取物对杉炭疽菌有较强的抑制活性 ,进一步用不同溶剂 ,在不同 pH条件下萃取将苦豆草乙醇提取物分离为 4个组分。生测表明其生物碱部分对该菌的抑菌活性最强。将生物碱部分用氧化铝柱层析分离得到 7种单体结晶。用熔点、旋光度、红外、和GC MS得到的MS数据与文献相应数据对照鉴定了这 7种生物碱 ,它们分别是 :槐果碱、苦参碱、槐胺碱、莱曼碱、槐定碱、苦豆碱、野靛碱。用纸环法生测表明这 7种生物碱对杉炭疽菌分生孢子萌发均具有较强的抑制活性 ;它们的EC50 为 :苦豆碱 72 0 μg/mL ,野槐胺碱 1 98 0 μg/mL ,苦参碱 86 0 μg/mL ,槐果碱 2 4 0 μg/mL ,槐定碱 2 6 0 μg/mL ,莱曼碱 1 2 6 0 μg/mL ,而相同条件下的常用杀菌剂 75 %百菌清和 70 %甲基托布津的EC50 值分别为 82 0和 1 1 8 0μg/mL。

植物源昆虫拒食剂的研究与应用前景

拒食剂可以定义为能抑制昆虫取食而不直接杀死它们的化合物。昆虫常继续留在经拒食剂处理的植物上并可能因饥饿而死。大部分植物依赖次生代谢物来防御植食性昆虫。各种研究表明协同进化的压力使植物越来越能抵抗昆虫的取食。大部分植物源拒食性次生性化合物可以分为倍半萜烯内酯类、异黄酮类、苦木素类和柠檬苦素类化合物４ 大类。虽然到目前为止关于结构与生物活性间关系方面尚未建立确实的规律，但结构与生物活性间关系的研究可以为了解发生在某些昆虫的膜受体水平上的分子过程提供线索，因而可以指导分离或合成高效拒食剂。昆虫感知拒食剂化合物可以通过刺激特定昆虫的特化的拒斥感器或者干扰接收诱食刺激化合物的神经元的正常功能实现。因为植物拒食剂是天然化合物，能在自然环境中很容易地被分解，较少环境污染，因而在ＩＰＭ 中具有重要的作用。为了开发出无公害新农药，需要进一步进行其作用机制、对环境的影响、结构与生物活性间关系、高效拒食剂的合成及田间试验等方面的研究。

光肩星天牛在杨树上产卵部位的选择

对光肩星天牛危害杨树的调查表明，光肩星天牛产卵处的高度与杨树胸径呈正线性相关．以往认为光肩星天牛喜在树干分枝处的观点只适用于胸径大于１５ｃｍ的情况，而在胸径小于１５ｃｍ的情况下，光肩星天牛主要产在主干基部或中部无分枝处．进一步调查的数据表明，光肩星天牛产卵时对树干直径、树皮厚度有严格的选择．对鲁伊莎杨测量分析的结果表明，树干直径与树皮厚度间存在着密切的正线性相关关系，这意味着光肩星天牛只要对两因子之一进行选择，另一因子也就同时确定了．据林间观察和分析。

松材线虫对其携带的一株致病细菌产毒的影响

该文报道了以黑松细胞为材料的一种改进的细胞荧光染色显微生测法.用该方法测定了接种松材线虫虫体上分离到的荧光假单胞GcM5--1A菌株或该菌株和无菌松材线虫混合物接种后的愈伤组织水提物的毒性.结果表明,单独接种无菌松材线虫或单独接种该菌株后的愈伤组织水提液未表现出毒性;而接种无菌松材线虫与该菌株的混合物后的愈伤组织水提液与接种野生松材线虫后的愈伤组织水提液的毒性以及该菌株的NB培养液的无细胞滤液的毒性均很强,并且它们三者之间没有显著差异.该结果说明松材线虫在寄主组织中能促进细菌的产毒.向该菌株的NB培养液的无细胞滤液中添加松材线虫后测定其毒性,结果表明无菌松材线虫对其毒性并无显著影响.实验结果表明松材线虫本身不产生毒素,在荧光假单胞菌培养液的无细胞滤液中加入无菌松材线虫未能显著改变其毒性.

国外昆虫聚集信息素研究概况

国外已对鞘翅目、膜翅目、半翅目、双翅目、直翅目和蜚蠊目 6个目、12科昆虫的聚集信息素进行了研究,其中大部分是森林害虫。本文对聚集信息素在自然界的作用、产生和释放、感受机制及昆虫的趋向行为等方面的研究结果进行了综述。