大豆异黄酮对幼年小鼠生殖发育的影响

目的探讨大豆异黄酮(SI)对幼鼠生殖发育的影响。方法将C57BL/6幼鼠随机分为对照组和SI小、大剂量组(10、100 mg/kg),每组10只,雌雄各半。各药物组幼鼠灌胃相应药液,每天1次,持续2周。末次灌胃后,计算幼鼠的体重增长百分比,检测血清雌二醇、睾酮水平以及生殖器官组织中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,观察其生殖器官组织的病理改变,并检测其细胞凋亡情况。结果与对照组比较,SI大剂量组雌性幼鼠的体重增长百分比显著升高,而雄性幼鼠的体重增长百分比显著降低(P<0.05或P<0.01)。SI各剂量组幼鼠卵巢组织均可见囊性卵泡,睾丸组织可见精母细胞排列松散,附睾组织可见部分上皮细胞脱落。SI各剂量组雌性幼鼠血清睾酮水平和雄性幼鼠血清睾酮、雌二醇水平,SI小剂量组雌性幼鼠卵巢组织中GSH-Px活性和SI各剂量组雌性幼鼠卵巢组织中T-AOC,以及SI各剂量组雄性幼鼠睾丸及附睾组织细胞凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01);SI各剂量组雌性幼鼠血清雌二醇水平,SI大剂量组雌性幼鼠卵巢组织中SOD活性和SI各剂量组雌性幼鼠卵巢组织中MDA含量,以及SI各剂量组雌性小鼠卵巢组织细胞凋亡率均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论SI可提高雌性幼鼠卵巢组织的抗氧化应激能力,减少其氧化应激损伤,但对雄性幼鼠的生殖器官具有一定的蓄积毒性。

苦荞bHLH93转录因子响应铝胁迫的功能研究

【目的】荞麦是一种重要粮食和经济作物。与其他作物相比,荞麦具备较高的耐铝性。实验室前期研究,在铝离子胁迫下的苦荞转录组中发现一个可能与铝离子响应密切相关的转录因子FtbHLH93,探究FtbHLH93的功能,为解决土壤酸化引致铝毒害的问题及耐铝植物的选育提供思路与线索,并为荞麦耐铝性的分子机理解析奠定基础。【方法】以品苦1号的cDNA为模板克隆FtbHLH93,通过qRT-PCR检测其在苦荞不同组织和铝离子处理不同时间段的表达量;酵母系统鉴定转录激活活性;亚细胞定位确定其表达部位。检测过表达材料的黄酮类物质含量,在未处理和铝离子处理条件下测定SOD和POD活性。运用转录组分析差异表达基因,筛选潜在的下游靶基因,对其进行启动子预测,并利用双荧光素酶报告基因试验进行验证。【结果】FtbHLH93转录因子编码区长度为573 bp,编码190个氨基酸残基,预测蛋白分子量为21.759 kDa,等电点为8.64。qRT-PCR结果显示,FtbHLH93在苦荞根中表达量高,铝胁迫下基因表达定量分析表明,FtbHLH93在24 h时表达量最高。转录因子活性鉴定显示,FtbHLH93在酵母系统中无转录激活活性。亚细胞定位显示其定位在细胞核上。在铝离子处理下,过表达FtbHLH93植株的毛状根具有耐铝性,并且SOD和POD活性均显著高于对照组,过表达材料的黄酮类代谢物的检测结果显示,芦丁、儿茶素、烟花苷含量明显高于对照组。通过对转录组数据进行GO和KEGG富集分析,发现GO富集分析中,其与金属离子转运和镉锰离子条目有关,KEGG富集分析中,其与ABC转运蛋白有关,且挖掘出3个铝响应的候选下游靶基因,共表达分析发现其中2个候选下游靶基因与FtbHLH93的表达模式相似。【结论】FtbHLH93转录因子可能通过促进黄酮类物质的累积、SOD和POD活性的提高来缓解铝毒害,FtbHLH93可能靶向调控与铝响应有关的FtPinG0100930100.01、FtPinG0303102000.01和FtPinG0403996200.01。

CXC趋化因子受体3对甲状腺细胞自噬与炎症的影响及机制

目的探讨CXC趋化因子受体3(CXCR3)对干扰素-γ(IFN-γ)诱导的甲状腺滤泡上皮细胞(Nthy-ori3-1)自噬及炎症的影响及相关机制。方法Nthy-ori3-1细胞分为正常组(不做任何处理)、IFN-γ组(500 U/mLIFN-γ处理24 h)、si-NC组[转染小干扰RNA(siRNA)]、si-CXCR3组(转染CXCR3 siRNA)、si-CXCR3+si-NC组(转染CXCR3 siRNA+转染siRNA)、si-CXCR3+si-Beclin1组(转染CXCR3 siRNA+转染Beclin1 siRNA)和si-CXCR3+3MA组(转染CXCR3 siRNA+3-MA自噬抑制剂)。实时荧光定量PCR检测各组CXCR3、CXC趋化因子配体9(CXCL9)的mRNA表达情况,免疫印迹法检测各组CXCR3、CXCL9、微管相关蛋白1轻链3-I(LC3I)、LC3II、囊泡转运蛋白34(Vps34)及Beclin1蛋白表达情况,免疫荧光染色观察各组细胞内自噬标志物LC3斑点数;酶联免疫吸附法试剂盒检测各组白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β水平;免疫共沉淀检测CXCR3与Beclin1相互作用。结果与正常组相比,IFN-γ组CXCR3、CXCL9表达水平显著升高(P<0.01);与si-NC组相比,si-CXCR3组Beclin1和Vps34表达及LC3II与LC3I比值(LC3II/LC3I)显著升高(P<0.01),LC3斑点数显著增加(P<0.01)。同时,与si-NC组相比,si-CXCR3组炎症因子IL-6、TNF-α及IL-1β的水平显著降低(P<0.01)。免疫共沉淀结果表明,CXCR3与Beclin1存在相互作用。与si-CXCR3+si-NC组相比,si-CXCR3+si-Beclin1组及si-CXCR3+3-MA组细胞的Beclin1、Vps34表达及LC3II/LC3I显著降低(P<0.01),LC3斑点数明显减弱(P<0.05);IL-6、TNF-α和IL-1β显著升高(P<0.05)。结论CXCR3可抑制Beclin1/Vps34信号通路,通过降低自噬进而促进甲状腺滤泡上皮细胞炎症。

叔丁醇暴露对HSPA1L敲除型雄性小鼠甲状腺的影响

以HSPA1L基因敲除(HSPA1L^(-/-))雄性小鼠为研究对象,观察甲状腺组织形态和细胞凋亡情况,分析Caspase-3蛋白表达,探讨叔丁醇(TBA)的毒性以及HSPA1L在此过程中的作用机制.结果表明,HSPA1L^(-/-)小鼠甲状腺的重量随TBA剂量增加而显著降低(P<0.05);甲状腺上皮滤泡细胞随TBA剂量增加而增大,高剂量组甲状腺滤泡甚至发生融合现象;甲状腺细胞凋亡增强,甲状腺组织Caspase-3表达量极显著增加(P<0.01).HSPA1L^(-/-)小鼠对TBA暴露更为敏感,TBA造成的伤害显著增强,提示HSPA1L可能通过负调控Caspase-3表达,抑制细胞凋亡,维持细胞稳态.

AKR7A5基因敲除对雄性小鼠生殖的影响

通过分析野生型和AKR7A5基因敲除型雄性小鼠的睾丸、附睾系数及其组织形态、精子活力和生育力,探讨AKR7A5基因对雄性生殖系统的影响。结果发现:AKR7A5基因敲除型与野生型小鼠睾丸、附睾系数及其组织形态无明显差异;AKR7A5基因敲除型小鼠与野生型小鼠相比,其精子浓度、直线前游总数、直线运动精子、前向运动精子、平均路径运动速度和平均曲线运动速度显著降低,不运动精子显著增加(P<0.01);总产仔数显著降低(P<0.01)。综上,AKR7A5基因敲除影响小鼠成熟精子的数量和活力,降低总产仔数。

湖北长阳贺家坪镇茶旅融合产业现状及发展对策

茶叶是湖北长阳的特色产业,凭借丰富的旅游资源和土家民俗文化,长阳贺家坪镇因地制宜发展茶旅融合产业,取得了一定成效。但同时也存在茶文化氛围不浓、营销宣传不够、茶旅融合不深、茶旅融合专业人才缺乏等问题。针对这些问题提出了相应的对策,以促进长阳贺家坪镇茶旅融合产业高质量发展。

仿刺参绿色饲料添加剂研究现状与思考

仿刺参(Apostichopus japonicus)不仅含有多种氨基酸和微量元素,而且皂苷、多糖、牛磺酸等活性物质也颇为丰富,保健和药用价值突出[1]。仿刺参养殖在我国渔业占有重要地位,近年来仿刺参养殖病害问题日益突出,严重制约了仿刺参养殖产业健康可持续发展。绿色水产饲料添加剂是指少量或微量添加于水产动物饲料中,能够促进生长、增强免疫力、提高饲料利用率、改善环境、确保水产品安全(无药物残留)等作用的特定物质[2]。水产饲料添加剂一般分为两大类:营养性饲料添加剂(包括维生素、氨基酸、微量元素等)和非营养性饲料添加剂(包括促生长剂、抗氧化剂、免疫刺激剂、诱食剂等)。

软式空中加油系统鞭甩现象多体动力学分析

软管-锥套式空中加油系统的柔性结构经常发生不同程度的软管鞭甩现象,极大影响空中加油任务的安全性。基于柔性多体动力学,建立了空中加油系统动力学模型,其中,利用基于任意拉格朗日-欧拉描述方式和绝对结点坐标法的索/梁模型描述管线的大变形、大范围运动以及软管收放,并对空中加油系统受到的气动力进行建模,建立的模型能够反映加油机和受油机运动、软管和锥套的变形与气动力的耦合影响。基于建立的空中加油系统动力学模型,复现飞行状态下的软管鞭甩现象,获得了鞭甩现象的形成机理。研究表明,对接冲击下,软管平衡状态改变所形成的剪切波向后传播与反射是鞭甩现象产生的主要原因。通过多工况计算结果,分析了软管刚度、对接速度、Ma数各因素对鞭甩现象引起的软管剪切力、纵波与剪切波传播速度的影响规律,并分别分析了软管收放控制和加缓冲的受油插头两种措施对鞭甩现象振动抑制的有效性。

后发酵茶中短短芽孢杆菌产酶能力及其在茶叶渥堆过程酶活性分析

目的全面了解源自后发酵茶中短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis,Br.brevis)的产酶特性,揭示其对后发酵茶品质形成的作用。方法对短短芽孢杆菌进行全基因组测序和关键酶预测,结合预测结果对短短芽孢杆菌进行纯培养、接种茶叶渥堆,分析其纯培养和参与茶叶渥堆过程的产酶能力、酶活性及渥堆茶叶主要品质成分的动态变化。结果测序结果表明短短芽孢杆菌糖苷水解酶、糖基转移酶得到注释基因最多,分别占比39.22%和33.33%。在短短芽孢杆菌的纯培养和参与茶叶渥堆过程中,短短芽孢杆菌具有产生蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、过氧化物酶和多酚氧化酶的能力,其中蛋白酶、淀粉酶和果胶酶活性较强,纯培养条件下蛋白酶酶活力最高可达到550.91 U/mL;相较于液体纯培养,在茶叶基质上培养有助于短短芽孢杆菌纤维素酶酶活力的提高,增幅达到691.02%;在短短芽孢杆菌参与的茶叶渥堆过程中,茶多酚、儿茶素、氨基酸和黄酮呈现下降趋势,茶多酚最大降幅为80.61%,咖啡碱检测含量显著增加,增幅最大为56.15%;相关性分析结果表明,渥堆过程短短芽孢杆菌产生的纤维素酶等与茶叶品质成分的变化表现出显著的正相关。结论短短芽孢杆菌在后发酵茶渥堆过程可以分泌多种胞外酶,通过酶促作用影响后发酵茶理化成分的改变。

乡村振兴背景下浮梁茶叶市场营销的问题与对策

产业振兴是实现乡村振兴的关键任务之一。浮梁产茶历史悠久,茶叶是浮梁传统特色优势产业,也是衔接乡村振兴与巩固拓展脱贫攻坚成果的农业产业。文章以乡村振兴为背景,在分析浮梁茶叶市场营销存在问题的基础上,提出以下发展对策:一是规范品牌统一标准,维护良好品牌形象;二是搭建专业性批发市场,推动浮梁茶产业的升级;三是促进茶叶电商发展,扩展茶叶销售渠道;四是促进产业融合,推动产业的共同发展。

混合式空中加油系统多体动力学仿真分析

提出了一种将软式加油与硬式加油结合并利用收放索控制的混合式空中加油概念。对硬伸缩管、软管及锥套建立了系统动力学模型,利用CFD仿真与数值拟合的方法分析锥套所受气动力,对混合式空中加油系统进行了动力学仿真。通过数值模拟和阻尼辨识对比分析研究了软管、硬管参数变化对系统稳定性的影响;探究了抑制锥套摆动的控制律。结果表明:硬管的抗弯刚度、频率、弹性模量及软管的弹性模量变化时,系统阻尼均出现峰值,软管的密度变化与系统阻尼呈正相关;采用收放索的PID控制可以有效提高系统稳定性。

苯甲酸钠对青春期小鼠肝脏的影响

目的探讨苯甲酸钠对青春期小鼠肝脏发育的影响及机制。方法将3周龄雄性小鼠分为苯甲酸钠低剂量(0.25 g/Kg)、中剂量(0.50 g/Kg)、高剂量(1.00 g/Kg)和生理盐水组,经口灌胃至青春早期(5周龄)、青春中期(7周龄)、青春晚期(9周龄)。称量小鼠体质量和肝脏组织重量,计算脏器系数,组织切片经HE染色后进行病理观察,检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力评估肝脏氧化损伤情况,采用TUNEL法检测细胞凋亡情况,通过荧光定量PCR测定凋亡相关基因表达。结果与生理盐水组比较,苯甲酸钠各剂量组小鼠体质量、肝脏系数均降低。苯甲酸钠各剂量组小鼠的肝细胞索结构紊乱,中央静脉和肝小叶等结构被破坏。苯甲酸钠各剂量组小鼠的肝脏MDA含量升高,SOD活力下降,肝细胞凋亡率显著增加,肝脏P53和Caspase-3基因表达上调,Bcl2基因表达下调。结论苯甲酸钠可对小鼠肝脏造成较严重损伤,且呈剂量依赖性,机制可能为苯甲酸钠导致肝细胞发生氧化损伤,进而诱发P53基因介导的线粒体途径的凋亡。

乙醛脱氢酶ALDH2基因敲除对雄性小鼠发育的影响

为了研究乙醛脱氢酶ALDH2基因敲除对雄性小鼠发育的影响,将不同周龄ALDH2基因敲除的雄性小鼠,通过分析其肝、肾、睾丸脏器质量分数,组织细胞形态,组织抗氧化能力,总产仔数等指标,探讨ALDH2基因敲除对雄性小鼠的影响.结果表明:7、10周龄敲除型(KO)小鼠肝细胞索排列紊乱,10周龄时,多核肝细胞数量明显增多,且肝细胞中黑色沉积物增加;7、10周龄KO小鼠肾脏出现明显的间质水肿;7、10周龄KO小鼠睾丸生精管内晚期精细胞和精子排序紊乱,腔内有脱落的生精细胞,睾丸组织出现纤维化;10周龄KO小鼠肝脏、肾脏总抗氧化能力和3、5周龄KO小鼠睾丸组织总抗氧化能力显著低于野生型(WT)小鼠;KO组小鼠产仔总数显著少于WT小鼠.综上,ALDH2敲除导致小鼠肝脏、肾脏和睾丸组织抗氧化损伤的能力降低,造成其细胞氧化损伤,进而影响雄性小鼠的生育力.该研究结果说明ALDH2基因敲除会引发雄性小鼠组织器官发育异常,进而影响小鼠的个体发育.

多层螺旋CT肺灌注对肺肿瘤的诊断价值

目的 研究多层螺旋CT肿瘤灌注对肺肿瘤的诊断价值。方法 对 46例肺部病变进行前瞻性分析。其中肺癌2 9例 ,病灶最大直径 2～ 7cm (平均 4cm)。 17例良性病灶中 ,结核 7例 ,肺脓肿 3例 ,非特异性炎症 3例 ,炎性假瘤 1例 ,曲菌球 1例 ,错构瘤 2例 ,病灶最大直径 2～ 5cm(平均 3cm )。采用GELightspeedQx/iExtra 8排探测器螺旋CT ,电影模式 ,层厚 5mm/4层。扫描时间 1s/圈 ,数据采集时间 40s。非离子对比剂 (3 0 0mgI/ml) 5 0ml用高压注射器经前臂浅静脉注射 ,速率 4ml/s ,延迟 5 .6s。CT灌注 2 体部肿瘤软件包分析。测定病变的血流量 (BF)、血容积 (BV )、平均通过时间(MTT)和表面渗透性 (PS)。结果 良恶性比较以BV和PS值有显著性差异 (P =0 .0 0 2和P =0 .0 0 0 )。若以BV值≥ 6作为恶性病变的域值 ,则灵敏度为 10 0 % ,特异度 64 .7% ,阳性预测值 82 .9% ,阴性预测值为 10 0 %。以PS值≥ 3 0作为恶性病变域值 ,灵敏度为 86.2 % ,特异度 88.2 % ,阳性预测值 92 .6% ,阴性预测值为 79%。结论 螺旋CT肺灌注在肺部病变的良恶性鉴别中有较大的帮助。灌注参数以BV和PS为佳 ,BV的敏感度高而PS的特异度高 ,两者相结合有利于提高诊断的正确率。

香加皮杠柳苷抑制Stat5信号通路诱导SMMC-7721细胞凋亡的实验研究

目的研究香加皮提取物杠柳苷对Stat5信号通路的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术观察肿瘤细胞的周期变化和凋亡,western blot法检测杠柳苷作用前后人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内Stat5蛋白质表达。结果杠柳苷明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,使细胞周期停滞在G2/M期,并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡。杠柳苷作用后,细胞核内的Stat5蛋白量降低而胞浆中的量未见明显改变。结论香加皮杠柳苷能够抑制Stat5信号转导通路,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡。

普洱茶中真菌种群的分离与分子鉴定

采用平板稀释法以孟加拉红(DRBC)和18%的甘油琼脂(DG18)两种培养基对60个普洱茶样品中的真菌种群进行了分离,种群分离结果显示:样品中真菌种群数量变化值范围为1.6×103～1.16×105cfu/g;应用分子生物学的手段,对分离到的71株真菌做了分子鉴定,鉴定结果表明:这些真菌分别属于19个属,40个种,主要是曲霉属13种,青霉属7种,其他属20种。数量上占优势的真菌种群是酵母和曲霉属的不同种。这些真菌的安全性有待进一步评估。

肺部球形病灶CT、MRI和PET的综合性研究

目的 研究CT、MRI、PET在肺部球形病灶中的综合诊断价值。方法 回顾性分析 6 5例有CT、MRI、PET资料并经病理证实的肺部球形病灶。结果 分析CT、MRI及PET三者敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值 ,并进行比较 ,发现其敏感性和特异性均无显著性差异 (P值分别为0 .377和 0 .7)。通过CT、MRI、PET的互补 ,在 4 4例肺癌中 ,仅 1例误诊 ,2 1例良性病变中 ,诊断正确的有 19例 ,其敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为 97.7%、90 .5 %、95 .4 %、95 .6 %和95 %。结论 多种手段的综合利用 ,有助于提高肺部球形病灶的诊断正确率。

普洱茶中真菌合成洛伐他汀的能力分析

对从普洱茶中分离的曲霉、青霉和木霉属真菌进行纯培养,采用液相色谱法分析培养基中洛伐他汀的含量,鉴定普洱茶中真菌合成洛伐他汀的能力。结果显示:曲霉属真菌中1株塔宾曲霉、1株温特曲霉和1株烟曲霉具有合成洛伐他汀的能力,在察氏(CYA)培养基中检测到的洛伐他汀含量分别为(9.59±0.42)、(2.33±0.21)、(2.77±0.13)ng/g;青霉属真菌中只有产黄青霉在CYA培养基上能检测到洛伐他汀的存在,检测含量为(3.36±0.69)ng/g;而从普洱茶中分离到的2株木霉属真菌——棘孢木霉和橘绿木霉均具有合成洛伐他汀的能力,在CYA培养基中检测到的洛伐他汀的含量分别为(4.8±0.17)、(1.47±0.36)ng/g。

STAT5在人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内的表达

目的研究信号传导及转录活化因子STAT5在人肝癌细胞内的表达及其酪氨酸磷酸化活化情况。方法分别采用western b lot、流式细胞术(FCM)方法检测人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内STAT 5蛋白和磷酸化STAT 5(P-STAT5)蛋白的表达。结果人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内有STAT 5的表达和酪氨酸(Tyr 694)磷酸化活化。结论STAT 5的异常表达和活化可能在肝癌的发生发展中起重要的作用。

红茶菌发酵普洱茶茶汤过程中主要成分变化

以蔗糖(50g/L)、不同贮藏年份的普洱茶(8g/L)为主要原料制成的糖茶水,经微孔滤膜除菌后接种红茶菌母液发酵,于28℃恒温静置培养8d,研究微生物总数、pH值、茶多酚、总酸度、蛋白质含量、成膜生物量及发酵液中高沸点物质的动态变化规律。结果表明:采用普洱茶茶汤培养的红茶菌,发酵过程中各项基本指标(如微生物总数、pH值等)的变化规律与采用绿茶或红茶茶汤发酵没有多大差异,说明普洱茶茶汤是培养红茶菌的较好原料;发酵过程中采用GC-MS从发酵液中共鉴定到了35种非挥发性成分,其中主要是醇类(14种)和酸类(13种),发酵初期(0～4d)以产生醇类物质为主,之后则以酸类物质为主;柠檬酸、nonahexacontanoic acid、2,6-十六烷基-1(+)-抗坏血酸酯等物质出现在菌液成熟期(7d),可能是成熟的红茶菌菌液中起保健作用的关键成分。