从“心脾相关”理论探讨心力衰竭心脏能量代谢障碍

心力衰竭是中医治疗的优势病种,临床试验和基础研究甚多,但中医理论与现代医学病理的联系方面少有新的进展。本研究拟探索中医“心脾相关”理论与心力衰竭心脏能量代谢病理过程的相关性。

黄芪注射液对血管紧张素Ⅱ诱导的H9c2细胞凋亡的抑制作用和机制研究

目的:探讨黄芪注射液对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的抑制作用及其可能作用机制。方法:采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)方法筛选H9c2细胞培养的黄芪注射液浓度;H9c2细胞分为正常对照组、AngⅡ模型组、AngⅡ+黄芪注射液组。采用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测3组H9c2细胞电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)及分子伴侣葡萄糖调节蛋白75(GRP75)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测VDAC1、Mfn2、GRP75的蛋白表达;Fura-2 AM法测定细胞内Ca^(2+)浓度变化;用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:黄芪注射液在浓度为0.125%时对细胞的促增殖作用最为显著。与正常对照组比较,AngⅡ模型组Mfn2、GRP75 mRNA表达水平明显增加(P<0.05),AngⅡ+黄芪注射液组Mfn2、GRP75 mRNA表达低于AngⅡ模型组(P<0.05或P<0.01),而3组VDAC1 mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较,AngⅡ模型组VDAC1、Mfn2和GRP75的蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01),AngⅡ+黄芪注射液组VDAC1、Mfn2、GRP75的蛋白表达低于AngⅡ模型组(P<0.01)。与正常对照组比较,AngⅡ模型组细胞钙含量、细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01),AngⅡ+黄芪注射液组细胞钙含量、细胞凋亡率低于AngⅡ模型组(P<0.01)。结论:黄芪注射液能够抑制血管紧张素Ⅱ诱导的H9c2心肌细胞凋亡,其机制可能与其调节VDAC1、Mfn2和GRP75等MAM结构蛋白表达和影响细胞内钙平衡有关。

芪苈强心胶囊对心肌梗死大鼠心脏IP3Rs/GRP75/VDAC1基因调控的机制研究

目的:探讨芪苈强心胶囊对心肌梗死大鼠线粒体Ca^(2+)转运相关基因的调控作用。方法:采用冠状动脉左前降支结扎术建立心肌梗死大鼠模型。术后随机将动物分到模型组、芪苈强心组和卡托普利组;同时设有假手术组作为对照。治疗四周后,通过心脏大体结构观察大鼠心脏梗死范围,HE染色观察大鼠心肌组织病理形态变化;实时荧光(Real⁃Time)PCR检测大鼠心脏梗死边缘区线粒体Ca^(2+)转运相关基因三磷酸肌醇受体2(IP3R2),葡萄糖调节蛋白75(GRP75),电压依赖性阴离子通道1(VDAC1),线粒体融合蛋白2(Mfn2),以及线粒体凋亡相关基因B淋巴细胞瘤⁃2(Bcl⁃2),Bcl⁃2相关X蛋白(Bax)mRNA表达变化;Western blot检测心肌组织Bcl⁃2,Bax蛋白表达变化;TUNEL染色检测心肌组织细胞凋亡率。结果:与假手术组相比,模型组大鼠心脏左室前壁呈现大面积梗死区域,心肌组织结构紊乱;线粒体Ca^(2+)转运相关基因IP3R2,GRP75,VDAC1,Mfn2 mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01);线粒体凋亡相关分子Bcl⁃2 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.01),Bax mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01),心肌细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。与模型组相比,芪苈强心组和卡托普利组心脏大体标本的梗死范围缩小,心肌纤维排列相对规整;线粒体Ca^(2+)转运相关基因IP3R2,GRP75,VDAC1,Mfn2 mRNA表达显著降低(P<0.01);线粒体凋亡相关分子Bcl⁃2 mRNA和蛋白表达有所提高(P<0.05,P<0.01),Bax mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),心肌细胞凋亡率明显下降(P<0.01)。结论:芪苈强心胶囊能够改善心肌梗死大鼠心脏形态结构,其作用机制与调节线粒体Ca^(2+)转运复合体IP3R2/GRP75/VDAC1基因表达,进而抑制细胞凋亡有关。

调脉饮对腹主动脉缩窄致心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响及机制

目的观察中药复方调脉饮对射血分数保留心衰大鼠心肌纤维化的影响及其机制。方法采用缩窄大鼠腹主动脉制备心力衰竭模型,随机分为假手术组、模型组、西药组(依那普利干预)、调脉饮组,从术后第2天开始给药,干预12周。采用左心室插管检测心脏收缩和舒张功能;Masson和免疫组化测定心肌组织胶原含量;放射免疫法检测心肌和血清中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)含量;蛋白免疫印迹法检测AngⅡ受体1(AngⅡtype 1 receptor,AGTR1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、纤连蛋白(fibronectin,FN)以及Smad7蛋白。结果与假手术组比,模型组的左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)和左心室开始收缩至左室内压最大变化速率(dp/dtmax)间隔时间(t-dp/dtmax)无明显变化,而左心室平均压显著上升(P<0.01),左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)明显减少(P<0.05),左心室终末舒张压、左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)和左心室压力下降时间常数均明显升高(P<0.05,P<0.01)。调脉饮组和西药组对左心室收缩功能无明显影响,对左心室舒张指标左心室舒张压、左心室终末舒张压和-dp/dtmax的均值都有降低但无统计学差异。模型组心肌胶原容积分数明显高于假手术组(P<0.01)。调脉饮组和西药组心肌胶原容积分数均明显降低(P<0.01)。与假手术组比较,模型组心肌组织及血中的AngⅡ明显增加(P<0.05),心肌组织中TGF-β明显升高而Smad7蛋白明显降低(P<0.05)。与模型组比较,调脉饮和西药可显著降低血中AngⅡ的含量(P<0.05),同时明显降低心肌组织TGF-β含量,升高Smad7蛋白水平(P<0.05)。结论调脉饮有一定改善舒张功能的趋势,明显改善射血分数保留心衰大鼠的心肌纤维化,其机制可能与降低血中AngⅡ的含量、降低心肌组织TGF-β、升高Smad7蛋白表达含量有关。

早期应用活血和益气中药抑制心衰大鼠左室重构和凋亡的对比研究

目的:比较早期应用活血、益气中药,抑制心梗后心衰大鼠左室重构和心肌细胞凋亡的作用特点。方法:结扎大鼠左冠状动脉致心梗后心力衰竭,随机分为模型组、活血组(8 g.kg-1)、益气组(8 g.kg-1)、气血组(16g.kg-1)、西药组(卡托普利10.125 mg.kg-1),另外有假手术组作为对照。于大鼠心梗后次日给药、疗程分别为4,8周。采用阻抗法测定心功能;病理染色图象分析测定左室腔周长和面积、单位面积内心肌细胞核数、单位面积内胶原的含量;TUNEL法测定心肌细胞凋亡百分率以及放射免疫法测定心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量。结果:各治疗组都改善了心衰大鼠左室收缩功能、减小左室腔面积、抑制胶原增殖、AngⅡ含量和心肌细胞凋亡,与模型组比较有显著差异;活血组给药8周改善心脏指数(C I)、减小左室腔面积、降低心肌AngⅡ的结果与假手术组已无显著性区别;活血组心肌细胞凋亡率显著低于益气药组。结论:活血、益气中药均有抑制心衰左室重构和心肌细胞凋亡,延缓心衰发展的作用,且活血组8周的效果最佳。

益气活血解毒方抑制家兔经皮血管腔内成形术后再狭窄的实验研究

目的:探讨益气活血解毒方对经皮血管腔内成形术(PTA)后再狭窄的防治作用。方法:采用电刺激兔颈总动脉加高脂饲料8周后,体表多普勒超声评价颈动脉粥样斑块狭窄,再行颈动脉PTA,形成再狭窄。造模后动物随机分为模型组、西药组(普伐他汀和巴米尔)、中药组(益气活血解毒方),另设正常组和假手术组作为对照,含药饲料治疗4周。分别在不同时间点检测血脂、血清C-反应蛋白(CRP)、转化生长因子(TGF-β)。药后4周颈总动脉取材,常规HE、弹力+VG和Masson染色,平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)和巨噬细胞RAM11免疫组化分析,所有病理切片经显微图像分析系统分析。结果:益气活血解毒方突出表现为对增生内膜中胶原的抑制作用,减少狭窄局部胶原面积比达50%;能减少血清中TGF-β的含量,降低血脂;而对血清CRP、增生内膜中巨噬细胞RAM11的表达无明显抑制作用。结论:益气活血解毒方通过减少增生内膜中胶原的堆积、降低血脂和TGF-β的含量,防治PTA后再狭窄。

益气活血解毒方和血府逐瘀胶囊抑制再狭窄中细胞外基质的对比研究

目的比较益气活血解毒方和血府逐瘀胶囊抑制再狭窄中细胞外基质的作用特点。方法用电刺激兔颈总动脉,喂饲高脂饲料,再用球囊原位扩张造成动脉粥样硬化再狭窄模型,病理取材,HE、Masson染色及平滑肌细胞肌动蛋白α-SM-actin免疫组化分析和图像分析。结果益气活血解毒方能显著减少内膜增生,尤其是降低血管局部胶原含量的作用最显著。而血府逐瘀胶囊可明显降低血清转化生长因子(TGF-β)的含量,也可减少血管局部的胶原含量。同时两组对内膜平滑肌细胞数均无影响。结论两种中医治则治法对再狭窄均有一定程度的抑制作用,但二者作用的病理环节有所不同。

冠心病、贫血患者红细胞变形性的临床实验研究

本文应用初始流量细胞变形仪对冠心病、贫血患者服用党参口服液前后进行临床观察．的果表明，冠心病患者在疾病的稳定期与健康人比较，其红细 胞平均初始滤过时间（Ｔc）、滤膜阻塞率（ＣＲ），未见明显差异（p＞０．０５）；而贫血病人红细胞变形性明显恶化，两项指标变化明显（Ｐ＜0.01）．党参口服液具有改善红细胞平均初始滤过时间（Ｔc）的作用．

面向对象程序设计在工业控制中的应用

提出了一种全新的研究方案,以一个饲料生产工艺系统为例,着力阐述了面向对象程序设计的思想,建立了饲料生产工艺流程控制的面向对象的模型。研究了面向对象的封装性、继承性和多态性及可视化软件的分层技术。结果表明,利用面向时象的方法分析和设计的饲料生产工艺流程控制系统其运行正常、稳定,仓下料从未出现超差,控制精度达到+0.2kg。

远程工业过程控制方法的研究

如何实现工业过程控制系统的智能化和网络化,是摆在我们面前的重要课题之一。本文着力阐述LonWorks控制 网络,探讨基于LonWorks技术下的远程工业控制。

基于delphi的面向对象方法在饲料生产工艺系统中的运用

文章以一个饲料生产工艺系统为例 ,着力阐述了面向对象的程序设计思想。介绍了如何运用面向对象的方法建立饲料生产工艺流程控制的面向对象的模型 ,并给出了一对象类的Pascal描述。

多通道多用途生产工艺流程控制系统中串口通信方法的实现

文章以一个饲料生产工艺系统为例 ,着力阐述了PC -75 0 6/ 75 0 73 2路开关量输入 /输出板的运用。介绍了PC -75 0 6/ 75 0 7串行通信方法和编程思想 ,并给出了部分源程序。

活血和益气方药对心肌梗死后左心衰大鼠左心室重构影响的比较研究

目的 :对比观察活血、益气方药对心肌梗死 (心梗 )后左心衰大鼠左心室重构的影响。方法 :采用心梗后左心衰大鼠动物模型 ,比较观察由丹参、川芎、红花组成的活血注射液和由党参、黄芪组成的益气注射液对心梗后左心衰大鼠心脏形态学结构及胶原成分、心脏湿重 /体重、左心腔面积、心梗区左室壁变薄比、单位面积内心肌细胞核数等指标的影响。结果 :活血、益气注射液组较模型组心梗健存区心肌细胞周围胶原组织明显减少 ,心脏湿重 /体重比值变小 (P <0 0 5 ) ,单位面积内心肌细胞核数明显增多 (P <0 0 5 ) ,左心腔面积明显缩小 (P <0 0 5 )。结论 :无正性肌力作用的活血注射液与益气注射液对心梗后心衰大鼠左心室重构均有一定的抑制作用。

冠心病心气虚证与左心室功能及心肌缺血相关性的临床研究

目的 :研究冠心病心气虚证与左心室功能和心肌供血三者的相关性。方法 :以多普勒超声心动图、体表心电图等方法进行宏观辨证与微观辨证研究 ;应用党参与硝苯吡啶治疗稳定性心绞痛 ,进行药证结合研究。结果 :(1 )冠心病心气虚证与非心气虚证组比较 ,左室舒张和收缩功能部分检测指标有显著性差异 ;左室舒张功能评价对心气虚证诊断有高敏感性(87% ) ,左室收缩功能则有高特异性 (88% )。 (2 )党参可保护左室舒张和收缩功能 ,改善心肌缺血。结论 :心肌缺血和血瘀可造成心气虚证 ,补气治疗心气虚证又可反作用于血瘀证 ,使心肌缺血好转。其机制为改善心肌正性舒张和收缩功能 ,从而改善心肌血供的灌注阻力和压力 ,有利于心肌供血。

活血益气药不同剂量配伍对心梗后心衰大鼠心脏系数及功能的影响

目的 :观察相同种类活血益气药的不同剂量配伍对心梗后心衰大鼠心脏系数、功能的影响。方法 :采用左冠脉结扎术致心梗后心衰大鼠模型 ,分别用活血益气方 (全方活血药量占全方 75 % )、益气活血方 (活血药量占全方2 5 % )、气血方 (活血药量占全方 5 0 % )于术后 4周给药至 8周 ,每日灌胃 ,以卡托普利作为阳性药。用阻抗法观察给药前后大鼠心脏功能、心脏系数的变化。结果 :心梗后心衰大鼠经 4周给药治疗后 ,心功能每搏输出量 (SV)、心输出量 (CO)、心脏指数 (CI)值都明显升高 (P <0 .0 1) ;同时 ,活血益气方 (活血药量占全方 75 % )、气血方 (活血药量占全方5 0 % )对模型动物治疗后心脏系数改善与假手术组相似 (P >0 .0 5 ) ,而益气活血方 (活血药量占全方 2 5 % )、卡托普利与假手术组比较 ,对其无改善 (P <0 .0 1)。结论 :活血益气药通过改善心梗后心衰模型大鼠心脏系数及功能 ,达到治疗心衰作用 ;同时 ,方剂配伍中多量活血药的应用 (活血药 /益气药为 75 %和 5 0 % )

建立心肌梗死心气虚血瘀证和心阳虚血瘀证病证动物模型的研究

目的探求中西医结合病证大鼠模型的构建和评价方法。方法结扎大鼠心脏前降支动脉致心肌梗死(心力衰竭)模型,于术后9～12周应用一氧化氮合酶抑制剂致血压升高、心衰加重,观察造模大鼠12周,采集四诊信息、结合中医八纲辨证,运用中西医结合学会虚证和血瘀证的诊断标准进行脏腑气血虚实辨证。结果造模后大鼠心电图ST段升高,异常Q波数量、脏体比值、左室腔面积和心肌胶原面积均明显多于假手术组(P<0.01),表现为血瘀证;且模型大鼠心率显著高于假手术组(P<0.01),力竭游泳时间、心功能显著低于假手术组(P<0.01),表现出心气虚证候;后期(12周)大鼠血压升高、心功能恶化,致心气虚证候加重,体温低、尿量增加进一步改变。结论将中西医临床和基础研究中规范的、成熟的、统一的标准和方法引入中医动物模型研究,可以成为中医病证动物模型建立和评价的基本思路。

心肌梗死后心力衰竭大鼠心脏基因表达谱及活血益气方药对其心脏的影响

目的观察活血益气方药对心肌梗死后心力衰竭模型大鼠心脏功能结构的影响。方法以大鼠左冠状动脉结扎术造成心肌梗死后心衰模型。对心衰形成期 (术后 10天 )、稳定期 (术后 8周 )大鼠左心室梗死区、非梗死区和同期假手术组左心室分别取材并提取总RNA ,以 6张大鼠 4 0S基因芯片 (40 96个基因 /张芯片 )对其进行检测 ;用基因芯片分析软件Genespring、Treeview、Clustering、SOM对芯片结果进行分析。术后 4周以活血益气方药对模型大鼠开始治疗 ,共 4周 ,以卡托普利作为阳性对照药 ;经阻抗法观察给药前后大鼠心脏功能和心脏系数的变化。结果 (1)用Genespring软件分析基因表达谱芯片检测结果发现有参与能量代谢、心肌细胞骨架及纤维化等 13类共千余条表达显著上调和下调的基因 ,在梗死区差异表达基因以形成期最多 (10 86条 )、稳定期次之 (72 4条 ) ;而非梗死区差异表达基因也以形成期最多 (196条 ) ,稳定期较少 (97条 )。 (2 )心肌梗死后心衰大鼠经活血益气方药、卡托普利治疗 ,心功能明显改善 ,每搏输出量 (SV)、心输出量 (CO)、心脏指数 (CI)均较治疗前显著提高 (P <0 0 1) ;同时活血益气方药还能改善模型动物的心脏系数 (与模型组比较 ,P <0 0 1,与假手术组比较 ,P >0 0 5 )。

心梗后心力衰竭模型大鼠中医证候特点及心脏的超声评价

目的研究心梗后心力衰竭模型大鼠的中医证候特点及心脏的结构和功能变化。方法大鼠随机分为模型组和假手术组,采用结扎左冠状动脉主干造成心梗后心衰模型,术后8周从动物一般状态、呼吸频率、心率、力竭性游泳时间、心电图等方面进行中医证候评价,并用超声心动图观察大鼠心脏的结构和功能变化。结果与假手术组比较,模型组术后8周呼吸频率和心率加快,力竭性游泳时间缩短,超声心动图参数室间隔舒张末期厚度、左室后壁舒张末期厚度、左室后壁收缩末期厚度、左室射血分数、左室短轴缩短率均下降(P＜0．01),左室舒张末期内径、左室收缩末期内径明显增大(P＜0．01)。12导联心电图ST段抬高、异常Q波发生的导联个数增多。同时全心重/体重高于假手术组(P＜0．05)。结论心梗后心衰模型大鼠术后8周的中医证候为气虚血瘀,其病理学表现为左室重构和功能损伤。

家兔新型动脉粥样硬化狭窄模型的建立及其动态观察

目的 为血管成形术后再狭窄的研究提供非球囊扩张和动脉造影的简单易行的新型动脉粥样硬化斑块狭窄动物模型。方法 选择日本大耳白兔 18只 (含正常组 6只 ) ,用电刺激血栓形成仪刺激颈总动脉并在术后高脂饲料喂养 6周 ,模型分别于术后 3天、1周、3周、6周处死颈总动脉取材 ,常规病理切片行HE、弹力V G染色 ,光学显微镜观察病理变化。结果 术后 1周内动脉有血栓形成 ,内皮剥脱和部分内弹力板断裂 ,内皮细胞增生 ,中膜局部平滑肌细胞有少量水肿、消失 ,外膜有中性粒细胞浸润 ;术后 3周以上则内膜明显增生 ,内膜下脂质沉积 ,中膜平滑肌细胞核有轻度减少 ,纤维组织及基质增生 ,以损伤部位更明显 ,外膜刺激部位有轻度增厚。术后 6周 6只动物颈总动脉均形成管腔狭窄。结论 用电刺激加高脂饲料喂养的方法可成功建立动脉粥样硬化狭窄的动物模型 ;该模型的病理表现与人类动脉粥样硬化的病理过程相似 。

大蒜素通过部分阻抑TGF-β_1介导的Smads信号改善压力超负荷大鼠心肌反应性纤维化

目的研究大蒜素是否通过TGFβ-Smads信号通路改善压力超负荷大鼠心肌纤维化。方法 40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、大蒜素组和川芎嗪组,每组10只。以腹主动脉缩窄方法制备压力超负荷心肌肥厚大鼠模型。造模后3天,大蒜素组和川芎嗪组分别给予大蒜素注射液5.0mg/kg、盐酸川芎嗪注射液20mg/kg腹腔注射,假手术组和模型组给予生理盐水腹腔注射。给药4周后,天狼猩红染色观察心肌胶原变化,计算心肌胶原容积分数(myocardial collagen volume fraction,CVF)和血管周围胶原面积(perivascular collagen area,PVCA);ELISA法检测血清转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平;免疫组化法观察心肌组织TGF-β1蛋白表达;实时荧光定量PCR检测心肌Smad2和Smad7 mRNA表达量的变化;荧光素酶报告基因检测进一步验证大蒜素对TGF-β信号传导系统的影响。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌CVF、PVCA、血清TGF-β1水平及心肌组织TGF-β1蛋白表达均明显增加(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,大蒜素组和川芎嗪组PVCA、血清TGF-β1水平及心肌组织TGF-β1蛋白表达均明显减少(P<0.05,P<0.01)。模型组Smad2 mRNA表达上调而Smad7mRNA表达下调,大蒜素组和川芎嗪组Smad2 mRNA表达明显下调(P<0.05),川芎嗪组Smad7 mRNA表达明显上调(P>0.05)。在2ng/mLTGF-β1干预下,1～2μg/mL大蒜素可以明显抑制相应TGF-β1的荧光素酶活性(P<0.05)。结论大蒜素通过部分阻抑TGFβ1介导的Smad信号减轻压力超负荷大鼠的心肌反应性纤维化。