川芎嗪对免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞CD_(34)抗原表达的影响

探讨川芎嗪对免疫再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓细胞ＣＤ_（３４）抗原分子表达的影响。方法：建立免疫介导的再障小鼠模型， ６．０Ｇｙ～^（６０）Ｃｏγ－射线照射和尾静脉输注淋巴细胞造成小鼠再障。分为正常组、再障组（对照组）、川芎嗪组，除正常组外均胃饲川芎嗪注射液 ４ｍｇ／次，１天 ２次，第 １０天用流式细胞仪检测各组小鼠骨髓细胞膜上 ＣＤ_（３４）抗原表达量。结果：川芎嗪 ＣＤ_（３４）抗原表达量的荧光强度（７７．６±６．５）明显高于再障组（６８．６±４．５，Ｐ＜０．０５），与正常组（８０．０±２．６）比较无明显差异。结论：川芎嗪通过影响骨髓微环境促进免疫再障小鼠的造血干、祖细胞增生，增加ＣＤ_（３４）抗原分子的表达。

川芎嗪对骨髓移植小鼠骨髓造血的影响

目的 :探讨川芎嗪对同基因骨髓移植 (bonemarrowtransplantation ,BMT)小鼠BMT后骨髓造血的影响。方法 :建立典型同基因BMT小鼠模型 ,随机分成两组 :骨髓移植 (BMT)组和BMT加川芎嗪处理组 (川芎嗪组 ) ,另设正常组 (未做任何处理 )。BMT组胃饲生理盐水 ,每次 0 2ml/只 ,每天 2次。川芎嗪组胃饲磷酸川芎嗪注射液 ,每次 0 2ml/只 ,每天 2次。分别于BMT后第 1、7、14天观察外周血细胞 ,骨髓单个核细胞 (BMMNC) ,采用免疫组化SABC AP法测定骨髓组织切片中硫酸肝素 (HS)表达水平 ;基质细胞来源因子 1(stromalderivedfactor ,SDF 1)的表达水平 ;CXC趋化因子受体 4 (CXCR4 )表达水平。结果 :川芎嗪组第 7、14天外周血白细胞、红细胞、血小板、BMMNC及CXCR4、HS、SDF 1表达水平均显著高于BMT组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :川芎嗪能够在骨髓移植造血重建早期促进骨髓造血。

川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子表达的影响

为了探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子 (VEGF)表达的影响及其促进放射损伤小鼠骨髓微环境修复的机制和信号通路 ,采用Westernblot法和流式细胞术对放射损伤小鼠骨髓基质细胞中VEGF表达水平 ,粘着斑激酶 (FAK)和促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)活性变化及骨髓基质细胞凋亡率和细胞周期改变进行分析 ,同时观察川芎嗪对其影响。实验结果表明 ,放射损伤后小鼠骨髓基质细胞VEGF表达明显低于正常水平 ,随时间推移而逐渐升高 ,但照射后第 14天仍未恢复正常 ,而服川芎嗪组VEGF表达在第 14天时已接近正常水平 ;骨髓基质细胞中磷酸化FAK和磷酸化MAPK表达亦有相同变化趋势。放射损伤后 ,骨髓基质细胞停滞于G0 G1期 ,S期减少 ,凋亡率明显增加。随时间推移 ,G0 G1期细胞比例呈由高到低的变化 ,凋亡率也逐渐降低 ,至 14天仍未恢复正常。用川芎嗪治疗后 ,骨髓基质细胞S期合成活跃 ,凋亡率明显下降 ,第 14天时恢复更明显 ,接近正常水平。结论 :川芎嗪可通过促进骨髓基质细胞VEGF的表达加速照射后骨髓造血微环境恢复 ,其机制可能是通过VEGF诱导FAK和MAPK磷酸化途径实现的。

川芎嗪对急性放射损伤小鼠骨髓碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达水平的影响

目的 探讨急性放射损伤小鼠骨髓碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及其受体(basic fibroblast growth factor receptor,bFGFR)的表达及川芎嗪对其影响。方法 56只清洁级昆明小鼠,随机分为3组:正常组,急性放射损伤对照组,川芎嗪组。将对照组和川芎嗪组小鼠用6.0Gy60Corγ射线一次性全身均匀照射,吸收剂量率为0.56Gy/min。照射后即分别胃饲生理盐水0.2ml/只及川芎嗪2mg/只,每天2次,连续13天。分别于照射后第3、7、14天颈椎脱臼法处死小鼠,取双侧股骨骨髓细胞制备单个核细胞(bone marrow mono-nuclear cells,BMMNC)悬液,用流式细胞仪检测小鼠BMMNC表面bFGFR的表达水平;取单侧肱骨切片后用免疫组织化学sABC-AP法检测小鼠骨髓组织中bFGF的表达水平。结果 急性放射损伤后第3、7、14天,对照组、川芎嗪组小鼠骨髓组织中bFGF表达显著低于正常组(P<0.05或P<0.01),同一时间点川芎嗪组bFGF、bFGFR的表达均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 川芎嗪通过促进骨髓组织中bFGF、BMMNC表面bFGFR的表达加速骨髓造血微环境的修复,可能是川芎嗪促进急性放射损伤后骨髓造血重建机制之一。

川芎嗪对同基因骨髓移植小鼠骨髓细胞PECAM-1/CD31分子表达与造血重建的作用

本研究通过观察骨髓移植后小鼠骨髓中血小板内皮细胞间黏附分子 (PECAM 1/CD31)的表达水平变化及川芎嗪对其表达的调节作用 ,进一步探讨川芎嗪促进骨髓造血微环境修复、改善造血重建的作用机制。将BALB/c小鼠随机分为正常对照组 ,单纯BMT对照组和川芎嗪治疗组 (骨髓移植 +川芎嗪 ) ,接受 7.5Gy60 Coγ射线一次性全身均匀照射 ,照射后进行同基因小鼠骨髓移植 ,并分别胃饲等量生理盐水与川芎嗪注射液 ,2次 /天。骨髓移植后第 7,14 ,2 1天 ,采用流式细胞术检测小鼠骨髓有核细胞表面CD31分子表达水平 ,计数外周血白细胞、血小板及骨髓有核细胞数 ,并做骨髓组织学检查。结果表明 :骨髓移植后第 7,14 ,2 1天川芎嗪治疗组的CD31表达水平 ,外周血白细胞、血小板和骨髓有核细胞计数以及骨髓细胞增生程度均高于骨髓移植对照组 (P <0 .0 1或P<0 .0 5 )。结论 :川芎嗪可以明显促进骨髓移植后骨髓有核细胞表面黏附分子CD31的表达水平 ,这可能是其促进造血重建的作用机制之一。

川芎嗪对骨髓移植小鼠CD44表达的作用研究

为探讨川芎嗪对骨髓移植小鼠早期造血重建过程中黏附分子CD4 4表达水平的影响 ,将BALB c小鼠随机分为 3组 :正常对照组 ,骨髓移植对照组 (简称对照组 )和骨髓移植 +川芎嗪治疗组 (简称川芎嗪组 ) ,对照组和川芎嗪组每天分别胃饲生理盐水和川芎嗪。于骨髓移植 (BMT)后第 7,14 ,2 1,2 8天处死小鼠 ,计数外周血细胞、骨髓有核细胞 ,分析骨髓中造血组织面积及成熟红细胞容量 ,用流式细胞术和免疫组织化学检测骨髓细胞上CD4 4的表达水平 ,并于第 10天取小鼠脾脏 ,计数脾集落形成单位。结果显示 ,骨髓移植后第 7,14 ,2 1,2 8天川芎嗪组外周血白细胞、血小板、骨髓有核细胞计数、骨髓中造血组织面积均显著高于移植对照组 ,外周血红细胞计数在第 7,14 ,2 1天也较对照组为高 ;同时 ,川芎嗪组CFU S计数明显高于同期移植对照组 ,骨髓中成熟红细胞容量则显著低于对照组 ,川芎嗪组CD4 4的表达在第 7,14 ,2 1,2 8天明显高于对照组。结论 :川芎嗪可提高骨髓移植小鼠骨髓细胞表面CD4 4的表达水平 ,促进造血干 祖细胞的归巢 ,加速移植后骨髓的造血重建。

川芎嗪促进放射损伤小鼠骨髓微环境修复VEGF/flk-1途径作用的研究

目的:探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其意义。方法:采用蛋白免疫印迹(Westernblot)法、免疫组化法及流式细胞术,对放射损伤小鼠BMSCs中VEGF蛋白表达水平、骨髓组织中VEGF受体胎肝激酶1(flk1)表达变化、BMSCs凋亡率及细胞周期改变进行分析,同时观察川芎嗪的影响。结果:放射损伤后小鼠BMSCs中VEGF和骨髓组织中flk1表达均明显低于正常水平,随时间推移而逐渐升高,但照射后第14d仍未恢复正常;而川芎嗪组在第14d时已接近正常水平。放射损伤后BMSCs停滞于G0/G1期,S期合成减少,凋亡率明显增加;随时间推移G0/G1期细胞比例呈由高到低变化,凋亡率也逐渐降低,但第14d时仍未恢复正常;用川芎嗪治疗后,BMSCs的S期合成活跃,凋亡率明显下降,第14d时恢复更明显,接近正常水平。骨髓切片苏木素伊红(HE)染色也证实川芎嗪组小鼠造血恢复明显较对照组快。结论:川芎嗪促进BMSCs中VEGF的表达,通过VEGF/flk1途径改善放射损伤小鼠骨髓微环境,是其促进造血功能恢复的机制之一。

人白血病细胞裸鼠异种移植模型的建立

我们成功地将人Ｔ淋巴细胞白血病细胞、人早幼粒细胞白血病细胞移植到裸鼠体内。裸鼠经环磷酰胺预处理后分别将（５－１０）×１０＾６ＭＯＬＴ－４细胞及（２－４）×１０＾６ＨＬ－６０细胞移植到动物皮下能形成实体瘤，该肿瘤呈进行性生长。

川芎嗪对急性放射损伤小鼠早期骨髓微血管系统的影响

对全身亚致死量^(60)Co 照射后的小鼠立即腹腔注射磷酸川芎嗪注射液250mg/kg,每天2次,连续7天,观察尺骨骨髓切片。第5天,川芎嗪组骨髓微血管数较对照组明显增多,第7天,对照组已降到正常值,而川芎嗪组仍持续增多,而且微血管面积明显扩张。应用川芎嗪7天内尺骨骨髓造血组织容量百分率与对照组比较,无明显差异;但照射后第7天,川芎嗪组外周血中性粒细胞比率有所上升。上述结果提示,在急性放射损伤后早期应用川芎嗪能促进和改善骨髓的血流供应,可能有助于骨髓造血的恢复。

川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞FAK表达的影响

目的 :探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞焦点黏附激酶 (FAK)表达的影响及其意义。方法 :利用流式细胞仪检测骨髓基质细胞的细胞周期及凋亡率 ;蛋白质免疫印迹 (Western blot)法检测骨髓基质细胞中 FAK的表达水平。结果 :放射损伤后骨髓基质细胞明显阻滞于 G0 G1期 ,凋亡率增加 ,同时 FAK的表达明显下降。用川芎嗪注射液治疗后骨髓基质细胞 S期合成活跃 ,凋亡率下降 ,FAK的表达增加。结论 :川芎嗪改善放射损伤小鼠骨髓微环境 ,促进骨髓基质细胞增生可能是通过增强

47例骨髓转移癌的临床及血液学特点

目的 研究骨髓转移癌的临床及血液学特点。方法 骨髓活检塑料包埋切片 ,H Gmiesa E ,Gomori ,PAS ,Alcinblue染色。结果 47例患者中 2 4例找到原发灶 ,其中胃癌 15例 ,前列腺癌 4例 ,肺癌 2例 ,乳腺癌、结肠癌、肝癌各 1例。 3 4例做骨髓活检者骨髓均找到转移癌细胞 ,而其中 10例骨髓象未能发现转移癌细胞。临床表现以贫血最常见 (91.5 % ) ,其次是血小板减少 (64 .7% )、骨痛 (61.7% )和发热 (4 8.9% )。结论 对于不明原因的贫血和骨痛患者 。

骨髓检查在全血细胞减少中的诊断价值及320例病因分析

目的:对比分析骨髓涂片与组织活检在全血细胞减少中的诊断价值以及引起全血细胞减少的常见病因。方法:选常规骨髓穿刺部位,用骨髓穿刺针先抽吸骨髓液行涂片,在隔2mm远处用骨髓活检针进针取骨髓组织活检;对比分析320例全血细胞减少患者的骨髓涂片与组织切片的结果。结果:骨髓活检切片与骨髓涂片增生程度一致者118例(36.9%),增生程度切片>涂片者41例(12.8%)。增生程度减低及重度减低者切片组152例(47.5%),骨髓涂片组193例(60.3%)。比较两者的骨髓增生程度,其差异存在统计学意义(P<0.01),骨髓活检对骨髓增生程度的判断优于涂片。两者结合起来更能反映骨髓细胞造血,提高诊断率。造血系统疾病是全血细胞减少的常见病因,也不能忽视非造血系统疾病所致的全血细胞减少。

常用活血化瘀中药对急性放射损伤小鼠骨髓微环境及其供氧的影响

给昆明小鼠8Gy60Coγ射线照射后，立即腹腔注射100％复方活血汤注射液（每ml含生药1g）0．2ml／只，每d2次，连续10d。分别于照射后第3、7、14d测定活体原位尺骨骨髓氧分压，观察相同部位骨髓切片组织学。结果表明，常用活血化瘀中药能促进急性放射损伤小鼠骨髓微血管恢复、增生，扩张其面积，使骨髓氧分压明显增高，增加骨髓微环境供氧，促进造血细胞增生。

ATM基因在髓性白血病原代细胞中的表达及其对基因治疗的意义

目的 研究在髓性白血病原代细胞和肿瘤细胞株中共济失调毛细血管扩张症突变基因(ATM) 的转录水平, 以确定反义封闭ATM基因治疗在白血病中应用的可行性。方法 利用半定量RT -PCR技术, 检测了正常人及31例髓性白血病患者和9种肿瘤细胞株的ATM mRNA表达量。结果 31例髓性白血病患者及9种肿瘤细胞株中ATMmRNA表达量普遍降低。结论 由于白血病患者中ATM mRNA表达量普遍降低, 因此, 反义封闭ATM对于白血病原代细胞基因治疗的适应性有待商榷。

川芎嗪对骨髓移植小鼠骨髓造血的影响

目的 探讨川芎嗪对同基因骨髓移植 (BoneMarrowTransplantation ,BMT)小鼠骨髓移植后骨髓造血的影响。方法 建立典型同基因BMT小鼠模型 ,随机分成两组 :骨髓移植对照组 (BMT组 )和骨髓移植 +川芎嗪处理组(川芎嗪组 ) ,另外设正常一组为未做任何处理的小鼠 ,共 3组。BMT组胃饲生理盐水 0 .2ml 只、次。每天 2次 ,川芎嗪组胃饲磷酸川芎嗪注射液 2mg 只、次 ,每天 2次。分别于BMT后第 1、7、14天观察外周血细胞 ,骨髓单个核细胞(CMMNC) ,使用免疫组化SABC -AP法测定骨髓组织切片中硫酸肝素 (HS)表达水平 ;基质细胞来源因子 - 1(stro maeellderivedfactor,SDF - 1)的表达水平 ;CXC趋化因子受体 4(CXCR4)表达水平。结果 川芎嗪组第 7、14天外周白细胞、血小板、CMMMNC、CXCR4表达水平、HS表达水平、SDF - 1均显著高于BMT组 (P <0 .0 5 )。结论 川芎嗪能在骨髓移植造血重建早期促进骨髓造血。

艾滋病的临床及血液学特点

目的 :研究艾滋病的临床及血液学特点。方法 :总结在我院确诊并有详细血液学资料的 15例患者 ,分析其临床表现、免疫功能及血液学特点。结果 :15例患者中发热 13例 ( 86 .7% ) ,淋巴结肿大 10例 ( 6 6 .7% ) ,消瘦 6例 ( 4 0 .0 % ) ,真菌感染 6例 ( 4 0 .0 % ) ,白细胞减少 8例 ( 5 3.3% ) ,贫血 12例 ( 80 .0 % ) ,为正常细胞正常色素性贫血 ,血小板减少 6例 ( 4 0 .0 % ) ,骨髓有核细胞增生、浆细胞增多及病态造血 ,免疫学检查主要为细胞免疫缺陷。结论 :艾滋病患者存在免疫功能低下 ,其临床。

继发于恶性肿瘤骨髓纤维化症47例临床资料分析

目的探讨继发性骨髓纤维化(secondarymyelofibrosis,SMF)患者的临床及骨髓病理学特点。方法对1995年～2004年同济医院确诊的47例继发性骨髓纤维化患者的临床表现、血片和骨髓象的细胞学表现及骨髓活检进行了回顾性研究,同时对不同疾病SMF程度与巨核细胞数的关系作了相关分析。结果骨髓转移癌常伴有SMF,易致骨髓穿刺干抽或稀释。急性淋巴细胞性白血病(ALL)或多发性骨髓瘤(MM)常伴SMF,骨髓象不易确诊,骨髓活检常能提供确诊的依据。各原发疾病之间MF程度没有统计学差异,而且MF程度与巨核细胞数没有明显相关性。结论当骨髓穿刺表现为“干抽”或疑为稀释、增生低下时,要考虑可能合并SMF,则应做骨髓活检,有助于对骨髓转移癌、ALL、MM、恶性淋巴瘤等疾病的诊断。

川芎嗪对同基因骨髓移植小鼠骨髓中干细胞因子表达的影响

目的 探讨川芎嗪促进骨髓移植后小鼠骨髓中干细胞因子表达的作用。方法 将小鼠随机分组 ,建立小鼠骨髓移植模型 ,对照组和川芎嗪组分别胃饲生理盐水 0 .2ml/只和川芎嗪注射液 2mg/只 ,2次 /天。在骨髓移植后的第 +7、+14、+2 1天 ,采用免疫组化的方法检测小鼠骨髓切片中干细胞因子的表达水平 ,记取外周血白细胞、血小板和骨髓有核细胞计数 ,并作骨髓组织学观察。结果 骨髓移植后第 +7、+14、+2 1天川芎嗪组干细胞因子的表达水平、外周血白细胞、血小板、骨髓有核细胞计数及骨髓细胞增生程度均高于骨髓移植的对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 川芎嗪能促进骨髓移植后骨髓中干细胞因子的表达 ,可能是川芎嗪重建造血的机制之一。

脐带血造血干/祖细胞关键细胞周期蛋白D亚型的鉴定

目的 确定控制脐带血造血干 /祖细胞增殖的细胞周期蛋白D (CyclinD)关键亚型。 方法 用Midi MACS免疫磁珠阳性分选的方法分离出脐带血CD34+ 细胞 ,在体外扩增以后 ,用RT PCR和WesternBlot分别在mR NA水平和蛋白水平检测CyclinD不同亚型的表达。 结果 mRNA在CyclinD1无表达 ,CyclinD2、CyclinD3有表达 ;蛋白在CyclinD1无表达 ,CyclinD2弱表达 ,CyclinD3高表达。 结论 控制脐带血造血干 /祖细胞增殖的CyclinD关键亚型是CyclinD3。

^(60)Co-γ射线对小鼠骨髓基质细胞表达血管内皮生长因子的影响

目的 探讨辐射对培养小鼠骨髓基质细胞表达血管内皮生长因子 (VEGF)的影响及凋亡率变化。方法 采用流式细胞术和 RT- PCR法。结果 经 8.0 Gy射线照射后 1h,骨髓基质细胞 VEGF m RNA水平即较正常对照显著升高 ,12 h达到高峰 ,2 4 h恢复至正常水平 ;照射后不同时间 ,骨髓基质细胞凋亡率与正常对照无显著差异。结论 8.0Gy6 0 Co- γ射线照射后骨髓基质细胞中 VEGF m RNA表达增强 。