补骨脂糖蛋白提取工艺优化及成分测定

为优化补骨脂糖蛋白(Psoralea corylifolia glycoprotein,PCG)提取工艺,并对PCG中成分进行分析,在单因素试验基础上,以PCG提取率为指标,对料液比、酶解时间、加酶量进行考察,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定PCG分子量,采用红外光谱仪、超高速全自动氨基酸测定分析仪、高效液相色谱仪测定PCG成分。结果表明,碱性蛋白酶对PCG提取率最高,优化后PCG的提取工艺为料液比为1∶30(g/mL)、酶解时间2.5h、加酶量3000U/g,提取得到的PCG分子量为17~75 kDa。PCG中含有氨基酸和糖类基团,氨基酸种类为16种,谷氨酸含量最高,为5.13%,单糖种类为5种,甘露糖含量最高,为44.43%。

何首乌抗性淀粉-玉米醇溶蛋白负载酯蟾毒配基纳米粒的制备及工艺优化

为了改善酯蟾毒配基的成药性,提高其生物利用度,本文通过反溶剂法制备了负载酯蟾毒配基的何首乌抗性淀粉-玉米醇溶蛋白纳米粒,以包封率为指标,采用单因素实验和正交试验进行纳米粒制备工艺的优化。优化后的制备工艺为pH值为4,搅拌速度为400 r·min^(-1),何首乌抗性淀粉和玉米醇溶蛋白比例为1∶1,玉米醇溶蛋白和酯蟾毒配基比例为1∶1,制备的纳米粒包封率为86.84%。

酶法纯化何首乌抗性淀粉及其对大肠杆菌增殖效力的影响

为优化何首乌抗性淀粉(resistant starch,RS)的纯化工艺,并考察其对大肠杆菌增殖效力的影响。基于单因素试验,采用Box-Behnken响应面法,以淀粉乳浓度、酶添加量、酶解时间为考察因素,RS含量为指标,优化RS纯化工艺;测定何首乌RS与纯化后RS的碘吸收曲线、平均聚合度;以RS为培养基碳源,采用体外发酵考察何首乌RS及纯化后RS对大肠杆菌增殖的影响。结果表明:最佳纯化条件为淀粉乳浓度16%、酶添加量22 U/g、酶解时间42 min条件下纯化RS,RS含量为(43.23±0.26)%。纯化后RS的碘结合能力明显提高,平均聚合度为47.03;纯化后RS表面呈现多孔结构。与葡萄糖培养基相比,纯化RS可显著降低大肠杆菌的增殖。

川芎蛋白-葡聚糖共聚物的制备工艺优化及其抗氧化性

为改善川芎蛋白(Ligusticum chuanxiong protein,LCP)的溶解性,提高其抗氧化性,采用响应面法优化川芎蛋白-葡聚糖(dextran,Dex)共聚物的制备工艺,并对所得川芎蛋白-葡聚糖共聚物(glycosylated Ligusticum chuanxiong protein,GLCP)的抗氧化性进行研究。结果表明,GLCP的最佳制备工艺为底物质量比Dex∶LCP=1.8∶1、溶液pH9、反应时间153 min、加热温度74℃。在此条件下,共聚物的接枝度为(35.21±0.12)%。电泳结果表明,LCP与Dex共价结合,且GLCP分子量大于LCP;扫描电镜结果表明,LCP呈近圆球形,而GLCP表面结构变得疏松多孔,呈蜂窝状;红外光谱结果表明:糖基化改变了LCP的二级结构。相较LCP,GLCP抗氧化性明显提高,当浓度为1 mg/mL时,羟自由基清除率为(65.91±1.93)%,ABTS+自由基清除率为(81.80±2.18)%。

基于标准汤剂对化湿止咳汤质量标准的研究

目的:基于标准汤剂质量理念,建立化湿止咳汤剂的质量标准,为今后化湿止咳汤煎制提供可靠的科学依据。方法:制备15批化湿止咳汤,计算出膏率、pH、定性鉴别白术、炙甘草,定量检测甘草苷含量,采用指纹图谱分析方法对化湿止咳汤质量进行综合评价。结果:三批化湿止咳汤中甘草苷平均含量为0.049 mg/mL,出膏率:15.98%~24.12%;pH为:5.30~5.91,指纹图谱特征峰相识度大于0.9。结论:该研究对化湿止咳汤多批次药材进行研究,质量稳定,可作为化湿止咳汤剂质量标准,为煎煮提供参考。

响应面法优化川芎蛋白提取工艺及抗氧化活性研究

为优化川芎蛋白(Ligusticum chuanxiong protein,LCP)的提取工艺,并考察其抗氧化活性。基于单因素实验,采用Box-Behnken响应面法,以料液比、提取时间、提取溶剂pH为考察因素,LCP得率为指标,优化LCP提取工艺;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定LCP的分子量范围;测定LCP的等电点(pI)及溶解度,并考察LCP的抗氧化活性。结果表明:最佳提取条件为料液比1:15(g/mL)、提取时间1.5 h、pH6,在优化条件下LCP得率为(2.36%±0.13%),实测值与理论值较为接近,表明该数学模型可用于优化LCP提取工艺。最优条件下提取的LCP分子量在17~48 kDa,等电点为3.88,pH8时溶解度为96%,羟自由基清除能力IC_(50)为1.18 mg/mL、超氧阴离子自由基清除能力IC_(50)为0.57 mg/mL、1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)自由基清除能力IC_(50)为1.31 mg/mL。该法提取的LCP具有较好的抗氧化活性,可为LCP抗氧化活性的进一步研发提供实验思路。

苗药铁筷子挥发油的化学成分分析及抑制BGC-823细胞增殖研究

目的:研究苗药铁筷子挥发油成分及挥发油抗肿瘤作用。方法:采用水蒸气蒸馏法提取铁筷子挥发油,利用GC-MS联用仪分析铁筷子挥发油的化学成分。CCK8法检测苗药铁筷子挥发油对BGC-823细胞增殖的抑制作用。结果:从苗药铁筷子挥发油中鉴定了33种化合物,共占挥发油的89.71%,苗药铁筷子挥发油中主要含有棕榈酸占总油量的19.99%、亚油酸占总油量的13.27%、油酸占总油量的10.99%。抗肿瘤活性表明苗药铁筷子挥发油对BGC-823细胞的增殖抑制作用,IC_(50)值为11.793μg/mL。结论:苗药铁筷子挥发油可抑制BGC-823细胞的增长。

柴葛畅原合剂中葛根素的含量测定

目的:建立柴葛畅原合剂中葛根素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-0.1%甲酸(30∶70)为流动相,流速1.0 mL/min,波长250 nm,柱温调整到25℃。结果:在这一条件下,葛根素和其他色谱峰分离程度达到要求,在0.0675~0.405μg质量范围内线性关系达到要求(r^2=0.9999),回收率102.3%,RSD为2.5%(n=6)。结论:该操作简单、专属程度大、灵敏特异性高、重复性强,可以用于该制剂的质量控制。

香椿皮质量标准研究

目的:为完善香椿皮质量标准提供依据。方法:按照《中国药典》2015年版方法,对香椿皮粉末进行显微观察,并对香椿皮水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物测定。结果:15批香椿皮药材粉末具有共同的明显的显微特征;水分、总灰分、酸不溶性灰分分别为6.4%~12.0%、5.5%~12.1%、0.2%~2.0%、19.1%~36.4%,平均值分别为10.5%、7.9%、0.6%、25.2%。结论:香椿皮药材粉末显微特征可为其定性鉴别提供依据,水分、总灰分、酸不溶灰分和醇溶性浸出物的含量控制限可为其品质提供保障。因此,本研究可为香椿皮药材质量标准的完善提供实验依据。

钻地风药材质量标准研究

目的:为完善钻地风药材质量标准提供依据。方法:按照《中国药典》 2015版要求,对钻地风药材组织进行显微观察,并对钻地风药材水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物测定。结果:9批钻地风药材具有相似的显微特征;水分为11.4%~14.1%;总灰分为2.1%~7.1%;酸不溶性灰分为0.6%~2.7%;稀乙醇浸出物为21.5%~44.8%。结论:显微鉴别为钻地风鉴别提供依据,水分、灰分、酸不溶灰分和稀乙醇浸出物为其品质提供保障,为钻地风质量标准提升提供实验依据。