连续性血液净化治疗心脏术后急性肾功能衰竭的效果评价

目的:观察连续性血液净化(CBP)在心脏术后急性肾功能衰竭(ARF)患者防治中的疗效,并探讨CBP治疗的时机。方法:将18例心脏术后ARF患者分为A组(n=8,符合SIRS诊断)及B组(n=10,符合MODS诊断),对全部患者治疗前和治疗24h后进行ATN-ISI评分、APACHE评分,同时记录氧合指数,平均动脉压(MAP),心率(HR),中心静脉压(CVP),pH值,血尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)等指标进行比较。结果:1B组的病死率明显高于A组(70.0%vs12.5%);2CBP治疗24h后,A组及B组的APACHE评分、氧合指数、BUN和Scr显著改善,仅A组的MAP,pH值显著改善;而两组病人ATN-ISI评分、CVP、HR在治疗前后无明显差异。结论:CBP能改善心脏术后重症ARF的病情,但必须强调尽早认识SIRS并行CBP治疗,从而减少并发症的发生,降低病死率。

静脉静脉血液滤过治疗对心脏术后伴ARF的MODS患者氧化应激的影响

目的前瞻性观察连续性静脉静脉血液滤过(CVVH)治疗心脏术后伴急性肾衰竭(ARF)的多脏器功能障碍综合征(MODS)患者氧化应激指标的变化。方法16例心脏术后伴ARF的MODS患者使用HF700型聚砜膜血滤器行CVVH治疗。分别在治疗前和治疗后2、61、2、24和48 h取血检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(TAC)指标的变化,同时对患者进行动态APACHEⅢ评分和MODS评分。结果①与健康对照组相比,心脏术后伴ARF的MODS患者TAC、SOD升高,GSH-Px明显下降,MDA显著升高。②心脏术后伴ARF的MODS患者TAC在CVVH治疗2 h后明显下降,SOD在治疗6 h后明显下降,MDA在治疗24 h后明显下降,在上述各时间点后TAC、SOD、MDA随治疗时间延长有不断下降趋势;GSH-Px在CVVH治疗2 h后较治疗前明显下降,6 h后随治疗时间延长有不断升高趋势,但较治疗前无明显变化。③CVVH治疗2 h后,APACHEⅢ评分即可改善,并随着治疗时间的延长有不断下降趋势。CVVH治疗24 h后,MODS评分获得改善,同时随治疗时间延长有下降趋势。结论①心脏术后伴ARF的MODS患者发生了氧化应激。②CVVH能改善心脏术后伴ARF的MODS患者的氧化应激,减轻氧化损伤。③CVVH能改善心脏术后伴ARF的MODS患者的病情。

VEGF对上皮间充质转化的抑制与Smad信号途径及SnoN表达的变化

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞发生肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的过程中对Smad2/3,Smad7信号途径以及SnoN表达的影响。方法体外培养的HK-2细胞分为:①正常对照组;②TGF-β1(5μg/L)阳性对照组;③VEGF165(100μg/L)作用组;④TGF-β1(5μg/L)+VEGF165(100μg/L)共同作用组。采用WesternBlot法和RT-PCR分别检测各组细胞p-Smad2/3和Smad2/3(共同作用30和60min),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad7、SnoN的表达水平(共同作用48h)。结果 TGF-β1组α-SMA蛋白和mRNA表达与正常对照组比较明显增强,TGF-β1与VEGF165共同作用组α-SMA蛋白和mRNA表达与TGF-β1单独作用组比较明显减弱(P<0.05)。体外HK-2细胞,TGF-β1组刺激30、60min,与正常对照组比较,(p-Smad2/3)/(Smad2/3)比值明显升高,TGF-β1+VEGF165组与TGF-β1单独作用组相比明显下降,且以30min时下降明显。TGF-β1组作用48h与正常对照组比较,Smad7蛋白和mRNA表达明显下降,VEGF165+TGF-β1组较TGF-β1单独作用组Smad7表达明显升高(P<0.05)。VEGF165组与正常对照组相比,α-SMA、(p-Smad2/3)/(Smad2/3)、Smad7蛋白和mRNA表达的差异无统计学意义(P﹥0.05)。TGF-β1组SnoN蛋白表达与正常对照组比较明显增强(P<0.05),TGF-β1与VEGF165共同作用组SnoN蛋白表达与TGF-β1单独作用组相比差异无统计学意义(P﹥0.05),各组SnoNmRNA表达差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论 VEGF165抑制TGF-β1诱导HK-2细胞EMT的机制可能与直接抑制Smad2/3磷酸化、上调Smad7信号表达有关,而与调节SnoN表达无关。

连续性血液净化疗法对心脏术后多脏器功能障碍患者氧化应激的影响

目的前瞻性观察连续性血液净化(CBP)对心脏术后多脏器功能障碍(MODS)伴急性肾衰竭(ARF)氧化一抗氧化指标的变化对患者存活的影响。方法16例心脏术后MODS伴ARF的患者行CBP治疗。分别在治疗前和治疗后2、6、12、24、48h取血检测两组血清丙二醛(MDA)，超氧化物歧化酶(SOD)，总抗氧化能力(TAC)等指标的变化。另设健康对照组比较。结果①16例患者中8例存活(A组)，8例死亡(B组)。②与健康对照组相比，MODS伴ARF组治疗前在性别、年龄方面差异无显著性。③A组MDA在治疗2、6h后，较治疗前下降，但无统计学意义，12h后明显下降，此后有不断下降趋势；而B组在48h的治疗过程中MDA持续高水平，较治疗前无明显下降。A组SOD在治疗2、6、12h后较治疗前无明显变化，24h后后明显下降，此后有不断下降趋势；B组SOD在治疗2h后即开始明显下降，此后有不断下降趋势。A组TAC在治疗2h后较治疗前无明显变化，6h后明显下降，此后有不断下降趋势；B组TAC在治疗2h后即开始明显下降，此后有不断下降趋势。结论①心脏术后MODS伴ARF患者发生了氧化应激。②CBP能改善MODS伴ARF患者的氧化应激，减轻氧化损伤。③在CBP治疗过程中，血清MDA持续高水平及SOD早期下降者预后差；动态监测MDA及．SOD有助于判断心脏术后MODS伴ARF的预后。

氧化应激与急性肾衰及血液净化

本文简要叙述了氧化应激与急性肾衰竭、血液净化之间的相互影响与作用。

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎肾损害

笔者介绍一典型病例的临床病理特点,并结合近年来收治的另外4例病人进行讨论和文献复习,以期加深对该病的认识.

肾脏穿刺技术回顾

本文分析了肾脏病理活检对肾脏疾病具有明确诊断、指导治疗及判断预后的意义,对不 同的穿刺方法进行了比较,以及需要注意的有关事项。

肾活检1542例临床病理资料分析

目的：回顾性分析1542例因肾脏疾病行经皮肾活检患者的病理类型和临床资料并探讨二者之间的联系．方法：参照WHO（1982年及改良的1995年）肾小球疾病组织学分型方案，结合临床资料、实验室检查结果、光镜、免疫病理及电镜的改变特点，提出初步诊断，最后与临床医师共同讨论确定诊断．结果：患者行肾活检时平均年龄32．5±15．3（6～63）岁，男女之比为1，55：1，原发性肾小球疾病占首位（69．39％），继发性肾小球疾病占26，85％，终末期肾病占2，59％，原发性肾小球疾病的病理类型中最多见为系膜增生性肾小球肾炎（45．05％），其次为局灶节段性肾小球硬化症（16．73％）和IgA肾病（8.32％）．继发性肾小球疾病以狼疮肾炎居首位（14．27％），其次为紫癜性肾炎（7．00％）和乙肝相关性肾炎（1．95％）．引起慢性肾功能不全的病理类型依次为IgA肾病（13．70％）、增生硬化性肾小球肾炎（10．40％）和局灶节段肾小球硬化症（9．10％）．结论：本地区肾脏疾病多见于青壮年，以原发性肾脏疾病最常见，其中系膜增生性肾小球肾炎是最多见的病理类型．继发性肾小球疾病以狼疮肾炎最常见．引起慢性肾功能不全最常见的病理类型为IgA肾病和增生硬化性肾小球肾炎．

NF-κB/IκB信号通路在乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中的表达

目的探讨核转录因子-κB(NF-κB)/IκB在乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBVGN)肾组织中的表达及其在HBVGN发病机制中的可能作用。方法采用免疫组化染色法,检测42例HBVGN、20例原发性膜性肾病及5例正常肾组织中NF-κBp65、IκB-α蛋白的表达。结果NF-κBp65蛋白在HB-VGN组织中的表达,明显高于在原发性膜性肾病(P<0.01)及正常肾组织(P<0.05)中的表达,且细胞核和细胞质中都可检测到NF-κBp65的表达;相反IκB-α在HBVGN组织中的表达低于原发性膜性肾病肾组织(P<0.05)。结论HBVGN肾组织可能有IκB-α蛋白降解及NF-κB核转移。NF-κB/IκB可能参与了肾组织的病理损害过程。

血管内皮生长因子对肾小管上皮-间充质细胞转化的作用及其与骨形成蛋白-7、分化抑制因子表达的关系

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的作用及其与骨形成蛋白-7(BMP-7)、分化抑制因子(Id)2、Id3表达的关系。方法体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)经转化生长因子-β1(TGF-β1,5ng/ml)与不同浓度VEGF165(0.1、1、10、100ng/ml)共同作用,或TGF-β1(5ng/ml)与血管内皮生长因子受体-1(VEGFR1)抗体(10μg/ml)共同作用48h后,免疫组织化学双染方法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素表达,实时荧光定量PCR法、Westernblot法检测细胞α-SMA、BMP-7、Id2和Id3的表达。TGF-β1(5ng/ml)、VEGF165(100ng/ml)与激活素受体样激酶-6/Fc嵌合体(Alk6/FcChimera)(2μg/ml,中和内源性BMP-7)共同作用48h后,Westernblot法检测细胞α-SMA、Id2的表达情况。结果TGF-β1作用后,α-SMA表达比正常对照显著增强(P<0.05),E-钙黏素、BMP-7、Id2及Id3的mRNA及蛋白质表达均显著减弱(P<0.05)。VEGF165以浓度依赖方式增强BMP-7及Id2蛋白表达,而显著降低TGF-β1上调α-SMA表达的作用(P<0.05)。加入VEGFR1抗体(10μg/ml)后,TGF-β1上调α-SMA表达的作用显著增强(P<0.05),而E-钙黏素、BMP-7、Id2表达显著减弱(P<0.05)。TGF-β1+VEGF165+Alk6/FcChimera共同作用后α-SMA蛋白表达比TGF-β1+VEGF165共同作用后显著增强(P<0.05),而Id2表达差异无显著性。结论VEGF165可抑制TGF-β1诱导HK-2细胞发生EMT;其机制可能与BMP-7和Id2表达上调有关,而与Id3表达变化无关。Id2表达增强可能与VEGF165的直接作用有关,而与BMP-7无关。

连续性血液净化治疗危重症患者对机体氧化应激的影响

目的前瞻性观察连续性血液净化(CBP)治疗危重症患者对机体氧化抗氧化指标的影响,探讨CBP治疗此类患者的机制。方法10例危重症患者使用HF700型聚砜膜血滤器行CBP治疗。分别在治疗前(0h)和治疗后2、6、12、24和48h取血检测血清过氧化脂质(LPO),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,同时对患者进行动态APACHEⅢ评分,并将评分与氧化应激参数进行相关性分析。结果与健康对照组相比,危重症患者在性别、年龄方面差异无显著性;LPO升高而GSH-Px下降;与健康对照组相比发生了氧化应激;CBP治疗2h后,APACHEⅢ评分即可改善,并随着治疗时间的延长,有不断下降趋势;LPO在治疗2h后,较治疗前无明显增减,6h后明显下降,此后有不断下降趋势;GSH-Px在治疗2h后明显下降,在治疗6,12h后逐渐恢复到治疗前水平,24h后较治疗前明显改善,并有不断上升趋势;LPO同APACHEⅢ评分呈正相关;GSH-Px同APACHEⅢ评分呈负相关。结论危重症患者存在氧化抗氧化紊乱;在CBP治疗过程中,血浆氧化指标持续下降,而抗氧化能力上升,CBP能改善患者的氧化抗氧化紊乱,减轻氧化损伤;CBP能改善危重症患者病情;LPO,GSH-Px可以作为监测危重症患者病情轻重的指标,并为CBP停止的时机及判断预后提供依据。

低蛋白饮食加α-酮酸对减轻腺嘌呤慢性肾功能衰竭大鼠模型血管钙化的作用

目的:观察低蛋白饮食加α-酮酸(LPD+α-KA)这一终末期肾功能衰竭(ESRD)病人营养治疗方法对减轻血管钙化的作用。方法:将18只大鼠随机分为正常对照组、正常蛋白-慢性肾功能衰竭(NPD-CRF)组和LPD+α-KA-CRF组。两组CRF大鼠饲料中含0.75%腺嘌呤。于喂养6周后留取血标本和腹主动脉,测定血钙、磷等生化指标,并采用H-E和Von-Kossa染色,观察各组动物腹主动脉血管壁的钙化程度。结果:与正常对照组比,两组CRF大鼠血肌酐水平均显著升高。NPD-CRF组表现为低钙高磷;LPD+α-KA-CRF组仅血钙显著升高,两组大鼠钙磷乘积均高于正常对照组。NPD-CRF组H-E染色示腹主动脉中层弹力纤维层数减少,排列紊乱,且弹力纤维迂曲断裂。经Von-Kossa染色可见弥漫的蓝黑色颗粒沉积,普遍发生钙化;而LPD+α-KA-CRF组大鼠血管壁中层弹力纤维结构尚完整,仅偶见蓝黑色颗粒沉积,钙化程度较轻。结论:腺嘌呤CRF大鼠模型存在钙磷代谢异常、血管钙化现象。LPD+α-KA可改善低钙高磷血症,并有助于减轻血管钙化程度。

四种气管上皮细胞分离培养方法的比较研究

目的:比较四种不同的方法在培养气管上皮细胞中的异同,改进其培养技术,为组织工程气管提供种子细胞。方法:用两步酶消化法(使用0.1%D ispase 4℃消化18 h后,用0.25%的胰酶37℃消化5m in)、D ispase冷消化法(用0.1%D ispase 4℃消化18 h)、胰酶温消化法(0.25%的胰酶37℃消化10m in)和机械刮刷法四种方法分离、培养兔气管上皮细胞,测定分离细胞的数量和纯度。结果:两步酶消化法、D ispase冷消化法较其他两种方法得到的气管上皮细胞纯度高,细胞状态好;D ispase冷消化法得到细胞数量较其他方法少,其余三种方法得到的细胞数统计学上不存在差异。结论:两步酶消化法较其他方法所得细胞数量多、纯度高、细胞成活率高,是一种较好的气管上皮细胞体外分离培养方法。

VEGF_(165)抑制HK2细胞上皮-间充质转化过程中NOTCH信号系统的变化

目的探讨应用血管内皮生长因子(VEGF165)干预肾小管上皮-间充质转化(EMT)过程中NOTCH信号系统的变化及其意义。方法(1)体外培养的人肾小管上皮细胞(HK2)分为转化生长因子-β1(TGF-β1,5μg/L)单独作用组(T组)和TGF-β1(5μg/L)+VEGF(100μg/L)共同作用组(T+V组),RT-PCR及Western blot方法检测不同作用时间点JAGGED-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。(2)TGF-β1与不同浓度VEGF165(0.1、1、10和100μg/L)共同作用细胞24 h,激光共聚焦显微镜(CFMS)、RT-PCR及Western blot检测E-钙黏素、α-SMA、JAGGED-1、NOTCH1表达。结果(1)作用后24和48 h,T+V组α-SMA和JAGGED-1蛋白表达均明显低于T组(P<0.05)。(2)同TGF-β1单独作用组比较,VEGF165(100μg/L)与TGF-β1共同作用组的E-钙黏素表达明显增强,α-SMA、JAGGED-1及NOTCH1表达均明显降低(P<0.05)。结论VEGF可抑制TGF-β1诱导HK2细胞发生EMT,并同时下调EMT过程中JAGGED-1、NOTCH1分子表达,提示该效应可能是VEGF抑制EMT的机制之一。

连续性血液净化对心脏术后多脏器功能障碍综合征患者炎性介质和氧化应激的影响

目的前瞻性观察连续性血液净化(CBP)对心脏术后多脏器功能障碍综合征(MODS)存活者与死亡者炎性介质和氧化应激指标的影响。方法16例心脏术后MODS伴ARF的患者使用HF700型聚砜膜血液滤过器行CBP治疗,8例存活(A组),8例死亡(B组);分别在治疗前(0h)和治疗后2、6、12、24和48h取血检测两组患者血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-4、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(TAC)等指标的变化。结果CBP治疗2h后A组促炎因子TNF-α、IL-6迅速下降,24h后IL-8明显下降,而死亡组治疗过程中上述炎性介质水平较治疗前无明显变化;两组抗炎因子IL-4在CBP治疗过程中较治疗前有所下降,但无明显统计意义。A组TAC在CBP治疗6h后明显下降,MDA在12h后明显下降,SOD在24h后明显下降;B组SOD、TAC在治疗2h后即开始明显下降,MDA在48h的治疗过程中持续保持高水平,较治疗前无明显下降。结论CBP有助于改善MODS患者促炎因子与抗炎因子的平衡,减轻炎性损伤。CBP能改善MODS患者的氧化应激,减轻氧化损伤。在CBP治疗过程中,TNF-α、IL-6、IL-8、MDA浓度持续高水平及SOD早期下降者预后差;动态监测上述指标可能有助于判断心脏术后MODS患者的预后。

舒洛地特抑制单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化

目的探讨舒洛地特对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾脏间质纤维化的作用,及其对肾小管上皮-间充质转化(EMT)和肾组织Jagged-1、Notch1表达的影响。方法雄性CD1小鼠60只随机分为:假手术组(A组),仅行腹膜切开后缝合;对照组(B组),行单侧输尿管结扎,术后予生理盐水0.1ml/d皮下注射;低剂量治疗组(C组),单侧输尿管结扎术后予小剂量舒洛地特6mg/(kg·d)皮下注射;高剂量治疗组(D组),单侧输尿管结扎术后予大剂量舒洛地特12mg/(kg·d)皮下注射。B、C、D组动物分别于术后第3d、7d、14d处死6只,取输尿管结扎侧肾组织。肾脏标本行HE、Masson染色检测肾间质纤维化程度。应用免疫组化、WesternBlot、RT-PCR检测肾脏组织中α-SMA、TGF-β1、VEGF、Jagged-1和Notch1表达。结果 HE染色显示,UUO术后肾脏间质区域细胞外基质成分逐渐增多,肾小管萎缩,细胞成分减少,而肾小球病变不明显。舒洛地特治疗后UUO小鼠肾脏组织学变化减轻,高剂量组效果更为显著。Masson染色显示,UUO术后小鼠肾组织出现明显肾间质纤维化,舒洛地特治疗可明显抑制肾间质纤维化(P<0.001)。与A组比较,B组肾组织α-SMA、TGF-β1和Jagged-1mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05);舒洛地特治疗明显抑制UUO小鼠肾组织α-SMA、TGF-β1和Jagged-1表达(P<0.05)。B组和A组比较,VEGF表达明显降低(P<0.05),舒洛地特治疗后VEGF表达无明显变化。未检测出小鼠肾组织中Notch1表达。结论舒洛地特可抑制UUO小鼠肾间质纤维化,这可能与舒洛地特抑制UUO小鼠肾组织EMT有关,而EMT的减轻可能与UUO小鼠肾组织TGF-β1,Jagged-1表达下调有关,VEGF在其中的作用尚不明确,其确切机制需进一步探讨。

腹腔内注射低剂量免疫球蛋白治疗持续不卧床腹膜透析相关性腹膜炎的疗效

目的:观察腹腔内注射低剂量免疫球蛋白对腹膜透析相关性腹膜炎的治疗效果。方法:符合条件的28例患者分为A、B两组,每组14例。两组患者在年龄、性别、持续不卧床腹膜透析(CAPD)持续时间、腹膜炎发生率方面无统计学差异。A组腹透液中加入头孢唑林和头孢羧甲噻肟,疗程14d。B组在上述抗生素治疗的基础上每次换液时腹腔内注射人免疫球蛋白(注射用冻干人免疫球蛋白300mg/2mL),疗程7d。分别于治疗开始后,记录每次换液时患者的症状与体征变化,如发热、腹痛、腹部压痛及其症状与体征消失时换液次数,腹透液由混浊变清亮的换液次数,同时每次换液后进行透出液细胞计数并进行分类,细胞计数并分类一直重复到腹透液中白细胞计数正常(<50mm3)。治疗结束后继续随访6个月。结果:至透出液清亮的换液次数和至发热消失的换液次数,B组较A组减少,但无统计学差异(P>0.05);至腹痛和腹部压痛消失时,B组的换液次数较A组明显减少(P<0.05);至透出液中白细胞计数正常(<50mm3)时,B组的换液次数较A组明显减少,两组之间差异有显著性(P<0.05)。结论:腹腔内注射免疫球蛋白联合抗生素治疗可以增加CAPD相关性腹膜炎的抗菌疗效,缩短治疗时间,减少复发。

MCP-1诱导的肾小管上皮-间充质细胞转化与整合素连接激酶表达变化的关系

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)诱导体外培养的肾小管上皮细胞转分化的作用及其与细胞整合素连接激酶(ILK)表达变化的关系。方法体外培养的HKC,以未处理的HKC为阴性对照,以8ng/mlTGF-β1处理的HKC为阳性对照,以不同浓度的MCP-1(0.1、1.0、10、100ng/ml)处理细胞,或以同一浓度的MCP-1(1ng/ml)在不同时间点(0h、12h、24h、36h、48h、72h)处理细胞。用半定量RT-PCR方法测定各组HKC细胞α-SMAmRNA的表达,Westernblot方法测定各组HKC细胞α-SMA及ILK表达。在上述实验基础上进一步观察MEK抑制剂(PD98059,10μmol/L),p38MAPK抑制剂(SB203580,5μmol/L)和ROCK抑制剂(Y27632,500μmol/L)对HKC细胞ILK表达的影响。结果MCP-1(0.1、1.0ng/ml)作用后HKC细胞α-SMAmRNA和α-SMA、ILK蛋白表达显著高于阴性对照组(P<0.01),但低于阳性对照组(P<0.01);其中以1.0ng/mlMCP-1组作用后α-SMAmRNA和α-SMA、ILK蛋白表达水平增高更为显著(P<0.001)。1.0ng/mlMCP-1作用后细胞α-SMAmR-NA和α-SMA、ILK蛋白表达在0～48h内逐渐增加,48h达最高峰(P<0.01),72h时呈下降趋势。分别加入阻断剂PD98059、SB203580和Y27632后,HKC细胞ILK蛋白表达水平与MCP-1单独作用无显著性差异(P>0.05)。结论MCP-1可诱导肾小管上皮细胞转分化并呈时间浓度依赖性,该作用可能与MCP-1上调ILK的表达有关;本研究未发现MCP-1上调ILK的信号传导途径与MEK1、p38MAPK、ROCK途径有关。

组织工程气管上皮组织体外构建的研究

目的:体外构建气管上皮组织,为气管组织工程奠定基础。方法:利用消化法获得气管上皮细胞、成纤维细胞,体外扩增后作为种子细胞,在胶原上接种气管上皮细胞、成纤维细胞,体外构建活性双层气管上皮组织,并行组织学检测。结果:复合培养的组织学苏木精-伊红(H-E)染色切片显示成纤维细胞构成的薄层结缔组织上有气管上皮细胞形成的上皮细胞层。结论:利用胶原成功地在体外构建出了气管上皮组织。