慢性束缚应激动物模型生物学特性及相关机制研究进展

慢性束缚应激动物模型是一种能引起典型非特异性应激反映的有效方法,束缚应激与人类心身性疾病过程相似,广泛用于抑郁症的相关研究,成为应激研究领域中的特点之一。研究表明,慢性束缚应激可以引起明显的行为变化及心脏、免疫、血液、脑组织等生化指标的改变。本文主要综述慢性束缚应激动物模型的临床表现和生物学特性及其相关作用机制,为今后深入研究慢性束缚应激提供参考。

脂多糖经TLR4介导Cx43的表达对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨脂多糖对膀胱癌细胞株Cx43和TLR4蛋白的表达,及其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养膀胱癌5637细胞,在LPS刺激下,采用蛋白质印迹法检测膀胱癌5637细胞中TLR4和Cx43蛋白的表达,通过CCK-8检测5637-control组和5637-LPS组细胞的增殖情况;利用流式细胞术检测5637-control组、5637-LPS组和5637-LPS+顺铂组细胞的凋亡情况。结果:在LPS刺激下,膀胱癌5637细胞中的Cx43基因表达较对照组明显增高,两组之间比较差异有统计学意义(P=0.012),而5637-LPS组(LPS,2μg/mL,24 h)中TLR4及Cx43的表达均较5637-control组明显增高,差异有统计学意义(P=0.019,P=0.003)。CCK-8结果显示,在LPS刺激下,5637-LPS组随着时间(0、1、2、3 d)的增加,细胞的增殖较5637-control组明显,差异有统计学意义(P=0.018)。流式细胞仪检测结果显示,5637-control组和5637-LPS组凋亡率分别为(8.3±1.58)%和(7.8±2.03)%,差异无统计学意义(P=0.099)。而5637-顺铂组凋亡率[(60±4.35)%]较5637-顺铂+LPS组[(52±6.25)%]高,差异有统计学意义(P=0.019)。结论:在LPS刺激下,膀胱肿瘤细胞可能通过提高TLR4和Cx43的表达来介导肿瘤细胞逃脱免疫监视。

体外培养不稳定膀胱组织中Cajal间质细胞缝隙连接蛋白-43的表达

目的:研究缝隙连接蛋白-43在体外培养不稳定膀胱组织Cajal间质细胞中的表达,初步探讨其与逼尿肌不稳定的关系。方法:建立膀胱出口梗阻豚鼠模型,用胶原酶消化法进行逼尿肌不稳定豚鼠膀胱组织中Cajal间质细胞及逼尿肌细胞的原代培养,利用免疫荧光染色法进行两种细胞特征性蛋白c-kit及SMA染色观察;RT-PCR法进行两种细胞的缝隙连接蛋白-43的检测。结果:豚鼠膀胱组织中Cajal间质细胞c-kit染色阳性,SMA染色阴性;逼尿肌细胞SMA染色阳性,c-kit染色阴性。逼尿肌不稳定豚鼠膀胱组织中Cajal间质细胞缝隙连接蛋白-43表达较逼尿肌细胞强(P<0.05)。结论:体外培养不稳定膀胱组织中Cajal间质细胞缝隙连接蛋白-43表达增强,提示Cajal间质细胞间兴奋传递增强与逼尿肌不稳定的发生关系密切。

重组人生长激素对肝硬化大鼠肝脏蛋白质代谢的影响

目的探讨重组人生长激素(recombinantgrowthhormone,rHGH)对肝硬化大鼠肝脏蛋白质代谢的影响。方法100只清洁级雄性SD大鼠,皮下注射3%硫代乙酰胺(TAA)溶液,制备大鼠药物损伤性肝硬化模型,从中随机抽取60只大鼠分为肝硬化组(n=30)和肝硬化+rHGH组(n=30)。正常组以生理盐水同法处理(n=30)。rHGH用法为1U·kg-1·d-1皮下注射,连续14天。注射后第14天取门静脉血测定胰岛素样生长因子-1(insulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)、白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白浓度,取肝脏做白蛋白mRNA定量测定。结果正常对照组血清白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白浓度分别为(32.07±2.15)(1.84±0.11)和(2.85±0.45)g/L,肝硬化+rHGH组分、别为(27.68±2.31)(2.49±0.41)和(2.56±0.27)g/L,均高于肝硬化组的(21.98±1.86)(1.12±0.5)和(1.37±0.32)、、g/L(P<0.01)正常对照组和肝硬化+rHGH组IGF-1浓度比肝硬化组高,差异有显著性(P<0.01)。肝硬化+rHGH;组白蛋白mRNA表达量明显高于肝硬化组。结论rHGH具有刺激产生IGF-1和增加白蛋白mRNA表达量的作用,进而可促进肝细胞蛋白质合成,明显改善肝硬化引起的低蛋白血症。

营养支持在腹部外科围手术期的应用

本文对３１例接受手术的危重病人在术前和术后进行了营养支持，并观察了氮平衡、血浆蛋白和有关的免疫指标。结果显示，营养支持可使氮平衡改善，血浆纤维连接蛋白明显改善，ＣＤ４＋和ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值明显升高，ＮＫ细胞活性明显增强。结合文献对围手术期营养支持的作用、时机和方法进行了讨论。

转染Cx43基因对人膀胱肿瘤细胞缝隙连接通讯及其生长变化的研究

目的:研究Cx43基因对膀胱癌细胞的缝隙连接通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)及其增殖的抑制作用,探索以Cx43基因治疗膀胱癌的可行性。方法:将含Cx43c DNA的质粒以脂质体介导转染Cx43表达缺失的BIU-87人膀胱癌细胞,通过原位杂交、RT-PCR和免疫组化染色检测Cx43m RNA及蛋白表达,划痕标记荧光染料示踪技术(SLDT)检测GJIC,MTT法测定细胞增殖率,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:转染后BIU-87细胞有不同程度的Cx43 m RNA和蛋白表达及GJIC恢复。Cx43高表达的克隆细胞增殖明显下降,细胞凋亡并未增加。结论:Cx43基因及GJIC在膀胱癌的发生、发展过程中起重要作用,可能成为膀胱癌基因治疗的优选靶点之一。

胸腺五肽乙酯的抗应激作用研究

目的考察胸腺五肽乙酯的抗应激作用。方法 (1)抗热应激作用:昆明系小鼠,共6组,在22℃条件下适应2天。除空白组外,其他小鼠放于42℃恒温孵箱中作用1h。在此期间禁水禁食。空白组和模型组皮下注射生理盐水0.2ml,试验组给予胸腺五肽乙酯生理盐水溶液,高剂量组2mg/kg、中剂量组0.2mg/kg、低剂量组0.02mg/kg,阳性对照组给予TP5 0.2mg/kg。(2)抗慢性应激作用:昆明系小鼠,共6组,置于22℃环境中,自由食水,可以自由活动。除空白组外,其余小鼠接受21天不同的应激刺激,每日1次,平均每种刺激3次。于每日进行刺激前1h皮下注射给药,空白组和模型组每天给予生理盐水0.2ml,试验组给予胸腺五肽乙酯生理盐水溶液,高剂量组2mg/kg、中剂量组0.2mg/kg、低剂量组0.02mg/kg,阳性对照组给予TP5 0.2mg/kg。分别在热应激模型和慢性应激小鼠模型上,通过放射免疫分析法测定血浆皮质醇、IL-2含量,以羟胺法测定血浆SOD水平。结果胸腺五肽乙酯能抑制应激小鼠的皮质醇增高效应,并提高血浆IL-2水平和SOD活力,与模型组和阳性对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论胸腺五肽乙酯具有明显的抗应激作用。

缝隙连接蛋白-43在膀胱出口部分梗阻的大鼠逼尿肌细胞膜中的表达

目的探讨缝隙连接蛋白-43(Cx-43)在膀胱出口部分梗阻大鼠逼尿肌细胞膜中表达的变化。方法 33只Wistar大鼠分为模型组和假手术组,两组大鼠分别于术后2、4和8 w处死,同时进行膀胱内测压、缝隙连接数量、形态变化及Cx-43的检测。结果在模型组中缝隙连接的数量显著降低,并且术后4 w Cx-43在模型组大鼠逼尿肌细胞膜上的表达显著降低。模型组大鼠逼尿肌细胞膜上的缝隙连接数量也明显减少。结论正常的排尿过程是通过逼尿肌细胞间的缝隙连接直接作用的结果。缝隙连接介导的细胞间通讯功能障碍可能是导致排尿功能障碍的原因。

Cx43通过P38/MAPK信号途径增强膀胱癌细胞的侵袭能力

目的:探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)对膀胱癌细胞侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法:选取2014年6月至2015年9月间承德医学院附属医院泌尿外科52例膀胱癌手术组织标本及32例癌旁组织,以及人膀胱癌细胞株5637。用免疫组化方法检测膀胱癌组织中Cx43蛋白表达。将Cx43脂质体、空白脂质体、siRNA及siRNA对照质粒转染5637细胞,Western blotting验证过Cx43表达和干扰效果;用Transwell侵袭实验检测5637细胞侵袭能力的变化,用Western blotting检测5637细胞MMP-2、MMP-9和P-P38蛋白表达水平的变化。结果:膀胱癌组织中Cx43蛋白的表达水平明显高于癌旁组织[(5.21±0.33)vs(2.84±0.19),P<0.01]。转染Cx43脂质体和siRNA成功上调/下调5637细胞中Cx43的表达。Cx43过表达组5637细胞的侵袭能力高于对照组[穿膜细胞数:(1.36±0.04)vs(0.70±0.15)个,P<0.01],siRNA干扰组细胞的侵袭能力低于对照组[穿膜细胞数:(0.20±0.08)vs(0.59±0.13)个,P<0.05)。Cx43过表达组细胞MMP-2、MMP-9、P-P38/P38蛋白水平均高于对照组(P<0.01或P<0.05),siRNA干扰组均低于对照组低(均P<0.01)。结论:Cx43增强膀胱癌5637细胞的侵袭能力,其机制可能是通过激活P38/MAPK信号途径实现的。

肾嗜酸细胞腺瘤诊治分析

目的探讨肾嗜酸细胞腺瘤的诊断和治疗的方法。方法回顾性分析23例肾嗜酸细胞腺瘤患者的临床特征、影像学、病理学表现,治疗及预后,并复习相关文献。结果 23例患者,男15例,女8例;年龄52～73岁。病变均为单侧,左侧10例,右侧13例。直径2～17 cm。有症状者11例,主要表现为患侧腰部胀痛不适;有体征者5例,均表现为腹部包块;另7例体检时行超声检查发现。B超均表现为质均、边界清楚的实性回声;CT表现为肿瘤密度均匀,瘤体中央有星状结构。行根治性肾切除术12例,肾部分切除术11例。免疫组化染色重组人细胞角蛋白18(CK18)强阳性、波形蛋白(Vimentin)阴性。术后病理回报均为肾嗜酸细胞腺瘤。18例患者随访2～62个月无肿瘤复发或转移。结论综合病史及影像学检查特点可考虑肾嗜酸细胞腺瘤的诊断,确诊靠术后病理。选择保留肾单位的肿瘤切除术是其首选治疗方法。

腹部外科围手术期病人营养状况和免疫功能的评价

本研究将１３例接受胃癌根治术的病人作为腹部外科围手术期病人营养与免疫指标变化的研究对象，并对其加以评价。结果：本组术前存在营养不足和免疫抑制；术后营养指标和免疫指标进一步降低，差异显著；术后出现并发症４例，均与营养指标和免疫指标下降有关。

豚鼠腺性膀胱炎模型的建立及尿流动力学的检查

目的探讨豚鼠腺性膀胱炎动物模型的建立方法及尿流动力学检查方法。方法将28只雌性豚鼠分三组:正常对照组、生理盐水对照组和造模组。用膀胱内灌注大肠杆菌的方法制作腺性膀胱炎动物模型,7周后行尿流动力学检查及病理检测。结果尿流动力学检查发现造模组豚鼠储尿期逼尿肌不稳定发生率较正常对照组及生理盐水对照组显著增多(P<0.001);正常对照组无腺性膀胱炎病变,生理盐水对照组出现腺性膀胱炎1例,造模组出现7例,造模组与另外两组相比差异有统计学意义(P<0.05),正常对照组与生理盐水对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论膀胱内灌注大肠杆菌可导致腺性膀胱炎,这证实了细菌感染是腺性膀胱炎的病因之一,同时为临床上的抗感染治疗提供了理论依据。此方法可用于建立腺性膀胱炎的动物模型。同时确立了腺性膀胱炎动物模型尿流动力学检查方法。

左旋多巴分析方法研究概况

左旋多巴用于治疗帕金森病已有30多年的历史,目前在临床上仍占有重要地位。近年来左旋多巴的体内外分析方法都取得了很大进展,紫外分光光度法、高效液相色谱法在左旋多巴的体内外分析中应用最广,流动注射自动分析方法和毛细管电泳法等也有广泛应用,可见-紫外分光光度检测器、荧光检测器、电化学检测器、化学发光检测、蒸发光散射检测器等新型检测器都有报道。本文通过查阅文献,对制剂中左旋多巴原药物和生物样品中左旋多巴及其代谢物的分离分析方法进行了概括和总结。

基于堆栈的Windows Shellcode编写方法研究

为更好地理解与防范缓冲区溢出攻击,对Windows平台下Shellcode的编写、提取技术及验证方法进行了研究。从概念出发,理清了Shellcode与Exploit的区别,分析了Shellcode的工作原理,介绍了利用Shellcode所需的3个步骤。在实验的基础上,总结了Shellcode的编写方法及提取技术,最后给出了验证Shellcode有效性的方法。

早期肠内免疫营养在重症急性胰腺炎治疗中的应用

目的比较免疫营养配方（EIN）与标准配方肠内营养（EN）对重症急性胰腺炎（SAP）炎症反应和患者感染预后的影响。方法所有患者均符合SAP诊断标准，APACHEII评分8分以上。随机分为两组：免疫营养组22例（研究组），给予EIN；对照组22例，给予标准型EN。共30d。两组患者的一般情况和病情严重度相似，并给予相同的处理，在发病1周左右，通过内镜放置鼻空肠管或经胃镜胃造瘘术行EIN及EN。观察全身炎症反应、营养指标的变化，比较感染等并发症发生率和病死率。结果①研究组死亡1例，对照组死亡2例；②两组的胰周感染发生率差异有统计学意义（P〈0．05）；③两组治疗前后C反应蛋白、白细胞计数均明显下降（P〈0．05），血小板计数均有所升高，差异有统计学意义（P〈0．01）；④平均住院时间两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论早期EIN与普通EN都能明显减轻SAP患者的炎症反应，改善营养状况，但EIN在预防SAP患者继发感染反应方面优于普通EN。

低温环境对电子控制模块发火电容性能的影响

通过“-40℃,4 h”低温存储试验研究了低温环境对A(钽电容)、B(电解电容)、C1(电解电容)及C2(钽电容)4种带点火药头电子控制模块的发火性能的影响,使用示波器测试了4种样品的发火电容在发火流程各阶段的电压值变化。研究发现:经过“-40℃,4 h”存储,试验前后钽电容及电解电容在发火流程各阶段的电压值没有明显变化,A(钽电容)和C2(钽电容)样品的发火电容性能没有影响;在-40℃环境下,B(电解电容)和C1(电解电容)中0 h-1#、0 h-2#样品均未发火,电解电容无法正常工作。

品牌APP:移动互联网时代品牌传播的自媒体平台

APP被认作是品牌继微博、微信后迈进移动互联网的第三大入口。当前用户、终端、流量和应用的移动化特征和趋势日益显著,品牌APP已成为移动互联网时代品牌"数字化生存"和"移动化生存"的重要形式。作为品牌传播新型自媒体平台,品牌APP刷新了互联网思维,颠覆了传统广告传播思路,赋予了整合营销传播更大的活力和可能性。同时,品牌APP亟须在用户体验、创意设计、市场推广、数据监测与评估等方面构建、完善运营路径。