肿瘤抑制基因PTEN负性调控鼠心肌肥大

目的观察肿瘤抑制基因PTEN(phosphatase and tensin homolog tumor suppressor)过度表达对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激所致Ca2+/钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)信号通路的影响,探讨PTEN负性调控心肌肥大的作用机制。方法利用携带野生型PTEN基因的腺病毒(adenovirus-mediated transfer of PTEN,Ad-PTEN)感染获得过度表达PTEN的原代培养心肌细胞,以AngⅡ作为促心肌肥大刺激剂处理心肌细胞,利用Furo-2/AM比率荧光成像系统检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i),逆转录酶-多聚酶链反应(reactive transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测受感染细胞内心钠素(atrial natriuretic factor,ANF)、β肌球蛋白重链(β-myocin heavy chain,β-MHC)与钙调神经磷酸酶(calcineurin Aβ,CaNAβ)的mRNA表达,免疫印迹(western blot)检测CaN Aβ的蛋白表达,同时测定CaN活性。结果Ad-PTEN感染后,心肌细胞内过度表达PTEN的mRNA和蛋白。AngⅡ刺激后[Ca2+]i、CaNAβ mRNA与蛋白表达以及CaN活性分别为(229±18)nmol/L、(1.34±0.09)μmol·mg-1·h-1、(1.74±0.10)μmol·mg-1·h-1和(3.26±0.23)μmol·mg-1·h-1,较无AngⅡ刺激组显著增高(P<0.05),PTEN过度表达组[Ca2+]i,CaNAβ mRNA与蛋白表达以及CaN活性分别为(178±19)nmol/L、(0.81±0.07)μmol·mg-1·h-1、(1.18±0.02)μmol·mg-1·h-1、(1.89±0.39)μmol·mg-1·h-1,较无PTEN过度表达组显著降低(P<0.05)。结论PTEN过度表达可抑制Ca2+/CaN信号通路,负性调控血管紧张素Ⅱ刺激所致心肌细胞肥大。

碱性成纤维细胞生长因子与心肌肥大关系研究进展

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是重要的心脏发育中形态和生长调节多肽，其在成年心脏中调节生长和细胞表型的作用不完全清楚。进年来发现在心血管重构中都伴有bFGFmRNA及bFGF表达合成变化，表明bFGF在成年心肌细胞及平滑肌肥大过程中有重要作用。阐明bFGF在心肌肥大中的作用及机制对于理解压力负荷致心脏肥大，预防心肌衰竭，降低高血压的死亡率有重要的临床意义。

bFGF在压力超负荷肥厚心肌中的表达及Losartan干预的实验研究

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在左室肥厚发生、发展中的作用及Losartan对左室肥厚的干预作用。方法:应用免疫组化法测定腹主动脉缩窄后大鼠心肌组织bFGF的表达变化。结果:腹主动脉缩窄后心肌组织bFCF在心肌细胞中的表达显著增加,P<0.01,术后第7d达最高峰;术后第14d左室肥厚病理改变明显。应用AngⅡ_1型受体(AT1)拮抗剂Losartan后,bFGF表达下降,左室肥厚被抑制。结论:bFGF参与左室肥厚的发生、发展,Losartan可抑制左室肥厚。

MEK信号通路参与PTEN对心肌细胞肥大的负性调控

目的探讨第10号染色体上同源丢失的磷酸酶张力蛋白(PTEN)基因的过度表达对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥大的负性调控机制。方法通过携带野生型PTEN基因的腺病毒(Ad-PTEN)感染,构建过度表达PTEN的原代培养的心肌细胞模型。以AngⅡ为促心肌肥大的刺激剂,采用RT-PCR检测受感染细胞内心房钠尿肽(ANP)、β肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA的表达,用Western blot检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(pERK1/2)蛋白的表达。结果Ad-PTEN感染后,心肌细胞内过度表达的PTEN mRNA和其蛋白,可明显抑制AngⅡ刺激所致心肌细胞肥大标志基因的表达。AngⅡ刺激可使ERK1/2与pERK1/2蛋白的表达明显增高;但PTEN的过度表达能明显抑制AngⅡ引起的ERK1/2与pERK1/2蛋白的表达。结论PTEN能够负性调控AngⅡ刺激引起的心肌细胞肥大,MEK1/ERK1/2信号通路可能参与了PTEN的负性调控过程。

汶川地震灾区灾后3个月疾病谱的变化及医学救援分期

目的探讨汶川地震灾区灾后3个月疾病谱的变化及医学救援分期方法。方法根据《疾病和有关健康问题的国际统计分类》,先将疾病分为外伤/伤口类疾病、非外伤性外科疾病、内科疾病三大类,再按各专科救治情况进行分类统计。结果震后7d内发生疾病以外伤/伤口类疾病占绝大多数;震后8d非外伤性外科疾病发病率逐渐升高,1个月后发病率稳定于50.72%～54.20%,主要为骨科类疾病和妇产科类疾病;震后4d内科性疾病发病率逐渐升高,1个月后稳定于44.32%～48.69%,主要为急性呼吸道、消化道感染、过敏性皮肤病和心理性疾病。结论汶川地震灾难医学救援可分为早、中、晚三期。早期(震后1～7d)疾病种类主要为外伤/伤口类;中期(8～30d)既有一般性内外科疾病,又有余震和地震所造成的次生灾害类伤病,此期为震后精神类疾病的高发期;晚期(震后1～3个月)多为当地常见病、多发病。

钙通道阻滞剂对心肌重构保护机制的研究

目的研究L和L/T型钙通道在梗死心肌组织中钙蛋白酶介导的心肌损伤中的作用。方法结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型,术前7d分别用安慰剂、L型钙通道阻滞剂阿莫地平(4mg·kg-1d-1)、L/T型钙通道阻滞剂米贝拉地尔(10mg·kg-1·d-1)。术后1、3、7、14d分别检测左心室游离壁(LVFW)、室间隔(IS),右室壁(LV)钙蛋白酶(ucalpain,mcalpain)及钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)表达。术后14d测心肌梗死病灶大小、IS隔厚度、左室大小。结果室间隔ucalpain蛋白表达于心肌梗死14d增加;左室游离壁mcalpain蛋白表达于心肌梗死3d时达高峰。米贝拉地尔更明显地抑制心肌组织mcalpain的上调,缩小心肌梗死病灶。阿莫地平则抑制ucalpain蛋白表达,明显抑制左室扩张和室间隔肥厚。结论心肌梗死病理过程中,梗死病灶内mcalpain上调,肥厚组织中ucalpain上调。L和L/T型钙通道阻滞剂能减轻心肌重构与选择性的抑制心肌组织中的ucalpain和mcalpain有关。

老年人群体质量指数与血压、血脂、血糖水平的相关性:1655例调查

目的了解离退休老年人群心血管疾病发病的相关因素,以制定合理的预防措施。方法选择离退休干部体检人员1655例,≥60岁,调查身高、体质量,血压、血糖、总胆固醇、三酰甘油。结果超重及肥胖的老年人1001例(60.5%),并随年龄增加,肥胖人数的比例逐渐增加(F=4.11～57.76,P<0.05)。随体质量指数(bodymassimdex,BMI)的增加,收缩压、舒张压、空腹血糖、三酰甘油增高,原发性高血压、冠心病、糖尿病、高脂血症的发病率也逐渐增加(P<0.01)。收缩压、舒张压、胆固醇、三酰甘油、空腹血糖均与BMI呈正相关(r=0.883,P<0.001),均是影响BMI的独立因素。结论对该组人群进行以预防肥胖为重点的健康教育,是降低心血管病的发病率的十分迫切和有益的工作。

血管紧张素转换酶抑制剂对梗死心肌组织钙蛋白酶的影响

目的探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对梗死心肌组织钙蛋白酶(calpain)系统的调节作用。方法结扎大鼠左冠状动脉复制心肌梗死模型,术前7d起用ACEI雷米普利(rampril)(1mg·kg-1·d-1)。术后1、3、7、14d分别检测左心室游离壁(LVFW)、室间隔(IS)、右室壁(RV)calpainⅠ、Ⅱ及钙蛋白酶抑制剂(calpastatin)蛋白表达。结果室间隔calpainⅠ蛋白表达于心肌梗死14d增加;左室游离壁calpainⅡ蛋白表达于心肌梗死3d达高峰。雷米普利可抑制心肌组织calpainⅠ和Ⅱ的上调,减少心梗面积和间质纤维化,calpastatin蛋白表达不受ACEI的影响。结论CalpainⅠ参与梗死心肌组织的晚期重塑,calpainⅡ参与缺血心肌组织的早期损伤作用。心肌梗死病理过程中,ACEI的心脏保护作用可能与其抑制calpainⅠ、Ⅱ有关。

经左锁骨下静脉穿刺植入电极行床旁紧急心脏临时起搏31例

目的：探讨对缓慢心律失常及心跳骤停时紧急心脏起搏救治的新方法。方法：３１例患者均采用非Ｘ线条件下，选择左锁骨下静脉穿刺插入起搏电极，于病床旁行紧急心脏起搏。结果：电极到位率１００％，心脏有效起搏率１００％。除２例患者死于非起搏因素外，其他患者均安全渡过危险期。结论：此法操作简便，起效迅速，疗效恒定，并发症少，患者存活率高，不失为一种救治缓慢心律失常或复苏心脏的可靠方法。

同型半胱氨酸对血管内皮细胞E-选择素、IL-6分泌的影响

目的探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对人脐静脉内皮细胞E-选择素、白细胞介素6(IL6)分泌的影响。方法在人脐静脉内皮细胞ECV304培养基中加入不同浓度Hcy,孵育不同时间,用ELISA法分别测定培养上清液中E-选择素及IL6的含量。结果终浓度为250μmol/L的Hcy孵育内皮细胞,E选择素的分泌在4h显著上调,6h达峰值;IL6的分泌在6h开始升高,24h达峰值,之后随着时间的延长逐渐下降。Hcy呈浓度依赖性(50μmol/L～500μmol/L)促进内皮细胞E选择素及IL6的分泌。结论Hcy能刺激血管内皮细胞分泌E选择素及IL6。

富氢生理盐水对心肌梗死后心肌重构的影响

目的观察富氢生理盐水对心肌梗死心肌重构的影响,并探讨其可能机制。方法选用20-25g的健康C57/BL6小鼠60只,随机分为对照组、心肌梗死（MI）组和MI＋富氢生理盐水（HRS）组,21天后通过心脏超声、多导生理记录仪检测心脏功能和血流动力学指标,病理染色观察心肌梗死范围、心肌肥厚和间质纤维化,并检测梗死交界区心肌中氧化应激和炎症反应情况。结果腹腔注射HRS可以明显改善小鼠心肌梗死后心脏功能（P〈0.01或P〈0.05）,缩小心肌梗死面积（P〈0.01）,抑制非梗死区的心肌细胞肥大和间质纤维化,增强心肌中超氧化物岐化酶活性,降低丙二醛、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-6、单核细胞趋化蛋白-1含量（P〈0.01或P〈0.05）。结论 HRS通过抑制心肌重构来改善小鼠心肌梗死后的心脏功能,可能与其减轻氧化应激、抑制过度炎症反应有关。

钙激动剂诱导心肌肥大转录因子的表达

目的 探讨不同来源的细胞内游离Ca2+ 浓度( [Ca2+ ] )在钙神经磷酸酶 (CaN) 活化T细胞核因子 3(NFAT3 )介导心肌肥大中的作用。方法 分别用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ )或雷诺定 (RY)刺激培养的大鼠心肌细胞外Ca2+跨膜内流或细胞内Ca2+释放,检测CaN、NFAT3、锌指转录因子(GATA4 )蛋白量以及氚 亮氨酸 (3H Leu)参入量,环孢素A(CsA)作为CaN特异抑制剂。结果 AngⅡ、RY刺激1、3d,心肌细胞CaN、NFAT3、GATA4 蛋白表达及 3H Leu参入量较对照组明显增高 (P<0 05或 <0 01 )。CsA可抑制上述作用,与刺激组相比差异有显著性 (P< 0 05或 <0 01)。结论 刺激心肌细胞Ca2+内流及Ca2+释放,均可激活CaN NFAT3 信号通路。该信号通路的激活与 [Ca2+ ]i增加有关,而与[Ca2+ ]i的来源无关。CsA能够抑制AngⅡ和RY介导的CaN NFAT3 GATA4 表达的增加和蛋白质合成。

罗格列酮对2型糖尿病合并不稳定性心绞痛患者血清MMP-9及IL-18的影响

目的观察罗格列酮对2型糖尿病合并不稳定性心绞痛患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及白细胞介素-18(IL-18)的影响。方法 82例2型糖尿病合并不稳定性心绞痛患者,随机分为罗格列酮组(n=41)和常规治疗组(n=41)。观察两组治疗前后空腹血糖、血脂及血清MMP-9I、L-18的差别。结果治疗前两组患者空腹血糖、血脂及血清MMP-9I、L-18的水平无显著差异(P>0.05);治疗4个月后,两组患者空腹血糖、血脂无显著差异,血清MMP-9及IL-18较治疗前均下降(P<0.01),罗格列酮组较常规治疗组下降明显,两组间差异显著(P<0.05)。结论罗格列酮能减少糖尿病合并不稳定心绞痛患者炎症介质的分泌,可能具有改善动脉粥样硬化的作用。

超声引导下注射凝血酶治疗医源性股动脉假性动脉瘤

目的:探讨超声引导下瘤腔内注射凝血酶治疗医源性股动脉假性动脉瘤的方法及其可行性和安全性。方法:6例患者因行股动脉穿刺于术后2～5d发生6处股动脉假性动脉瘤,均在彩色多普勒超声定位下通过瘤腔内注射凝血酶进行治疗,治疗后即刻超声复查,并定期随访。结果:4例患者4处假性动脉瘤一次性注射凝血酶300～500U后瘤腔即刻闭合,随访10～90d,假性动脉瘤无复发。2例患者2处假性动脉瘤瘤体较大,第1次注射后于第3d复发,行第2次注射后,假性动脉瘤无复发。其中1例患者出现一过性肢体栓塞临床表现,经观察后肢体栓塞临床表现消失,未特殊处理。6例患者均未出现过敏反应等并发症。结论:瘤腔内注射凝血酶治疗医源性股动脉假性动脉瘤是一种创伤小、有效、安全的方法,但操作时需注意瘤体的大小及凝血酶的用量。

AT2R基因转染对树突状细胞成熟和免疫功能的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因表达对树突状细胞(DC)成熟及免疫功能的影响,探讨AT2R参与动脉粥样硬化斑块进展的免疫炎性反应机制。方法用免疫磁珠分离纯化C57BL/6J小鼠骨髓细胞,体外培养为DC,再转染携带绿色荧光蛋白的AT2R基因重组腺病毒载体(p Ad CMV/AT2R)或空病毒载体(p Ad-GFP),分为对照组、脂多糖组、p AdGFP组、p Ad CMV/AT2R组及p Ad CMV/AT2R+AT2RB组(AT2R拮抗剂)。用荧光显微镜、RT-PCR、Western印迹检测绿色荧光及AT2R mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测DC表面标志CD86和MHCⅡ的表达率;MTT检测DC刺激T淋巴细胞增殖能力;ELISA检测细胞因子白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果 DC转染病毒后有绿色荧光及AT2R mRNA和蛋白的表达,p Ad CMV/AT2R组CD86和MHCⅡ的表达、T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌量都较对照组高(P<0.01),但比脂多糖组显著降低(P<0.05或P<0.01),p Ad CMV/AT2R+AT2RB组上述变化也显著高于对照组(P<0.01),但与脂多糖组比较无显著差异(P>0.05)。结论 DC表达AT2R基因,AT2R能抑制DC成熟诱导的局部免疫炎性反应,推测AT2R可能介导抑制动脉粥样斑块的进展。

激活过氧化物酶体增殖物激活受体-δ对梗死心肌腱糖蛋白表达的影响

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体-δ(PPARδ)激动剂GW610742X对梗死心肌腱糖蛋白表达的影响。方法 60只Wistar大鼠,随机分为对照组,假手术组,心肌梗死(MI)组,心肌梗死+GW610742X(GW)组;结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型,GW组给予PPARδ激动剂GW610742X喂养。3个月后检测各组大鼠左心室游离壁的腱糖蛋白表达;用免疫荧光法检测左心室游离壁心肌腱糖蛋白的分布。结果心肌梗死(MI)组术后3个月左心室游离壁心肌有不同程度的坏死及纤维化。MI及GW组基质腱糖蛋白的表达高于对照组及假手术组(P<0.01),GW组基质腱糖蛋白的表达低于MI组(P<0.05),假手术组与对照组基质腱糖蛋白的表达无显著差异(P>0.05)。结论梗死心肌的重构病程中,基质腱糖蛋白显著上调,激活PPARδ能抑制腱糖蛋白的表达。

血管紧张素Ⅱ受体和钙蛋白酶在心肌重构中的作用

目的:探讨不同程度充血性心力衰竭(CHF)病人心肌组织血管紧张素Ⅱ受体(AT1、AT2)mRNA表达与钙蛋白酶和心功能的关系。方法:RT-PCR检测39例瓣膜病所致的不同程度心力衰竭病人与8例正常人心肌组织AT1和AT2mRNA表达。免疫沉淀检测钙蛋白酶(u-calpain,m-calpain)蛋白表达。结果:瓣膜病所致心力衰竭病人心肌组织呈心肌重塑的病理改变。轻度心衰组AT1mRNA表达较正常人高,中重度心衰组AT1mRNA表达明显降低,AT2mRNA表达差异无显著性,但AT1/AT2比值明显降低。u-calpain,m-calpain蛋白表达随心功能恶化而增加。结论:重度心衰病人心肌组织以AT2为主,钙蛋白酶系统处于激活状态进一步恶化心功能。

急诊PCI替罗非班预防无复流的作用

目的探讨急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)替罗非班预防冠脉无复流的作用。方法回顾分析急诊PCI患者90例,根据PCI术前及术中是否使用替罗非班,分为替罗非班组50例(无复流3例,血流正常47例),对照组40例(无复流12例,血流正常28例),记录两组基础临床情况、观察两组患者术中无复流发生率。结果替罗非班组无复流发生率6%明显低于对照组30%,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论急诊PCI加强抗血小板治疗能减少无复流的发生,提高手术的近期疗效。

促红细胞生成素对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,Epo)对兔心肌缺血再灌注的保护作用。方法建立兔心肌缺血再灌注损伤模型,选用新西兰兔30只随机分为对照组、缺血组、Epo治疗组,检测血浆丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(cTnT)和心脏组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、白介素-6(IL-6)变化。结果 Epo治疗组血浆MDA、CK、CK-MB、cTnT水平较缺血组显著下降(P<0.05);心脏组织匀浆SOD显著升高、IL-6显著降低(P<0.05)。结论 Epo对兔心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,这种作用可能与提高心脏组织中SOD水平,降低心脏组织中IL-6水平有关。