草鱼生长激素单抗免疫亲和柱的制备及初步应用

用纯化的草鱼生长激素单克隆抗体偶联到CNBr活化的Sepharose4B凝胶上，制成约10ml的亲和层析柱．用该柱一步纯化了重组鲤鱼生长激素基因的表达产物．偶联有13．65mg单克隆抗体的亲和柱一次可纯化得到约0．7mg重组鲤鱼生长激素．酶联免疫受体测定表明它具有强烈的生物学活性，SDS－PAGE表明它为单一蛋白带，分子量约为22000．

SPOC联合PBL教学法在《麻醉生理学》教学中的应用探讨

《麻醉生理学》是麻醉学专业本科生的专业核心必修课程,南方医科大学麻醉学院积极探索《麻醉生理学》的线上线下混合式教学,采用小规模限制性在线课程(small private online course,SPOC)联合以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL),以项目—问题为导向,在追求巩固知识目标的基础上引导学生为解决问题而主动学习,兼顾了理论知识的教授,又致力于培养学生发掘问题、分析问题、解决问题的综合能力,体现了“以学生为主体,以问题为中心,学生为解决问题而主动学习”的新理念,有助于提高教学质量深化教学改革,获得良好的教学效果。

儒家生态伦理思想的内涵

在现代生态伦理学视域下,儒家"天人合一"的哲学根据,"一体之仁"的人性基础,"中庸和谐"的生态理想,是一份独特的思想资源。揭示儒家生态伦理思想的内涵,对建构新时代中国特色的生态伦理有着十分重要的实践价值。

论《中庸》之“诚”的形上意义及道德价值

《中庸》是先秦儒学的哲学纲领,它既是对先秦儒学的总结和发展,又是宋明新儒学的经典根据。作为《中庸》思想体系核心观念的“诚”,在《中庸》里是贯通天人、连接物我的一个重要哲学范畴,并且被赋予了伦理与哲学的双重意蕴。《中庸》之“诚说”构成了儒家道德形上学较为完备的思想体系。

意义·觉解·境界——略论冯友兰对人生意义的追问

人生意义的追寻是人生哲学的必然旨归。冯友兰的人生哲学,以目的论为人生意义追问的逻辑起点,以觉解论为言说中介,以境界说为人生意义追问的终极界说。这表现了冯友兰对于复兴中国传统哲学精神和价值的终极关切。

经典诵读在儿童教育中的德育价值

经典文本承担着道统传承的使命,经典思想可以实现道德理念的内化,经典诵读有助于道德品质的生成。在新时代,儿童经典诵读,不仅是对优秀传统文化的继承,也在潜移默化中培养儿童的道德品质。

儒学的三重向度及其现代价值

在中国历史发展中,儒学全方位地参与了社会生活的各个方面,形成了贯穿心性、政治、社会的完整思想理论体系。这一体系包括心性儒学、政治儒学和生活儒学的三重向度。儒学三重向度的互动与整合是中国文化复兴的价值基础。

牟宗三对儒家道德形上学的现代重建

现代性造成道德与知识的紧张是近代以来中国哲学所面临的突出问题。牟宗三会通儒家心性之学和康德哲学,用"一心开二门"的哲学架构,重建了儒家的道德形上学。肯定良知,确立德性的优先性,又给知识以恰当的安排,是牟宗三穷其一生对现代性所作的积极回应。道德形上学的重建无疑再植了儒家思想在现代性中的智慧灵根。

牟宗三对儒家道德形上学的现代诠释——以《中国哲学的特质》为中心的考察

"性"是儒家哲学的核心概念。牟宗三以天论性,确立了儒家道德形上学的超越本体;即心说性,奠定了儒家道德形上学的内在根据;贯通性与天道,沟通主客,打通天人,完成了儒家道德形上学的哲学重构。牟宗三对儒家道德形上学的诠释,为儒家思想的现代转型开创了一条生生不息之途。

草鱼垂体生长激素分离纯化及其抗体制备的研究

应用碱性抽提、亲和层析、凝胶过滤和离子交换层析等技术从草鱼垂体中分离提纯出纯度高的 草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）。用酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）检测表明草鱼ＧＨ与大马哈鱼ＧＨ抗血清 具有明显的免疫交叉反应，而与大马哈鱼催乳素（ＰＲＬ）抗血清没有交叉反应，聚丙烯酰胺凝胶电 泳表明草鱼 ＧＨ为单一蛋白带，其分子量约为２２５００道尔顿；等电聚焦揭示出草鱼 ＧＨ主要由等电 点为４．７和５．０的两条蛋白带组成。用纯化的草鱼ＧＨ制备了其特异的兔抗血清。在ＥＬＩＳＡ测定中， 该抗血清与大马哈鱼ＧｔＨ及牛ＧＨ完全没有交叉反应，而与大马哈鱼ＧＨ只有当其浓度高达２ｕｇ／ ｍｌ时，才有微弱的交叉反应．草鱼 ＧＨ抗血清的效价确定为１： ４００００左右。应用草鱼 ＧＨ及其抗血清 建立了酶标受体测定法（ＥＬＩＳＡ－ＲＡ）并检测了草鱼ＧＨ的生物活性。结果表明，草鱼ＧＨ具有与草 鱼肝细胞ＧＨ受体特异结合的生物活性。免疫细胞化学研究表明草鱼ＧＨ抗血清只与草鱼垂体间 叶（ＰＰＤ）的生长激素分泌细胞特异结合，而与前叶（ＲＰＤ）及后叶（ＰＩ）细胞均无染色反应。

牟宗三论儒家道德形上学的伦理精神

牟宗三会通康德哲学和儒家心性之学,由道德的进路,重构了儒家的形上学。这种道德形上学突显了内在超越、实践理性和道德宗教的伦理精神。它打通超越与内在、本体与工夫、道德与宗教的关节,实现了伦理世界与超越世界的完美统一。

草鱼的生长及其血清生长激素水平的季节和日变化规律的研究

在池塘养殖条件下，草鱼种（始重１５～３０ｇ／尾）在６～８月份生长速度明显高于其他月份，而以６月份生长速度最快，冬季生长最慢；其血清ＧＨ水平也呈现明显的季节性变化规律，４～５月份血清ＧＨ明显高于其他时期，而４月份达峰值。在繁殖季节，草鱼亲鱼在临催产前，血清ＧＨ水平明显升高，出现一个明显的ＧＨ高峰，产卵后，此ＧＨ峰值即行消失。在实验室条件下，草鱼种在一天内血清ＧＨ水平也存在明显周期性变化，ＧＨ水平夜间一般高于白天。

用酶联免疫吸附受体法检测鱼类生长激素的生物活性

根据激素—受体反应的原理，结合酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体测定法（ＲＲＡ）的优点，应用我们纯化的草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）和大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及其特异抗体．采用鱼类肝细胞膜受体制剂，首次建立了测定鱼类ＧＨ生物活性的酶联免疫吸附受体测定法（ＥＬＩＳＡ—ＲＡ）。此法检测草鱼ＧＨ的灵敏度达０．０６３～０．１２５μｇ／ｍｌ，检测大马哈鱼ＧＨ与草鱼肝膜受体结合的灵敏度达０．２５μｇ／ｍｌ。同时表明草鱼ＧＨ、基因重组鲤ＧＨ以及大马哈鱼ＧＨ均可不同程度地与草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ）、鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）、鲶（Ｓｉｌｕｒｕｓｍｅｒｉｄｉｏｎａｔｉｓ）和黄颡鱼（Ｐｅｔｔｅｏｂａｇｒｕｓｆｕｌｖｉｄｒａｃｏ）肝细胞ＧＨ受体特异结合。本测定系统可用于测定鱼类垂体中的ＧＨ含量以及监测鱼类ＧＨ分离纯化过程。

草鱼生长激素非竞争式酶联免疫吸附测定法的建立及鉴定(英文)

应用草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）单克隆抗体及多价兔抗血清建立了草鱼ＧＨ非竞争式酶’联免疫吸附测定ＥＬＩＳＡ系统。用正辛酸法对腹水单抗进行了分离纯化，获得了高纯度的单抗制备物。聚丙烯酸胺凝胶电泳表明纯化的单抗由分子量分别为５５ｋＤ和２５ｋＤ的两条蛋白带组成。用纯化单抗铺底，用兔抗血清作后续抗体建立了一种测定草鱼ＧＨ的非竞争式双抗夹心ＥＬＩＳＡ方法。交叉试验表明该测定系统只与草鱼ＧＨ和基因重组鲤生长激素（ｒｃＧＨ）具有剂量依存的结合反应，而与大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）、牛生长激素（ｂＧＨ）、大马哈鱼促性腺激素（ｓＧｔＨ）、及黑鲢促性腺激素（ｂｓｃＧｔＨ）等均无交叉反应。该 ＥＬＩＳＡ方法的灵敏度可达０．８ｎｇ／ｍｌ，组内变异系数为 ５．９ ％，组间变异系数为７．６％，回收率达９０％以上。初步应用表明，鲤和团头鲂垂体抽提液、草鱼血清、鲤血清及鲫血清在该测定系统中有剂量依存的反应曲线，而大口鲶、黄颡鱼、中华鲟及黄鳝鱼垂体抽提液及大口鲶、胡子鲶和罗非鱼血清在该测定系统中没有交叉反应。

CHS对银鲫血清生长激素水平影响的研究

采用草鱼生长激素酶联免疫吸附测定法,研究了一种生长抑素抑制剂(CHS)对银鲫血清生长激素水平的影响.研究结果初步显示:CHS能以剂量依存的方式显著升高银鲫血清GH水平,其中100μg/g剂量升高血清GH水平的效果最为明显,其次是50μg/g的剂量.

胡子鲶血浆中外源生长激素的代谢动力学

采用草鱼生长激素夹心式酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ） ，研究了重组鲤生长激素（ｒｃＧＨ） 在胡子鲶血浆中的代谢动力学。肌肉注射ｒｃＧＨ（０．２ 和ｌ μｇｇ） 后， 胡子鲶血浆ｒｃＧＨ 水平迅速升高， 于２ 和３ｈ 时达峰值， 随后下降，在注射后第２ 和４ 天， 血浆中检测不到ｒｃＧＨ。腹腔注射ｒｃＧＨ（０ ．２ 和ｌμｇｇ） 后， 胡子鲶血浆ｒｃＧＨ水平也有同上类似的变动规律。胡子鲶腹腔注射０ ．５、１ 和２ μｇｇ 的ｒｃＧＨ，７ 天后各组鱼血浆中的ｒｃＧＨ 均被清除干净。向尾部血管内注射ｒｃＧＨ（０ ．２ 和０．５ μｇｇ） 后，胡子鲶血浆ｒｃＧＨ 水平下降遵循指数性衰减规律，２４ｈ 后血浆中ｒｃＧＨ 均未清除干净。

草鱼催乳素抗血清的制备与鉴定

应用从草鱼垂体中分离纯化的催乳素（ＰＲＬ）免疫兔子制备了特异抗血清。用常规酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）检测表明该抗血清与大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及促性腺激素（ｓＧｔＨ）完全没有交叉反应，而与草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）有微弱交叉反应。免疫细胞化学染色表明该抗血清主要与草鱼垂体前叶（ＲＰＤ）催乳素细胞发生结合反应，与垂体问叶（ＰＰＤ）细胞有微弱染色反应，但与神经垂体（ＮＰ）及垂体后叶（ＰＩ）细胞则完全没有免疫结合反应。

孔孟荀人性论之内在意蕴

孔子人性论蕴含的是孟、荀人性论之争的思想渊源。孟、荀人性论的分歧主要在于他们对人性概念内涵的界定不同。作为儒家思想的忠实代表，其人性论追求的最高目标是一样的，即善。性善论与性恶论的对立仅仅是表面现象，而不是本质，实际上二者相辅相成，以一种理性的张力，共同构成儒家人性观的理论双翼。

银鲫和建鲤血液外源生长激素代谢动力学

采用草鱼生长激素夹心式酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ），研究了重组鲤鱼生长激素（ｒｃＧＨ）在银鲫和建鲤血液中的代谢规律．银鲫每ｇ体质量腹腔注射ｒｃＧＨ１μｇ后，血清ＧＨ水平迅速升高，２ｈ时达峰值，８ｄ后血清ＧＨ水平仍未恢复正常值．而每ｇ体质量腹腔注射ｒｃＧＨ０．２μｇ后，银鲫血清ＧＨ却较为缓慢升高，６ｈ后才达峰值，８ｄ后血清ＧＨ水平已恢复正常值．银鲫每ｇ体质量腹腔注射ｒｃＧＨ０．２，１，５μｇ后，仅０．２μｇ组在２ｄ后血清ＧＨ水平恢复正常值，其余两剂量组在８ｄ后仍未恢复正常值．建鲤每ｇ体质量腹腔注射ｒｃＧＨ０．５，１，５μｇ后，血清ＧＨ水平分别在第３，５。

长时间灌流式器官培养方法

用灌流方式优化器官标本的生存环境。灌流通道的对外进出口端分别以小孔径疏水型空气过滤器和双重无菌气体隔离区作为防菌屏障，配以恒流泵的驱动作用，保证了在长时间的实验期间内不仅能有效地防止污染，而且灌流速度具有足够范围内的可调性和持续恒定性。用这种方法使草鱼脑垂体在长达８２天的连续灌流中保持着较为稳定的生长激素分泌水平，证实了草鱼脑垂体的生长激素分泌水平与培养液中Ｃａ２＋、Ｋ＋离子浓度（一定范围内）成正相关。