二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸及其组合对斑马鱼阿尔茨海默病模型认知障碍的改善作用和机制

目的omega-3多不饱和脂肪酸二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)能够抑制M1型小胶质细胞的过度激活促炎细胞因子的释放和细胞凋亡,而EPA具有抗抑郁的作用。与EPA比较,DHA似对记忆的改善作用更强。由于两者在食物、衰老和疾病中的比值多变,其单一和最佳组合的功效不明,本实验拟利用AD模型比较研究EPA、DHA及最佳组合改善认知障碍及神经炎症的机制。方法Al 3+诱导斑马鱼AD模型,饲予EPA、DHA或EPA+DHA(1∶2),评估新物体识别和T迷宫奖赏的记忆,GC-MS检测躯体PUFAs浓度变化,qPCR检测脑内AChE、Axl、APP、Bace1、IL-6、TNF-α、CD11b、CD206、VDAC1、Caspase-3、Caspase-9和Bax的变化,ELISA试剂盒检测脑内Aβ的浓度。结果与模型组相比,EPA仅明显改善了斑马鱼的新物体识别能力,而DHA与EPA+DHA均恢复了新物体识别和T迷宫中的记忆。给予EPA、DHA和EPA+DHA均明显抑制了Aβ的蛋白浓度变化以及IL-6、CD206、Caspase-3、Caspase-9、Bax和AChE的mRNA表达,EPA和DHA均明显抑制了Bace1、APP和TNF-α的mRNA表达。DHA和EPA+DHA还明显降低了Axl和VDAC1的mRNA表达。结论EPA+DHA的组合对Al 3+诱导斑马鱼AD模型的记忆和认知障碍具有更好的改善作用,其作用机制可能通过抑制脑内细胞凋亡情况来改善记忆和认知障碍。

海马改善斑马鱼慢性应激所致抑郁样行为和病理变化的机制

目的探究海洋中药海马对慢性不可预测温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)诱导的斑马鱼抑郁样模型的影响。方法将成年斑马鱼分为对照组、Stress组、Stress+低剂量(Stress+0.044%SH)、Stress+高剂量(Stress+0.22%SH)海马干预组,采用新环境水槽(novel tank test,NTT)鉴定抑郁样行为,Elisa检测皮质酮(cortisol)、白介素(interleukin,IL)-6和干扰素(interferon,IFN)-γ水平,高效液相色谱检测多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)及代谢产物含量,荧光定量PCR检测色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,TPH)-2、5-HT2A受体的mRNA表达水平。结果与对照组相比,Stress组在NTT中达到顶部的潜伏期明显延长,转移至顶部区域次数和顶部停留时间明显减少,cortisol和IL-6、IFN-γ蛋白水平明显上升,脑内DA和5-HT含量明显减少以及5-HT代谢率增加,同时5-HT2A mRNA表达上调,TPH2的mRNA表达下调;而低剂量的海马干预有效降低CUMS斑马鱼焦虑程度、减少cortisol和IL-6、IFN-γ浓度、增加单胺类神经递质水平和逆转5-HT能系统失调。结论海马可能通过抗炎和调节单胺类神经递质水平发挥抗抑郁效果。

改良A^(2)/O+深度处理工艺在城市生活污水处理中应用案例

某污水处理厂设计规模为1万m^(3)/d,针对传统A^(2)/O存在的缺点,采用改良A^(2)/O处理工艺,在A/O脱氮工艺曝气池末端增设了一个缺氧段和一个好氧段,前端增加一个厌氧段,使之在高效脱氮的同时,除磷效果与A^(2)/O工艺相当。深度处理采用高效澄清池和深床滤池,出水水质达到《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)V类标准。单位经营成本为1.32元/t。

不同ω-3多不饱和脂肪酸对斑马鱼阿尔茨海默病模型记忆损伤和神经病理学变化影响

【目的】研究ω-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)对铝致斑马鱼认知、记忆损伤和病理变化的影响。【方法】利用共聚焦显微镜观察斑马鱼幼鱼脑内荧光强度。以100μg/L铝诱导斑马鱼阿尔茨海默病(AD)模型,给予EPA、DPA和DHA后,进行新物体识别和T迷宫奖赏测试,Elisa检测β-Amyloid(Aβ)、p-tau、乙酰胆碱酯酶(AChE)和白细胞介素(IL)-1β的含量,qPCR检测小胶质细胞标志物Hexb与星形胶质细胞标志物GFAP及脑源性神经营养因子(BDNF)的变化。【结果】与对照组相比,铝显著激活斑马鱼幼鱼脑内的小胶质细胞。在行为实验中,与对照组相比,铝显著延长到达新臂、奖励臂潜伏期,减少在新臂、奖励臂时间;EPA、DPA和DHA均显著增加在新臂、奖励臂时间;EPA和DHA显著减少到达奖励臂的潜伏期;与对照组相比,模型组显著增加Aβ、p-tau、AChE和IL-1β的蛋白浓度以及Hexb和GFAP的mRNA表达。EPA、DPA和DHA均显著降低Aβ蛋白浓度和GFAP的mRNA表达。EPA显著降低p-tau、AChE和IL-1β的蛋白浓度,并抑制Hexb及上调BDNF的mRNA表达;DPA亦显著降低p-tau蛋白浓度;DHA显著降低AChE浓度。【结论】三种ω-3PUFAs对斑马鱼AD样变化作用各不相同,EPA的效果最佳。

对虾养殖环境中乳酸菌的筛选及其发酵工艺的研究

[目的]对虾养殖环境中乳酸菌进行筛选并对其发酵工艺进行研究。[方法]首先利用含碳酸钙的MRS固体培养基从虾养殖环境中的海水和底泥中筛选出有溶钙圈的菌株M5;接着根据16S r DNA基因序列系统发育树分析对菌株M5进行鉴定,最后在单因子实验的基础上,通过正交试验对发酵工艺进行优化。[结果]初步鉴定菌株M5为粪肠球菌,该菌株的最佳发酵工艺为:甘蔗糖蜜浓度为5%,蛋白胨浓度为0.75%,硫酸铵0.5%,磷酸氢二钾的浓度为0.5%,发酵温度为30℃,发酵时间为48 h。在以上工艺下,发酵液中乳酸菌的活菌数高达4.97×108CFU/m L。[结论]本研究对对虾养殖所用乳酸菌的发酵生产具有一定的参考价值。