稳定表达Caveolin-3基因突变型P104L和P47L的C2C12骨骼肌细胞株的构建

目的构建稳定表达Caveolin-3(CAV3)基因突变型P104L和P47L的C2C12骨骼肌细胞株。方法将野生型CAV3(CAV3-WT)、CAV3-P104L、CAV3-P47L装在带有GFP标签的质粒中,构建目的基因与GFP基因融合的表达质粒,以只含GFP的载体为对照。将C2C12细胞随机分为A、B、C、D组,分别转染对照空载体(NC)、CAV3-WT、CAV3-P47L及CAV3-P104L。以遗传霉素(G418)进行阳性克隆筛选,荧光显微镜下挑选稳定转染的细胞系,Western blotting法检测各组细胞中的CAV3-GFP融合蛋白,免疫荧光法检测各组细胞中的CAV3蛋白,以荧光强度代表目的蛋白相对表达量。结果经酶切和测序验证,证实4种表达质粒构建成功。B、C、D组细胞中测得CAV3-GFP融合蛋白,A组未测得融合蛋白。A、B、C、D组CAV3蛋白相对表达量分别为23.0±2.25、32.3±0.35、25.6±0.92、24.3±1.42,B组CAV3蛋白表达增强,与A组相比,P<0.01;A、C、D组CAV3蛋白表达下调,与B组相比,P均<0.01。结论成功构建了稳定表达CAV3-P47L和CAV3-P104L的C2C12细胞,两种细胞中CAV3蛋白表达下调。

Caveolin-3基因多态性的筛查及其在中国汉族糖尿病患者中的特点

目的:观察我国汉族正常人和2型糖尿病(T2DM)患者Caveolin-3(CAV3)基因的多态性差异,并介绍一种研究CAV3相关遗传病的实用方法。方法:CAV3基因只有2个很短的外显子,使用PCR-SSCP进行筛查,然后选择性测序。针对性地设计引物,经过PCR-SSCP分别测定50例正常人和50例T2DM样本的基因外显子基因多态性情况。结果:PCR-SSCP发现T2DM患者CAV3基因电泳变异累计发生率为48%,而正常人变异累计发生率为7%,存在显著差异(P<0.001)。抽查变异条带,测序证实发生了碱基变异。结论:中国人T2DM的CAV3基因存在增加的多态性特征,PCR-SSCP法可有效地进行初步筛查;提示CAV3基因多态性可能是中国人T2DM发生的遗传背景之一。

桂林医学院对本科教材《外科护理学》的评价与思考

目前，各高校相继开展教学改革，高质量、高水平的教材是做好教学工作的基本前提，并将对整个高等护理教育教学内容改革和教材体系建设产生良好的导向和促进作用。教材建设不仅是学术的体现，更是综合质量的反映。如何切实加强高校护理教材建设、深化高校护理教材改革成为护理教育界普遍关注的问题。

Sandwich教学法在外科护理学课程中的应用研究

目的探讨Sandwich教学法在外科护理学课程中的应用效果。方法随机选取本院护理专业两个班级分为对照组和观察组,每组36名学生。对照组采取传统授课方式教学,观察组采取Sandwich教学法进行教学,比较两组学生对教学效果的评价。结果观察组课程成绩评分、学习氛围评分、学习积极性评分均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Sandwich教学法可明显提高学生沟通能力和解决问题能力,调动学生积极性,增加课堂趣味性,改善外科护理学教学效果。

胸部损伤急救思维虚拟仿真训练平台的构建与应用

胸部损伤是临床常见的急危重症。为提高护生核心能力的培养,运用3DMax及Maya等现代化技术手段,构建智能化虚拟仿真胸部损伤急救思维训练项目,还原院前急救、转运途中救治和院内救治等多个场景,结合实践教学,虚拟练思维、实践练技术,虚实结合,培养学生的救治能力及临床思维能力。

医院-家庭联合远程护理在T管引流术社区康复中的应用

目的探讨医院-家庭联合远程护理在T管引流术社区康复中的应用效果。方法选取2018年4月-2019年12月携T管出院患者80例,按随机数字表法分为观察组和对照组各40例。对照组给予常规延续护理,观察组实施医院-家庭联合远程护理模式,于出院时、出院2周时应用焦虑自评量表(SAS)评价两组患者焦虑水平,用自我护理能力实施量表(ESCA)评价两组的自我护理能力,记录两组患者居家期间T管并发症发生率和两组患者院外带管时间。对两组观察指标进行统计学分析比较。结果出院时两组SAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05),出院2周时对照组SAS评分与出院时比较,差异无统计学意义(P>0.05),观察组SAS评分与出院时比较明显下降,差异有统计学意义(P<0.001),且下降程度显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001);两组ESCA的自我责任感、自我护理技能、自我概念、健康知识水平4个维度评分均比出院时显著增高,差异有统计学意义(P<0.05),但观察组增高幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。观察组皮肤刺激症状、T管堵塞、结石复发、T管道移位或脱出、T管相关感染等T管并发症总发生率为2.50%,对照组为20.00%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);观察组院外带管时间(24.36±2.86)d,对照组带管时间(32.94±3.79)d,两组比较差异具有统计学意义(P<0.001)。结论将医院-家庭联合远程护理应用于T管引流术社区康复中,能减轻带T管出院患者的焦虑水平,提高自我护理能力,有效降低并发症的发生,缩短带管时间,对改善患者的生活质量具有积极意义。

CAV3基因突变相关的骨骼肌和心肌病

Caveolin-3(CAV3)是微囊蛋白家庭成员的肌肉特异性蛋白,在心肌中表达丰富,目前发现它的基因突变与九种典型的骨骼肌和心肌病症有关:肢带型肌营养不良(LGMD-1C)、波纹肌肉病(RMD)、远端型肌病(DM)、横纹肌溶解症(RM)、高CK血症(H-CK)、肥厚型心肌病(HCM)、扩张型心肌病(DCM)、长QT综合征(LQTS)、婴儿猝死综合症(SIDS)。有些突变可能导致两种以上的疾病同时出现,同种突变也可能导致不一样的疾病类型,CAV3相关疾病报道越来越多,其致病机制尚待深入的研究。本文就CAV3突变相关疾病及其分子机制研究进行综述。

荧光定位法快速准确筛选一种GFP重组质粒细胞株

筛选脂质体介导的稳定转染细胞株的方法需要较多重复工作才能完成,尤其是转染效率不高的细胞。本研究报道一种快速准确获取稳定转染细胞株的方法,供同类实验参考。我们构建的真核表达载体带有可用于筛选阳性克隆的绿色荧光基因和Neo基因,采用脂质体将其转染入C2C12细胞,并用G418筛选阳性克隆,荧光显微镜下挑选绿色荧光与目的基因表达的蛋白在细胞内定位一致的细胞株,Western Blot可检测到融合蛋白表达,免疫共聚焦显示目的蛋白表达量增加;荧光散在分布于整个细胞的细胞株,经Western Blot检测没有融合蛋白表达。因此,根据GFP绿色荧光分布的位置可以准确挑选带有目的基因重组质粒的稳定细胞株。

脂质体介导的C2C12肌细胞瞬时转基因技术

C2C12细胞是常用于研究的肌细胞,广泛适用于肌肉再生、肌肉疾病、糖脂代谢以及药物研究实验。由于肌细胞结构较特殊,基因转染不容易成功。本文介绍脂质体介导的肌细胞瞬时转基因技术,国内外未见详细报道。我们实验室经优化细胞密度、质粒DNA纯度以及转染最佳时间等条件,并改变底物和稀释液的成份,将细胞分成几组:1底物Opti-MEM+稀释物DMEM组;2底物Opti-MEM+稀释物Opti-MEM组;3底物无血清DMEM+稀释物无血清DMEM组;4底物无血清DMEM+稀释物Opti-MEM组;5底物含10%FBS的DMEM+稀释物DMEM组进行转染。24 h后荧光倒置显微镜观察各组荧光表达情况,48 h Western Blot检测GFP蛋白表达。结果 C2C12细胞瞬时转染的细胞数量和荧光强度达到理想效果。其中第3组GFP蛋白表达水平明显高于第5组(p<0.05)。这是一种方便有效的脂质体介导C2C12细胞转基因技术。

三明治教学在《外科护理学》课程中的应用研究

目的探讨三明治教学在《外科护理学》理论课程中的应用效果。方法随机选取护理专业两个班级为对照组和观察组,每组36名。对照组学生采取传统授课方式,观察组学生采取三明治教学,通过理论考核和问卷调查比较两组教学效果。采用SPSS 24.0进行方差分析和t检验。结果观察组课程成绩评分、学习氛围评分、学习积极性评分均高于对照组,观察组学习氛围评价良好率、学习积极性评价良好率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论三明治教学可明显提高学生的沟通能力,解决问题的能力,调动学生积极性,增加课堂趣味性,具有实际的应用价值。