体外生产红细胞:进展与挑战

目前临床用血供不应求,尽管自体输血等血液保护技术可部分缓解此类情况,但红细胞作为主要的血液成分需求量巨大,而体外生产安全的红细胞则可解决这一难题。目前研究显示,可从胚胎干细胞、人诱导多能干细胞、脐带血、外周血和永生化红系祖细胞系几种来源分化出成熟红细胞。本文就体外生产红细胞的来源及应用进行综述,并分析目前所面临的挑战,以期为输血治疗提供新思路。

血小板裂解液凝胶治疗高原难愈性创面一例

高原难愈性创面受低氧、强紫外线、高寒等不利条件影响,细胞功能损伤严重,再上皮化受阻,创面愈合延迟甚至不愈合。常规清创引流、功能性敷料等多种传统治疗手段疗效差,患者不仅住院时间长,还可能因创面长期不愈合而导致其他并发症。本文报道1例长达2个月未愈合的高原难愈性创面患者,采用血小板裂解液凝胶治疗2次后,创面完全愈合。该治疗方式为高原难愈性创面患者提供了新的治疗思路,值得临床借鉴。

血浆置换联合连续性肾脏替代救治热射病患者的疗效观察

探讨血浆置换(PE)联合连续性肾脏替代(CRRT)救治热射病(HS)患者的疗效。方法 选取本院2013年7月-2019年7月收治的30例HS患者,随机分为A组和B组,A组给予PE治疗,B组给予PE联合CRRT治疗,对比两组临床治疗效果。结果 B组治疗后的WBC、Mb、CK分别为(13.45±2.16)×10^9/L、(98.62±11.94)ng/mL、(187.55±19.87)U/L,均低于A组的(18.19±2.33)×10^9/L、(145.37±13.28)ng/mL、(351.39±22.53)U/L;Scr、BUN、ALT分别为(142.24±17.75)μmol/L(9.45±1.82)mmol/L(115.24±13.66)U/L,均低于A组的(218.16±21.35)μmol/L(14.27±2.23)mmol/L(237.25±22.53)U/L;治疗有效率(86.67%)显著高于A组(66.67%),P<0.05。结论 PE联合CRRT可有效治疗HS患者,能够促进其疾病指标降低与肝肾功能恢复,具有较高的临床应用价值。

Tim-3/galectin-9调控脂多糖诱导的人淋巴细胞中Th1/Th2细胞平衡

目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)/半乳糖凝集素-9(galectin-9)在脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞炎性过程中对辅助性T细胞(Th)Th1/Th2细胞失衡中的作用。方法收集脓毒症患者的外周血。分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-qPCR检测Tim-3、galectin-9、T-bet和GATA3的表达;ELISA检测血清sTim-3、galectin-9、IFN-γ和IL-4的水平;分离的外周血单个核细胞体外培养,LPS刺激建立体外炎性模型;ELISA法检测细胞培养上清中Th1和Th2细胞相关细胞因子的水平;Western blot检测JAK2/STAT3相关因子的表达;Pearson相关系数分析Tim-3、galectin-9、IFN-γ和IL-4的相关性。结果脓毒症患者外周血中Tim-3和galectin-9的mRNA表达增多,sTim-3、galectin-9、IL-4和GATA-3升高,IFN-γ和T-bet水平下降,磷酸化JAK2和STAT3升高(P<0.05)。阻断Tim-3表达后,IFN-γ水平升高,而IL-4的水平明显下降,磷酸化JAK2和STAT3下降(P<0.05)。Tim-3、IL-4与galectin-9呈正相关,而Tim-3与IFN-γ呈负相关,IFN-γ与galectin-9呈负相关,Tim-3与IL-4呈正相关。结论在LPS诱导的炎性细胞中,Tim-3/galectin-9可能调控JAK2/STAT3通路,导致Th1/Th2细胞的失衡。

PDGF促进创面修复的研究进展

血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)是一种多效能细胞因子,因具有启动细胞增殖、迁移、分泌并促进血管形成等作用,可促进伤口愈合,在创面修复领域备受关注。目前,含高浓度PDGF的富血小板血浆及重组人PDGF应用于创面修复已有数十年历史,因存在保质期短、异体使用受限或生物利用率低、副作用多等不足,使得其无法满足临床需求,而优化的富血小板纤维蛋白和浓缩生长因子,则具有更高的PDGF浓度,创面修复能力更佳。血小板裂解液保存期限可显著延长,且具有更小的异体使用风险,已成为血小板创面修复的发展方向。基于生物工程技术构建的高能递送系统可显著提高PDGF局部驻留率、延长作用时间,经过对PDGF结构进行改造,添加活性结构域可设计出多种能诱发持续强直信号的转化型PDGF,将活性结构域整合形成功能可控的PDGF模拟肽,并衍生了多种高效的PDGF基因递送策略,为解决创面修复问题提供了多种潜在选择。本文主要阐述PDGF的生理特性与应用特性及其在创面修复中的研究进展。

医务人员职业损伤的研究分析

目的 :研究分析医务人员因针头或其他尖锐器具造成损伤的发生率及其原因。方法 :对 6 10名医务人员进行问卷调查 ,被调查人员包括医生、护士、技师和实验工作人员。被调查者通过回顾的方式 ,如实填写过去一年内皮肤损伤的原因、次数及所采取的预防措施。回收有效问卷 5 81份 (95 % )。结果 :在 5 81名被调查者中 ,共发生 1811例次皮肤损伤污染事件 ,其中 5 4%是被污染血液后的内孔针头引起的 ;医务人员清楚地了解 ,有 13%的病人患有乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病等可以通过血液传播的疾病。每名医师 (技师 )每年有 2 .85次皮肤损伤几率 ,每名护士每年有 3.4次皮肤损伤几率。所有的损伤事故发生后 ,均采用强力碘等消毒伤口 ,并有针对性地采取大量盐水冲洗、注射乙肝疫苗、高效免疫球蛋白等措施。结论 :医务人员的这种损伤与他们的特殊职业有密切的关联。 5 4%的损伤是在内孔针头充满血液的情况下造成的 ,具有很高的传播疾病的危险性。因此 ,应采取针对性的防护安全教育 ,预防事故发生。

免疫胶体金技术效能评价

目的对 3种免疫胶体金技术 (DIGFA)检测试条 (卡 )检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体 (抗HCV)、梅毒螺旋体抗体 (抗TP)和艾滋病病毒抗体 (抗HIV)的性能进行评价 ,为各血液中心传染病检测实验室选用提供参考。方法对多份质控血清和 4 2 1 4份患者血清或血浆分别采用 3个厂家的DIGFA试条 (卡 )和酶免疫法 (EIA)进行检测 ,以EIA技术为参照 ,对DIGFA试条 (卡 )的灵敏度、特异性、检测效率和物理性能等参数进行评价。结果多份质控血清 4个项目DIGFA试条 (卡 )检测特异性均为 1 0 0 % ,HBsAg、抗HIV、抗HCV和抗TPDIGFA试条 (卡 )检测的灵敏度分别为 86 .6 7%、93.33%、86 .6 7%和 90 .4 7% ;检测效率分别为 91 .1 1 %、96 .6 7%、93.33%和 94 .4 5 %。 4 2 1 4份患者血清 (血浆 )的HBsAg、抗HIV、抗HCV和抗TPDIGFA试条 (卡 )的检测特异性分别为 99.6 7%、99.76 %、99.5 6 %和 99.79% ;灵敏度分别为 6 8.35 %、1 0 0 .0 0 %、5 6 .4 1 %和 73.33% ;检测效率分别为 97.6 0 %、99.76 %、98.77%和 99.6 9%。结论DIG FA试条 (卡 )检测灵敏度比较低 ,花费成本较大。该技术可用于急诊病人的初步筛选 ,不适于献血员筛选试验。

献血者筛查ALT活性标准研究分析

目的 探讨分析ALT活性作为献血者检测标准及其参考区间。方法 选择从未受血和HBV、HCV标志物均为阴性的 2 84 9名健康人和献血者作为研究对象 ,采用连续监测技术测定其血清ALT活性 ,又在其中随机选取 6 85名以赖氏法测定ALT活性。结果 血清ALT的测定值在各年龄组无显著性差异 ;男性ALT活性明显高于女性 ,具有明显的统计学差异 (连续监测法 :Ρ<0 .0 0 1 ;赖氏法 :Ρ<0 .0 5 )。ALT活性连续监测法测定 x± 2s上限为 5 3 4 9U/L , x± 3s限为 6 6 .5 9U/L ;ALT活性赖氏法测定 x± 2s上限为 2 4 96U , x± 3s上限为 38 89U。结论 参照赖氏法参考区间 ,ALT连续监测法参考区间上限应该为 5 3.4 9U/L。

输血传播疾病标志物快速检测与职业暴露

目的增强医护人员职业防护意识,探讨可能的防护方法,减少职业暴露的发生。方法对7089份急诊患者血清进行HBsAg、抗HCV、人类免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)、梅毒螺旋体特异性抗体(抗TP)快速和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。结果7089份急诊手术患者血清中,HBsAg、抗HCV、抗HIV和抗TP快速检现特异性分别为99.67%,99.55%,99.79%和99.76%;灵敏度分别为68.97%,62.74%,88.89%和70.37%;检测效率分别为97.59%,98.74%,99.76%和99.65%。结论临床医护人员,尤其是麻醉手术科和外科医护人员,容易遭受输血传播疾病的暴露,具有很高的传播疾病的危险性。因此,应采取针对性的防护安全教育,预防事故发生。

美军输血勤务规则文件刍析

据美军有关的统计资料分析,海湾战争、科索沃战争等现代战场的战伤情况显示：伤员中发生失血性休克者可〉80%,在受伤后2～4 h因失血性休克致死的伤员占死亡伤员总数的50%,所以在伤后2～4 h的＂黄金时间＂内,给予伤员快速有效的输血治疗是抢救成功的关键。

免疫胶体金与酶免疫检测HIV抗体和梅毒螺旋体抗体对照实验

目的采用免疫胶体金技术(DIGFA)检测试卡和酶免疫(EIA)检测试剂,检测艾滋病病毒抗体(抗HIV1/2)和梅毒螺旋体特异性抗体(抗TP),对DIGFA技术参数进行评估。方法对多份质控血清和5863份患者血清或血浆,分别采用DIGFA试卡和EIA试剂进行检测,以EIA检测结果为参照,对DIGFA检测试卡的灵敏度、特异性、检测效能和物理性能等参数进行评价。结果多份质控血清抗TP和抗HIV1/2DIGFA试卡检测特异性均为100%;抗TP、抗HIV1/2DIGFA试卡检测的灵敏度分别为80.00%和93.33%;检测效率分别为88.44%和96.97%。5863份患者血清(血浆)的抗TP和抗HIV1/2DIGFA试卡检测特异性分别为99.86%和99.76%;灵敏度分别为50.94%和77.78%;检测效率分别为99.42%和99.69%。结论DIGFA试卡检测灵敏度比较低,花费成本较大,不适宜献血员筛选试验。如果应用到街头(采血车)献血员快速筛选,必须和EIA联合应用。

哈萨克族人群中FVLeiden突变的研究

目的 研究分析中国新疆哈萨克族健康人群中FVLeiden突变的发生率。方法 应用多聚酶链反应 限制性片段长度多态性分析 (PCR RFLP) ,对新疆地区 183例 (汉族 98例 ;哈萨克族 85例 )健康个体进行FVLeiden基因突变研究分析。结果 哈萨克族人群中检出 3例FVLeiden(FVArg50 6→Gln)突变杂合子 ;汉族人群中均无该突变类型。结论 中国新疆地区哈萨克族人群中存在FVLeiden基因突变 ,而汉族人群中未检测到该类型突变 ,FVLeiden突变可能不是中国人群静脉血栓 (VT)发病的主要危险因素。不同种族人群的VT致病的分子机制存在差异。

FV Leiden突变检测方法的建立及在哈萨克族人群中的初步应用

目的 :建立FVLeiden突变的检测方法 ,研究分析中国新疆哈萨克族健康人群中FVLeiden突变的发生率。方法 :应用多聚酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 (PCR -RFLP) ,对新疆地区 183例 (汉族 98例 ;哈萨克族 85例 )健康个体进行FVLei den基因突变研究分析。结果 :哈萨克族人群中检出 3例FVLeiden(FVArg50 6→Gln)突变杂合子 ,;汉族人群中均无该突变类型 ,没有发现突变纯合子。哈萨克族人群FVLeiden突变的发生率为 3.5 % ,和汉族人群存在明显差异。结论 :中国新疆地区哈萨克族人群中存在FVLeiden基因突变 ,而受检测组汉族人群中未见到该类型突变 ,FVLeiden突变可能不是新疆地区汉族人群静脉血栓 (VT)发病的主要危险因素。

人冻干血小板复水程序的优化

目的探讨不同复水条件对冻干血小板功能的影响。方法经过添加激活抑制剂(PGE1、左旋精氨酸、植酸钠和百维利肽)、DMSO和海藻糖等低温保护剂、冷冻干燥后获得冻干血小板,在一系列不同复水程序下对冻干血小板复水,应用流式仪检测并分析其CD62p和PAC-1的表达,评价血小板活化状态。通过正交设计,研究不同复水程序包括复水溶液、复水温度、复水方式3个影响因素对冻干血小板复水后活性的影响。结果 3个对冻干血小板复水后活化的影响因素排序:复水温度>复水方式>复水液(P<0.05);37℃条件下冻干血小板复水后血小板膜蛋白CD62p和PAC-1活化率最低,分别为(5.96±2.51)%和(4.55±1.97)%;预水化后再行四步添加复水可降低冻干血小板膜蛋白CD62p和PAC-1的表达率至(6.68±2.62)%和(5.45±2.06)%;添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和血小板抑制剂的2号复水液对冻干血小板复水后膜蛋白CD62p和PAC-1的表达率影响最低,分别为(6.72±3.35)%和(5.28±2.30)%。总体模型评价进一步显示,第5实验组,即在37℃条件下加入PVP和血小板抑制剂的复水液配方,先预水化后再行四步法添加复水,其复水血小板活化率最低,CD62p和PAC-1的表达率分别为(3.06±1.36)%和(2.70±0.84)%。结论 37℃下,饱和蒸汽环境中预水化后,采用加入PVP及血小板抑制剂的复水液四步添加复水,其复水血小板活化率最低。

深低温保存血小板的标准制定及质量控制

目的探讨建立系统完善的深低温保存血小板的制备标准与质控标准。方法制定200 m l全血中血小板的批量分离和深低温保存,包括采血、离心、分离、加入二甲亚砜(DMSO)、深低温保存和复温的全过程的制备标准;建立深低温保存血小板冻存前和复温后的质控标准,并按标准抽检1年中使用的48袋(每月4袋)深低温保存前后的血小板。结果48袋深低温保存血小板的保存的时间跨度为5—275 d;冻存前血小板平均容量为(91.21±12.35)m l/袋,平均含量为(3.13±0.51)×1010/袋,血小板体积分布宽度(PDW)的均值为17.06±0.51,平均血小板体积(MPV)的均值为(9.65±0.90)fl,红细胞污染数的均值(0.51±0.09)×109/袋,白细胞污染数的均值(0.96±0.23)×108/袋;HBsAg、抗-HCV、抗-H IV、梅毒特异性抗体阴性,丙氨酸氨基转移酶(ALT)在正常范围内;深低温保存血小板复温后pH值的均值为(7.20±0.86),血小板计数(P lt)平均回收率的均值为(96.78±1.34)%,MPV的平均增加值为(13.56±3.04)%;复温后细菌培养结果阴性,HBsAg、抗-HCV、抗-H IV、梅毒特异性抗体阴性,ALT在正常范围内;48袋深低温保存血小板的外观及化验检测结果均合格。结论所建立的深低温保存血小板的制备标准及质控标准能保证该成分临床应用的安全性和有效性。