苹果坏死花叶病毒CP基因原核表达及其抗血清制备

苹果坏死花叶病毒(Apple necrotic mosaic virus,ApNMV)是近年新发现的病原物,并且是与我国苹果花叶病症状高度相关的重要病毒,进行ApNMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因原核表达、制备多克隆抗血清,以建立快速、灵敏、准确的ApNMV常规检测方法尤为必要.通过设计特异性引物,以RT-PCR方法成功获得ApNMV CP基因序列,插入到原核表达载体pET-28a(+)中构建重组质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG进行重组蛋白(含His-tag)诱导表达.SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,用Ni Sepharose 6 Fast Flow进行蛋白纯化,回收共得到重组蛋白2.4 mg.在屏障环境下免疫2只SPF级新西兰兔,制备出多克隆抗血清,稀释400倍后仍能与ApNMV阳性苹果叶片样品发生免疫反应.由此证明,本研究建立的ApNMV间接ELISA检测方法具有较好的灵敏性,检测效率高,能够用于田间大量样品ApNMV的诊断.

阈值增长对肝细胞癌的诊断效能

目的:探讨肝脏影像报告和数据系统2018版(LI-RADS v2018)中的主要征象阈值增长(TG)对肝细胞癌(HCC)的诊断效能。方法:回顾性分析首诊、随访均行MRI检查,且首诊病灶为LI-RADS 2~4类的肝硬化患者215例。记录TG出现率及LI-RADS分类调整情况。对TG不作为及作为主要征象的病灶分别进行LI-RADS分类。通过计算诊断优势比(DOR)确定TG与HCC诊断的相关性。以术后病理或临床诊断为金标准,以LI-RADS 5类为诊断HCC的标准,分别计算TG不作为及作为主要征象的诊断效能。结果:215例患者共253个病灶,其中HCC 157个、非HCC恶性肿瘤21个、良性病变75个。HCC中TG的出现率为32.5%(51/157),TG与HCC显著相关,DOR值为5.29(95%CI 2.39~11.75)(P<0.001)。当TG不作为主要征象时,51个HCC分类为LI-RADS 3类15个、LI-RADS 4类6个、LI-RADS 5类28个、LI-RADS M类2个。当TG作为主要征象时,21个HCC分类发生调整,其中15个LI-RADS 3类上调至LI-RADS 5类[最大径10~19 mm+非环状动脉期高强化(APHE)],6个LI-RADS 4类上调至LI-RADS 5类(最大径10~19 mm+非环状APHE+强化包膜1个,最大径≥20 mm+非环状APHE 5个)。以LI-RADS 5类为标准诊断HCC,TG作为主要征象与不作为主要征象相比,敏感度(75.2%vs.61.8%,P<0.001)、准确率(83.0%vs.75.5%,P<0.001)更高,特异度(95.8%vs.97.9%,P=0.683)相似。结论:TG与HCC显著相关,TG作为LI-RADS v2018中的主要征象之一可提高HCC(尤其表现为非环状APHE+TG)的诊断敏感度和准确率。

肝硬化背景下肝内胆管细胞癌的钆塞酸二钠MRI表现及征象分析

目的:探讨肝硬化背景下肝内胆管细胞癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)的钆塞酸二钠(Gadoxetate disodium,Gd-EOB-DTPA)MRI表现。方法:回顾性分析南通大学附属南通第三医院2014年6月-2021年10月31例经病理证实为ICC且行Gd-EOB-DTPA MRI的患者资料。观察病灶大小、形态、边缘及常规平扫表现、动态强化规律、肝胆期信号特点。两名诊断医师在未知病理结果情况下应用Gd-EOB-DTPA增强MRI对肝硬化背景下的ICC诊断结果进行比较。结果:31例ICC均为单发,形态以分叶状居多,所在肝叶萎缩7例,邻近肝包膜凹陷16例,远端胆管扩张11例。T2加权成像平扫多呈不均匀高信号。21例弥散加权成像图像上表现为“靶征”改变。根据动态强化模式,将ICC分为:经典型ICC(n=24),瘤体逐渐进行性增强或持续强化;不典型ICC(n=7),肿块部分区域动脉期强化、门脉期或移行期呈低信号“廓清”改变。按动脉期增强方式,分为周边或环形强化(87.1%,27/31)和全瘤或接近全瘤强化(12.9%,4/31),ICC以前者表现更常见。肝胆期22例(70.9%)ICC呈现中央云絮状稍高信号伴边缘低信号的“靶征”样改变。两名医师诊断结果与术后病理比较,诊断准确率及诊断结果的一致性均很高。结论:Gd-EOB-DTPA MRI有助于肝硬化背景下ICC的诊断和鉴别诊断,具有重要的临床价值。

大气层内全天时星敏感器成像模型仿真与影响因素分析

全天时星敏感器在大气层内进行观测任务时,难以避免受到大气的影响。为了深入研究全天时星敏感器白昼观星困难的原因,需要对全天时星敏感器在成像过程中所受到的大气影响进行分析。利用MODTRAN软件对大气的干扰进行仿真计算,对不同观测条件下大气的影响进行了研究,并得到大气对全天时星敏感器成像影响的计算模型。研究结果显示,选择合适的光谱范围有利于全天时星敏感器的白昼观星任务。结合黑体辐射定律、恒星星等和恒星光谱型等信息,对恒星辐射的计算进行了修正,建立了恒星目标光谱辐射计算模型。最后,利用得到的大气影响的计算模型和修正后的恒星目标光谱辐射计算模型,并结合相关探测参数,进行仿真信噪比和仿真星图的计算。通过将仿真结果与实际实验结果进行对比,验证了所提出模型的正确性。

江苏近岸海域悬沙浓度的时空分布特征

2006—2007年间的四个季节在江苏近岸海域69个站位采集水样,获取悬沙浓度。通过对TM遥感数据反演,获取该海域四季大面悬沙浓度,并与调查的实测悬沙浓度进行对比。结果显示,大面调查的非同步数据基本可正确反映大区域悬沙浓度的季节与空间分布趋势。悬沙浓度等值线由高至低、由陆向海分布,底层浓度约为表层的2—3倍;废黄河口和长江口外海域为悬沙浓度高值区,而海州湾为低值分布区,东南部陆架区受台湾暖流影响出现低值中心。冬季整个海域悬沙浓度均较高,其次为春季,夏季最低;废黄河口海域的高值中心在不同季节分布位置有所移动。海底沉积物的再悬浮是苏北近岸悬沙最主要的来源,河流输沙量的季节变化是影响长江口海域悬沙浓度变化的关键因子。相关分析结果表明,潮流为影响悬沙浓度分布的主要控制因子;季风、风暴潮和风浪虽对悬沙的分布具有一定的影响,但冬季的低温环境是形成该季节整个海域悬沙浓度显著偏高的重要因素。

重庆三峡库区柑橘叶片锌营养状况及其影响因子分析

【目的】了解重庆三峡库区柑橘叶片锌营养状况及其影响因子。【方法】在该区域10个主产县的代表性果园共采集土样260份和叶样584份,对果园土壤有效锌含量,以及土壤pH值、品种、砧木和树龄对叶片锌含量的影响进行了分析。【结果】重庆三峡库区柑橘园土壤有效锌含量自东向西呈上升趋势,但果园土壤普遍缺锌,土壤有效锌缺乏比例高达62.31%,适宜比例仅9.23%;柑橘叶片普遍缺锌,叶片锌含量缺乏的比例高达74.66%,适宜比例仅1.03%;相关性分析显示,仅云阳县柑橘园叶片锌含量与土壤有效锌含量呈显著正相关(P【0.05),其余9县相关性不显著;不同pH值土壤的柑橘叶片锌含量存在差异,微酸至微碱性土的柑橘叶片锌含量最高,酸性土最低,且2者差异达极显著水平;品种方面,普通甜橙叶片锌含量最高,柚最低,2者差异达显著水平;砧木方面,酸柚砧柑橘的叶片锌含量最低,枳橙砧次之,红橘砧和枳砧相对较高;树龄方面,3~8 a(年)生柑橘树叶片缺锌比例比8 a生以上树高8.46个百分点。【结论】重庆三峡库区柑橘园土壤、叶片锌普遍缺乏,测土难以准确地反映树体的锌营养水平,建议叶面喷施锌肥,并配合有机肥施用矫治缺锌。

动脉自旋标记与动态磁敏感对比MRI在脑卒中缺血半暗带的对照研究

目的:对照研究动脉质子自旋标记(ASL)与动态磁敏感对比(DSC)MRI在评价脑卒中缺血半暗带中的应用价值。方法:对34例发病12h内的急性脑卒中患者行常规MRI、扩散加权成像(DWI)、ASL和DSC检查。观察两种技术的灌注特点,分别用两种灌注技术与DWI结合来评价缺血半暗带(IP),结果采用Mann-Whitney检验做定性分析。以DWI显示的最大病变为标准层面,分别测量两种技术异常灌注范围大小,结果采用独立样本t检验做定量分析。结果:①定性分析,34例患者中32例两种灌注方法判断结果一致(低灌注30例,其中存在IP17例,不存在IP 13例;高灌注2例),两者间差异无统计学意义(P>0.05)。②定量分析,34例患者两种灌注技术显示的最大病变层面异常灌注区面积大小,SDSC=27.17±14.07cm2,SASL=29.10±12.72 cm2,两者间差异无统计学意义(t=-0.499,P>0.05)。③2例两种灌注技术不一致(2例ASL均为高灌注,DSC均为正常灌注)。④6例患者ASL图显示低灌注区边缘带出现条形高信号。结论:无创性ASL技术与DSC技术对评价脑卒中IP具有较好的一致性。ASL对显示脑卒中高灌注、低灌注区边缘高信号(提示侧支循环)更敏感。

赣南脐橙园土壤有效锌含量状况研究

【目的】为了解赣南脐橙园土壤有效锌含量状况,【方法】在赣南16县随机选取446个脐橙园,分析土壤农化样和背景样有效锌含量、pH值、有机质含量等。【结果】赣南脐橙园背景样和农化样土壤分别有80.78%和90.87%为酸性（pH〈5.5）,其中强酸性（pH〈4.5）土壤分别占30%和44%;95.63%的背景样土壤和80.38%的农化样土壤有机质含量低于15 g.kg-1,农化样土壤有机质平均含量高于背景样土壤;背景样土壤有效锌平均含量仅为1.50 mg.kg-1,农化样为3.09 mg.kg-1;背景样和农化样有效锌不足（〈2 mg.kg-1）的果园比例分别为77.29%和58.10%,只有10.92%背景样和16.35%农化样土壤有效锌含量达到适量（2~3 mg.kg-1）水平;土壤有效锌含量与土壤pH值和有机质均呈极显著正相关,有效锌与有效P、有效Cu的相关系数分别为0.420、0.502,呈极显著正相关。【结论】赣南脐橙园背景样土壤和农化样土壤均酸化严重、有机质和有效锌含量普遍偏低,应增施石灰、有机肥和锌肥矫治。

组织工程骨膜包被双相陶瓷磷酸钙修复兔尺骨缺损

背景:研究证明骨膜在骨缺损的修复方面起着重要作用,然而大段骨缺损常常伴随骨膜的缺失。因此运用组织工程学原理构建组织工程骨膜修复骨缺损已成为研究热点。目的:通过外周血来源间充质干细胞复合猪小肠黏膜下层构建组织工程骨膜,观察其包被双相陶瓷磷酸钙支架对兔骨缺损的修复。方法:将外周血间充质干细胞接种于SIS膜(猪小肠黏膜下层)上构建组织工程骨膜,并通过活死细胞染色观察间充质干细胞生长情况。取30只新西兰兔构建15 mm尺骨缺损模型,随机等分为空白对照组、单纯磷酸钙陶瓷组、组织工程骨膜包被磷酸钙陶瓷组分别进行相应的骨缺损修复处理。通过术后标本影像学、组织学观察对比3组骨缺损修复情况。结果与结论:(1)外周血间充质干细胞接种于SIS膜后细胞活死染色发现间充质干细胞生长良好,数量逐渐增多;(2)X射线片Lane-Sandhu评分:体内实验中,术后4,8周组织工程骨膜包被磷酸钙陶瓷组X射线片Lane-Sandhu评分显著高于单纯磷酸钙陶瓷组(P<0.05),单纯磷酸钙陶瓷组高于空白对照组(P<0.05);(3)组织学变化:术后4,8周组织工程骨膜包被磷酸钙陶瓷组骨基质形成多于单纯磷酸钙陶瓷组,基质周围有较多成骨细胞分布;(4)结果显示,外周血间充质干细胞和SIS膜构建的组织工程骨膜包被双相陶瓷磷酸钙对骨缺损有良好的修复作用。

基于导航星域和K矢量的快速星图识别算法

星图识别算法是星敏感器的关键技术,快速性和可靠性一直是对其评价的重要指标。提出了基于K矢量查找表和导航星域联合进行超快速星图识别的方法。首先根据星敏感器视场和所能敏感的星等建立全天球导航星表;再依据K矢量的原则对全天的导航星按照星对角距进行分类,建立星对角距所对应导航星的K矢量和K矢量查找表。利用星敏感器视场中的4颗星构成6组星对角距,将其中的5组星对角距所对应K矢量查找表域的星对组进行导航星表域(简称导航星域)的变换,根据另外一组星对角距所对应的K矢量查找表域的值对前面5组导航星域的值同时进行索引比较,直接找到了满足条件的4颗导航星,即完成全天的星图识别。最后,通过计算机仿真,实验室模拟和真实星空实验三个层次验证了此方法的可靠性和快速性。

微型星敏感器实验室测试系统研究

微型星敏感器以其质量小、体积小、功耗小、精度高的优点在小型卫星中得到了越来越多的应用。常规的地面测试装置设备复杂,费用昂贵,调试困难。在实验室条件下设计并实现了一种简单有效的测试系统,并分析了系统参数对测试精度的影响,给出了设计原则。针对清华大学所设计的星敏感器的原理样机进行了实验测试和误差分析,结果验证了星敏感器的设计指标。实验系统能完成微型星敏感器的性能和指标评价,可用于微型星敏感器的快速原型设计。

北京平谷区苹果锈果类病毒检测初报

采集北京市平谷区‘中秋王’、‘寒富’苹果叶片样品共12份,以Northern杂交、RT-PCR方法检测苹果锈果类病毒（Apple scar skin viroid,ASSVd）带毒情况。结果表明,表现明显锈果症状的‘中秋王’样品均检出ASSVd,无明显症状的‘中秋王’样品没有检出ASSVd,而无明显症状的‘寒富’样品全部携带ASSVd。测序发现,所得序列与NCBI中已报道的ASSVd基因组序列相似性为91%～99%,且两品种中ASSVd主流序列完全相同。结果说明‘中秋王’对ASSVd较为敏感,感病后易于表现出明显的锈果症状;‘寒富’对ASSVd耐性较强,感病后不表现出明显症状。

石化废水中常见有机酸的液相色谱分析

利用高效液相色谱（HPLC）法同时检测石化废水中丙烯酸、对甲基苯磺酸、甲基丙烯酸。水样调节pH=1．6，经0．45μm醋酸纤维滤膜过滤后直接进行色谱分析。色谱条件：流动相为体积比93：7的磷酸盐缓冲溶液（pH=3）和乙腈，流速1．0mL／min，ZORBAX-SB—C18色谱柱，柱温30℃，MWD检测器，检测波长195nm，进样量10μL。丙烯酸、对甲基苯磺酸、甲基丙烯酸的最低检出限分别为0．030、0．028和0．050mg／L；样品测定的相对标准偏差分别为1．83％、0．69％和0．84％；样品加标回收率96％～112％。

肝脏影像报告和数据管理系统LR-2类肝硬化相关结节的MRI纵向观察分析

目的:探讨肝脏影像报告和数据管理系统(LI-RADS)LR-2类肝硬化相关结节的MRI纵向观察分析。方法:回顾性分析2012年9月至2018年12月期间本院MRI首诊为LR-2类肝硬化相关结节,并进行过至少1次MRI增强随访复査,期间未进行过活检、手术等,共47例(105个病灶)肝硬化患者纳入观察。记录随访时长、影像改变及LI-RADS分类情况。采用Kaplan-Meier曲线分析LR-2类肝硬化相关结节进展至LRA4的12、24、36个月累积发生率。结果:105个LR-2类肝硬化相关结节,随访时长12.0-56.3个月,平均20.5个月。随访期间,4个上调至LR-5,1个上调至LR-4,3个上调至LR-3,78个保持不变,19个下调至LR-1。LR-2类肝硬化相关结节进展至LR≥4的累积发生率为4.8%,其中12、24、36个月累积发生率分别为0%、5.2%,7.7%,演变过程中,均表现为病灶内铁廓清、T2WI信号增高以及动脉期富血供转变。结论:肝硬化背景下约4.8%的LR-2类肝硬化相关结节转归为可能或明确的HCC,铁廓清、T2WI信号增高及动脉期富血供转变为病变多步癌演变过程重要的影像征象。

基于学科核心素养导向下的体育教学观与教学策略——“3+1”自主情智体育教学观及策略理论分析

进入21世纪以来,我国教育处于从“量”到“质”的转变过程中,体育教学观与教学策略正在逐步走向现代化与科学化,对学生核心素养的培育成为教育改革的重中之重。体育教师应在正确的体育教学观指导下,利用合理的教学策略落实对学生体育学科核心素养的培养。在此背景下,如何有效开展基于学科核心素养的体育与健康教学设计成为学校体育工作者关心的话题。

单、多相位动脉自旋标记灌注成像在脑卒中的研究

目的探讨单、多相位动脉自旋标记(ASL)灌注技术的优缺点以及在脑卒中患者中的临床应用价值。方法对31例脑卒中患者行常规MRI、扩散加权成像(DWI)和单、多相位ASL检查。观察2种方法的灌注特点,包括低灌注、正常灌注、延迟灌注、高灌注等,比较2种方法各自的优势。分别在DWI、ASL上确定病变的范围,比较两者之间的关系。结果31例患者中,23例单、多相位ASL灌注结果完全一致(低灌注14例,低灌注伴局部高信号3例,高灌注4例,正常灌注2例),8例灌注结果不完全一致,(2例单相位显示低灌注,多相位为延迟灌注;6例单相位显示低灌注,多相位为低灌注伴局部高信号)。30例脑卒中患者中,DWI与ASL对同一病例相同病变显示面积大小:SDWI<SASL,n=13;SDWI≈SASL,n=16;DWI阳性而ASL阴性,n=2。结论ASL能基本反映脑梗死区的血流灌注情况,多相位ASL在显示脑卒中延迟灌注、局部高信号(提示侧枝循环)方面比单相位ASL更具优势,单相位ASL图像信噪比相对较高。

锌胁迫下水培枳幼苗锌分布及矿质营养元素含量变化

为了解锌胁迫(缺乏或过量)下枳体内锌分布及其他矿质元素含量变化,以30d枳实生幼苗为试材,分别进行锌缺乏(0μmol·L-1)、对照(0.7μmol·L-1)和锌过量(70μmol·L-1)水培处理,70d后测定和分析。结果表明,枳幼苗根、茎和叶中锌含量随处理浓度升高而显著升高,不同器官锌含量为根>茎>叶,锌胁迫下植株地上部分含锌量比例增加。与对照相比,缺锌处理枳幼苗叶片K、Mn和Cu含量显著降低,叶片Fe含量显著升高,根系Mn含量显著上升,根系Cu含量显著下降。与对照相比,锌过量处理枳幼苗叶片P、Ca、Mg和Cu含量,茎P和K含量,根系Fe和Cu含量均显著升高;叶片K、Fe和Mn含量,茎Ca和Fe含量,根系K和Mn含量均显著降低。各器官不同处理间S含量差异无显著性。相关性分析显示,Zn和Cu含量在枳幼苗根、茎、叶中呈显著或极显著正相关;Zn和Fe含量在叶片和茎中呈极显著负相关,在根中呈极显著正相关。

中国苹果花叶病病原研究现状分析

我国是世界上最大的苹果生产国,苹果花叶病是苹果栽培中最常见的病毒性病害,在我国各大苹果产区发生普遍。感病苹果叶片常表现花叶、坏死、沿脉形成不均匀分布的条纹等症状,栅栏组织细胞排列松散、叶绿体畸变、膜结构遭到破坏,最终影响叶片光合能力和果实品质形成,严重威胁苹果产业的可持续健康发展。近年来的研究表明,从感花叶病苹果叶片中新鉴定的苹果坏死花叶病毒(Apple necrotic mosaic virus,ApNMV)与我国苹果表现花叶病的相关性较高,可能是引起我国苹果花叶病的主要病原。但也有研究指出,同属于雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)等轴不稳环斑病毒属(Ilarvirus)的苹果花叶病毒(Apple mosaic virus,ApMV)和李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)也被认为可能是引起我国苹果花叶病的重要病原。为此,笔者依据前人研究基础及本研究室前期研究结果,系统综述了ApNMV与我国苹果花叶病的关系及其研究进展,并分析了ApMV和PNRSV在我国表现苹果花叶病的苹果样品中的侵染状况,旨在进一步明确引起我国苹果花叶病的主要病原,为该病害的科学防控提供参考。

Effects of Sn element on microstructure and properties of Zn-Cu-Bi-Sn high-temperature solder

The microstructures and properties of the Zn-Cu-Bi-Sn(ZCBS) high-temperature solders with various Sn contents were studied using differential scanning calorimetry(DSC),scanning electron microscopy(SEM) and X-ray diffraction(XRD).The results indicate that the increase of Sn content can both decrease the melting temperature and melting range of ZCBS solders and it can also effectively improve the wettability on Cu substrate.The shear strength of solder joints reaches a maximum value with the Sn addition of 5%(mass fraction),which is attributed to the formation of refined β-Sn and primary ε-CuZn_5 phases in η-Zn matrix.However,when the content of Sn exceeds 5%,the shear strength decreases due to the formation of coarse β-Sn phase,which is net-shaped presented at the grain boundary.

霉菌性食管炎762例相关发病因素分析

目的探讨霉菌性食管炎相关发病因素。方法对762例经内镜诊断为霉菌性食管炎患者的临床资料、发病机制进行回顾性分析。结果广谱抗生素、糖皮质激素和非甾体抗炎药的过度应用是主要致病原因,年老体弱及免疫功能低下者发病率高。结论霉菌性食管炎的发生机制主要是霉菌侵袭因素与机体防御因素失去平衡的结果,任何导致全身免疫能力下降和食管黏膜屏障作用削弱的因素,都将增加本病发生机会;霉菌性食管炎的防治关键是规范使用抗生素、激素及非甾体抗炎药。