高效液相色谱法提高红曲细菌分离与分析的效果

为了探讨高效液相色谱技术(HPLC)在复杂微生态体系中微生物分离、分析的应用潜力,提高现代分子生物学技术检测的灵敏度和准确性,本文选取红曲作为模式体系,优化红曲中细菌样品的制备方法,应用HPLC技术对红曲中的生产菌株进行分离,并结合变性梯度凝胶电泳(DGGE)、细菌16SrDNA鉴定方法对色谱分离得到的菌株进行鉴定。结果显示:根据HPLC紫外检测图谱收集到5个明显的洗脱峰,其中有3个洗脱峰经DGGE分析为单一条带,16SrDNA鉴定洗脱峰分别包括环状芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、人参土芽孢杆菌和脂肪酸芽孢杆菌。研究表明,高效液相色谱技术能够从复杂的红曲微生物样品中分离出单一的细菌,与传统PCR-DGGE技术相比,无需进行胶回收便可实现16SrDNA的直接测序,且具有准确性高,试验周期短,细菌细胞可回收等优点。色谱分离技术在下一代测序技术中的应用潜力也在探讨中。

肠道菌群模式菌株的HPLC分离条件优化及其表征

采用高效液相色谱分别考察了肠道菌群模式菌株及各单菌的色谱行为,成功建立了HPLC分离分析肠道菌群模式菌株的最佳洗脱方法,即阶梯式梯度洗脱.结果显示,肠道模式混合菌株经过高效液相色谱分离得到5个明显的洗脱组分,分别为0.10 mol·L^(-1)(脆弱拟杆菌和金黄色葡萄球菌)、0.20 mol·L^(-1)(青春双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌)、0.25 mol·L^(-1)(粪肠球菌)、0.30 mol.L^(-1)(奇异变形杆菌、克雷伯肺炎杆菌和产气荚膜梭菌)和0.50 mol·L^(-1)(大肠杆菌和产气荚膜梭菌)洗脱峰.色谱柱的上样浓度为培养菌液(OD600=0.576)的5倍时,其最大上样量为500μL,且方法分辨率高、重现性好、结果稳定.

发酵果汁胶原蛋白饮料的研制及其活性研究

文章以胶原蛋白肽为原料,添加发酵果汁和辅料,研制口味良好、功能多样的胶原蛋白饮料。结果表明:⑴以发酵木瓜/复合莓果汁作为饮料的基础口感最好,其中:糖酸比分别为38∶1和18∶1;胶原蛋白肽含量皆为6.0%。⑵添加发酵木瓜/复合莓果汁有助于抗氧化活性的增加,其顺序为:K发酵复合莓果汁胶原蛋白饮料>K发酵木瓜果汁胶原蛋白饮料>K胶原蛋白肽。⑶发酵木瓜/复合莓果汁的添加有助于胶原蛋白肽的降解消化,体外消化率顺序为:D发酵木瓜果汁胶原蛋白饮料≈D发酵复合莓果汁胶原蛋白饮料≥D胶原蛋白肽。⑷胶原蛋白饮料皆能显著提高小鼠的抗疲劳能力(p<0.05),其顺序为:F发酵复合莓果汁胶原蛋白饮料>F发酵木瓜果汁胶原蛋白饮料>50%。所研制的2款胶原蛋白饮料具有口感好、生物活性功能多样的特点,可望为市场所接受。

共存葡萄糖对超氧化物歧化酶热稳定性的影响

热加工会导致超氧化物歧化酶热变性而失去抗氧化活性。在药食两用材料中,普遍共存的还原糖可能通过美拉德反应发挥保护作用。本文模拟中药炮制和煎煮过程,对葡萄糖与超氧化物歧化酶进行不同条件的共存保温,通过酶活力和SDS-PAGE分析,探讨葡萄糖共存对SOD热稳定性的影响。试验结果表明:共存葡萄糖与超氧化物歧化酶发生美拉德反应后可明显提高超氧化物歧化酶的热稳定性。