10Cr9Mo1VNb与12Cr1MoVG异种钢焊接及热处理工艺探讨

锅炉及蒸汽管道检修改造过程中经常遇到厚壁管异种钢的焊接,为了保证焊接质量,根据标准规范选用合适的焊接材料、采用合适的焊接及热处理工艺,获得了优良的焊接接头,保证管线的安全可靠运行,希望能为以后类似管道焊接及热处理工艺的确定提供一些参考。

Pax-6在大鼠发育脑喙侧神经干细胞迁移流中的表达

目的 了解大鼠脑发育过程中 ,喙侧神经干细胞迁移流中不同时期Pax 6表达水平的时空差异。 方法 用BrdU对胚胎 14d、出生后 0、1和 7d的Wistar大鼠行活体标记 ,取各时相点鼠脑 ,冰冻切片 ,行BrdU、Nestin、Pax 6和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫荧光染色 ,观察Pax 6在脑内增殖细胞中的表达情况 ,比较在上述 4个时相点 ,Pax 6于室管膜前下区、迁移流主干部分和嗅球 3个部分的表达差异。 结果 1 在发育中大鼠脑内 ,Pax 6主要表达于神经干细胞内 ,在海马增殖细胞亦有较高表达。 2 在喙侧神经干细胞迁移流内 ,Pax 6在迁移流主干部分的表达高于室管膜前下区和嗅球 ;在胚胎 14d的表达与出生后 0d和 1d相似 ,表达水平较高 ,出生后 7d迅速下降到很低水平。 结论 在大鼠脑发育过程中 ,Pax 6主要表达于神经干细胞及海马增殖性细胞内 ,在大鼠出生后 ,随着大鼠脑的发育 ,Pax 6于喙侧神经干细胞迁移流的表达迅速减弱 ,但迁移流主干部分的表达始终高于室管膜前下区和嗅球。

Wnt-1在大鼠喙侧神经干细胞迁移流中的时空表达

目的 比较在大鼠脑发育过程中 ,Wnt 1在喙侧神经干细胞迁移流中表达水平的时空差异。方法 以 5 溴脱氧尿嘧啶尿苷 (BrdU)对胚胎 14d、出生后 0d和 7d的Wistar大鼠行活体标记 ,取各时相点鼠脑 ,冰冻切片 ,行BrdU、Wnt 1和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫荧光染色 ,比较在上述三个时相点 ,Wnt 1于室管膜前下区、迁移流主干部分和嗅球三个部位的表达情况。结果 在时间上 ,Wnt 1的表达在胚胎 14d高于出生后 0d和 7d ,出生后 0d和 7d的表达情况相似 ;在空间上 ,Wnt 1的表达在嗅球最高 ,室管膜前下区稍低 ,在神经干细胞迁移流主干部分的表达最低。结论 随着大鼠脑的发育 ,Wnt 1于喙侧神经干细胞迁移流中的表达逐渐减弱 ;在胚胎期及出生后早期 ,Wnt 1在喙侧神经干细胞迁移流中表达的空间分布情况相似。

hTERT转染神经干细胞端粒酶活性及hTERT mRNA检测

目的以逆转录病毒PLXSN为载体,将hTERT基因转染入体外培养的人神经干细胞,检测神经干细胞端粒酶活性及hTERT mRNA表达情况,为建立永生化神经干细胞系提供一种新的思路。方法体外扩增人神经干细胞及基因转染后,应用PCR-ELISA法检测神经干细胞端粒酶活性,荧光定量PCR法检测hTERT mRNA表达情况。结果通过逆转录病毒介导的hTERT基因转染人神经干细胞后,端粒酶活性明显升高,持续表达,hTERT mRNA也早期呈高水平表达,但继之下降,维持在一个较低水平。结论转染hTERT基因后的神经干细胞具有表达高水平端粒酶活性,并稳定表达,这为建立基因工程的永生化神经干细胞系奠定了基础。而hTERT mRNA则逐渐下降,并维持在一个较低水平,不能作为检测神经干细胞增殖和分化能力的指标。

高原地区颅脑损伤去骨瓣减压术后并发症分析

目的 分析高原地区颅脑损伤患者经去骨瓣减压手术治疗后的相关并发症.方法 回顾性分析西藏军区总院2007年6月～2012年6月收治的167例经去骨瓣减压手术治疗的高原地区颅脑损伤患者的病例资料,分析去骨瓣减压手术相关并发症的类型和发生率以及相关临床因素.结果 35例（21.0%）减压术后6个月内死亡.78例（46.7%）发生去骨瓣减压术相关并发症,其中39例（23.4%）出现≥2种并发症.在术后并发症中,脑膨出的发生率最高（26.9%）,其次是硬膜下积液（25.1%）.入院GCS评分低和年龄高与并发症的发生相关.结论 高原地区颅脑损伤去骨瓣减压术最常见的相关并发症为脑膨出和硬膜下积液.术者应考虑GCS评分和年龄等危险因素,预防和采取有效措施防治并发症,改善高原地区颅脑损伤患者预后.

非病毒载体介导神经干细胞基因转染的效果观察

目的 寻找较佳的神经干细胞非病毒载体基因转染方法。方法 采用磷酸钙、不同种类脂质体、Fugene 6和Nucleofector法将绿色荧光蛋白基因转染于神经干细胞 ,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染结果。结果 荧光显微镜观察和流式细胞仪检测结果表明 ,转染效率从高到低依次为Nucleofector法、DMRIE C介导、FuGene6介导、Lipofectamine和磷酸钙转染 ,组间均存在显著差异。结论 Nucleofector法和DMRIE

Id2在SVZa神经干细胞向神经元分化中的作用

目的研究DNA结合抑制物2(inhibitor of DNA binding2,Id2)在室管膜前下区(anteriorsubventricularzone,SVZa)神经干细胞向神经元分化中的作用。方法体外分离培养P0昆明小鼠SVZa神经干细胞,正义Id2、反义Id2真核表达质粒转染SVZa神经干细胞,采用流式细胞仪检测在Id2作用下SVZa神经干细胞分化为神经元的比例。采用Western blot检测不同浓度的骨形成蛋白2(bonemorphogenenticprotein2,BMP2)诱导下Id2蛋白的表达变化。结果正义Id2真核表达质粒转染组,SVZa神经干细胞分化为神经元的比例小于空白对照组,反义Id2真核表达质粒转染组,SVZa神经干细胞分化为神经元的比例明显高于空白对照组;随着BMP2浓度的增加,Id2的表达增加。结论Id2抑制体外培养的P0SVZa神经干细胞向神经元方向分化,BMP2可以促进SVZa神经干细胞Id2的表达,它们共同参与调控SVZa神经干细胞向神经元分化的过程。

Nestin、Wnt1和β-catenin在小鼠SVZa-RMS-OB通路的表达

目的:研究Nestin、Wnt1和β-catenin在小鼠SVZa-RMS-OB通路的表达情况。方法:取P0昆明小鼠全脑组织,冰冻切片,切片厚度为20μm,行免疫荧光双标检测Nestin和Wnt1在小鼠SVZa-RMS-OB通路的表达情况,行免疫荧光单标检测β-catenin小鼠SVZa-RMS-OB通路的表达情况。结果:Nestin在SVZa表达最高,在OB表达最低,在RMS表达介于SVZa和OB之间;Wnt1在OB表达最高,在RMS表达最低,在SVZa的表达介于OB和RMS之间;β-catenin在SVZa表达最高,在OB表达最低,在RMS表达介于SVZa和OB之间。结论:随着SVZa神经干细胞从SVZa向OB迁移,Nestin和β-catenin表达逐渐减低;Wnt1在迁移终点OB高表达,在RMS迁移途中表达最低;Nestin、Wnt1和β-catenin在小鼠SVZa-RMS-OB通路的不同表达可能与SVZa神经干细胞增殖、分化有关。

高密度Oligo基因芯片筛选小鼠嗅球发育相关基因的研究

目的 研究小鼠嗅球发育相关基因表达谱,探讨嗅球(olfactorybulb ,OB)在室管膜前下区(anteriorsubventricularzone ,SVZa)神经干细胞的迁移及分化中的作用。方法 采用165 0 0点的小鼠高密度Oligo基因芯片对胚胎16d(embryonicday16,E16)、生后1d(postnatalday 1,P1)、7d(P7)、2 1d(P2 1)OB的基因表达情况进行检测,以4个时相点全脑等量混合样品作为对照。结果 通过筛选基因表达谱,得到5 2 77条在E16、P1、P7及P2 1OB中均有表达的基因,然后采用两两对比组合,得到6组数据,从中筛选出了5 81个差异在3倍以上的基因,分层聚类分析将其分为6大类,进一步分析了与SVZa区神经干细胞的迁移相关基因Slit2聚类同组的2 8个基因及与多巴胺神经元分化相关基因TH聚类同组的17个基因。结论 在小鼠嗅球发育中发现了5 81条表达差异≥3倍的基因,进一步通过对与Slit2相关的2 8个基因及与TH相关的17个基因的分析有助于揭示SVZa神经干细胞迁移及向多巴胺神经元分化的作用机制。

人胚与鼠胚神经干细胞体外培养的差异

为比较人胚与鼠胚神经干细胞体外培养的差异 ,实验采用具有丝裂原作用的细胞生长因子 ,结合无血清细胞培养技术从人胚和鼠胚皮层分离神经干细胞 ,在连续传代过程中观察其体外培养特性 ,免疫荧光染色检测 Nestin抗原和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达 ,并用流式细胞仪检测神经干细胞分化情况。结果表明 :1使用单一生长因子即可从鼠胚皮层分离神经干细胞 ,但在人胚却需同时使用多种生长因子 ,协同使用 b FGF、EGF和 L IF是人胚神经干细胞体外培养的较佳条件 ;2鼠胚皮层神经干细胞在连续传代过程中增殖速度快于人胚 ,其 Nestin阳性率和 Brd U标记的阳性率亦高于人胚 ,表明其增殖能力明显高于人胚 ;

SVZ神经干细胞分化过程中的Bmp4启动子活性分析

目的 室管膜下层 (Subventricularzone ,SVZ)神经干细胞分化过程中的Bmp4启动子活性分析及其与神经元分化的关系。方法 在构建Bmp4启动子———红色荧光蛋白报告载体基础上转染SVZ神经干细胞 ,动态地观察报告基因在SVZ神经干细胞分化过程中的表达 ,并进行显微计数和神经元标志物流式细胞仪检测。结果 SVZ神经干细胞贴壁分化过程中具有较高的Bmp4启动子活性 ,48h阳性率达到 8.6%,且明显高于皮层神经干细胞。SVZ神经干细胞的Bmp4启动子活性与神经元分化高度正相关 (r =0 .80 5 ,P <0 .0 5 ) ,皮层神经元分化与Bmp4启动子活性相关不明显。结论 采用启动子活体荧光标记 ,能够较好地反映正常情况下内在蛋白的表达情况 ;Bmp4启动子活性与SVZ神经干细胞向神经元的分化高度相关 。

西藏地区脑出血危险因素及预后10年趋势分析

目的：分析西藏高海拔地区过去10年脑出血的基本特征、危险因素及预后，并总结其治疗经验。方法以西藏军区总院2002～2012年收治的脑出血病例每5年分成一组，对前后二组临床资料进行对比分析。结果后5年组与前5年组对比，住院人数从2002～2007年的年均61例增加至2007～2012年的年均143例，男性比例从75％下降至66％，而女性比例从25％增加至34％（P＜0．01）；吸烟患者比例从38％下降至29％（P＜0．01），而应用降血压药物患者的比例从13％上升至27％（P＜0．01）；住院时间从21 d缩短至16 d（P＜0．05）。出院时的神经功能恢复情况应用改良Rankin量表（mRS）评价， mRS 0～3分的患者比例从43％上升至58％（P＜0．01），而mRS 4～5分的患者比例从46％下降至34％（P＜0．01）。结论虽然近年来西藏地区脑出血就诊人数增加，但总体呈现出预后改善的趋势，其原因可能与居民健康意识增强、医疗设备的改善和治疗方式的改进有关。

高原地区重型颅脑损伤患者死亡因素分析

目的分析高原地区的重型颅脑损伤患者的死亡率和死亡危险因素。方法回顾性分析西藏军区总院2007年6月～2012年6月收治的367例高原地区重型颅脑损伤患者的病例资料,应用多因素logistic回归分析确定引起死亡的危险因素。结果患者入院3个月的总死亡率为22%(80/367)。患者受伤至入院时间(OR=1.805),入院时GCS评分(OR=1.991)、孔对光反射情况(OR=2.033)和头颅CT显示的中线移位程度(OR=1.717)为死亡的独立危险因素。患者性别、年龄和居住地海拔高度对于死亡率的影响未显示出统计学意义。结论本研究分析了高原地区重型颅脑损伤死亡的危险因素。受伤至入院时间较长、入院GCS评分低、双侧瞳孔散大或CT显示中线移位>10 mm的重型颅脑损伤患者死亡率高。这些发现有利于制定临床治疗方案,改善患者预后。

锥颅穿刺引流术治疗高海拔地区基底节区脑出血

目的探讨锥颅穿刺血肿引流术治疗高海拔地区基底节脑出血的疗效。方法回顾性分析2002年8月~2012年8月收治的155例中等量（30~60 ml）基底节区脑出血病例临床资料,其中行锥颅穿刺血肿引流术（微创组）75例,保守治疗（保守组）80例。结果住院期间微创组肺部感染的发生率显著低于保守组（P〈0.05）,而其它并发症发生率无统计学意义（P〉0.05）。微创组出院时及出院后6个月的死亡率均明显低于保守组（P〈0.05）,出院时及出院6个月应用改良Rankin量表评价的神经功能恢复状况也优于保守组（P〈0.01）。结论锥颅穿刺血肿引流术手术时间短、组织创伤小、并发症少、生存率高,治疗高海拔地区中等量的基底节区脑出血的疗效优于保守治疗。

高原地区轻、中型颅脑损伤死亡原因分析

目的探讨高原地区轻、中型颅脑损伤的死亡原因。方法西藏军区总院2002年6月至2012年2月收治720例首诊为轻、中型颅脑损伤的患者,22例死亡。回顾性分析死亡患者的死亡原因。结果入院3d内死亡3例,3d～3周死亡15例,3周后死亡4例。17例患者入院3d内GCS评分降低至9分以下,5例入院3d～3周GCS评分降低至9分以下。因脑疝死亡13例,术后颅内感染死亡2例,肺部感染死亡3例,多发伤死亡3例,突发心肌梗死死亡1例。结论轻、中型颅脑损伤的死亡原因以脑疝为主,其次是并发症和复合伤。临床医生应在患者颅脑损伤早期警惕死亡的危险因素,采取有效措施降低死亡率。

SD大鼠偏侧帕金森病模型差异表达cDNA文库的构建(英文)

背景帕金森病（Parkinson＇s disease，PD）是好发于中老年人的神经退行性疾病，随着社会的老龄化，其患病率及致残率呈上升趋势。根据流行病学调查，神经病理学研究及基因水平分析，一般认为PD的病因及其病理损伤过程是多因素的，包括遗传因素、环境毒素、氧化应激、兴奋性氨基酸毒性作用、线粒体功能障碍、细胞凋亡和神经营养因子水平降低等。对疾病分子水平变化的研究，不但为阐明疾病的发生发展提供新的资料，而且还能为其治疗开辟新的途径。然而目前对PD分子水平所知尚少，因此，揭示PD分子病理变化，具有十分重要的意义。本研究旨在构建偏侧帕金森病SD大鼠纹状体组织差异表达基因消减cDNA文库，并筛选出一些可能参与PD病理损伤过程的基因，为PD的基因治疗提供依据。方法行SD大鼠纹状体区立体定向注射6-OHDA制备偏侧帕金森病模型；用抑制消减杂交方法分离差异表达基因的cDNA片段，连接T载体构建文库，转化扩增后随机挑取白色克隆行菌落PCR鉴定；利用反Northern杂交对重组质粒进行筛选；通过序列测定后与Genebank进行同源性比较。结果消减文库扩增获得1500余个白色阳性克隆，随机挑取95个行PCR扩增，81％的克隆中有100～600bp的插入片段，经反Northern杂交筛选出12个差异表达基因。结论利用立体定向技术成功制备偏侧帕金森病SD大鼠模型；利用SSH法及T／A克隆技术成功构建偏侧帕金森病大鼠纹状体组织差异表达基因消减cDNA文库。

高密度Oligo芯片筛选小鼠嗅球发育中DLX2相关基因

目的筛选小鼠嗅球发育中调控同源盒转录因子2(DLX2)的相关基因,探讨室管膜前下区神经干细胞在嗅球中向多巴胺神经元分化的机制。方法利用16844点的高密度Oligo芯片检测发育期嗅球的基因表达情况,采用基因神经网络分析,筛选与DLX2相关的基因。结果从2398个在4个时间点都表达的基因中筛选出623个差异基因,在相关系数设定为0.95水平上,共筛选出29个与DLX2相关的基因。29个基因中,已知功能的基因有13个,主要与代谢、凋亡、发育及信号传导功能相关,未知功能的基因有16个。结论在嗅球中可能有29个基因参与了DLX2的表达调控,对它们进一步的研究将有助于理解室管膜前下区神经干细胞在嗅球中向多巴胺神经元分化的机制。

中枢神经系统结核瘤的手术治疗

目的分析中枢神经系统结核瘤的临床特点,探讨中枢神经系统结核瘤的诊断和手术治疗水平。方法回顾性分析11例中枢神经系统结核瘤的临床表现、影像学特点及手术疗效。结果 11例结核瘤均通过手术全切除,病理检查证实为结核瘤,术前误诊为脑脓肿2例,脑胶质瘤1例。术后均予正规抗结核药物治疗。除1例死亡外,其余10例治愈出院。10例随访2年,遗有偏瘫3例,癫痫发作1例,其他病例可正常生活。结论中枢神经系统结核瘤临床上常缺乏特征性表现,对于诊断不明确的病例,应积极手术治疗。手术一般能完整切除瘤体,效果满意。

5例Fahr病的报道

Fahr病又称特发性基底节钙化症、锥体外系铁钙沉着症或特发性家族性脑血管亚铁钙沉着症，为一种罕见疾病。张雪哲等于1990年首先报道1例，迄今国内报道已近二百例。现报告我院2007年到2011年发现的5例病例。1临床资料1．1一般资料本组全部为男性，藏族（高原世居人）4例，汉族（高原移居人）1例，年龄分别为29岁、17岁、5岁、13岁、

人胚胎神经干细胞的体外培养

目的:从人胚胎皮层分离神经干细胞,寻找其在体外培养的适合条件.方法:使用具有丝裂原作用的多种细胞生长因子,结合无血清细胞培养技术,从人胚胎皮层分离具有增殖能力的细胞群,在连续传代过程中,验证其自我更新能力和多分化潜能,免疫荧光染色检测Nestin抗原和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达,并且流式细胞仪检测神经干细胞分化结果.结果:协同使用bFGF和EGF从人胚胎皮层分离的细胞群,具有自我更新能力和多分化潜能,表达胚胎早期细胞抗原Nestin,加入LIF后细胞增殖速度加快,分化为神经元的比例增高,而单独采用bFGF、EGF或LIF培养的细胞迅速衰退,仅能培养3 5代.结论:协同使用丝裂原生长因子从人胚胎皮层分离的细胞是中枢神经系统的干细胞;bFGF、EGF和LIF协同使用是体外培养神经干细胞的较佳条件.