男性乳腺良、恶性病变类固醇激素受体的临床病理研究

用免疫组化单克隆抗体技术对２１例男性乳腺癌，２８例男性乳腺发育作ＥＲ和ＰＲ检测。结果显示：男乳腺癌ＥＲ阳性率８０．９５％，ＰＲ阳性率６１．９０％。ＥＲ和ＰＲ阳性率随癌组织分化增高而增高。男性乳腺发育ＥＲ阳性率６０．７１％，低于乳腺癌ＥＲ检出率，ＰＲ阳性率８９．２９％，明显高于男性乳癌的检出率。本文结果提示ＥＲ和ＰＲ的表达与男性乳癌和男性乳腺发育之间有一定关系：体内雌激素相对活性升高，使ＥＲ和ＰＲ合成增多，提高了上皮对雌激素的敏感性，致乳腺上皮及间质呈病理性增生。

鼻咽癌分子遗传学研究进展

探讨鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)发生发展的分子遗传学事件及其变异对NPC临床病理变化的影响。对原发性NPC进行杂合性缺失(lossofheterozygosity,LOH)和比较基因组杂交(comparativegenomichybridizationCGH)分析,观察到NPC发生高频率LOH的染色体主要位于1p、3p、9p、9q、11q、13q、14q、16q和19p,并定位了相应的LOH最小丢失区,并发现特定区域LOH与鼻咽癌临床病理有密切关系;LOH量化值高(FAL值)并伴随病人血清高滴度EBV/EA和EBV/VCA抗体的NPC,多表现为T3+T4期、进展期TNM/III+IV期和远处淋巴结转移。NPC发生遗传物质扩增(gain)的染色体主要位于1q、2q、3q、6p、6q、7q11.2、8q、11q13、12、15q、17q和20q,表明在这些区域可能存在与NPC发生发展相关的癌基因(oncogenes)活化,且1q,8q,18q的扩增和9p的丢失与晚期NPC有密切关系。正常鼻咽上皮和鼻咽上皮不典型增生病变,3p区LOH的检出率分别高达74%和75%,表明3p区缺失是NPC发生过程中极早期分子事件。连锁分析表明HLA基因和细胞色素P4502E1酶基因可能是NPC的遗传易感基因,并定位了新的潜在NPC易感基因位点。应用cDNA微阵列技术,发现细胞周期蛋白、抗凋亡因子、某些癌基因/肿瘤抑制基因、生长促进因子。

鼻咽癌全基因组杂合性缺失分析

目的:分析鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)全基因组染色体杂合性缺失(lossofheterozygosity,LOH),定位NPC发生高频率LOH的区域,为定位NPC相关基因提供分子遗传学依据。方法:用PCR微卫星多态性分析(335个位点)技术检测98例NPC肿瘤基因组DNA等位基因缺失。结果:在22对染色体中,19对染色体在所选取位点中有至少1个位点LOH频率≥30%,3对染色体(15号、20号和22号)无LOH频率大于30%的位点;在335个位点中,4个位点LOH频率≥60%,其中3个在3号染色体,1个在9号染色体;5个位点LOH频率介于50%～59%,其中3个在3号染色体,5号和11号染色体各1个位点;22个位点LOH频率介于40%～49%,52个位点LOH频率介于30%～39%;252个位点LOH频率低于30%,提示为背景缺失;LOH频率≥30%的位点主要集中于12个染色体臂,分布于:1p36-34,3p24-26,3p14-21,3q25-27,4q35-31,5q15-21和5q32-33,8p22-23,9p21-23和9q33-34,11p12-14,11q13-23,13q13-14和13q31-32,14q11-13,14q23-24,14q32。本研究新报道在染色体区带1p,5q和19q等发生高频率LOH,LOH精细图谱提示这些区域内可能存在与NPC相关的TSG。结论:NPC肿瘤细胞在多染色体区带发生高频率LOH是常见的分子事件,提示在这些缺失区,可能存在与NPC发生、发展过程中起重要作用的肿瘤抑制基因。

原发性肝癌9号染色体等位基因杂合性丢失研究

目的：对广东地区37例肝癌染色体9p的9个位点进行微卫星多态性分析，明确这些位点染色体等位基因杂合性丢失（LOH）的情况，定位该区域可能存在的与肝癌有关的肿瘤抑制基因。方法：对所取位点用PCR法进行微卫星多态性分析并确定发生LOH的位点；结果：30例（80.80％）在至少一个位点发生LOH，其中LOH频率最高的位点是D9554（60．60％），LOH频率高于50％的位点有位于9p21带的1FNA，D9S1747和D9S1752，6例在所有能够提供信息的位点均发生LOH，7例在所有9个位点均未发生LOH。提示本地区肝癌染色体9P缺失的区域主要位于D9554（9p24），和DgS1752，D9S1747，1FNA（9p21）。结论：本研究首次发现肝癌在染色体9p24区发生高频率LOH，染色体9p21区也发生高频率LOH，提示在染色体9p24和9p21区域可能存在多个与肝癌相关的肿瘤抑制基困。

原发性肝细胞癌多染色体杂合性丢失研究

目的：研究原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）５ 对染色体３８ 个位点等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ） ，ＬＯＨ 与肝癌的临床病理改变和肝炎病毒感染的关系。方法：用ＰＣＲ 微卫星多态性分析检测肝癌ＬＯＨ。结果：发生高频率ＬＯＨ 的位点有染色体１ｐ 的Ｄ１Ｓ１８６（ｐ３１ ， ４８－１％ ） 和Ｄ１Ｓ２４３（１ｐ３６－３ ， ５１－６ ％ ） ； 染色体９ｐ２４ 的Ｄ９Ｓ５４（６１－８％ ） 、９ｐ２１ 的Ｄ９Ｓ１７４７（５２－４％ ） 和ＤＤ９Ｓ１７５２（５１－８ ％ ） 位点；１０ 号染色体１０ｑ２３ ～２４ 区Ｄ１０Ｓ１２２３（５３－３ ％ ） 和Ｄ１０Ｓ１２２５（３８－７ ％ ）位点； １６ 号染色体１６ｑ２４ 区的Ｄ１６Ｓ４１３ 位点ＬＯＨ 频率最高（７０－８ ％ ） ； １７ 号染色体１７ｐ１３ 上ＴＰ５３（５３－８ ％ ） 和Ｄ１７Ｓ５２０（５６－８％ ） 。各染色体ＬＯＨ 与肝癌的临床病理改变无明显关系；ＨＣＶ 和ＨＢＶ 复合感染与ｐ５３ 和ｐ１５ＩＮＫ４Ｂ基因的ＬＯＨ 有关。结论： 肝癌的发生、发展与多染色体的ＬＯＨ 有关， 在染色体１ｐ３１ ， １ｐ３６～ｐ３５ ， ９ｐ２４ 和９ｐ２１ ，１０ｑ２２ ～２４ ，１６ｑ２４ 和１７ｐ 可能存在多个与ＨＣＣ 有关的ＴＳＧ。

大切片P53免疫组化染色对判断直肠癌远端扩散长度的临床意义

背景与目的:目前直肠癌远端的安全分子切除长度尚无定论。本研究拟探索直肠癌远端肠壁内浸润的分子长度及其对临床的指导意义,阐明根治性直肠癌远端正常肠管应切除的安全长度。方法:收集1996年8月～1997年10月手术切除的P53阳性直肠癌标本61例,应用大切片P53免疫组化染色、对照常规HE染色,在显微镜下测量远端肠壁内浸润长度,并根据组织回缩比率,换算成活体远端浸润的实际长度;长期追踪随访,用寿命表法估计、比较各组浸润长度的生存曲线。结果:用免疫组化染色观察P53阳性直肠癌,82.0%(50/61)病例向远端浸润,肠壁内扩散的分子长度0.11～3.50cm,平均0.59cm,>3cm仅1例;而用常规HE染色观察,29例(47.5%)发生肠壁内扩散,长度为0.10～1.39cm,平均0.13cm,两组均数比较差异有显著性(P<0.0001);随访结果表明,浸润长度>1cm的病例,其生存率明显低于无远端浸润或浸润<0.5cm组(P<0.05)。结论:用免疫组化染色较常规HE染色测量直肠癌远端浸润长度更准确,对指导临床更有意义。P53阳性直肠癌远端浸润多数在1cm以内,根治术切除肿瘤远端正常肠管3cm对95%以上的病例已安全。浸润长度>1cm的病例生存率明显降低。

血浆EB病毒DNA浓度预测鼻咽癌远处转移的研究

背景与目的:鼻咽癌治疗失败的主要原因之一是远处转移,近年多项放化疗综合治疗的临床研究未显示出明显的远处转移率的降低和远期生存的获益,综合治疗适宜个体及最佳模式尚未确立。血浆EB病毒DNA(EBVDNA)浓度是一项能反映鼻咽癌分期、治疗反应、预后的灵敏、特异的分子生物学指标。我们设计此前瞻性研究,探讨通过鼻咽癌患者血浆EBVDNA浓度预测远处转移的发生,为个体化的综合治疗模式的选择提供分子学指标。方法:69例初治鼻咽癌患者分别在治疗前和治疗结束时采用荧光定量PCR方法检测血浆EBVDNA浓度。所有患者按计划随访,进行远期疗效及生存的评价。Kaplan-Meier法计算无转移生存率及总生存率,多因素分析用Cox回归模型。结果:远处转移患者治疗前血浆EBVDNA中位浓度(27000copies/ml)及治疗后EBVDNA检出率(55.56%)均高于持续缓解者(4000copies/ml,5.56%)及局部复发者(3850copies/ml,0%)(P值分别为0.039,0.001)。以治疗前20000copies/ml、治疗后0copies/ml为界值点,EBVDNA低浓度患者的无复发生存率、无转移生存率及总生存率均高于高浓度患者,差异有显著性。Cox回归分析显示治疗前EBVDNA浓度(P=0.050,RR=3.95)、治疗后EBVDNA浓度(P=0.001,RR=11.74)均是影响无转移生存的危险因素。进一步将患者治疗前后EBVDNA浓度变化综合进行生存分析,结果表明治疗后EBVDNA浓度能否降到0是影响无转移生存最重要的预后因素(P=0.000)。结论:鼻咽癌患者治疗前、后血浆EBVDNA浓度,尤其是治疗后能否降到0,能预测远处转移的发生,有望为放化综合治疗筛选高危患者,指导放化结合模式的选择。

鼻咽癌患者血浆游离EBV/DNA的定量检测及其临床意义

目的:探讨血浆EBV/DNA定量分析,在鼻咽癌早期诊断、临床分期、预后判断和监测放疗后转移复发中的临床意义。方法:采用荧光定量PCR方法定量检测经病理确诊为鼻咽癌的120例初治、90例放疗后随诊患者,其中包括60例放疗后持续缓解,30例远处转移和局部复发患者的血浆EBV/DNA含量。结果:初治、远处转移和局部复发的鼻咽癌患者血浆中游离的EBV/DNA检出率分别为96.0%、95.0%和100%,显著高于治疗后持续缓解鼻咽癌患者、健康对照者和非鼻咽癌的肿瘤患者;初治鼻咽癌患者各TNM分期之间血浆EBV/DNA拷贝数有显著统计学差异,晚期患者(Ⅲ+Ⅳ)期血浆EBV/DNA中位拷贝数显著高于早期患者(Ⅰ+Ⅱ)期;初治患者治疗后已出现局部和远处转移者,治疗前血浆EBV/DNA中位数显著高于尚未出现复发转移患者;初治患者治疗前血浆EBV/DNA≥40000拷贝/ml与<40000拷贝/ml两个水平,患者22个月无复发生存率分别为46.1%和92.9%,有显著统计学差异;放疗后复发、转移鼻咽癌患者血浆EBV/DNA的中位拷贝数显著高于治疗后持续缓解患者。结论:采用荧光定量PCR方法检测鼻咽癌患者血浆中游离的EBV/DNA是一种敏感可靠的方法,对于鼻咽癌早期诊断、鉴别诊断、分期、判断预后、监测治疗后复发和远处转移具有重要的临床意义,有可能成为鼻咽癌的血清肿瘤标记物。

EBV DNA定量分析在监测鼻咽癌转移和复发中的临床意义

背景与目的:EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)感染与鼻咽癌关系密切,近年来,有报道鼻咽癌患者血浆/血清中可检测到游离EBVDNA,但血浆EBVDNA水平对判断放疗后鼻咽癌患者转移、复发的临床意义尚缺少大宗研究报道。本研究定量检测鼻咽癌放疗后随诊患者血浆EBVDNA含量,探讨其在监测鼻咽癌转移、复发中的临床意义。方法:选择在中山大学肿瘤防治中心门诊随诊的放疗后鼻咽癌患者90例,用荧光定量PCR方法检测血浆EBVDNA含量,比较转移、复发与持续缓解患者血浆EBVDNA拷贝数。结果:放疗后转移或复发患者血浆EBVDNA的检出率为96.7%(29/30),中位拷贝数为2650copies/ml(0～5900000copies/ml);而持续缓解组患者血浆EBVDNA检出率12%(7/60),中位拷贝数为0copy/ml(0～71000copies/ml),差异均有统计学意义(P<0.01)。3例临床持续缓解但有血浆EBVDNA升高患者,在随后的3～4个月随访中,证实有肿瘤转移或复发。结论:血浆EBVDNA李宇红,等.EBVDNA定量分析在646定量检测可能成为监测放疗后鼻咽癌患者肿瘤转移、复发的敏感肿瘤标记物。

散发性结直肠癌微卫星不稳定状态与错配修复蛋白表达缺失及临床病理特征的相关性

目的:探讨散发性结直肠癌微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)情况及其与错配修复(mismatch repair,MMR)蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失的相关性,并总结MSI散发性结直肠癌的临床病理学特征。方法:多重荧光PCR法检测散发性结直肠癌肿瘤组织DNA的微卫星不稳定性,免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)S-P法检测散发性结直肠癌肿瘤组织MLH1、MSH2、MSH6、PMS2蛋白的表达缺失,分析MSI发生与MMR蛋白表达缺失及临床病理特征的相关性。结果:75例散发性结直肠癌检出MSI 21例(28%),包括MSI-H 19例、MSI-L 2例,其他54例(72%)为MSS。检出MMR蛋白表达缺失16例(21.33%),其中15例(93.75%)为MSI-H、1例(6.25%)为MSS;MMR蛋白表达59例(78.67%),其中4例(6.78%)为MSI-H、2例(3.39%)MSI-L,其他53例为MSS。MSI组MMR蛋白缺失率(15/21,71.43%)显著高于MSS组(1/54,1.9%)(P<0.01)。MSI与患者年龄,是否黏液腺癌,肿瘤有无远处转移有关(P<0.01),其中MSI-H好发于年龄>50岁、肿瘤无远处转移、MMR蛋白缺失人群,且类型以黏液腺癌为主。结论:散发性结直肠癌肿瘤组织中MSI发生率高于MMR蛋白缺失率,并且MSI-H的散发性结直肠癌转移风险较低、预后较好。检测MSI状态对提高结直肠癌的预防、诊断和治疗水平,降低结直肠癌的发病率和病死率有着重要意义。

乳腺癌差异表达的MicroRNA的筛选研究

【目的】应用miRNA芯片技术筛选乳腺癌及癌旁组织差异表达的miRNA,发现与乳腺癌相关的miRNA,为进一步阐明其在乳腺癌发病机制中的作用打下基础。【方法】收集8例新鲜的乳腺癌及其癌旁组织,抽提总RNA并分离出小RNA进行Cy3荧光标记,将标记的小RNA在miRNA芯片上进行杂交反应,应用实时定量RT-PCR方法验证miRNAs芯片结果的可靠性。【结果】对芯片数据进行SAM分析,结果筛选获得16个乳腺癌相关miRNAs,相对于癌旁组织,在乳腺癌组织中9个miRNAs表达上调,7个miRNAs表达下调。其中显著上调的有miR-21,miR-365,显著下调的有miR-497,miR-31。【结论】筛选得到乳腺癌miRNA差异表达谱,其可能与乳腺癌的发生发展有关。

鼻咽癌差异表达miRNAs筛选研究

【目的】应用miRNAs芯片筛选原代培养的鼻咽癌细胞差异表达miRNAs,并寻找差异表达miRNAs调控的靶基因,为进一步研究其在鼻咽癌发病机制中的作用打下基础。【方法】运用miRNAs芯片技术筛选原代培养的鼻咽癌细胞差异表达miRNAs,同时运用miRNAs特异的引物组对差异表达的miRNAs进行荧光定量RTPCR验证。运用靶基因预测软件并结合全基因组表达谱芯片结果预测差异表达miRNAs可能调控的靶基因,并利用western blot技术检测预测的靶基因在原代培养的鼻咽癌细胞中的表达。【结果】miRNAs芯片结果显示,鼻咽癌中miR-203、miR-503、miR-424、miR-141和miR-148a表达下调,而miR-25、miR-195和miR-15a表达上调,其差异表达均在2倍以上;荧光定量RTPCR结果与miRNAs芯片的结果较符合;其中miR-203的预测靶基因为CCNG1和SPARC,Westernblot结果显示,其在原代培养的鼻咽癌细胞亦高表达。【结论】miR-203、miR-503、miR-424、miR-141、miR-148a、miR-25、miR-195、miR-15a在原代培养的鼻咽癌细胞与正常鼻咽上皮细胞中存在差异表达;CCNG1和SPARC可能是miR-203调控的靶基因,可能参与了鼻咽癌的发生发展。

肿瘤相关巨噬细胞对鼻咽癌进展和预后的影响

背景与目的:有研究表明,在肺癌、乳腺癌等肿瘤组织中,肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associatedmacrophages,TAMs)与肿瘤的预后呈负相关。然而在胃癌和部分结直肠癌的研究中得出了TAMs与预后呈正相关的结论。本研究旨在探讨TAMs对鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)进展和预后的影响。方法:应用免疫组化技术检测60例鼻咽癌组织中TAMs标记物CD68的表达;分别培养正常巨噬细胞、鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2以及肺癌细胞株95D,将同浓度的3种癌细胞株的上清液加入同量的巨噬细胞中共培养1天,6天及加入LPS活化后继续培养1天,应用ELISA技术检测共培养后TAMs释放的细胞因子TNF-α和IL-10的表达。以与肺癌细胞株95D上清液共培养后的巨噬细胞作为阳性对照;正常巨噬细胞作为阴性对照。结果:鼻咽癌组织中TAMs高密度表达者的3年无瘤生存率(85.7%)明显高于低密度表达者(56.3%)(P=0.017)。与阳性对照组比较,接受鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2上清液刺激后的TAMs分泌TNF-α较少(73pg/ml,64pg/mlvs.7794pg/ml,P=0.001),经LPS活化后明显增多(6905pg/ml,6788pg/mlvs.137pg/ml,P=0.001);分泌IL-10很少(1pg/ml,1pg/mlvs.94pg/ml,P=0.002),经LPS活化后升高不明显(87pg/ml,99pg/mlvs.416pg/ml,P=0.015),与阴性对照组比较差异无显著性。结论:鼻咽癌组织中TAMs的密度与患者的预后呈正相关;与鼻咽癌细胞上清液共培养后TAMs分泌的细胞因子倾向于杀伤肿瘤细胞,促进机体的抗瘤免疫作用。

大肠癌组织p53、PCNA表达与临床病理及预后的关系

目的：探讨突变型ｐ５３ 蛋白、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ） 在结直肠癌细胞中的表达情况与临床病理及预后的关系。方法：用ＬＳＡＢ 免疫组化方法检测１７２ 例癌组织中的ｐ５３ 蛋白、ＰＣＮＡ 的表达情况，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ 回归分析ｐ５３ 表达的相关因素，Ｃｏｘ 模型分析ｐ５３ 、ＰＣＮＡ 表达对预后的的影响。结果：ｐ５３ 、ＰＣＮＡ 阳性率分别为４３－６ ％ （７５／１７２） 、９１－３ ％ （１５７／１７２） 。ｐ５３ 表达与临床病理因素无关，ｐ５３ 阳性预后比阴性差，ｐ５３ 阳性常伴有ＰＣＮＡ 过度表达，但ＰＣＮＡ 高表达，预后有好的趋势。结论：结直肠癌ｐ５３ 突变的癌细胞多呈高增殖状态，ｐ５３ 阳性、ＰＣＮＡ 中、低强度表达是预后差的生物学指标。ＰＣＮＡ 高表达，是癌细胞处于高增殖状态、对化疗敏感的标志，对该类病人给予辅助化疗可望提高根治术疗效。

鼻咽癌患者血清VEGF、CD44s、MMP-3蛋白定量分析及其临床意义

背景与目的:在人体液中可以检测到多种与肿瘤转移相关的因子,有文献报道这些因子与肿瘤分期、预后有关。本研究检测鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)患者血清可溶性因子VEGF、CD44s、MMP-3表达水平,探讨其与肿瘤临床分期和预后的关系。方法:采用双抗体夹心ELISA法对46例无转移NPC患者、20例局部复发和/或器官转移的NPC患者和18例健康者外周血中VEGF、CD44S、MMP-3水平进行测定。结果:局部复发和/或远处转移的NPC患者血清VEGF平均水平(791.7±560.5)ng/L显著高于健康对照组(424.6±197.1)ng/L和无转移NPC组(429.0±249.7)ng/L;而健康组与无转移NPC组患者VEGF平均水平差异无显著性。初治患者中,T4期患者血清VEGF水平显著高于T1～T3期;初治NPC患者治疗前血清VEGF≥600ng/L与<600ng/L两组,治疗后2年无复发生存率有显著性差异(37.5%vs83.9%)。有转移NPC患者血清MMP-3水平(28.8±15.5)μg/L显著高于健康组(16.2±11.1)μg/L和无转移组(19.8±11.6)μg/L,健康组与无转移组患者MMP-3水平无显著性差异;治疗前血清MMP-3水平≥25μg/L与<25μg/L的初治NPC患者,治疗后2年无事件生存率无显著性差异。NPC患者血清CD44s水平显著高于健康对照组,但有转移与无转移NPC患者之间无显著性差异;

nm23-H1 基因产物在人鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的：ｎｍ２３是一种肿瘤转移抑制基因。它在某些人类肿瘤包括乳腺癌、结肠癌、胃癌、肝癌、膀胱癌等中的表达水平与肿瘤转移呈负相关。本研究检测ｎｍ２３－Ｈ１基因产物在鼻咽癌中的表达，探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因的表达与鼻咽癌转移和预后的关系。方法：用ｎｍ２３－Ｈ１单克隆抗体通过免疫组化ＬＳＡＢ法，对９５例鼻咽低分化鳞癌蜡块标本进行研究，用Ｌｏｇｒａｎｋ检验分析ｎｍ２３－Ｈ１基因的表达与鼻咽癌转移、复发和预后的关系。Ｃｏｘ＇ｓ回归模型作多因素预后分析。结果：ｎｍ２３表达阴性组淋巴结转移率（８６．７％）比表达阳性组高（４８．６％，Ｐ＜０．０１），ｎｍ２３表达阴性组放疗后复发、远处转移较表达阳性组高（Ｐ＜０．０５），ｎｍ２３－Ｈ１基因产物的表达与鼻咽癌患者的预后呈正相关（Ｐ＜０．０１）。Ｃｏｘ＇ｓ回归模型多因素分析显示ｎｍ２３－Ｈ１是影响鼻咽癌预后的一个指标（Ｐ＜０．０５）。结论：本研究的结果提示ｎｍ２３－Ｈ１的阴性表达与鼻咽癌的淋巴结转移、复发、远处转移显著相关，ｎｍ２３－Ｈ１可作为预测鼻咽癌预后的一个重要指标。

miR-21表达异常与乳腺癌临床病理特征及预后的关系

目的:应用荧光定量PCR技术研究miR-21表达量与乳腺癌临床病理特征及患者预后的关系。方法:搜集具有5年以上随访资料的乳腺癌病例113例,从甲醛固定、石蜡包埋(FFPE)乳腺癌(BRCA)及其癌旁组织(NATs)中提取总RNA,应用荧光定量RT-PCR技术检测miR-21在乳腺癌及其癌旁组织中的表达量。结果:与相应癌旁组织比较,miR-21在乳腺癌组织中表达显著上调(P<0.01),平均上调倍数为1.74±0.48。miR-21表达上调水平与乳腺癌临床分期(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.01)及预后[hazard ratio(HR)=5.476,P<0.01]相关。Cox多重回归分析显示miR-21相对表达量(HR=4.133,P<0.01)为乳腺癌的独立预后因素之一。结论:miR-21表达上调与乳腺癌患者预后不良有关,其可能是一种潜在的乳腺癌独立预后指标。

肝癌染色体DNA拷贝数的变化及其与临床病理和预后的关系

目的：探讨人肝癌染色体ＤＮＡ 的丢失和增加的状态及其在肝癌临床病理及预后中的意义，并为寻找肝癌相关基因提供线索。方法：收集手术切除的肝癌标本３１ 例，采用比较基因组杂交方法对肝癌染色体ＤＮＡ 拷贝数进行检测，同时进行病理观察和随访。结果：在染色体ＤＮＡ 拷贝数的增加中，以１ｑ 的频率最高（８３－９％ ） ，其次为８ｑ（６１－３％ ） ；在染色体ＤＮＡ 的拷贝数的减少中，以１６ｑ 的频率最高（７７－４ ％ ） ，其次为１７ｐ（６１－３ ％ ） 和４ｑ（５１－６ ％ ） 。经统计分析发现，在１ｑ 拷贝数增加的病例中，其半年生存的相对机率比无１ｑ 扩增的病例高１０－５ 倍（ 回归系数β＝ ２－３５，Ｐ＜ ０－０５） ； 有１７ｐ 丢失患者的半年内复发的相对危险性比无１７ｐ 丢失的患者高６－８６ 倍（ 回归系数β＝ １－９３ ， Ｐ＜０－０５） 。此外，１ｑ 的增加与肿瘤大小、有无包膜、坏死程度和ＡＦＰ 浓度等均呈负相关；４ｑ 和１７ｐ 的丢失与肿瘤分化程度均呈负相关；４ｑ 的丢失与８ｑ 的增加呈负相关。这是第一次报道肝癌染色体ＤＮＡ 拷贝数的变化与肝癌临床、病理以及预后之间的关系。结论：在肝癌的发生发展中多个染色体的ＤＮＡ 拷贝数存在着高频率的变化，其中１?

荧光原位杂交技术检测滑膜肉瘤SS18基因易位的诊断价值

【目的】探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测石蜡包埋滑膜肉瘤组织中染色体易位的病理学辅助诊断意义。【方法】收集168例肿瘤标本,其中75例确诊滑膜肉瘤、33例疑似滑膜肉瘤,采用LSI SS18(18ql1.2)双色断裂分离探针检测SS18基因易位状况;60例非滑膜肉瘤作为阴性对照,制定SS18基因易位阳性的判断阈值。【结果】165例肿瘤标本成功进行FISH检测,其中129例(78.2%)SS18基因二体性,36例(21.8%)SS18基因多拷贝数。根据建立的SS18基因易位阳性的判断阈值,确诊滑膜肉瘤的病例中85.1%(63/74)可检测到SS18基因易位,余11例结合形态学及免疫组化结果仍诊断为SS;疑似滑膜肉瘤的病例中71.1%(22/31)可检测到阳性结果,余9例最终诊断为其他肿瘤。【结论】FISH法检测SS18基因易位是滑膜肉瘤诊断的有效辅助手段,滑膜肉瘤的最终诊断及鉴别诊断需结合形态学、免疫组化及分子生物学检测的综合分析。

复发转移性胃癌患者HER2基因扩增、蛋白表达及预后的关系

目的探讨复发转移性胃癌肿瘤原发灶HER2基因扩增与蛋白表达的相关性,及与临床病理特征和预后的关系。方法收集237例复发转移性胃或胃食管交界处腺癌肿瘤原发灶标本,分别应用荧光原位杂交法(FISH)和免疫组织化学法(IHC)检测HER2基因扩增和蛋白的表达。结果 FISH检测HER2基因扩增18.1%(43/237);IHC检测HER2蛋白表达-、1+、2+、3+分别为160例(67.5%)、34例(14.3%)、17例(7.2%)和26例(11.0%)。HER2总体阳性率(FISH+或IHC 3+)为19.0%(45/237)。FISH与IHC方法总的符合率较好,达92.4%(219/237),呈显著正相关(r=0.696,P<0.01)。HER2更常见于胃食管交界处腺癌、肠型胃癌及分化较好的胃癌。胃癌HER2阳性表达与肝、肺等广泛的转移相关。对215例接受全身化疗的患者进行生存分析显示,HER2阳性状态与较差的生存时间相关。结论胃癌HER2基因扩增及蛋白表达具有较好的一致性。胃癌HER2的表达与预后差相关。