白菜种子cDNA酵母文库的构建及BrTTG1互作蛋白的筛选及分析

【目的】通过构建白菜种子的cDNA文库,筛选WDR 40蛋白TRANSPARENT TESTA GLABRA 1(TTG1)的互作蛋白,探究TTG1参与MBW三元复合体调控种皮原花青素形成的分子机制。【方法】以棕籽白菜自交系‘B147’的种子为材料,提取总RNA并建立cDNA文库,通过gateway技术构建诱饵载体pGBKT7-TTG1并进行酵母双杂交筛库。【结果】酵母文库库容为1.2×10^(7)CFU,文库滴度是5.0×10^(7)CFU/mL,插入片段平均长度大于1000 bp,诱饵载体在酵母中无自激活活性。通过构建的诱饵载体pGBKT7-TTG1与构建的cDNA文库杂交,共获得了38个阳性互作蛋白,功能预测显示其中一个蛋白注释为MYB转录因子,注释为MYB73,序列分析结果显示该基因含有R2R3-MYB型抑制子保守基序C1和C2,推测该基因为白菜中参与种皮颜色形成的R2R3-MYB型抑制子,暗示着白菜中可能存在不同MYB转录因子参与的调控网络,影响着原花青素的形成。【结论】本研究构建了白菜种子组织的酵母双杂交cDNA文库,获得了38个TTG1阳性互作蛋白,首次挖掘到了可能影响白菜种皮颜色原花青素形成的R2R3-MYB型抑制子MYB73,为后期探究白菜种皮原花青素的调控网络奠定良好的基础。

球茎甘蓝MYB62转录因子的克隆与表达特征分析

为了明晰球茎甘蓝MYB62转录因子的序列特征及其在逆境胁迫后的表达特征,进一步探索球茎甘蓝MYB62转录因子的生物学功能,为后续MYB62转录因子功能鉴定提供理论依据,以球茎甘蓝为研究对象,采用同源克隆的方法获得球茎甘蓝MYB62转录因子基因,并对其进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR的方法分析MYB62在球茎甘蓝不同组织间以及逆境胁迫后的表达特征。基因克隆结果表明,BocMYB62基因gDNA全长1353 bp,CDS为837 bp,包括4个外显子和3个内含子,编码278个氨基酸。序列结构分析结果显示,BocMYB62为亲水性蛋白,具有2个SANT-MYB结构域,属于R2R3-MYB型MYB转录因子;空间结构预测显示其具有典型的α-螺旋结构;系统发育分析表明,BocMYB62与甘蓝型油菜MYB62亲缘关系最近。时空表达结果显示,BocMYB62在绿色球茎甘蓝中的表达量始终高于在紫色球茎甘蓝中,且存在明显的组织特异性,在干旱胁迫后BocMYB62表达量显著升高,胁迫12 h表达量最高,低温胁迫后BocMYB62表达量显著低于对照,在4℃低温胁迫时表达量最低,推断BocMYB62可能参与花青素生物合成调控,并可能参与逆境胁迫的调控作用。

不同青熟果色线辣椒中APRR2基因的克隆与表达分析

青熟果色是辣椒重要的商品性状之一,为探究拟南芥伪响应调节因子基因(APRR2)对青熟果色的影响,本研究以青海地方品种循化线辣椒深绿青熟果色野生型XHB及浅绿青熟果色突变体QL2017为研究材料,对不同青熟果色线辣椒中的基因APRR2进行克隆和时空表达分析。结果表明:APRR2基因CDS序列全长为1737 bp,共编码578个氨基酸,在XHB和QL2017中序列没有差异;APRR2蛋白分子质量64.34 kDa,等电点5.74,为不稳定亲水性蛋白,属于SANT超家族;在系统进化关系上,线辣椒APRR2蛋白与茄科的番茄和潘那利番茄同属一个分支;APRR2基因在2个品种不同时期不同组织中的表达存在显著差异,且具有组织特异性。APRR2基因在XHB果实、QL2017叶和果实中的表达量显著高于其他组织,在茎中表达量最低。研究结果为后续相关基因定位及深入分析线辣椒青熟果色形成机制提供了理论依据。

白菜型冬油菜白粉病病程中超氧化物岐化酶和过氧化物酶及多酚氧化酶的变化

通过研究白菜型冬油菜在感白粉病品种全生育期和全病程中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性变化,发现SOD和POD的活性在白粉菌侵染后明显升高,而在植株衰老枯死时迅速降低;从白粉菌侵染到发病高峰期,SOD活性与白粉菌菌斑数目增加趋势以及单个菌斑面积增加趋势呈指数曲线型相关;POD与白粉菌菌斑数目增加趋势和菌斑面积占总叶面积百分数的增加趋势呈指数曲线型相关;PPO活性变化与病害侵染无明显相关。

不同施肥水平对玉树芫根营养品质的影响

为探究不同施肥水平对玉树芫根营养品质的影响,本研究以该作物为试验材料进行田间试验,以不施肥为对照(CK),研究氮、磷、钾肥施肥量及复合肥配比对玉树芫根营养品质的影响。采用隶属函数、相关性分析对玉树芫根的可溶性糖、亚硝酸盐、可溶性蛋白质、维生素C和多糖含量进行评价。结果表明:每667 m^(2)追施8 kg硫酸钾对提升可溶性糖含量效果最好,追施15 kg复合肥对提升多糖含量的效果最好,追施6 kg硫酸钾对提升可溶性蛋白质含量效果最好,追施4 kg硫酸钾对提高维生素C含量的效果最好,追施20 kg磷酸二铵对降低亚硝酸盐含量的效果最显著。在K6、K4、P15、N10和K8处理下,玉树芫根的营养品质均有提高。本研究可为后续玉树芫根高产、高品质种植提供数据参考。

黄色‘循化线辣椒’资源的园艺学分类鉴定

为对黄色‘循化线辣椒’(C.annuumL.var.dactylusM.)资源做出科学鉴定和评价,进一步为其基因资源利用奠定基础,通过对30份国内线辣椒资源的主要农艺性状比较分析,重点对黄色变异种质资源‘HJ2002’进行了分类鉴定,发现‘HJ2002’是目前国内少见的皱皮黄色线辣椒天然变异资源,该资源的果实成熟色和风味特征与Smith辣椒园艺学分类中Cayenne型线辣椒特点有一定的差异。

UV-B胁迫对辣椒叶片防御酶活性及丙二醛含量的影响

为筛选抗紫外线UV-B辣椒品种,助力青藏高原地区辣椒产业发展,本试验以青海省特色品种青椒3号、循化线椒、甘科-2-11及吉祥101品种为试验材料,研究不同UV-B(20.05μW/cm 2)胁迫时间对辣椒叶片中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及丙二醛(MDA)含量的影响。结果显示:随着UV-B胁迫时间的延长,POD、CAT及SOD活性均呈现先升高后降低的趋势,于处理第2 d和3 d达到最大,而丙二醛(MDA)含量则呈现先升高后降低再升高的趋势,分别于试验处理第2 d和4 d达到最大。综合以上4个指标,通过隶属函数分析得出4个辣椒品种的耐紫外性依次为青椒3号>循化线椒>甘科-2-11>吉祥101,因此推测青椒3号是耐紫外线强的辣椒品种,适合在青藏高原种植。

线辣椒主要数量性状遗传参数相关性分析

以12份不同来源的线辣椒自交材料为研究对象,采用方差-协方差分析法,对12份线辣椒的主要数量性状的遗传参数和相关性进行估算分析。结果表明:株高、单果种子数、单株结果数、单株产量、单果质量、单果干鲜比等6个性状具有较强的遗传效应,适于在早期世代进行选择,且性状改良难度较小,其余性状选择效率较低,改良难度较大;相关性分析发现存在6对极显著正向相关的性状,1对极显著负向相关的性状。

以色列资源节约型农业模式对中国农业发展的启示

以色列农业从理念、管理模式、科学技术等方面均体现出了资源节约和高效利用的特点，这对于中国当前现代化农业建设具有一定的借鉴意义，对中国农业产业化发展具有一定的启发作用。

早中晚熟结球甘蓝不同部位组织的再生特性

对3种不同熟性甘蓝进行培养,以探讨品种不同熟性、不同外植体、不同培养基激素水平等因素对结球甘蓝不定芽诱导、不定芽增殖的影响。结果表明,3种培养基中MS培养基最适于甘蓝组织培养,在MS培养基上京丰甘蓝的下胚轴在激素水平为NAA 0.45mg.L-1和6-BA 3.0mg.L-1时的不定芽分化率最高(76.7%),中甘十一的下胚轴和晚丰甘蓝带柄子叶在NAA 0.6mg.L-1和6-BA 4.5mg.L-1时不定芽分化率最高,分别为83.3%和90%;京丰、晚丰和中甘十一的不定芽在激素分别为NAA 0.3mg.L-1和6-BA7.5mg.L-1、NAA 0.6mg.L-1和6-BA 7.5mg.L-1、NAA 0.3mg.L-1和6-BA 1.5mg.L-1时增殖系数分别达到3.69、4.125和3.45。可见,不同熟性甘蓝的不同部位组织不定芽的产生对基础培养基和激素配比具有比较严格的选择性。

PDCA循环模型在科技计划项目管理中的应用

介绍了PDCA循环模型的基本构成稆特点，结合青海省科技计划项目管理改革实践，以该摸型的“计划、执行、检查、处理”4个环节的理论为指导。设计构建了省级科技计划项目的过程控制模式？

低温胁迫对辣椒果实形态和抗氧化酶系统的影响

本文以华美105和乐都长辣椒为试验材料,通过低温处理,检测了表型生物量、维生素、可溶性糖和抗氧化酶等指标。结果表明:华美105不像乐都长辣椒,当季未发生明显的落花落果现象;两个品种的株高、功能叶片数、鲜重、干重均低于对照;华美105叶绿素、可溶性糖、SOD、CAT和APX含量降幅相对较小,整体上乐都长辣椒对低温响应更敏感。

黄色线辣椒及其杂交组合品质特性研究

以自然突变的黄色果实成熟色线辣椒资源HJ2002为母本,3份红色果实成熟色线辣椒纯系为父本,采用顶交法配制杂交组合,研究了果实成熟过程中的维生素C、可溶性糖、叶绿素和类胡萝卜素含量的变化特点。结果表明:维生素C、可溶性糖、类胡萝卜素含量随着果实的生长成熟而增加;叶绿素含量在果实成熟过程中逐渐减少;母本HJ2002在果实生理成熟期仍含有一定量的叶绿素,而F_1代在生理成熟期叶绿素含量几乎为零;通过相关性分析发现,线辣椒果实中叶绿素与类胡萝卜素含量在成熟过程中呈显著的负相关;少量叶绿素b的存在可能是黄色线辣椒突变材料成熟期颜色表现构成的重要遗传因素。

十字花科植物线粒体DNA的提取和纯化

以十字花科植物芸芥 Eruca sativa 、白菜型油菜 Brassica rapa 和甘蓝型油菜 Brassica napus :武39- 1、武4 3- 1、武5 0 - 2为试材,在蔗糖衬垫法分离纯化m t DNA方法优点的基础上,通过4组不同离心力配比,采用差速离心法、改变缓冲液A的成分以及增加缓冲液的用量,建立了一种简便提取十字花科植物mt DNA方法.研究结果表明:分离细胞破碎组织的离心力、分离线粒体的离心力以及纯化线粒体时的离心力分别为10 0 0 g、2 0 0 0 0 g、180 0 0 g时可分离到高产量的线粒体,且在缓冲液A 蔗糖0 .5 m ol·L- 1 ,Tris- Cl5 0 mm ol·L- 1 ,EDTA5 m mol·L- 1 ,BSA 0 .1% ,PVP 0 .5 % ,0 .1%β-巯基乙醇,p H=7.5 中加入0 .5 % PVP可提高mt DNA的产量,经DNA电泳检测、RAPD扩增证明此方法得到的mt DNA可完全达到RAPD标记和其它分子生物学研究的要求.

芸芥自交亲和系与自交不亲和系SOD、POD和CAT酶活性

对芸芥(Eruca sativaM ill)自交亲和系(SC)与自交不亲和系(SI)柱头SOD、POD和CAT三种酶活性进行了测定。自交亲和系和自交不亲和系在授粉后都能引起SOD、POD和CAT三种保护性酶活性的变化。比较SC和SI的酶活性发现,在未授粉时二者SOD酶活性差异显著,而POD和CAT酶活性则无显著性差异;异花授粉后SC和SI的三种酶活性表现了相似的趋势,在各个时间段上无差异;自花授粉后自交亲和系的酶活性显著高于自交不亲和系的酶活性。结果表明,SOD、POD和CAT三种酶活性的变化与自交亲和系所具有的自交亲和基因的调控有关。

菊芋山旱地栽培氮磷钾元素配比及平衡施肥回归模型研究

应用氮、磷、钾三因素"3414"试验设计,研究了氮、磷、钾肥用量和配比对山旱地上菊芋产量的影响,并获得了相应的回归模型,通过解析模型,得出了山旱地菊芋产量最高时的施肥量为:N,23.74kg/667m^2;P_2O_5,133.40kg/667m^2;K_2O,22.23kg/667m!2,理想的最高产量为7524.54kg/667m^2。

利用RAPD分子标记技术研究芸芥(Eruca Mill.)的遗传多样性

目的研究不同来源的芸芥材料的遗传多样性和它们之间的亲缘关系,以便对其进行有效、科学的利用。方法利用RAPD分子标记技术对来源于欧洲、非洲和亚洲的30份代表性的芸芥(ErucaMill.)材料进行遗传多样性分析,根据遗传相似系数计算不同材料RAPD数据的遗传距离矩阵,按UPGMA方法对研究材料进行聚类。结果不同芸芥亚种间表现出比较大的多态性,47个引物共扩增出486条DNA带,其中432条表现出多态性,占总带数的89.0%,来源不同的材料有各自的特征带。30个材料的遗传距离在0.1036～0.4511之间。结论聚类分析表明,在遗传距离为0.1452处,30个材料可分为7个类群,其中来源于中国的材料为一独立的类群,来源于西班牙及其他国家地区的材料分属另外6个不同的类群。芸芥起源中心的西班牙及其毗邻地区的芸芥的遗传多样性最为丰富,而中国可能是芸芥的次生演化中心。

黄色线辣椒为母本的F_1代遗传特性与杂种优势研究

以1份黄色线辣椒材料为母本,10份红色线辣椒为父本,采用顶交法配制10个杂交组合,研究了果实成熟色和8个农艺性状的杂种优势和配合力。结果表明:所有F1代果实成熟色均表现红色,红色果实成熟色相对黄色而言为显性效应;F1代除开展度外各性状均表现出正向优势,具有较高的超中亲、超高亲以及超标优势;一般配合力效应值与杂种优势表现呈正相关,Gx07-06、05991-1、xhB、07-09、05-17产量性状一般配合力相对较高,参与组配的组合为强优势组合,超标优势>30%,Gx07-06、05991-1超标优势分别达到75%和56%,为高产优质亲本;可利用此类亲本组配高原环境气候下高产线辣椒品种。

不同灌水量对青海高原地区线辣椒产量和耗水规律的影响

以"青线椒1号"为试材,在青海省农林科学院试验站日光温室内进行了单次562、437、312、187、62m3/hm2 5种不同灌溉量对线辣椒生长发育及产量影响的试验,测定分析了不同处理下土壤含水率、土壤电导率、土壤温度及线辣椒植物学性状和产量性状的变化。结果表明:在1个灌水周期内,各处理土壤含水量总体呈下降趋势;562、437、312m3/hm2处理下的电导率呈现高-低-高的变化趋势,187、62m3/hm2处理下电导率随时间变化的趋势较为平缓,没有明显升高或降低的趋势;土壤温度随灌水量的减小而升高;不同灌溉量下辣椒株高、茎粗、产量差异显著;从节水高效模式来看,312m3/hm2的灌溉处理为最经济灌水量。

西葫芦新品种青葫1号的选育

青葫1号是以优良自交系0452-086为母本,以0921-033为父本配制而成的早熟西葫芦一代杂种。矮蔓生,第1雌花节位为第5~6节,瓜条顺直,长棒形,平均纵径28.75cm,横径7.27cm,皮色墨绿,单瓜质量670g左右,连续结瓜能力强,成瓜率高,商品性好。每667m^2平均产量达4100kg以上,高产田每667m^2产量可达5300kg以上。西宁地区播种到采收50d(天)左右,采收期比对照早青一代早10d(天)左右,全生育期120d(天)左右。田间对白粉病的抗性强于对照早青一代。适宜在青海省各地温室周年栽培,及海拔2900m以下地区露地越夏栽培。