基于改进粒子群算法的多约束随船备件配置优化

为合理配置船舶随船备件,构建了多约束条件下的备件配置优化模型,提出了一种改进的粒子群算法对模型求解。首先,以备件费用、存储空间、重量为约束条件,以最大化系统备件保障概率为优化目标,通过构造含罚函数的适应度函数,将多约束最优化问题转化为无约束最优化问题;其次,设计了一种基于模拟退火改进的粒子群算法求解优化模型;最后,通过开展仿真实验,证明了该方法在求解随船备件配置优化问题的有效性和优越性。

基于网络药理学与分子对接研究三黄石膏汤治疗流感机制

目的:通过网络药理学与分子对接研究三黄石膏汤治疗流感的潜在作用机制,为后续研究提供理论基础。方法:通过TCMSP数据库筛选三黄石膏汤活性成分及活性靶点;在GeneCards数据库中以“Influenza”为关键词筛选流感相关的靶点,将这些靶点与三黄石膏汤的靶点映射,筛选出三黄石膏汤治疗流感的共同靶点;使用Cytoscape 3.9.1软件,构建“中药-化合物-靶点-疾病”网络图;将共同基因导入STRING数据库中,构建蛋白互作网络图;综合上述两个网络图筛选出三黄石膏汤治疗流感的核心靶点;使用DAVID数据库对这些靶点进行GO功能分析和KEGG通路富集分析;利用AutoDockTools-1.5.7软件对核心靶点和三黄石膏汤活性成分进行分子对接。结果:筛选得到三黄石膏汤活性成分127个,对应靶点406个,三黄石膏汤与流感交集靶点176个。GO功能富集分析显示三黄石膏汤治疗流感可涉及594个生物学过程、72种分子功能、126种细胞学功能。KEGG富集分析得到168条相关信号通路。分子对接结果显示,槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇与AKT1、MAPK1、TNF、IL-6等靶点具有结合潜力。结论:三黄石膏汤可能通过槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚等活性成分作用于AKT1、MAPK1、TNF、IL-6等靶点,通过IL-17信号通路、TNF信号通路和甲型流感信号通路等发挥抗流感和抗病毒作用。

甘草水煎剂中miRNA的提取及其对人外周血单个核细胞的影响研究

目的:分离提取甘草水煎剂中的微小核糖核酸(miRNA),并初步探索其对人外周血单个核细胞(PBMC)的影响。方法:将甘草干燥药材按照常规方法制备水煎剂,浓缩干燥后采用通用植物microRNA快速提取试剂盒提取其中的miRNA,所得miRNA经DNaseⅠ处理后进行电泳鉴定;分别利用甘草水提物、甘草酸、甘草次酸和甘草miRNA处理体外培养的健康人PBMC,24 h后,对各组进行细胞计数,并观察细胞形态学的变化;分别利用antiCD3、anti-CD56、anti-HLA-DR单克隆抗体染色,检测PBMC中不同细胞亚群的变化情况。结果:电泳结果表明,从甘草干燥药材的水煎剂中确实能够提取到miRNA,进一步印证了miRNA的稳定性。对体外培养PBMC作用结果表明,与空白对照组比较,经甘草miRNA刺激的PBMC发生了明显的抱团,细胞数量增多,HLA-DR+细胞的比例显著增加。结论:本实验成功地从甘草干燥药材的水煎剂中提取到了甘草miRNA,甘草miRNA对PBMC的生长具有促进作用,并能显著增加HLA-DR+细胞亚群的比例。

IETM在装备信息化保障中的应用研究

结合装备信息化保障的需求及发展趋势,简要介绍交互式电子技术手册(IETM)的概念,论述了IETM的发展趋势,IETM与装备信息化保障及装备综合保障设计之间的关系。给出了IETM的研制框架,详细描述了IETM的制作过程及各阶段主要工作内容。

不同培养环境对PMBC中Treg和Th17细胞分化的影响

目的:研究不同培养环境对调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)和Th17细胞分化的影响,探索能够逆转肿瘤微环境诱导的免疫耐受的手段。方法:克隆人白介素-6(IL-6)的基因,将其转入表达TGF-β的肿瘤细胞株中,并筛选稳转系;分别收集含或不含IL-6的肿瘤细胞培养上清,制备成条件培养基(Conditioned medium,CM),用于体外培养人外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC),流式检测PBMC在不同培养环境中Treg和Th17细胞的变化情况。结果:RTPCR分析表明BEL-7402表达TGF-β的水平明显高于Hep G2,因此选择BEL-7402用于制备IL-6的稳转系;ELISA检测结果表明所制备的稳转系能够有效地表达IL-6;流式结果表明,由肿瘤细胞培养上清制备的CM能明显诱导T细胞分化为Treg,而在IL-6存在的情况下则能明显抑制Treg细胞的形成,并促进T细胞分化为Th17细胞。结论:肿瘤细胞培养上清促使PBMC中Treg比例增加;而在其中添加IL-6则能够降低Treg细胞比例,并增加Th17细胞的比例。

两种存活蛋白变异剪接体在HeLa细胞中的表达定位及相互作用

存活蛋白(survivin)是重要的肿瘤相关抗原基因,在肿瘤的发生发展中起着重要的作用.除了标准的剪接形式外,它至少还编码2种变异剪接产物—存活蛋白-2B和存活蛋白-ΔEx3,这2个变异剪接体所编码的蛋白具有不同的生物学功能.为研究这2个变异剪接体在肿瘤细胞中的相互作用情况,本实验利用增强型青色荧光蛋白(enhanced cyan fluorescent protein,ECFP)和增强型黄色荧光蛋白(enhanced yellowfluorescent protein,EYFP)分别标记存活蛋白-2B和存活蛋白-ΔEx3.首先通过激光共聚焦扫描显微镜观察它们的细胞定位;同时利用荧光共振能量转移(fluorescence resonanceenergytransfer,FRET)技术研究两者在细胞内的相互作用情况.研究结果表明,存活蛋白-2B主要分布在细胞质中,而存活蛋白-ΔEx3则主要分布在细胞核内,少量分布在细胞质中;FRET分析结果显示,两者仅在细胞质中存在着很弱的相互作用,表明两者很可能是通过某种间接的方式发挥功能上的相互调节作用.本研究为进一步探讨存活蛋白变异剪接体的生物学功能及相互作用机制奠定了基础.

CRISPR-Cas9系统定向编辑TCR基因的sgRNA筛选

为构建靶向T细胞抗原受体(T Cell Receptor,TCR)基因的CRISPR-Cas9基因组编辑系统,基于p X458质粒构建靶向TCR基因β链C区的CRISPR-Cas-sgRNA质粒,将其转染Hep G2细胞系,用流式细胞术检测转染效率;转染48 h后提取Hep G2细胞基因组DNA,扩增含有编辑位点的片段,测序分析该片段的峰图改变;对出现双峰的扩增片段做T-A克隆后测序分析,确定基因编辑发生的位置,并结合转染效率计算基因编辑效率.结果表明,成功构建含有3种sgRNA序列(N1、N2、S1)的p X458-sgRNA质粒,其转染效率分别为38.5%(N1)、39.7%(N2)和24.2%(S1);基因组PCR产物测序分析发现,S1组扩增片段在打靶位置出现杂峰;T-A克隆测序发现,20克隆有4个发生了基因编辑(20%),结合转染效率(24.2%)可知,编辑效率约为83%.可见,本文成功构建靶向TCR基因的CRISPR-CassgRNA质粒,并鉴定出基因编辑效率较高的一种sgRNA序列.

Survivin启动子介导的胞嘧啶脱氨酶(CD)自杀基因的抗肿瘤研究

目的探讨Survivin启动子介导的CD/5-FC自杀系统的抗肿瘤效果。方法利用Survivin启动子替换p EGFP-N1载体上的巨细胞病毒(CMV)启动子,构建重组表达载体p Sur P-EGFP,通过报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达确定Survivin启动子的特异性;将酿酒酵母的胞嘧啶脱氨酶(CD)基因克隆在p Sur P-EGFP中,构建成重组载体p Sur P-CD,转染肿瘤细胞后利用毛细管电泳仪检测前药5-氟胞嘧啶(5-FC)的转化效率,同时分析肿瘤细胞的凋亡。结果 GFP的表达表明Survivin启动子具有较好的肿瘤靶向性;毛细管电泳检测表明CD能够有效地将5-FC转化为5-FU,显微镜观察和流式分析表明了Survivin启动子介导的CD的抗肿瘤效果。结论 Survivin启动子能有效地介导CD自杀基因的表达,具有较好的靶向性抗肿瘤效果。

重组SARS-CoV S1蛋白抗原表位分析及抗原性检测

目的对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒（SARS—CoV）刺突蛋白（Spike，S）S1段进行原核重组表达，并检测表达产物的抗原性。方法对S1中的HLA抗原表位进行预测分析，根据分析结果选定用于重组表达的区段，利用pET21b载体进行原核表达，将产物纯化后利用SARS抗血清进行抗原性检测。结果抗原表位分析表明，S1中包含有多个能够被HLA分子有效提呈的抗原表位，综合考虑表位肽的分布、重组表达的效率、重组蛋白的空间构象以及引物设计的优化等因素，选取S1中的关键区域259～565aa进行原核重组表达，得到了包涵体形式的重组蛋白，经过纯化和复性，获得了纯度较高的可溶性S1蛋白；用SARS抗血清对此重组蛋白进行免疫学鉴定，表明该蛋白具有SARS特异的抗原性。结论重组表达的S1蛋白具有较强的抗原性，为进一步的疫苗研究和抗体筛选奠定了基础。

收入分配差距根源研究--基于三步法收入分配分析框架

在总结收入分配思想史的基础上,提出了一个收入分配分析框架:第一步,起点分析,整个社会经济系统中的制度、技术和结构等是形成收入差距的间接原因;第二步,过程分析,资本和劳动等生产要素分别按照其对生产的贡献获得了财产收入和劳动收入,这是形成收入差距的直接原因;第三步,结果分析,各个家庭总收入的相对分布形成了一个经济体的整体收入差距,可以分解为自然性收入差距、制度性收入差距、结构性收入差距和其它收入差距。一个经济体应通过公平的制度建设尽量消除制度性收入差距和结构性收入差距,使收入差距主要由自然性收入差距形成,基本服从正态分布且具有完全流动性。

经济发展合力论:一个经济发展分析框架

本文综合以前各个学派、各个学者关于经济发展的见解,认为经济发展是由整个社会经济系统的各个方面相互作用的合力决定的。这个系统包括形成人与人的关系的制度,即生产关系和上层建筑;形成人与物的关系的科学技术和生产力;经济活动本身的内容和结构;以及经济活动的承载平台,如自然地理、资源能源、基础设施、虚拟经济、历史背景、国际环境等。社会经济系统中的技术和制度会相互作用,技术创新会提高生产力,引起制度变迁,良好的制度创新也会有利于技术创新和生产力提高,技术创新和制度变迁在相互影响中共同决定经济发展。

生物制药专业本科生《基因工程综合性实验》的改革与探索

为了帮助学生更全面深入地理解和掌握基因工程技术,进一步深化实验教学改革,将《基因工程》、《发酵工艺原理》和《生物技术药物药剂与药代动力学》这三门课程中相互联系比较密切的实验部分进行有机的整合,同时结合我们自己的科研项目,围绕基因工程这一中心,设计了一套较为完善的综合性实验流程,同时对实验的考核方式进行了改革.调查结果表明这一改革取得了较好的效果,为我们在其他实验课程中开展改革提供了有益的借鉴.

单链TCR分子的构建与酵母表面展示

目的构建单链T细胞抗原受体(scTCR),借助酵母展示载体对其进行表达和展示,并确定优化的展示时间点。方法利用融合PCR(fusion PCR)通过linker将TCR分子两条链的可变区连接在一起,构建成scTCR,并克隆入展示载体pYD1;转化酵母细胞后,通过激光共聚焦显微镜观察scTCR的表达情况,并利用流式细胞仪测定其表达曲线;洗脱酵母细胞表面的蛋白质,通过点杂交检测进一步确定scTCR的表达。结果 scTCR被成功地构建和克隆;转化酵母细胞后,激光共聚焦检测表明其分布在酵母细胞的表面,流式细胞检测表明scTCR在诱导24 h左右在酵母细胞表面的展示比例达到峰值;对酵母表面洗脱蛋白的点杂交检测进一步表明了scTCR的表达和展示。结论所构建的scTCR能够有效地表达并展示在酵母细胞表面,为下一步构建scTCR酵母展示库并确定最佳的表达诱导和筛选时机奠定了良好的基础。

Survivin-2B在肿瘤细胞凋亡过程中的作用研究

目的探讨肿瘤细胞凋亡过程中survivin-2B的作用机制。方法通过流式细胞仪分析survivin-2B对肿瘤细胞周期的影响;利用激光共聚焦显微镜观察通过青色荧光蛋白(CFP)标记的survivin-2B和罗丹明123标记的线粒体在细胞内的定位及在细胞凋亡过程中的变化;采用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)方法分析survivin-2B和survivin-ΔEx3在细胞内的相互作用。结果流式细胞仪分析结果表明,Survivin-2B能够明显抑制肿瘤细胞生长,促使细胞凋亡增加;通过激光共聚焦显微镜观察到凋亡早期survivin-2B聚集在细胞发生固缩的部位,且在肿瘤凋亡过程中不存在明显的线粒体定位及与线粒体的相关性;FRET分析显示survivin-2B与survivin-ΔEx3在细胞质中存在很弱的相互作用。结论Survivin-2B能够明显促进肿瘤细胞凋亡,且survivin-2B通过与survivin-ΔEx3直接结合以阻断其抗凋亡效应的可能性较小。

三次制度革命和“根制度”变迁——对人类社会长期制度演化的思考

制度作为型塑人和人类社会的基础因素,其确立人际关系的原则是整个制度体系的根基,称为"根制度","根制度"决定制度体系的性质。通过三次制度革命,人类社会的"根制度"不断升级,推动人类文明不断向更高水平发展。第一次制度革命是社会、国家和制度产生,使人类走出了"霍布斯丛林";第二次制度革命是人类社会由等级依附向机会平等的演变;第三次制度革命是未来可能发生的实现完全平等理想社会的变革。人类能选择的制度水平受制于物质基础、思想意识、人口素质和路径依赖等因素,完全平等的理想社会要经历长期的发展以使物质财富极大丰富才可能实现。在资源稀缺和人有限理性的环境里,使人们在经济和社会生活中获得机会平等的制度就是理想的制度,要在机会平等的"根制度"下,推动制度公平、经济增长、收入分配和人的发展四者协同推进,为未来实现理想社会创造条件。

骨水泥型人工股骨头置换术治疗老年股骨转子间骨折的效果分析

目的:探讨骨水泥型人工股骨头置换术治疗老年股骨转子间骨折的效果分析。方法:选取泰州市中西医结合医院2018年1月—2022年6月收治的120例股骨转子间骨折患者,随机分为对照组和研究组,每组60例。对照组实施闭合复位内固定手术进行治疗,研究组实施骨水泥型人工股骨头置换术方式进行治疗。统计两组临床指标(手术时间、术中出血量及术后完全负重时间)、髋关节功能、治疗效果及并发症(切口感染、压疮、关节脱位、骨水泥植入综合征)发生率。结果:研究组各方面临床指标均优于对照组(P<0.05)。研究组髋关节功能恢复程度优于对照组(P<0.05)。研究组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。研究组并发症发生率低于对照组(P<0.05)。结论:在对于老年股骨转子间骨折患者的治疗中,运用骨水泥型人工股骨头置换术可以有效缩短手术时间,减少术中出血量,治疗效果良好,促进髋关节功能的进一步恢复,提高手术治疗过程的有效性,有效减少恢复过程中出现的并发症。

薯蓣皂苷对人肾癌786-0细胞缝隙连接功能的影响

目的探讨薯蓣皂苷(Dioscin,Dio)对人肾癌786-0细胞缝隙连接(Gap junction,GJ)功能的影响及其作用机制。方法 MTT法测Dio对786-0细胞生长的影响,荧光显微镜观察及流式细胞术结合荧光示踪法分析GJ功能变化,RT-PCR和Western blot分析连接蛋白基因表达。结果 0～2.5μmol.L-1 Dio处理786-0细胞48h不影响其存活率;用0、0.1、0.5、1和2μmol.L-1 Dio处理细胞48 h后,荧光显微镜下观察,Dio能明显提高786-0细胞Calcein传递,流式细胞术分析对照组和实验组的绿色荧光细胞(G4)与双阴性受体细胞(G3)比值(G4/G3)分别是0.13±0.01、0.23±0.01、0.30±0.01、0.56±0.02和1.15±0.02,各实验组G4/G3值明显高于对照组(P<0.01);RT-PCR和Western blot分析结果显示,用0、0.1、0.5、1和2μmol.L-1 Dio处理细胞48 h对其Cx43、Cx32和Cx26表达无明显影响。结论体外较低浓度Dio能够有效促进786-0细胞GJ功能,且具有明显的剂量效应关系。但Dio促进GJ机制并不是通过上调Cx43、Cx32和Cx26蛋白表达途径。

Sox基因家族研究的新进展

Sox基因家族是在动物中发现的一类新的编码转录因子的基因家族,其产物具有一个HMG基序保守区,参与诸如性别决定、骨组织的发育、血细胞生成、神经系统的发育、晶状体的发育等多种早期胚胎发育过程。人类SOX基因的突变或缺失会导致发育异常和严重的先天性疾病。SOX蛋白与其他转录因子相互作用形成复合体而发挥作用。同一Sox基因在不同的细胞或在同一细胞中对不同的启动子具有不同的影响。部分Sox基因之间在功能上相互交叉并且是可以相互替代的。本文比较全面地对Sox基因家族近几年来的新研究成果作一综述。

五味子乙素对非酒精性脂肪肝病的治疗效果

目的观察五味子乙素(Sch B)对非酒精性脂肪肝病的治疗效果。方法除空白对照组外,建立非酒精性脂肪肝病的ICR小鼠模型,随机分成模型组、Sch B低剂量组、Sch B中剂量组、Sch B高剂量组、阳性药组5组,每组9只,空白对照组小鼠饲喂普通饲料,其余各组饲喂高脂饲料(89%基础饲料+10%猪油+1%胆固醇)。建模同时,模型组、Sch B低剂量组、Sch B中剂量组、Sch B高剂量组、阳性药组分别予橄榄油10 m L/kg、Sch B 10 mg/kg、Sch B 20 mg/kg、Sch B 40 mg/kg、非诺贝特100 mg/kg灌胃治疗1周,之后测定各组动物的三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝系数。结果与空白对照组比较,模型组的TG、TC、ALT、AST含量和肝系数显著增加(P<0.05);与模型组比较,各Sch B组的肝脏TG和TC含量呈剂量依赖性降低(P<0.05);Sch B中剂量组的AST和ALT含量显著降低(P<0.05)。阳性药组TC、TG、ALT、AST水平明显降低,肝系数明显增加(P<0.05),而其他各组肝系数无显著性变化。结论中剂量和高剂量Sch B具有降脂和降酶作用,并且对肝脏无明显损伤。

游离脂肪酸混合物对肝细胞脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响

目的:研究游离脂肪酸(FFA)混合物对肝细胞L-02的脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响。方法:正常肝细胞L-02分别用正常培养基和0.5、1、2 mmol/LFFA混合物(油酸和软脂酸的比例为2:1)培养24 h后,尼罗红染液室温避光染色,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪确定细胞内脂质堆积情况。组织细胞酶法测定试剂盒测定细胞内甘油三酯含量。MTT法分析细胞存活率,Annexin V-PI凋亡检测试剂盒分析肝细胞的凋亡情况,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒分别检测培养液中ALT和AST活性。实时定量PCR技术检测脂代谢相关的脂肪分化相关蛋白(ADRP)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)的mRNA表达情况。结果:各浓度FFAs混合物均可剂量依赖性增加肝细胞脂肪堆积和肝细胞甘油三酯含量,且1 mmol/LFFA混合物可增高肝细胞的甘油三酯含量2.6倍,与非酒精性脂肪肝病人的变化基本相同。2 mmol/LFFA混合物可降低肝细胞L-02细胞存活率并诱导细胞凋亡,而0.5 mmol/L和1 mmol/LFFA混合物对细胞无明显影响。与对照组相比,各浓度FFA混合物对细胞上清中ALT和AST活性无明显影响。1 mmol/LFFA混合物作用后可分别上调肝细胞的ADRP和SREBP-1 mRNA的表达2.660和2.758倍。结论:FFA混合物可诱导肝细胞L-02脂肪变性且2mmol/LFFA混合物可造成轻度细胞损伤。脂代谢相关基因ADRP和SREBP-1表达上调与FFA混合物诱导的脂肪变性相关。