E838对放烧复合伤小鼠造血功能的保护作用

目的 研究炔雌醇衍生物E838对放烧复合伤造血功能保护作用 ,同时与公认抗放效果较好的Nilestriol进行比较。方法 采用两种给药方案 ,在致伤后 2 32d计数外周血白细胞和骨髓有核细胞 ,进行骨髓造血祖细胞CFU E和CFU GM培养 ,观察造血功能的变化。结果 在本实验用药方案条件下 ,E838对放烧复合伤造血功能有保护作用 ,部分指标效果较Nilestriol要好。

芥子气损伤防治药物的研究进展

芥子气是典型的糜烂性毒剂,其主要损伤机制是与生物分子作用,形成烃化物。近年对芥子气损伤机制的研究集中在DNA烃化、DNA链断裂、聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)激活、钙紊乱、蛋白水解酶激活和炎症反应等方面,而防治药物的研究也相应地得到进一步扩展。本文综述了不同作用机制的抗芥子气损伤药物的研究进展。

对《化学武器损伤防治学》教材修订的思考

通过专家通讯、同行研讨和文献调研,确定《化学武器损伤防治学》教材修订方案。提出了"完善学科理论体系、突出专业能力培养、强调军民融合、体现最新进展"的指导思想。该指导思想奠定了科学修订教材的基础。

放射损伤、烧伤和放烧复合伤心功能的早期改变

采用离体工作心脏装置(isolated working heart preparation,IWHP)研究放烧复合伤对心脏功能的影响。实验大鼠分成对照组(C)、烧伤组(B)、放射损伤组(R)和放烧复合伤组(RB)。经^(60)Co γ线照射和/或5KW溴钨灯光辐射致放射伤和/或30％TBSA Ⅲ度烧伤,伤后不补液、测定伤后1、3、8、16和24h离体灌流心脏的LVSP、±dp/dtmax、CO、HR、CF和AP,并计算心脏干湿重比Rw。RB组LVSP、±dp/dtmax、CO和AP,伤后8h降低最为明显(P<0.05),分别为C组的79.8％、63.7％、59.4％、88.0％,且均较B组下降为轻,较R组重。CF和Rw无明显组间差异。结果提示:放烧复合伤早期已有心肌固有收缩能力(intrinsic contractility)的抑制,该抑制作用在伤后24h时内表现为加重-恢复过程,且抑制程度较单烧伤为轻。

射线诱导在体造血细胞凋亡的量时效关系的研究

以4—10Gy射线在体损伤的小鼠为模型,应用DNA电泳和流式细胞术等方法证实细胞凋亡是射线损伤在体骨髓造血细胞的途径之一,发现射线诱导的造血细胞凋亡有明显的量效和时效关系。4、6、8和10Gy照射后,细胞凋亡发生率均表现为升高-降低过程,各剂量诱导的凋亡发生率峰值分别出现在照后12、8、4和4h,6和8Gy诱导的凋亡发生率已达最高水平,约为30％,10Gy诱导的凋亡反而要低。上述结果表明,诱导细胞凋亡是射线损伤骨髓造血细胞的一个重要途径,而且凋亡的发生率受照射剂量和照后时间的影响。因此,深入研究射线诱导的细胞凋亡,将有助于揭示射线损伤造血功能的机理。

以实战化训练提高化学防御和卫勤保障能力

实战化训练是提高军事训练质量的有效途径。防化医学作为三防医学的重要组成部分,在部队的建制和训练中都处于防御大规模杀伤性武器的核心地位。防化医学乃至三防医学的实战化训练首先应建立完善的规章、指南、条例及相应的管理机制。教官队伍、训练模式、训练安全和训练评估是实战化训练中需要注意的关键问题,可以通过调研外军和国际组织实战化训练现况,着力提升我军卫勤保障的实战化训练效果。

p53蛋白调节射线所致细胞凋亡

细胞凋亡的形态学特证明确，但具体生化过程尚不很清楚。抑癌基因ｐ５３的蛋白产物在射线所致的凋亡中起重要作用，它的作用机制可能与ｐ５３蛋白的①同特异的ＤＮＡ一致顺序结合，激活或抑制某些基因的表达；②使射线损伤的细胞停滞在Ｇ１期和Ｇ２期；③同其它原癌基因的蛋白相互作用，影响细胞寿命等功能相关。

辐射损伤后造血细胞增殖能力的变化

辐射损伤后，存活的造血细胞的增殖能力决定着伤后造血功能的状态和预后。本实验以辐射损伤小鼠为模型，用ＢｒｄＵ掺入法和ＣＦＵＧＭ培养等方法，观察到４～１０Ｇｙ射线全身照射后４ｈ，骨髓细胞的增殖指数就显著下降，在观察时间内一直处于较低水平（仅为对照组的２０％或更低）。在４～１０Ｇｙ照射后４ｈ或更长，几乎看不到骨髓造血细胞的ＣＦＵＧＭ集落，推测存在一个“成集落休克期”。可见，射线在损伤造血细胞的同时，还明显抑制存活细胞的增殖能力，这可能是某些增强细胞增殖能力的药物能促进伤后造血功能恢复的基础之一。

美国国民警卫队大规模杀伤性武器民事保障队的能力建设

美国大规模杀伤性武器民事保障队由国民警卫队多兵种人员组成,每个州都至少有1支队伍。作为州属的应急救援力量,这些队伍有非常高的专业性、即时响应能力、综合保障能力,其组队、训练、认证、行动等方面的做法值得借鉴。

放射损伤、烧伤和放烧复合伤心肌线粒体脂质过氧化的加强效应

Ｗｉｓｔａｒ大鼠经６Ｇｙ６０Ｃｏγ线和／或３０％总体表面积（ＴＢＳＡ）Ⅲ度烧伤致放射损伤（ＲＩ）、烧伤（ＢＩ）和放烧复合伤（ＲＢＩ）．观测伤后１、３、８、１６和２４ｈ大鼠心肌线粒体脂质过氧化和抗氧化酶活力的改变，发现三种伤类均表现为脂质过氧化代谢产物丙二醛（ＭＤＡ）含量伤后１ｈ即明显升高，２４ｈ降至对照组（Ｃ）水平；超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力在整个实验过程中维持在明显低于Ｃ组的水平；ＢＩ组和ＲＢＩ组还可见谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力在伤后１６和２４ｈ明显降低。结果表明，伤后心肌线粒体抗氧化酶活力降低，脂质过氧化加强，提示线粒体内有自由基堆积。结合此前同样改变条件下所见的心功能下降，认为自由基的有害作用可能是心功能降低的重要原因之一。

细胞凋亡和细胞增殖抑制在射线损伤造血功能中的作用

细胞凋亡和细胞增殖抑制在射线损伤造血功能中的作用Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｃｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｓｕｐｐｒｅｓｉｏｎｉｎｒａｄｉｏ┐ｉｎｄｕｃｅｄｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ邹仲敏罗成基（第三军医大学预防...

放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞对粒-巨噬系祖细胞生长的影响

为了进一步阐明放射损伤复合烧伤(放烧复合伤)时骨髓造血基质细胞支持粒-巨噬系祖细胞造血能力的变化,采用小鼠骨髓基质细胞体外融合培养和粒-巨噬系祖细胞集落(CFU-GM)培养的方法,观察了5Gy照射复合15％Ⅲ度烧伤时基质细胞对支持CFU-GM生长的影响。结果表明:①单纯5Gy照射,单纯烧伤及放烧复合伤后,其骨髓基质细胞支持正常粒-巨噬系祖细胞造血的能力明显下降,以伤后3-5天最为显著,伤后10天仍未恢复至正常;②当骨髓基质细胞和粒-巨噬系祖细胞均受到致伤因素作用时,单纯照射及放烧复合伤组的CFU-GM形成能力下降更为明显,至正常对照组的10％以下,单纯烧伤组也有明显下降,但恢复较快;③在本研究所涉及的各种情况下,损伤的效应均有伤后3-5天达最低值的规律,之后可不同程度地恢复。实验结果提示,在上述损伤因素的作用下骨髓基质细胞的功能确已受到了不同程度的损伤,因此在治疗由此所引起的造血功能障碍时,同时加强促进基质细胞修复的措施,可能会取得更满意的疗效。

小鼠骨髓间质干细胞的生物学特点及分化潜能鉴定

目的 建立一种体外分离、培养和鉴定小鼠骨髓间质干细胞的方法 ,探讨体外培养中间质干细胞的一些生物学特点 ,为利用MSCs促进创伤修复提供实验基础。方法 分离 5～ 6周龄的小鼠胫骨、股骨 ,用预冷的IMDM培养基冲洗出骨髓 ,经密度梯度离心得到骨髓单个核细胞 ,接种后 1 2～ 1 6d形成单层贴壁的成纤维状细胞。体外多向诱导分化鉴定分离的细胞 ,用传代的细胞进行生长曲线的测定、观察其接种贴壁率、检测细胞周期和超微结构。结果 体外传代培养的MSCs具有分化形成成骨和成脂细胞的能力 ;MSCs倍增时间约为 3 8h ,传代后 1 2h贴壁达 90 %以上 ,细胞周期显示有 80 %细胞处于G0 G1 期 ,并用电镜照片显示其超微结构。结论 在本实验条件下 ,体外培养的MSCs具有多向分化潜能 ,体外生长稳定 ,传代后的细胞适应性强 ,增殖较快 ,超微结构和细胞周期表现出较早期细胞特点。

骨髓间充质干细胞的研究前景

除造血干细胞以外 ,骨髓中还含有另一类干细胞 ,被称为间充质干细胞 (mesenchymalstemcell ,MSC)。在不同的诱导条件下 ,这类细胞可分化为多种造血以外组织特别是中胚层和神经外胚层来源的组织细胞 ,如成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞、成肌细胞和星形神经胶质细胞等。骨髓间充质干细胞易于分离和培养扩增 ,还易于外源基因的导入和表达 ,有望成为一种新的细胞治疗和基因治疗的靶细胞 ,在多种造血以外组织的缺陷性疾病、退行性疾病和遗传性疾病的细胞治疗和基因治疗中具有重要的应用前景。

G-CSF动员循环间充质干细胞及其对小鼠颅脑损伤修复的可行性分析

目的建立小鼠严重颅脑创伤模型探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)动员循环间充质干细胞(mesenchym alstem cells,MSCs)的可行性,并观察G-CSF动员的修复效应。方法以G-CSF作为动员剂,培养骨髓和外周血来源的MSCs,计数动员前后的CFU-F。制作小鼠严重颅脑创伤模型,致伤后采用G-CSF对MSCs进行动员,在2、24、48、96、120、144、192、264、336h进行神经行为学评分、运动功能评分,并观察小鼠死亡率和病理组织切片。结果从小鼠外周血培养出MSCs,G-CSF动员后骨髓和外周血MSCs的CFU-F数量显著高于正常对照组(P<0·01)。致伤后小鼠神经行为学和运动功能评分显著低于正常对照组(P<0·01),创伤治疗组在144～192h期间评分显著高于创伤组(P<0·05)。致伤后小鼠死亡率增高,病理切片可见创伤处有出血和空泡。结论成功培养及用G-CSF动员了外周血MSCs,在成功建立小鼠严重颅脑创伤模型的基础上,显示G-CSF动员可以降低严重颅脑创伤小鼠死亡,参与了创伤修复。

肌肉特异性microRNAs在失神经肌肉萎缩中表达变化的研究

目的探讨miR-1、miR-133和miR-206等3种肌肉特异性microRNAs在失神经支配所致骨骼肌萎缩中的表达变化情况。方法采用坐骨神经离断术建立小鼠腓肠肌失神经支配模型,采用失神经前后腓肠肌湿质量、肌纤维横截面积百分比对模型进行评价,应用Northern blot方法检测失神经支配不同时间点肌肉特异性microRNAs的表达变化。结果成功建立小鼠腓肠肌失神经萎缩模型,在该过程中,随着失神经支配时间的延长,骨骼肌特异性miR-206表达明显上调,miR-1、miR-133表达先快速下调后逐渐回升。结论随着失神经支配时间的延长,骨骼肌特异性microRNAs表达发生明显变化,骨骼肌特异性microRNAs可能在失神经介导的骨骼肌萎缩中发挥了一定作用。

基质细胞对小鼠骨髓单个核细胞体外扩增的促进作用

目的 阐明基质细胞在造血细胞体外扩增中的作用。方法 采用骨髓基质细胞培养、骨髓单个核细胞（ＢＭＭＮＣ）体外液体培养和各种造血祖细胞集落培养技术，进行基质细胞支持条件下骨髓单个核细胞体外扩增的研究，并与单纯细胞因子支持下的细胞扩增进行比较。结果 在照射后基质细胞层存在的条件下，同时含有细胞因子组合的培养体系，对细胞总数和集落形成细胞数的扩增作用明显高于其它各组。结论 基质细胞对细胞因子作用下的造血细胞体外扩增有明显的促进作用。

MyoD基因诱导骨髓间充质干细胞分化为成肌细胞的实验研究

目的 探讨MyoD基因诱导骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化为成肌细胞的可能性。方法 利用脂质体转染方法 ,将真核表达的双顺反子质粒载体pIRES2 EGFP MyoD转入MSCs中 ,G418筛选 ;用RT PCR检测MyoD的表达 ,扩增产物纯化测序鉴定 ;荧光显微镜和激光共聚焦观察报告基因产物 ;免疫组化检测MyoD、myogenin、myosin、myoglobin、desmin的表达 ;电镜观察转染前后细胞超微结构的变化。结果 RT PCR可检测出转染后细胞表达MyoD ,扩增产物纯化测序与GeneBank比较完全一致 ;荧光显微镜和激光共聚焦观察均可见绿色荧光 ;免疫组化检测MyoD、myogenin、myosin、myoglobin、desmin表达均为阳性 ;转染后的MSCs观察表现为较为成熟细胞的形态学特点 ,且胞浆中有丝状物结构。结论 MyoD基因可成功诱导体外培养的骨髓MSCs分化为成肌细胞 。

尿毒症毒素对甲酚对单核细胞体外释放炎症因子的影响

目的利用体外细胞模型研究尿毒症毒素对甲酚对单核细胞释放炎症因子的影响及其可能机制。方法采用CCK-8法检测THP-1单核细胞株经20、40、80、160mg/L对甲酚分别处理6、12、24h后细胞增殖能力的变化;根据细胞增殖实验结果,选取40mg/L和80mg/L两个剂量组作为低剂量组和高剂量组,提取细胞RNA和蛋白质,用RT-PCR法、Western blotting检测对甲酚处理24h后THP-1单核细胞株炎症因子TNF-α、抗炎因子IL-10以及炎症相关Toll样受体4(TLR-4)m RNA和蛋白表达的变化。结果对甲酚可抑制THP-1细胞增殖,其抑制作用呈浓度和时间依赖性(P<0.05);RT-PCR及Western blotting检测显示,对甲酚处理的THP-1细胞炎症因子TNF-α释放增加,IL-10释放减少,TLR-4表达增加(P<0.05)。结论对甲酚可抑制THP-1细胞增殖,抑制IL-10抑炎因子表达,并可能通过上调TLR-4的表达,促进促炎因子TNF-α的释放,从而导致微炎症状态。