阿魏酸对糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的人RPE细胞损伤的抑制作用及其机制

目的探讨阿魏酸对糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的抑制作用及其机制。方法选取SPF级雄性8周龄2型糖尿病db/db小鼠30只,采用随机数字表法将小鼠分为模型组和阿魏酸组,每组15只,另选取15只同周龄db/m小鼠作为对照组。模型组和对照组每日采用生理盐水灌胃(5 ml/kg),阿魏酸组采用阿魏酸溶液灌胃(0.05 g/kg),治疗后2个月处死各组小鼠并摘除眼球。采用苏木精-伊红染色观察小鼠视网膜组织形态学变化;采用免疫荧光染色法和Western blot法检测各组小鼠视网膜组织线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)蛋白荧光强度和表达水平。取人RPE细胞,将其分为对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、高糖组和高糖+阿魏酸组,其中对照组不做任何处理,其余各组用相应试剂培养24 h。采用活性氧簇(ROS)检测试剂盒检测各组RPE细胞ROS水平;采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测各组RPE细胞线粒体膜电位水平;采用微丝绿色荧光探针检测各组RPE细胞MCU和微丝荧光强度;通过慢病毒转染技术沉默和过表达MCU蛋白水平探讨MCU与p38 MAPK、p-p38MAPK间的调控关系;采用免疫荧光染色法和Western blot法检测各组RPE细胞MCU、p38 MAPK、p-p38MAPK蛋白荧光强度和表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠视网膜组织外核层、内核层和神经节细胞层细胞间隙增大、排列紊乱,阿魏酸组小鼠视网膜组织明显改善。与对照组比较,模型组、阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p-p38 MAPK和MCU+p-p38 MAPK蛋白荧光强度显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p-p38 MAPK和MCU+p-p38 MAPK蛋白荧光强度显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠视网膜组织MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、DMSO组、高糖组和高糖+阿魏酸组细胞ROS荧光强度分别为0.22±0.02、0.22±0.03、0.30±0.02和0.24±0.02,总体比较差异均有统计学意义(F=7.845,P<0.01),其中高糖组细胞ROS荧光强度明显高于对照组和DMSO组,高糖+阿魏酸组细胞ROS荧光强度明显低于高糖组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高糖组、高糖+阿魏酸组细胞线粒体膜电位水平明显低于对照组和DMSO组,高糖+阿魏酸组细胞线粒体膜电位水平明显高于高糖组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组、DMSO组比较,高糖组MCU荧光强度较高,并伴随着细胞微丝减少和变细;高糖+阿魏酸组MCU蛋白荧光强度明显下降,细胞微丝数量明显增加。与对照组、DMSO组比较,高糖组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白荧光强度和相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与高糖组比较,高糖+阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白荧光强度和相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组和空载体组比较,MCU过表达组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著升高,MCU shRNA组、MCU过表达+阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与MCU过表达组比较,MCU shRNA组、MCU过表达+阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论阿魏酸能够调控氧化应激和线粒体功能障碍,进而改善糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的RPE细胞损伤,其可能通过MCU及p38MAPK信号通路发挥保护作用。

阿魏酸改善高糖诱导的视网膜色素上皮细胞损伤的研究

目的 通过观察阿魏酸(FA)对高糖(HG)诱导视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)损伤的影响,探讨FA对糖尿病视网膜病变的作用机制。方法 采用HG处理ARPE-19构建体外糖尿病视网膜色素上皮细胞损伤模型,FA溶解在二甲基亚砜(DMSO)中,分为Control组(5 mmol/L葡萄糖)、DMSO组(0.1%DMSO+5 mmol/L葡萄糖)、HG组(30 mmol/L葡萄糖)、HG+FA组(30 mmol/L葡萄糖+50μmol/L)。通过CCK-8检测细胞的增殖活性;采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测各组ROS水平;免疫细胞荧光和Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、核因子κB(NF-κB)的表达水平。结果 CCK-8检测结果表明,与Control组相比,HG可诱导ARPE-19细胞的增殖活性降低,而FA可改善高糖对细胞增殖的影响(P<0.05)。ROS检测结果表明,与Control组相比,HG组可诱导ARPE-19细胞ROS荧光强度升高,FA可显著降低高糖诱导ARPE-19细胞的ROS荧光强度(P<0.05)。免疫细胞荧光和Western blot实验表明,HG组可诱导ARPE-19细胞TLR4、MyD88、NF-κB表达升高,FA可显著降低它们的表达(P<0.05)。结论 FA通过降低ROS产生和下调TLR4、MyD88、NF-κB表达改善高糖诱导的视网膜色素上皮细胞损伤。

枸杞多糖对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的保护作用

目的 观察枸杞多糖(LBP)对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞(RGCs)的保护作用。方法 将48只健康雄性SD大鼠随机分为正常组(A组)、损伤组(B组),LBP治疗组(C组)和LBP预防组(D组)4组,每组12只。除A组外,其余3组均用微型视神经夹制备大鼠左眼视神经损伤模型。D组于造模前以LBP100 mg/(kg·d^(-1))灌胃2周,造模后灌胃3个月。B组和C组造模后每天分别以生理盐水和LBP 100 mg/(kg·d^(-1))灌胃3个月。处死前1周用荧光金(FG)注入双上丘标记RGCs。灌胃3个月后摘除大鼠左侧眼球,剥离视网膜铺片,计算RGCs密度,检测视网膜中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果 A组、B组、C组和D组RGCs密度分别为(2 354±250)、(802±82)、(1 138±96)、(1 196±82)个/mm^(2),4组间比较差异有统计学意义(P<0.05);B组RGCs密度降低、大小形态不一、显色弱且排列不规则。A组、B组、C组和D组SOD含量分别为(77.93±9.64)、(24.23±7.44)、(40.47±16.94)、(42.15±8.87)U/mgprot, 4组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组、B组、C组和D组MDA含量分别为(6.21±1.97)、(43.09±13.15)、(29.55±4.51)、(28.91±6.74)nmol/mgprot, 4组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LBP通过上调外伤性视神经病变(TON)后RGCs中SOD含量,增强清除活性氧(ROS)的能力,抑制脂质过氧化反应,下调MDA的含量,显著提高了FG标记RGCs的密度,对TON后RGCs有保护作用。

羟基磷灰石义眼台植入术后义眼台暴露的处理

目的探讨羟基磷灰石义眼台植入术后义眼台暴露的处理方法。方法对20例羟基磷灰石义眼台暴露采用不同的方法。结果义眼台暴露范围小的9例能自行愈合;11例需手术治疗修补,其中1例伴有慢性感染者需手术取出义眼台。结论义眼台暴露的处理可根据其暴露范围采用不同方法处理,义眼台暴露范围在5mm以内的可采用保守治疗,暴露范围超过10mm的应尽早手术修补。

鼻泪道支架植入治疗泪道阻塞疗效分析

目的探讨鼻泪道支架植入治疗泪道阻塞的临床效果。方法选择溢泪和溢脓患者220例246眼,其中单纯泪道阻塞152例174眼,慢性泪囊炎68例72眼,分别植入鼻泪道支架。结果242眼植入了泪道支架,成功率为98%,单纯性泪道阻塞174眼均顺利植入泪道支架,慢性泪囊炎72眼,其中68眼顺利植入泪道支架,4眼植入失败。随访3-12个月,治愈230眼;好转11眼;无效1眼。总有效率为99%。结论鼻泪道支架植入是一种微创性鼻泪道阻塞的治疗方法,简单、安全、省时,术中出血少,不改变原有的解剖结构,成功率高。

虹膜型人工晶体植入术治疗外伤性无虹膜眼的疗效观察

目的探讨外伤性无虹膜眼虹膜型人工晶体植入术的临床疗效。方法对10例10眼外伤性无虹膜眼行虹膜型人工晶体植入术,术后随访时间3-36个月。结果术后一周矫正视力0.1-0.3者3眼,0.3-0.5者6眼,0.6者1眼,术后3个月矫正视力为0.3-0.6。全部患者畏光症状消失。结论虹膜型人工晶体植入手术为治疗无虹膜眼提供了新的方法,但应严格掌握适应症。

羟基磷灰石义眼台二期眶内植入55例观察

的 观察二期羟基磷灰石义眼台植入术的疗效。方法 对 5 5例眼球摘除术后 2 - 30年的患者采用二期羟基磷灰石义眼台植入 ,并观察其疗效。结果 随访 2 - 18个月均获得良好的效果 ,并发症少 ,无感染、移位和脱出。结论 二期羟基磷灰石义眼台植入疗效满意 ,是目前眼球摘除术后良好的眶内充填材料。

白内障手术对角膜内皮的影响

目的 评价老年性白内障囊外摘除人工晶体植入术后角膜内皮的损伤情况。方法 使用Topcon非接触型角膜内皮分析仪观察 10 0眼白内障摘除及人工晶体植入前后角膜中央区内皮细胞变化。结果 10 0眼术后1周内皮细胞损失 14 .17% ,其中 4 7眼术后 3个月角膜内皮细胞损失 3.18% ,经统计学处理P <0 .0 1。结论 术前术后角膜内皮细胞的测定 。

大龄儿童单眼弱视的疗效观察

目的探讨大龄儿童单眼弱视的治疗方法及疗效。方法收集10-14岁大龄儿童单眼弱视患儿60例(60眼),经综合疗法治疗弱视,观察其治疗效果。结果大龄儿童单眼弱视60例(60眼)治愈率为61.67%、进步率为28.33%、无效为10%,治疗总有效率为90%。结论大龄儿童单眼弱视疗效较好,应积极治疗。

糖皮质激素性青光眼30例临床分析

目的探讨糖皮质激素性青光眼的病因、临床特点、治疗方法和预防措施。方法对30例42眼糖皮质激素性青光眼患者进行回顾性分析。结果30例患者中,男性18例,女性12例;年龄6-56岁,平均41岁。28例局部使用糖皮质激素,2例为全身使用。所有患者均具有开角型青光眼的临床表现,其视野和视神经的损害程度与用药时间基本相同。经药物或手术治疗后眼压均得到控制。结论滥用药物是发生糖皮质激素性青光眼的重要原因。合理用药,早期发现,早期治疗是防治糖皮质激素性青光眼的关键。

羊膜移植治疗大泡性角膜炎

目的观察羊膜移植治疗大泡性角膜病变的疗效。方法对18例大泡性角膜病变的患者采用羊膜移植治疗,其中无晶体眼4例,人工晶体眼11例,绝对青光眼2例,爆炸伤1例。结果随访3个月-1年,治疗后1周眼疼痛及刺激症状消失,角膜缺损区在1-3周内愈合,随访15例患者均未见复发。结论羊膜移植是治疗大泡性角膜病变较为有效的方法。

钝挫伤致睫状体脱离的手术治疗

目的探讨睫状体缝合复位术治疗睫状体脱离的疗效。方法对12例钝挫伤所致睫状体脱离的患者采用睫状体缝合复位术,其中拳击伤4例,棍棒及塑料子弹击伤4例,车祸伤2例,羊顶伤1例。结果术后随访3-18个月。术后1周内有4例眼压升高大于24mmHg,经用激素及降眼压药物后,2周内恢复正常。其余8例眼压均在10-20mmHg之间。术后房角检查,睫状体附着于巩膜突上者9例,附着于后部小梁网者3例。结论睫状体缝合复位术是治疗睫状体脱离有效的方法。

LASIK术后泪液稳定性及功能性视力的研究

目的:研究LASIK手术后泪液稳定性及功能性视力的变化。方法:我们对2008-04/06在我院接受LASIK治疗近视的48例患者(96眼)进行前瞻性病例对照研究,分别在术前、术后1d;1wk;1,3,6mo进行干眼症状问卷调查,检测泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)、泪液分泌试验(schimer test values,STV)、角结膜荧光素钠染色(sodium fluorescein,FL)、比较功能性视力(functional visual acuity,FVA)与基础视力(baseline VA)的差值(FVA)。结果:术前有15眼(16%)有干眼症状,术后分别有91眼(95%),82眼(85%),57眼(59%),43眼(45%),32眼(33%)在术后1d;1wk;1,3,6mo表现有干眼症状;术后第1dBUT由术前7.06±2.04s缩短至4.4±1.8s(t=2.65,P=0.00),STⅠ由术前12.7±6.6mm增加到14.5±6.6mm(t=1.76,P=0.036),STⅡ由术前7.2±2.4mm减少到5.47±2.02mm(t=1.68,P=0.00),术前FL评分1.0±0.8,术后1d增多到1.4±1.0(t=0.375,P=0.002)。术后6mo除STⅠ10.6±7.0mm,仍低于术前(t=1.83,P=0.03),其余参数均恢复至术前水平。FVA术后1d由术前0.50±0.37增加至0.62±0.35(t=1.146,P=0.025),1wk后恢复至术前水平。结论:本研究证实术后干眼是LASIK矫正近视的常见并发症,主要影响BUT,STⅠ,STⅡ。LASIK术后早期功能性视力有所下降,1wk后逐渐好转。

羊膜移植治疗大泡性角膜炎18例临床分析

为观察羊膜移植治疗大泡性角膜病变的疗效,分析18例大泡性角膜病变的患者采用羊膜移植治疗的临床资料,其中无晶体眼4例,人工晶体眼11例,绝对青光眼2例,爆炸伤1例.结果,治疗后1周眼疼及刺激症状消失,角膜缺损区在1～3周内愈合,随访3～12个月,随访的15例患者均未见复发.提示羊膜移植是治疗大泡性角膜病变较为有效的方法.

糖尿病患者的眼表面不规则指数

目的:研究糖尿病患者在自然状态下和持续睁眼状态下眼表面规则指数的变化。方法:分别对13例糖尿病患者连续病例及13例非糖尿病对照组患者(年龄、性别匹配)检测泪液分泌试验(SchirmerⅠtest,SⅠt),泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT),角膜荧光素染色(fluorescein staining,FL)及干眼症症状问卷调查。角膜地形图检测自然眨眼状态下及持续睁眼10s后的角膜不规则系数(irregular index,Irreg),后者模拟日常无意识眨眼次数减少的凝视状态。结果:更多糖尿病患者(9/13,对照组6/13)主诉每周至少一次出现一种以上干眼症症状。与对照组相比,糖尿病组SⅠt试验(11.4±2.5vs14.9±3.3mm/5min,P<0.01)及BUT(10.9±4.7vs13.6±3.4s,P=0.02)均明显降低。两组FL差异无显著性意义(0.59±0.65vs0.29±0.54,P=0.06)。自然状态下糖尿病组Irreg较对照组高,但差异无统计学意义(分别为1.36±0.46,1.11±0.45,P=0.06)。然而,持续睁眼10s后,糖尿病组Irreg明显增高至4.23±1.32,而对照组保持在2.08±0.60(P<0.01)。结论:糖尿病患者反射性泪液分泌及泪膜稳定性下降。持续睁眼时糖尿病患者角膜规则性指数(SRI)增加。

角膜塑形镜治疗青少年近视的疗效观察

目的探讨角膜塑形镜对青少年近视的治疗效果。方法收集接受角膜塑形镜治疗的8～18岁青少年近视患者59例(118只眼)作为研究对象。按患者配戴角膜塑形镜前等效球镜度数将研究对象分为低度近视组(-0. 75～-3. 00 D)、中度近视组(-3. 25～-5. 00 D)及高度近视组(-5. 25～-9. 00 D)。观察患者配戴角膜塑形镜1、3、6个月及1年后屈光度、眼轴长度、中央角膜厚度、角膜曲率的变化情况,采用方差分析比较不同近视组间屈光度、眼轴长度变化量、中央角膜厚度、角膜曲率的差异。结果各组患者配戴角膜塑形镜1、3、6个月及1年后屈光度、眼轴长度、角膜曲率、中央角膜厚度较配戴前明显降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。低度近视组、中度近视组患者配戴角膜塑形镜1、3、6个月及1年后屈光度、眼轴长度变化量、角膜曲率、中央角膜厚度明显低于配戴前,差异有统计学意义(P <0. 05);高度近视组患者眼轴长度变化量、角膜曲率较配戴前明显降低,差异有统计学意义(P <0. 05);屈光度、中央角膜厚度与配戴前相比虽有所降低,但差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论角膜塑形镜能有效地矫正低、中度近视患者的视力,对高度近视患者的治疗效果可能与配戴时间有关。长期配戴角膜塑形镜可能控制眼轴增长,降低角膜曲率,使中央角膜变扁平、变薄。

阿魏酸对高糖诱导的人晶状体上皮细胞损伤的保护作用

目的探讨阿魏酸对高糖诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)损伤的保护作用。方法以HLEC为研究对象,将细胞随机分为对照组(HLEC+DMEM)、DMSO组(HLEC+DMEM+DMSO)、高糖组(HLEC+DMEM+30 mmol·L^-1高糖)、高糖+阿魏酸组(HLEC+DMEM+DMSO+30 mmo·L^-1高糖+阿魏酸)。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Q-PCR检测p53、Bcl-2、Bax mRNA表达水平;免疫细胞化学和Western blot法检测p53、Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果高糖抑制HLEC的细胞活性,不同浓度阿魏酸干预后,HLEC的细胞活性均明显升高,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,高糖组HLEC凋亡率高于对照组(P<0.05),高糖+阿魏酸组细胞凋亡率低于高糖组(P<0.05);高糖组p53、Bax mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组,而Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组(均为P<0.05);高糖+阿魏酸组p53、Bax mRNA和蛋白表达水平均明显低于高糖组,而Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平均明显高于高糖组(均为P<0.05)。结论阿魏酸可能通过降低Bax和促进Bcl-2表达,进而减轻高糖诱导的HLEC损伤,从而达到防治糖尿病白内障发生的作用。

超声乳化白内障吸除联合后房型人工晶体植入治疗原发性闭角型青光眼的疗效观察

目的探讨和评估超声乳化白内障吸除联合后房型人工晶体植入术治疗原发性闭角型青光眼的临床疗效。方法对原发性闭角型青光眼患者68例,行超声乳化白内障吸除联合后房型人工晶体植入术,观察术前术后眼压情况,随访时间1-28个月。结果术后最佳矫正视力较术前明显提高(P<0.05),术后眼压较术前明显降低(2.01±0.61)kPa(P<0.05),术后中央前房深度较术前明显加深(2.497±0.141)mm(P<0.05)。结论超声乳化白内障吸除联合后房型人工晶体植入术可有效治疗合并白内障的原发性闭角型青光眼。

早期糖尿病视网膜病变视觉对比敏感度变化的临床研究

目的观察视觉对比敏感度检查在早期糖尿病视网膜病变患者中的应用价值。方法选取内分泌科确诊的早期糖尿病患者,行眼底造影检查无眼底病变患者50例(100眼),另选50例(100眼)正常人群作为对照组,对2组入选对象进行视觉对比敏感度检查。结果糖尿病组与正常对照组在标高环境对比度视力及测试速度差异均无统计学意义(P>0.05);糖尿病组与正常对照组在标低环境对比度视力差异无统计学意义(P>0.05),测试速度差异有统计学意义(P<0.05);糖尿病组与正常对照组在低亮环境对比度视力及测试速度差异有统计学意义(P<0.05)。结论视觉对比敏感度在糖尿病患者眼底未发生病变之前即可发生变化,可作为糖尿病患者早期筛查的重要指标。