牛膝中植物甾酮类成分的研究进展

植物甾酮类成分是怀牛膝的主要有效成分,具有调节糖代谢、抗脂质过氧化、保护内皮细胞、调节基因表达、影响细胞繁殖等作用。本文综述了近几年对怀牛膝中植物甾酮类成分的研究情况,就其结构性质、分离分析和药理作用作一概述。

人新型冰冻血小板的制备方法与质量评价

目的:优化人新型冰冻血小板制备相关技术参数,制定人新型冰冻血小板的制备方案。方法:利用O型袋装富血小板血浆(PRP)制备人新型冰冻血小板,优化其制备过程中的关键技术参数(DMSO加入方式、孵育时间、离心条件等),并通过血常规检测、细胞凋亡率、血小板活化率及表面蛋白表达水平等评价冰冻血小板质量。结果:人新型冰冻血小板的制备方案中将离心去除上清的操作调整到血小板冰冻程序前,并当离心条件为800×g离心8 min时,离心操作对血小板影响最小。此外,离心前与DMSO孵育30 min的血小板在冰冻及解冻复融后的质量更优。采用本方案制备的人新型冰冻血小板经长期冰冻保存后各项指标仍保持稳定。结论:本研究制定了人新型冰冻血小板制备方案。在人新型冰冻血小板制备过程中,血小板与DMSO振荡孵育30 min后再经800×g离心8 min处理可提升冰冻血小板质量。

可缓释富血小板血浆生长因子的新型自组装多肽水凝胶制备及性能表征

背景:富血小板血浆水凝胶由于生长因子的突发释放与伤口部位蛋白酶的快速清除,导致生长因子在伤口部位的停留时间较短,近年来研究者关注利用水凝胶材料包封富血小板血浆,以改善富血小板血浆水凝胶的不足。目的:制备自组装多肽-富血小板血浆水凝胶,探究其对富血小板血浆生物活性因子释放的影响。方法:采用固相合成法合成自组装多肽,以D-PBS配制成溶液。将不同体积的多肽溶液分别与富血小板血浆、氯化钙/凝血酶溶液混合制备水凝胶,使体系中多肽的最终质量分数分别为0.1%,0.3%,0.5%,观察成水凝胶状态,并体外检测富血小板血浆中生长因子释放情况。将质量分数1%多肽溶液与质量分数1%人血清白蛋白溶液混合激发多肽自组装,使多肽的最终质量分数分别为0.1%,0.3%,0.5%,观察液体流动状态,并检测自组装多肽的流变力学性能。通过扫描电镜与透射电镜观察多肽(质量分数分别为0.1%,0.001%)-人血清白蛋白溶液的微观结构。结果与结论:①不同体积多肽溶液与富血小板血浆均可形成水凝胶,与富血小板血浆水凝胶相比,0.1%,0.3%多肽-富血小板血浆凝胶可缓解表皮生长因子、血管内皮生长因子的突发释放,延长释放时间至48 h。②添加人血清白蛋白后,0.1%多肽组仍呈流动液体,0.3%多肽组呈半液体状态,0.5%多肽组激发自组装形成水凝胶,确定富血小板血浆中人血清白蛋白可激发多肽自组装;随着多肽质量分数的提高,自组装多肽的存储模量越高,越容易成胶。③透射电镜下可见,添加人血清白蛋白前,多肽纳米纤维较短且无序堆积;添加人血清白蛋白后,多肽纳米纤维明显变长,并且相互交联成束,形成致密的纤维网络结构。扫描电镜下可见,添加人血清白蛋白前,多肽呈无序堆积的片状结构;添加人血清白蛋白后,多肽自组装成相互交联且有序密集排列的多孔状结构。④结果显示,新型自组装多肽可由富血小板血浆激发自组装,根据人血清白蛋白与多肽的比例可精准调节自组装效果,且多肽对富血小板血浆生长因子有缓释作用,可作为一种新型的生物材料应用于组织修复。

大型LNG低温储罐干燥过程技术探讨

LNG储罐在投用之前需要经过干燥和预冷过程,如果干燥不合格,在预冷过程中会出现结冰现象,甚至破坏保温材料,影响储罐的保冷效果。结合华油广安2万m^3单包容LNG储罐的实例,介绍LNG储罐的干燥流程,以及在干燥过程中遇到的问题及解决方案。

影响人外周血单个核细胞4℃保存效果的因素分析

目的:分析4℃无血清条件下人外周血单个核细胞保存效果及其相关影响因素。方法:采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,使用不同细胞密度、添加人血清白蛋白、葡萄糖等条件对其进行4℃保存,并检测保存72 h内细胞的存活率、细胞数量、活细胞数量和细胞表型。结果:随保存时间延长,人外周血单个核细胞数量逐步下降(r=0.982),与(5-6)×10^(6)/ml细胞密度相比较,细胞保存密度为(1-2)×10^(6)/ml时细胞数量下降趋势减缓;添加人血清白蛋白和葡萄糖可有效提升人外周血单个核细胞的存活率,其中,2%人血清白蛋白保存效果更优;淋巴细胞亚群的分析结果表明,相较于对照组,添加人血清白蛋白和葡萄糖后NK细胞和T细胞数量下降趋势明显减缓。结论:(1-2)×10^(6)/ml的细胞密度、2%人血清白蛋白更适合PBMC的保存,5%葡萄糖可提升人外周血单个核细胞的4℃保存效果。

基于自组装多肽的无血清细胞冷冻保存

目的实现基于自组装多肽(Peptide)的无血清低DMSO的高效细胞冷冻保存。方法使用胎牛血清(FBS)、DMSO和Peptide 3种冷冻保护剂(cryoprotectant,CPA)进行组合冷冻保存Hepa1-6细胞。采用共聚焦显微成像、流式细胞术及细胞计数等方法检测冻存后细胞的存活率、回收率及增殖能力,并通过差示扫描量热(differential scanning calorimetry,DSC)法检测CPA抑冰性能,最终确定一种用于细胞冻存的高效CPA。结果Peptide可在DMSO溶液中形成纤维网络水凝胶封装细胞,支撑细胞呈三维(3D)立体分布。在无血清条件下,与5%DMSO及0.1wt%Peptide组相比,用0.1wt%Peptide联合5%DMSO作为新型复合CPA冻存Hepa1-6细胞,可显著提高细胞存活率及冻存后回收率,且与10%DMSO+20%FBS组相比差异无统计学意义(t分别为0.983和2.164,P均>0.05)。此外,与10%DMSO+20%FBS组相比,0.1wt%Peptide+5%DMSO组冻融后细胞的增殖能力差异也无统计学意义(t=3.513,P>0.05)。DSC测试显示,基于Peptide的CPA抑冰性能良好。结论使用0.1wt%Peptide联合5%DMSO作为新型复合CPA具有良好的细胞冻存效果。