血液肿瘤细胞凋亡形态学观察的改良荧光染色法

改良了观察血液肿瘤细胞凋亡形态学的荧光染色法。其程序包括细胞固定、、制片、染色、现察等步骤，简单易行；整个细胞凋亡检测过程在2h内即可完成，且检出率极高，甚至在细胞凋亡发生率仅为1％的情况下，仍可快速检出。因此，该染色法具有方便、快速、实用性强的特点。适用于常规实验室细胞凋亡形态学观察。

黑色素对流感病毒诱导细胞凋亡的抑制效应

用荧光染色技术及流式细胞仪分析方法研究了 Ａ１／京防８６１ 和 Ｂ／沪防９３１ 两株流感病毒感染与细胞凋亡的关系，探讨利用嗜麦芽假单胞菌黑色素抑制流感病毒诱导 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞凋亡的可能性 结果显示：黑色素在 １００ ｍ ｇ· Ｌ－ １ 浓度范围内，对 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞无细胞毒性； Ａ１／京防 ８６１ 和 Ｂ／沪防 ９３１ 两株流感病毒均可诱导 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ细胞凋亡，但二者存在毒力差异（ｐ＜ ０．０５）病毒感染１２ ｈ 后，荧光染色可观察到典型的凋亡核形态，流式细胞仪则可检测到病毒诱导 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞产生的凋亡峰，且细胞凋亡率分别为３７．０２％ 和 ２７２９％ ；２０ ｍ ｇ· Ｌ－ １ 的黑色素可有效抑制两株流感病毒诱导细胞凋亡，使细胞凋亡指数从２５％ ～３５％ 降至３％ 以下 结果表明，黑色素可以抑制 Ａ 和

极端嗜盐菌冷冻干燥保藏研究

本文报道了不同浓度的海藻糖和蔗糖作为保护剂对盐生盐杆菌（Ｈａｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｈａｌｏｂｉｕｍ）Ｒ＿１菌株冷冻干燥存活性的影响。结果表明：６％海藻糖，１２％蔗糖和１５％ＮａＣｌ组成的混合保护剂，是冷冻干燥保藏Ｒ＿１菌株极佳的保护剂。采用该保护刑冷冻干燥２５株极端嗜盐菌，于４℃保藏１４个月，经液体培养基和斜面培养基培养检测，全部存活。

p16蛋白对B型流感病毒诱导HeLa细胞凋亡的影响

以流感病毒 B/沪防 93- 1株感染 He L a细胞 ,通过 Hoechst332 5 8荧光染色、琼脂糖凝胶电泳分析检测细胞凋亡 ,并用免疫组化技术测定 p16蛋白的表达 ,探讨 p16蛋白表达对 He L a细胞凋亡的影响 .结果表明 ,B型流感病毒感染 He L a细胞可诱导其凋亡 ,感染 2 4h后 ,细胞凋亡数达 84.5 % ;He L a细胞凋亡伴随 p16蛋白的表达 ,2 4h达高峰 ,阳性率为 49.2 3± 1.70 .研究结果提示 ,B型流感病毒感染诱导 He L a细胞凋亡过程与 p16基因激活相关 ,p16蛋白可能是介导流感病毒诱导细胞凋亡的另一重要途径 .

细菌转化黑色素的抗流感病毒作用

采用敏感的ＭＴＴ法测定了嗜麦芽假单胞菌转化黑色素的抗流感病毒作用。测定结果表明：纯化的黑色素毒性极低，对ＭＤＣＫ细胞的无毒界限为０．２ｍｇ／ｍｌ，远高于其有效的作用浓度；１０～２０μｇ／ｍｌ的黑色素能有效抑制流感病毒（血凝效价１∶３２）致细胞病变。病毒感染７２ｈ后用ＭＴＴ法测定，其宿主ＭＤＣＫ细胞保护百分率达９５％以上；此外，加黑色素后的ＭＤＣＫ细胞，抗流感病毒感染的能力优于目前抗病毒的有效药物病毒唑，前者的最佳作用浓度（２０μｇ／ｍｌ）比后者（１００μｇ／ｍｌ）低５倍。可以认为嗜麦芽假单胞菌转化黑色素具有毒性低。

冷休克诱导肿瘤细胞凋亡的动力学特征

应用扫描电镜观察、末端DNA转移酶介导的脱氧UTP缺口末端标记技术 (TUNEL)和流式细胞术研究低温冷休克诱导人乳腺癌细胞系 (ZR -75 -30)细胞凋亡 ,并对其细胞凋亡的动力学特征测定、分析。结果显示 :-5℃、0℃、4℃冷休克均可诱导ZR -75 -30细胞凋亡 ,但细胞凋亡进程受实验细胞预培养时间 ;冷休克温度、时间 ;细胞冷休克后恢复培养时间的影响 ,这些影响因素具有明显的动力学特征。经过对冷休克诱导ZR -75 -30细胞凋亡的动力学特征分析、比较 ,优选出研究冷休克诱导肿瘤细胞凋亡的实验体系 :即细胞经37℃预培养36h→冷休克 ( -5℃24h,0℃36h,4℃48h)→细胞冷休克后于37℃恢复培养18 -24h→细胞凋亡检测→检测结果综合分析。应用该实验体系可使细胞凋亡率达50-60 % ,且重复性尚佳。优化体系为深入研究冷体克诱导细胞凋亡的信号传递及其分子机制提供实验模型。

嗜盐细菌冷冻干燥保护剂的正交法优化

报道了利用正交试验设计的原理和方法，筛选冷冻干燥保藏盐生盐杆菌（Ｈａｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｈａｌｏｂｉｕｍ）菌株Ｒ１的保护剂组成与最佳配比的结果．直接分析和方差分析的结果表明：在由ＮａＣｌ、水解乳蛋白、海藻糖和蔗糖４种成份组成的保护剂系统中，海藻糖对菌株Ｒ１冷冻干燥存活率影响最大，为主要因素；其次为蔗糖和ＮａＣｌ；水解乳蛋白影响最小，为次要因素．保护剂最优的水平组合为ＮａＣｌ１６％、水解乳蛋白４％、海藻糖６％、蔗糖１８％．采用正交法从传统“简单可比性”需８１次的实验减少到９次，并且正交法的综合可比性能在较短时间内找出最佳的水平组合．利用最佳组合的保护剂使冷冻干燥菌株Ｒ１存活率达到９１．８０％．从试验的结果可以认为只要选择适当的保护剂，用冷冻干燥法保藏嗜盐菌是安全可行的．

极端嗜盐菌冻干保藏及其质检稳定性的研究

采用优化组合保护剂冷冻干燥２０株极端嗜盐菌，于４℃冷库保存２年，经复水测定，全部菌株保持较高存活性．用ＴＥＮＳ法对其中９株菌Ｒ１，ＲＦ１，Ｊ７，Ｓ９，Ｔ４～１，Ｊ６，Ｒ６～１，Ｒ６～７和Ｒ６～５作质粒稳定性检测，含质粒的菌株ＲＦ１，Ｊ７，Ｓ９，Ｔ４～１，Ｒ６～５于４℃保存２年后，质粒稳定存在；而菌株Ｒ１，Ｊ８，Ｒ６～１和Ｒ６～７冻干保存前后均末检测到质粒．结果表明：优化组合保护剂不仅能有效地用于极端嗜盐菌的冷冻干燥保藏，还能保持宿主质粒的稳定性．

猪瘟病毒野强毒株持续感染细胞模型的初步研究

经过筛选和连续传代 ,建立了稳定的猪瘟病毒野强毒株 (CSFV2 2 )感染猪肾传代细胞系 (PK 15 )的持续感染细胞模型 ,获得CSFV2 2 PK15病毒持续感染的传代细胞株 用免疫荧光技术、RT PCR技术、透射电镜、流式细胞仪研究了CSFV2 2 PK15细胞株连续传代中病毒在细胞内持续感染的基本特性 结果显示传代细胞表现为病毒持续感染的基本特征 .

理科院校《医学微生物学》教学初探

理科院校《医学微生物学》教学初探郑从义（武汉大学生命科学学院武汉４３００７２）１９９０年，在国家教委主持召开的兰州理科教学会议上，要求理科院校在加强基础的同时，必须重视应用人才的培养，为此《医学微生物学》被确定为理科院校微生物学专业本科生的任选课。四...

银杏愈伤组织超低温保存的研究

本文对银杏子叶愈伤组织进行了超低温保存研究。结果表明 ,冰冻保护剂、冷冻速度对解冻后材料相对存活率影响较大 ,冻前预培养和预冻至某一温度停留一段时间也较为重要。在含高浓度山梨醇或甘露醇的培养基上预培养 2d的愈伤组织 ,用 10 %二甲基亚砜 +0 .5mol·L- 1 山梨醇作为冰冻保护剂 ,以 1℃·min- 1 速度降温 ,在 - 15℃、- 35℃分别停留 10min和 30min后 ,投入液氮中保存 1d ,细胞相对存活率可达 6 0 %以上。再培养时 ,细胞能恢复生长。

重视每个建设环节铸造微生物学国家精品课程

国家精品课程建设是提高高校教育质量的重要举措,是涉及教师、学生、教材、教学技术手段、教育思想和教学过程管理的系统工程。介绍了我们在微生物学国家级精品课程建设过程中在师资队伍建设,教学内容和课程体系改革,注重使用先进的教学方法和手段,重视教材建设,理论教学与实践教学并重等各个课程建设环节的做法与体会。

用现代化理念和手段建设国家精品课程“微生物学”

改革旧的课堂教学内容和模式。实现现代化、互动式教学随着学科的飞速发展和教学。手段的不断更新，课堂教学面临着新的挑战。改革旧的课堂教学内容和模式，实现现代化、互动式教学已成为当今提高教学质量的关键，我们的做法如下：

超低频脉冲梯度磁场治疗肿瘤及其机理的探讨

报道了用超低频脉冲梯度磁场治疗肿瘤的实验研究以及对其机理的探讨 .将峰值强度为 0 .6～ 2 .0T,磁场梯度 10～ 10 0 T/ m,脉冲宽度 2 0～ 2 0 0 m s,重复频率 0 .16～ 1.34Hz的磁场作用于鼠 S- 180肉瘤 ,观察到磁场对肿瘤生长的抑制及促使肿瘤细胞的凋亡 .研究表明 ,磁场治癌的机理不是单一的 ,而是从多方面共同作用的结果 ,其中包括磁场减少对肿瘤的营养供应、破坏其代谢功能并影响癌细胞核 DNA复制等方面 ,而且磁场的作用具有选择性 。

微流控芯片操纵传输及实时监测单细胞量子释放

微流控芯片技术用于细胞生化分析已引起了广泛关注.

含羟基环多胺金属配合体系切割DNA及其体外抗肿瘤活性研究

研究了 3 -羟基 -1 ,5 ,8-三氮杂环癸烷 ( L1 )和 3 ,1 3 -二羟基 -1 ,5 ,8,1 1 ,1 5 ,1 8-六氮杂二十元环胺 ( L2 )与Ni( ) ,Ca( ) ,Co( ) ,Cu( )离子在不同配比下与质粒 p BR3 2 2 DNA及肝癌细胞 BEL -740 2的相互作用情况 .发现 L1的单核体系和 L 2的双核体系能有效地将超螺旋 DNA同时切割得到切口开环型和线型 DNA,并对 BEL-740

中外微生物学教材建设状况调查与分析比较

优秀教材是高水平课程教学的前提与基础。本文对国内外微生物学教材的建设和发展状况进行了调查研究和分析比较,希望能为今后我国选择、引进、利用国外优秀英文版微生物学教材,以及加强我国自身高水平微生物学教材建设的工作提供借鉴。

香龙散诱导人胃癌细胞凋亡的机理探讨

应用荧光染色法、电镜、流式细胞术、DNA凝胶电泳和免疫组化法研究中药香龙散含药血清诱导人胃癌细胞(HS—746T)的凋亡和对Bcl—2、BaX、P16基因表达的影响。结果香龙散含药血清在5％的浓度剂量时,作用细胞24小时,去含药血清,再加入无含药血清的培养液培养36小时,细胞凋亡达到高峰,凋亡率为37.02％,大部分细胞阻滞在S期;可使Bcl—2基因表达减弱,Bax、P16基因表达增强。结果表明,香龙散含药血清可诱导人胃癌细胞凋亡,并影响凋亡相关基因的表达。

野生稻愈伤组织的超低温保存和冻后再生植株的形成

对不同基因组的野生稻愈伤组织进行了超低温保存的研究，主要结果如下：①野生稻愈伤组织经过预培养→预处理→冰冻降温→液氮保存→快速解冻的超低温保存，冻后细胞存活率最高可达８７．９％。②１０％ＤＭＳＯ＋８％葡萄糖为最佳冰冻保护剂。降温程序为０℃→－１０℃，１５ｍｉｎ→－４０℃，６０ｍｉｎ→液氮（ＬＮ）。③普通野生稻、宽叶野生稻、疣粒野生稻获得了冻后再生植株。④疣粒野生稻解冻后形成旺盛胚性愈伤组织，并通过体细胞胚胎发生途径再生出大量植株。

鱼呼肠孤病毒诱导草鱼肾细胞凋亡

采用荧光显微镜、电子显微镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析等技术研究鱼呼肠孤病毒诱导草鱼肾细胞 (CIK)凋亡。结果显示 ,鱼呼肠孤病毒感染CIK细胞后 ,光镜下可见空斑形成 ;荧光染色观察到细胞凋亡碎裂核 ;且电镜下呈现细胞核裂解 ,核周裂隙增大 ,细胞膜内陷并出泡形成凋亡小体现象 ;琼脂糖凝胶电泳出现 1 80— 2 0 0bp整数倍的DNA梯形带 ;流式细胞仪检测到典型的细胞凋亡峰 ,在病毒感染 48h ,细胞凋亡百分率达 1 5%。上述结果显示 ,鱼呼肠孤病毒诱导CIK细胞凋亡是其致细胞病变死亡的重要表现形式之一。