氧化应激与老年性痴呆发病的相关性研究

氧化应激作为老年性痴呆的发病机制之一越来越受到学术界关注。活性氧可氧化DNA、RNA和蛋白质导致基因突变、转录错误、转录效率降低、翻译错误,以及影响蛋白质正常功能的发挥。该文就氧化应激对DNA、RNA和蛋白质的氧化损伤与老年性痴呆发病的相关性进行综述。

淀粉样前体蛋白在快速老化痴呆小鼠P8海马中表达的免疫组化学研究

目的:观察淀粉样前体蛋白(APP)在快速老化痴呆小鼠P8(SAMP8)海马中的表达,探讨其与SAMP8小鼠增龄性变化的关系。方法:选用1、4、8、12月龄的SAMP8,用同龄正常老化小鼠R1(SAMR1)作为对照组,每组各8只,用免疫组化方法检测海马区APP的表达。结果:APP主要在SAM鼠海马神经元胞浆内表达,海马不同区域均有表达。定量结果显示对照组SAMR1小鼠海马各区域APP的表达随月龄增加无显著性改变(P>0.05);而SAMP8小鼠APP的表达则随月龄增加而增加,8月龄和12月龄SAMP8小鼠CA1区的表达量显著高于1月龄组(P<0.05),也分别显著高于同月龄对照组(P<0.05),CA3区APP的改变稍晚于CA1区,与同品系1月龄小鼠及同龄对照组比较,12月龄时显示有显著性增加(P<0.05)。结论:SAMP8小鼠海马APP的表达随月龄增加而增加,提示APP表达量的增加与SAMP8小鼠的快速老化相关。

血清胱抑素C在肾功能分期中的应用研究

目的探讨用血清胱抑素C（cystatinC，CysC）对临床急、慢性肾功能损害患者进行肾功能初步分期的可行性。方法检测132例肾病患者血肌酐（Cre），收集患者24h尿计算GFR；检测血清CysC并观察其与GFR的相关性，计算肾功能各期CysC的95％的可信区间。结果（DCysC与GFR呈中度负相关，回归方程为GFR=135．664×0．618cys c。②cysC各期的可信区间分别为1．107～1．410、1．363～1．612、1．716～2．119和3．311-3．868。③cysC水平在各期之间比较差异有统计学意义。结论CysC可用以对肾功能进行初步分期。

8-氧鸟嘌呤脱氧核苷在快速老化小鼠SAMP8海马中表达的增龄性变化研究

目的观察8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-7,8-dihydroguanine,8-oxo-dG)在快速老化小鼠SAMP8海马不同区域的表达,探讨其变化与SAMP8增龄的关系。方法选用1、4、8、12月龄快速老化小鼠SAMP8(每组各6只),对照组为同龄抗快速老化小鼠SAMR1(每组各6只),用免疫组化法检测海马不同区域内8-oxo-dG的表达水平。结果8-oxo-dG在海马不同区域均有表达,且主要在海马神经细胞胞核内表达。对照组SAMR1小鼠海马各区域8-oxo-dG的吸光度定量结果显示各月龄组间无统计学差异(P>0.05);1、4月龄组SAMP8小鼠海马各区域8-oxo-dG的吸光度定量结果与同龄匹配的SAMR1小鼠间无统计学差异(P>0.05);8、12月龄组SAMP8小鼠海马各区域8-oxo-dG的吸光度定量结果分别显著高于1月龄和4月龄组(P<0.05),也分别显著高于同龄SAMP1对照组(P<0.05)。结论8-oxo-dG在SAMP8快速老化小鼠海马中的水平随增龄而显著增高。

CEA、CA125和CA153联合检测在小细胞肺癌诊断中的应用

目的探讨CEA、CA125和CA153三种肿瘤标志物联检在小细胞肺癌诊治中的应用前景。方法采用化学发光免疫分析法分别测定50例小细胞肺癌和22例肺良性疾病患者血清中CEA、CA125和CA153水平。结果小细胞肺癌患者血清中CEA为(8.18±13.84)ng/ml,CA125为(65.13±9.97)ng/ml,CA153为(16.73±9.77)ng/ml,均显著高于肺良性疾病组的血清水平(P<0.05)。三项标志物对小细胞肺癌诊断的敏感性分别为32%、54%、18%;两两联检之后CEA/CA125、CEA/CA153、CA125/CA153的敏感性分别为70%、50%、64%;而三项联检对小细胞肺癌的敏感性达80%,特异性100%。结论联合检测CEA、CA125和CA153三项标志物可有效提高小细胞肺癌诊断的敏感性。

甲型H1N1流感病毒致宿主细胞脱氧核糖核酸氧化损伤的研究

目的:通过检测DNA损伤标志物8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-dG)在甲型H1N1型流感病毒感染MDCK细胞中的表达,初步探讨甲型H1N1型流感病毒诱导细胞凋亡的脱氧核糖核酸(DNA)损伤机制。方法:MDCK细胞培养后,甲型H1N1流感病毒感染继续培养0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h,细胞爬片免疫组织化学方法检测各时间点DNA损伤标志物8-oxo-dG的表达。结果:甲型H1N1流感病毒感染后各时间点实验组MDCK细胞8-oxo-dG的表达均显著高于相应的正常对照组(P<0.05),病毒感染各组间两两比较发现各组间差异显著。结论:甲型H1N1流感病毒感染能造成宿主细胞DNA氧化损伤。

影响大学生上课注意力集中原因的调查和对策

目的:调查大学生上课注意力集中程度及其影响因素。方法:通过调查问卷获得资料并对其进行统计分析。结果:超过87%的学生上课注意力集中时间低于80%,其中低于60%比例占46.6%。影响因素中最主要是对授课内容的兴趣、疲劳和对授课教师印象;其次是熬夜犯困、学习压力、网络、饥饿和厌学等。结论:本科生上课注意力不集中是一个比较普遍的问题,解决的手段包括采取各种授课手段、改革教学方法等多条途径。

流感病毒的致病机理研究进展

流感病毒属于正黏病毒科流感病毒属。具有多种形态,可呈杆状或丝状,一般为球形。直径80～120nm,由包膜和致密的病毒核心组成。按其核蛋白（nucleic protein,NP）和基质蛋白（matrix protein,MP）抗原性不同将其分为A、B、C三个血清型。根据血凝素（hemagglutinin，HA）和神经氨酸酶（neuraminidase，NA）的不同又分为众多亚型，仅A型流感病毒有很多亚型．HA有15个亚型和NA有9种亚型。

建立动态信息监管系统以缩短检测结果回报时间

目的建立检验路径信息监管机制,加强标本管理,缩短检测结果的回报时间(TAT)。方法建立TAT信息采集及流程监管系统,与医院信息系统(HIS)、实验室信息系统(LIS)连接,设立流程监控点,并按规则进行信息校验。对超时未进入下一环节的标本,系统自动提示相应工作站进行及时处理。结果TAT信息监管系统对检验标本进行全程动态监管,可有效解决检验结果回报延迟、标本遗失等问题。结论检验全程的信息化动态监管是缩短TAT的有力措施,能够提高实验室服务效率。

重氮法与钒酸盐氧化法测定总胆红素的方法学比较

目的分析重氮法与钒酸盐氧化法测定血清总胆红素结果的相关性,并对两法进行偏倚评估,建立仪器间的校正方法。方法依据美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件方案,每天随机抽取8份血清标本,分别用重氮法与钒酸盐氧化法进行总胆红素测定,共测定5 d。对检验结果进行离散点检查,计算线性方程和相关系数并进行偏倚估计。结果以重氮法(X)为参比方法,对钒酸盐氧化法(Y)进行评估,两者测定总胆红素的回归方程为Y=1.1588X-2.461 6,相关系数R2=0.998。总胆红素浓度为34.2、171μmol/L、342μmol/L时,钒酸盐氧化法的相对偏倚分别为8.72%、14.42%、15.12%。结论两种方法测定血清总胆红素具有良好的相关性,其比例误差是0.158 8,恒定误差是-2.4616μmol/L。其相对预期偏倚随总胆红素浓度增高而增高。

甲型H1N1流感病毒致宿主细胞氧化与凋亡之间的关系研究

目的:观察甲型H1N1流感病毒诱导的犬肺(MDCK)细胞氧化与凋亡之间的关系。方法:MDCK细胞培养后,甲型H1N1流感病毒感染0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h,在各时间点进行检测:采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染料法检测细胞的凋亡率;丙二醛(MDA)法观察膜的氧化损伤程度。结果:(1)甲型H1N1流感病毒感染后0、1、3、6h组细胞凋亡率与正常对照组无显著性差异(P>0.05),感染后12、24、48h组的凋亡率显著高于正常对照组(P<0.01);(2)实验各组MDA含量随着感染时间的延长呈下降趋势,0、1、3、6、12h时MDA含量显著高于正常对照组(P<0.01),而24、48h时与正常对照组无显著性差异(P>0.05);(3)MDA含量与凋亡率呈高度的负相关,回归分析进一步证明二者间的相关关系。结论:甲型H1N1流感病毒感染对细胞造成的氧化损伤是极早期事件,可能是细胞凋亡的重要因素。

MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性

目的探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性。方法PCR法扩增富含组氨酸钙结合蛋白（histidine—rich calcium—binding protein，HRC）基因启动子／增强子序列，插入报告载体pGL3-Basic中，生成pGL3-HRC enhancer质粒，该质粒与全长野生型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA—MEFcDNA，或含4～15个CAG的变异型MEF2AcDNA表达质粒pCDNA—MEFcDNA—CAGr，以及内参质粒pRL—TK，用脂质体转染法共转染于293T细胞，Western blot检测MEF2A蛋白的表达，双荧光素酶检测系统测定报告分子的表达。结果成功构建了MEF2A蛋白体外转录激活活性检测系统；所构建的含4～15个CAG序列的MEF2A变异蛋白，与含11个CAG序列的野生型MEF2A蛋白之间其转录激活活性没有显著性差异。结论目前已发现的MEF2A第11号外显子CAG重复数目的改变不会影响MEF2A蛋白的转录激活活性。

阿魏酸钠对β淀粉样蛋白_(25-35)诱导的体外培养神经细胞损伤的保护作用

目的 研究阿魏酸钠 (SF)对 β淀粉样蛋白2 5-3 5(Aβ2 5-3 5)诱导的原代培养神经细胞损伤的保护作用。方法 以原代培养孕 17～ 18d的SD大鼠胎鼠的大脑皮层神经细胞为观察对象。倒置显微镜下观察给药前后神经细胞的形态学变化 ,用MTT比色实验检测神经细胞活性 ,依据LDH漏出率检测神经细胞膜的损伤程度 ,以MDA生成量推测生物膜不饱和脂肪酸过氧化程度。结果 与正常对照组相比 ,Aβ2 5-3 5(2 0 μmol/L)处理 2 4h ,可使神经细胞活性显著下降 (P <0 0 1) ,SF (10 μmol/L ,5 0 μmol/L ,10 0 μmol/L ,5 0 0 μmol/L ,1mmol/L)能剂量依赖地减轻Aβ2 5-3 5的细胞毒性。结论 SF能够对抗Aβ2 5-3 5诱导的培养皮层神经细胞的损伤。

快速老化小鼠SAMP8海马组织中基因表达谱的研究

目的观察快速老化小鼠P8(SAMP8)与同龄正常老化小鼠R1(SAMR1)海马组织中基因表达谱的差异。方法选用1、4、6、8、12月龄的SAMP8小鼠,用SAMR1作为对照组,每组各9只,快速处死后取海马组织提取总RNA,用纯化后的总RNA合成cDNA并标记荧光染料,与32k小鼠寡核苷酸微阵列芯片杂交,用共聚焦扫描仪LuxScanTM10KA及LuxScan3.0软件进行图像采集与数据处理,用SAM软件分析差异表达的基因,用MAS系统对差异基因进行通路(pathway)分析。结果正常老化小鼠SAMR1各月龄间表达谱差异无显著性,快速老化小鼠SAMP8各月龄间差异显著,两种品系小鼠的比较结果显示1月龄、12月龄基因表达差异最为显著,6月龄无显著差异。Pathway分析结果显示MAPK信号通路的基因表达差异最为显著。结论SAMP8小鼠与SAMR1小鼠海马的基因表达存在明显的差异,以MAPK信号通路的基因表达差异最为显著。

8-oxo-G在快速老化小鼠SAMP8海马中表达的增龄性变化研究

目的观察8-氧鸟嘌呤核苷(8-oxo-G)在SAMP8品系快速老化小鼠海马不同区域的表达,以探讨其与SAMP8小鼠增龄性变化的关系。方法选用1、4、8、12月龄的快速老化小鼠SAMP8以及同龄抗快速老化小鼠SAMR1(对照组),每组各6只,采用免疫组化方法检测小鼠海马不同区域8-oxo-G的表达。结果8-oxo-G主要在SAM小鼠海马神经元胞浆内表达。对照组SAMR1 1月龄小鼠海马CA1和CA3区8-oxo-G表达显著高于其他月龄组(P<0.05),4、8、12月龄小鼠间其表达差异无统计学意义(P>0.05);SAMP8 12月龄小鼠海马8-oxo-G的表达显著高于1、4、8月龄组(P<0.05);SAMP8和SAMR1小鼠之间比较,1、4月龄间差异无统计学意义(P>0.05),8、12月龄间差异有统计学意义(P<0.05)。结论SAMP8小鼠海马8-oxo-G的表达除1月龄外随月龄增加而增加,提示8-oxo-G的表达增加与SAMP8小鼠的快速老化相关,有可能为增龄,甚至AD的生物学标志。

MTH2蛋白与8-氧鸟嘌呤脱氧核苷在阿尔茨海默病患者海马组织中的表达变化

目的:观察8-氧鸟嘌呤脱氧核苷三磷酸酶同源蛋白2(MTH2)及8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxodG)在阿尔茨海默病(AD)患者海马组织标本中的表达变化,探讨在AD患者海马中二者表达的相关性。方法:选用临床及病理均诊断为AD的尸检海马组织石蜡切片作为实验组,年龄匹配且临床及病理诊断均排除AD的尸检海马组织石蜡切片作为对照组,每组各3例,用免疫组化的方法分别检测人脑海马中8-oxo-dG的含量及MTH2蛋白的表达。结果:免疫组化定量结果显示,在人脑海马组织CA1及CA3区,AD患者8-oxo-dG的表达显著高于年龄匹配对照组,而AD患者MTH2的表达显著低于年龄匹配的对照组。结论:在人脑海马组织中,DNA氧化产物8-oxo-dG含量在AD患者比年龄匹配对照组有显著提高,抗氧化修复蛋白MTH2的表达量却显著降低,提示人脑海马组织中MTH2蛋白表达量的减少及8-oxo-dG含量的增加与AD的发病过程相关。

定量检测血清PCT对不同致病菌的感染和程度分析

目的：探讨血清降钙素原（procalcitonin，PCT）与不同致病菌感染及感染程度的关系。方法：按照ACCP／SCCM（美国胸内科医师学会／危症监护医学学会）关于脓毒症的相关定义，将感染性疾病分为确诊脓毒症和非脓毒症，并经微生物培养确认感染微生物。采用免疫荧光定量检测法（ELFA）测定患者血清PCT含量，比较在不同致病菌所致感染之间差异，以及脓毒症组与非脓毒症组间差异。结果：以PCT≥0．05ng／ml为阳性域值，PCT阳性率为89％（34／38），而不同致病菌所致感染组间PCT含量无显著性差异（P〉0．05）。以PCT≥2ng／ml为脓毒症阳性域值，脓毒症患者与非脓毒症患者血清PCT浓度有极显著性差异（P〈0．01）。PCT对脓毒症的临床诊断灵敏度63．6％（14／22），特异性为100％（16／16）。结论：血清PCT是鉴别细菌感染引发脓毒血症快捷、敏感、准确的检测手段，优于血清CRP检测；但不能判断为何种细菌感染。目前脓毒症是重症监护中死亡的重要原因，应加强PCT和细菌培养、血常规的互利互补和动态跟踪，提高临床对感染诊断和治疗的准确性。

分析前质控对检验结果的影响

分析前错误占检验错误的比例最高,是检验过程中影响患者的医疗安全的主要因素。为解决这一问题,我院检验科已建立基于检验流程的精细管理模式,在注重分析中和分析后质量控制的同时,加强分析前质量控制。通过建立"临床标本采集和处理标准操作程序(standard operating procedures,SOP)",以电子SOP文件的形式镶嵌于医院信息系统(hospital information system,HIS)内,为各临床科室建立和执行检验医嘱,提供样本采集等相关详细信息。采集后的样本,经信息校验、初步分类、与物流交接校验后,被送达临床实验室各专业组再行校验。同时,实时记录以上各步时间点,从而实现对样本采集、运送的有效管理和质量控制。

重视学生创新性思维训练 培养全面的检验医学人才

我国本科教育传统的教育理念是进行基础理论和技能教育,学生的创新性思维培养未受到足够重视。随着世界经济和科学技术的发展,检验医学取得了骄人的成绩。本文从培养创新性思维的必要性和如何培养具有创新性思维的检验医学人才出发,论述了创新性思维训练在检验医学本科教育中的重要性。