大豆ASR蛋白富含组氨酸结构域在结合金属离子中的作用

利用固相亲和层析实验结果表明,Gm ASR蛋白及其含组氨酸结构域A1-A5短肽可与金属离子Cu^2＋和Cd2＋结合;采用Cu-抗坏血酸体系检测了Gm ASR蛋白及A1-A5清除羟基自由基的能力,证明Gm ASR蛋白及A1-A5短肽中组氨酸数目与清除羟基自由基能力呈正相关;Gm ASR蛋白及A1-A5可保护DNA分子免受Cu^2＋造成的氧化损伤.CD实验和SDS-PAGE实验结果发现,Gm ASR蛋白及A1-A5短肽与Cu^2＋结合后将引起可逆性聚集及沉淀.可见Gm ASR蛋白通过组氨酸结合过多的金属离子,维持细胞内离子平衡,是保护植物免受重金属毒害的重要机制之一。

大豆子叶内酸性磷酸酶活性的超微结构定位

开花后３５～５０ ｄ 期间和萌发早期（播种后４～８ ｄ）的大豆（Ｇｌｙｃｉｎｅｍ ａｘ Ｌ．）种子中，酸性磷酸酶主要分布在子叶细胞中的蛋白体内；在内质网内也检测到酸性磷酸酶活性。此外，在萌发早期的部分子叶细胞的质膜外侧及其细胞壁基质中可见密集的酸性磷酸酶活性；而且在近质膜的胞质中常见到一些富含磷酸铅沉淀的胞质小泡。

大豆子叶中蛋白体的形成与贮藏蛋白质积累的关系

大豆(Glycine max L.)和其它豆科植物一样,子叶细胞中的贮藏蛋白质是积累在蛋白体内的。大豆子叶中蛋白体的形成有两种途径。大豆种子中的贮藏蛋白质有两种主要成分:7S豌豆球蛋白(vicilin或conglycinin)和11S豆球蛋白(legumin或glycinin)。7S球蛋白有3种亚基:α’、α和β;11S球蛋白分为酸性亚基区(11S

萌发大豆种子中蛋白体的消化与酸性磷酸酶活性的分布

大豆种子播种后，其子叶细胞内蛋白体的消化呈三种方式：即内部均匀消化、内部非均匀消化和边缘消化．子叶蛋白体内酸性磷酸酶活性分布为：均匀分布于蛋白体的基质内、主要分布于蛋白体的一点或几点及“空腔”的边缘和优先分布于蛋白体的边缘．

大豆子叶细胞中由液泡发育成蛋白体的不同方式

大豆开花后18天,子叶细胞中的大液泡开始以分隔或缢束方式分成较小的液泡,在其中逐渐积累蛋白质,转化为蛋白体。贮藏蛋白在液泡中的积累有三种方式:一种是蛋白质逐渐沉积于液泡膜的内表面,同时伴随着液泡的出芽分离;一种是贮藏蛋白以凝集的团块结构积累于液泡中;一种是以絮状方式均匀分布于液泡内。本文对贮藏蛋白在液泡内积累的不同方式与大豆凝集素的关系,贮藏蛋白在细胞内运输的途径等问题进行了讨论。

发育大豆子叶细胞中酸性磷酸酶的亚细胞学定位

本实验采用电镜细胞化学技术，观察了酸性磷酸酶在发育中大豆子叶细胞内的亚细胞学分布。酸性磷酸酶除分布在细胞核内的部分染色质上，内质网膜上，质体胞质小泡和胞质中，主要积累于蛋白体内。酸性磷酸酶在不同蛋白体内分布有所不同：１）在一部分蛋白体中，酸性磷酸酶均匀散布于蛋白质基质上；２）在另一部分蛋白体内，酸性磷酸酶成簇沉积于其中；３）还有一部分蛋白体，其中央为致密区，边缘为疏松区，酶在边缘疏松区的含量明显高于中央致密区中酶的量。

大豆子叶发生的细胞学和组织化学的研究

在晚球形原胚内可划分出子叶形成区、胚芽原区和下胚轴-胚根区。子叶形成区细胞分裂频率较高,细胞分裂方向以垂直于胚纵轴的居多,核仁较大,细胞质浓密。胚芽原区细胞分裂频率较低,核仁体积较小;直到第一对叶原基开始分化时,该区细胞分裂频率明显上升。下胚轴-胚根区细胞分裂频率和核仁直径的数值表现为前两个区域的中间类型,胞质稀疏,液泡较大。随着原胚的继续发育,子叶形成区细胞分裂方向发生改变,逐渐以平行和斜向于胚纵轴的占优势。结果,子叶原基突起,并进一步伸长。原胚径心形胚发育为鱼雷形胚。幼胚分化出第一对叶原基后,子叶细胞内液泡迅速增大。开花后20—25天,子叶细胞开始积累淀粉粒、蛋白质和脂滴,并逐渐增大和增多。开花后50天,淀粉粒直径达最高值(6.2—7.0μm)。以后逐渐变小。在种子完全成熟时,绝大部分淀粉粒消失。开花后50—60天,脂滴和蛋白体的直径达最高值(分别为5.4—7.0μm和6.2—7.0μm)。蛋白体的形成与液泡有关。

几种转基因植物体细胞克隆变异的多样性研究

分析了杨树、水稻和甘蔗转基因植株体细胞克隆的表型变异和基因组DNA多态性。探讨了以下问题 :转基因植株体细胞克隆的 1 )表型多样性 ,2 )基因组DNA多样性 ,3)二者的相关性 ,4)表型变异和DNA变异的可遗传特性 ,5)产生的可能原因 ,以及 6)在农业生产上的应用。

大豆子叶发育过程中,子叶细胞内造粉质体分化和脱分化过程的电镜观察

大豆开花后18～43天,子叶细胞含叶绿素。细胞内原质林可逐渐积累淀粉粒;基质内有基粒和基质片层。原质体发育为造粉质体。这种造粉质体属“绿色造粉质体”。开花后53～63天,造粉质体内淀粉粒数目减少,体积缩小;片层结构肿胀,并逐渐解体。造粉质体脱分化为原质体。造粉质体的分化和脱分化过程与蛋白质和脂类的积累密切相关。

大豆子叶细胞中变形质体的形成和发育过程

质体是植物细胞中特有的一种细胞器。原质体、白色体、叶绿体和有色体之间的发育有着密切的关系。变形质体是一类不规则形状的原质体,多呈哑铃形、马蹄形或杯状。前人曾在许多植物的多种组织中看到过变形质体。但是关于变形质体的作用和进一步发育趋势目前尚无一致的看法。本文采用常规透射电镜技术观察了大豆子叶细胞中变形质体的形成和发育途径。结果和讨论:开花后19天的大豆子叶细胞中有许多原质体。其中部分原质体呈圆球形(图1)。部分原质体呈哑铃形(图2)、马蹄形(图3)和环形。从三维空间进行分析。

种子蛋白体结构和组分的研究进展

引言种子贮藏蛋白,是一类非常重要的植物蛋白。它为种子萌发提供氮源和氨基酸,也为人类提供了高蛋白食物。在双子叶植物种子的子叶和单子叶植物种子的胚乳和糊粉层细胞中。

紫露草雄配子体的发生

本文详细描述了紫露草活体花药内和花粉粒离体萌发实验中雄配子的发育及其发育过程中的异常现象。紫露草成熟粉粒大部分为2细胞型,此外还有3细胞和4细胞花粉;含染色体数为11或13的核的非整倍性小孢子,带微核的小孢子和败育花粉粒。紫露草活体花粉中存在“花粉二型性”现象。

大豆种子发育过程中子叶内几种同工酶活性变化

本文利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,观察大豆开花后30～60天期间,子叶内α、β-淀粉酶、酯酶和酸性磷酸酶积累的动态变化。并对其变化趋势与贮藏物质积累的关系进行了初步探讨。大豆是一种有重要经济价值的豆类作物。其种子中贮藏着大量的蛋白质(平均约为40％)和油类(平均约为18％)。同时还含有多种酶类,如:酸性磷酸酶、乙醇脱氧酶、淀粉酶、酯酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、亮氨酸肽酶、过氧化物酶、超氧物岐化酶等(Kiang et al,1983;王爱国等,1983)。许多作者曾对这些酶的基因定位、基因连锁、遗传多态性、等位基因频率及其地理性分布等问题,进行了系统的研究(Kiang et al,1983)。但是,关于发育中种子内同工酶积累变化及其生理意义的研究,尚缺乏系统的研究报告。我们采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了大豆种子发育过程中,子叶内α、β-淀粉酶、酯酶和酸性磷酸积累的动态变化。并讨论了其变化与贮藏物质积累的关系。

阿尔茨海默病的防治策略研究进展

评述了阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的多种病因学说,包括胆碱能学说、β-淀粉样级联学说、ABC学说(aging,beta-amyloid,channel)、tau蛋白过度磷酸化学说、氧化应激学说、神经细胞凋亡学说和基因突变学说等.指出AD是多因素引起的病变,其发病机制也必然有多种.由于该病与人体衰老过程密切相关,发病机理复杂,且神经细胞丢失后不具再生能力,这就决定了研究治疗AD有效药物的艰巨性.还指出AD防治工作应重视早期预报和早期干预,发展早期诊断方法包括正电子发射计算机断层扫描、磁共振成像,及血液和尿液中寻找灵敏的生物标志物等技术方法.目前有关AD防治药物包括一线治疗药物、疫苗、尚在研究阶段的药物、辅助性治疗药物、中药以及医疗保健品.前3类药物因疗效或研究结果长期未取得突破性进展,人们开始关注后3类药物对延缓AD的作用及机理.课题组重点开展后3种药物防治AD的作用和机理研究,发现硒代蛋氨酸、辅酶Q-10和中药组分淫羊藿甙对防治AD有好的疗效.综述了目前抗AD药物的研究现状和面临的挑战,提出AD的防治策略是:摒弃针对单一致病因素的治疗思路,从多因素及内在相互联系的系统生物学角度,开展AD防治机制及新药研发.

大豆PM2蛋白及其结构域可提高烟草耐盐性

深圳市微生物基因工程重点实验室已利用大肠杆菌异源表达体系证明了大豆PM2蛋白(LEA3)的耐盐功能,并首次证实PM2蛋白序列中的22-氨基酸结构域(PM2B)为一主要耐盐结构域．为在高等植物中进一步验证PM2蛋白及22-氨基酸结构域的耐盐功能,将大豆PM2及PM2B基因克隆至植物表达载体pBI121,并利用农杆菌侵染法转化烟草叶盘,通过PCR扩增法鉴定转基因植株．结果表明PM2及PM2B基因已整合至转基因烟草的基因组DNA中,转化率分别为44．4％和62．5％．与含1．5％(质量分数)NaCl的培养基比较,转基因烟草植株的生长状况和叶片的叶绿素含量,结果表明转PM2和PM2B基因的烟草耐盐性明显高于对照(转化pBI121载体)植株．这说明转PM2和PM2B基因可提高烟草的耐盐能力．可见,PM2蛋白及22-氨基酸结构域在原核和真核细胞中的耐盐保护作用可能是相似的．

硝酸铅对大蒜根尖细胞有丝分裂的影响

采用不同浓度硝酸铅分别处理大蒜根尖,试验结果表明:随着硝酸铅质量浓度的增加(0.01.0.1,1.5, 10,100μg/mL)和染毒时间(6,18,24 h)的延长,细胞的增殖率下降,有丝分裂指数逐渐降低,由12.5％降至 5.65％,而且在有丝分裂的细胞中还出现微核、滞后染色体、染色体桥等畸变现象。这说明铅对植物具有毒害 作用。

大豆耐盐相关基因的分离及其功能鉴定

利用大肠杆菌功能表达体系,从大豆开花40d未成熟种子的cDNA表达文库中筛选获得了11个耐盐相关cDNA克隆.对其中3个克隆的插入片段进行测序.结果显示,其中的Gm1013为一尚未报道的新基因片段;GmRPS25 2编码的蛋白质序列与西红柿40S核糖体蛋白S25有91%的同源性;GmAIP 2编码的蛋白质序列与大豆根铝诱导蛋白SALI3 2有97%的同源性.其中GmAIP 2可表达分子量为30 8kD的多肽.pET GmAIP 2转化后的大肠杆菌在含800mmol/LNaCl和700mmol/LKCl的液体培养基中生长状况明显好于对照菌,即前者表现出较短的生长迟滞期和较高的生长量.

大豆LEA蛋白Em的表达可提高大肠杆菌和烟草耐盐性

将大豆Em(LEA1)基因构建到原核表达载体pET28-Em中.转化大肠杆菌,经SDS-PAGE电泳及电喷雾质谱鉴定.结果显示,经IPTG诱导的重组菌可表达约18kDa的特异蛋白.这种蛋白具有良好的可溶性和热稳定性.在含800 m mol/L NaC l培养基中,含空载体的对照菌生长迟滞期约为50 h,含Em基因的重组菌生长迟滞期为32 h,表明大豆Em蛋白的表达可提高大肠杆菌对盐胁迫的适应能力及耐盐性.在此基础上,构建了含Em基因的真核表达载体pB I-Em.再利用根癌农杆菌介导法将该基因转入烟草.PCR及RT-PCR结果显示,大豆Em基因已整合到转基因烟草的基因组DNA中,并能正常转录.转化率为53%.转Em基因烟草植株在含有质量分数1.5%NaC l的培养基中生长状况好于对照植株,叶片的叶绿素含量高于对照植株的叶片.结果表明,大豆Em基因的表达可提高大肠杆菌和转基因烟草的耐盐性.

高温/渗透双重胁迫对大豆某些生理反应具累加效应的初报

对“吉林 2 7号”和“白农 6号”大豆幼苗进行了单纯高温、渗透和高温与渗透双重处理。发现三种胁迫处理均导致两品种幼苗叶片相对含水量下降 ,相对电导率和丙二醛 ( MDA)含量升高。高温 /渗透双重胁迫对含水量影响、对质膜透性和膜脂过氧化损伤近似于两单项胁迫效应之和。此外 ,胁迫作用可诱导两品种超氧物歧化酶 ( SOD)活性升高 ,使“白农 6号”过氧化氢酶 ( CAT)活性上升。胁迫处理使“吉林 2 7号”

香花槐组培苗快繁体系的建立及工厂化育苗的主要影响因素

建立了香花槐组培苗快繁无性系.在改良MS培养基中添加ρ(6.BA)/mg L-1=0.35-0.5、ρ(NAA)/mg L-1=0.05-0.08,ρ(GA3)/mg L-1=0.07-0.1作为生长培养基.在丛生芽诱导培养基中,ρ(6-BA)/mg L-1=0.8-1.4,其余成分同生长培养基.两种培养方法同时使用,保证了组培苗繁殖系数为5左右.生根培养基中大量元素为MS基本培养基的1/4,ρ(IBA)/mg L-1=0.1-0.5、ρ(IAA)/mg L-1=1.7-2.5,香花槐组培苗的生根率为90％.炼苗后组培苗的移栽成活率为85％,且植株表型未见变异.将MS基本培养基中硝酸钾的含量由1.9g/L提高至2.199-2.931g/L,可满足每代香花槐试管苗生长25-35 d期间对钾的需求.将培养基中6-BA的含量降至0.4 mg/L,并采用合适的组培容器,在连续培养2、3代后,可将超度含水态苗的发生频率控制在10％以下.在6 mo内生产100万株香花槐组培移栽苗.