狂犬病病毒Vero细胞适应株3aG-V的致病性和免疫原性

狂犬病病毒3aG-V株是3aG-5在Vero细胞适应的毒株,对其在小鼠、豚鼠、家兔、犬的不同感染途径的致病性,小鼠、豚鼠、兔子上的免疫原性进行研究,同时进行纯毒及在中枢神经系统中能否形成尼氏小体试验,结果表明:狂犬病病毒3aG-V株潜伏期较长,在动物脑内不形成尼氏小体,为固定毒,其在实验动物上具有较弱的致病性和较好的免疫原性,可作为纯化Vero细胞狂犬病疫苗的生产用疫苗株。

Vero细胞口服狂犬病疫苗的研究

本试验采用ＣＴＮ－１株经Ｖｅｒｏ细胞传１５代，病毒滴度均在７．０～８．０ｌｏｇＬＤ５０／ｍｌ之间。给８只犬分别口服８．１ｌｏｇＬＤ５０的疫苗３０天的中和抗体几何平均效价为１：１１０，中和抗体的平均国际单位为２．５９ＩＵ／ｍｌ，阳转率为１００％；给４只犬分别口服７．４３ｌｏｇＬＤ５０的疫苗，阳转率为５０％，中和抗体的平均国际单位为２．４８ＩＵ／ｍｌ。选用３５－６０日龄的乳犬１６只口服１０个剂量的疫苗，并在口服后５、１０、２０天、３个月各杀３只犬取脑及唾液腺分别在ＢＨＫ２１细胞上盲传２代，同时在昆明种小白鼠乳鼠脑内盲传２代，进行病毒分离，均为阴性，余下犬观察１２个月均正常。总之该口服狂犬病疫苗对犬具有较好的安全性及口服免疫原性。

狐狸脑炎流行病学调查

狐狸脑炎是犬传染性肝炎病毒(CAV—1)引起的一种急性、败血性、接触性传染病,本病具有发病急、传染快、危害严重等特点。狐狸脑炎由Green(1928)首先在美国的银狐养殖场发现,以后德国、法国、苏联、(1961—1963)挪威、波兰、加拿大等国也都进行了报道1949年Sietopf和Carlson证明与犬传染性肝炎的病原相同。

狐喉气管炎病毒FAV—2型的分离鉴定

某进口种银狐场2～3月龄仔狐爆发喉气管炎,以死亡狐的扁桃体、颈部淋巴结和气管内分泌物,经犬纤维癌(A_(72))细胞传代、与抗 CAV-1和 CAV-2血清作交叉中和试验、电镜负染观察,确定为犬腺病毒2型,命名为FAV-2。该病毒能在 A_(72)细胞上复制并产生典型病变;能在猪肾(PK_(15))和 CEF 细胞上复制,但不产生病变.凝集人 O型红细胞,不凝集豚鼠、鸭、兔、鹅的红细胞。对酸、乙醚、热不敏感.与犬腺病毒2型疫苗毒株有密切交叉中和关系(亲缘值 R=85.7%).利用间接免疫荧光染色法可在感染该病毒的 A_(72)细胞核内发现特异的荧光.

口服狂犬病疫苗

口服狂犬病疫苗根据毒种类型分为二类：一类为减毒活疫苗，首先美国用ＥＲＡ株在实验室研究成功，随后各国相继研究ＳＡＤ株的突变株ＳＡＤＢｅｒｎ（或ＳＡＤｓｗｉｓｓ），ＳＡＤＢ＿１９、ＳＡＧ＿１以及ＣＴＮ—１株口服狂犬病疫苗，均获得较好的口服免疫原性，对动物ＳＡＤＢｅｒｎ、ＳＡＤＢ＿１９、ＳＡＤｓｗｉｓｓ、ＣＴＮ—１的毒性相近，而ＳＡＧ＿１的毒性最弱，对多种成年野生动物不致病。以上各株病毒分别被制成口服疫苗在世界许多地区得到试验和应用。另一类为重组基因工程口服疫苗，已将狂犬病毒的糖蛋白基因分别重组到人腺病毒５型，痘苗病毒、浣熊痘病毒、金丝雀痘病毒、多角体病毒中，并证实均有免疫原性，重组痘病毒ＶＶＴＧｇＲＡＢ制备的口服疫苗已在比利时进行大规模的区域性试验，具有有效性、无毒性和热稳定性。口服疫苗的诱饵多采用鸡头、蜡制或膨化食物外壳内包装有疫苗胶囊的复合体。

我国纯化狂犬病疫苗的临床反应及效果评价

目的 对11家企业新近研制成功的9批地鼠肾细胞纯化狂犬病疫苗和5批Vero细胞纯化狂犬病疫苗进行临床安全性和有效性考核。方法 每家企业研制的疫苗任取1批,按3针和/或5针免疫程序接种,观察接种人群的副反应发生率。通过测定全程免疫后的血清中和抗体确定其免疫效果。结果 纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗和Vero细胞狂犬病疫苗的副反应发生率分别为0％～31.5％和0％～39.4％。全程免疫后均能产生很高的中和抗体。无佐剂疫苗第1针免疫后的第7d中和抗体GMT水平已达到0.4IU/ml,阳转率可达45.2％。结论2种疫苗均具有较好的安全性和免疫原性。

精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗的效果观察

为提高狂犬病疫苗的质量 ,对辽宁生物技术公司生产的精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗进行了临床观察 ,经过第Ⅰ阶段 35人和第Ⅱ阶段 310人的暴露前和暴露后注射的观察 ,结果显示仅有轻微的副反应 ,无中、强度反应 ,总反应率 2 0 % (7/35 ) ,低于法国维尔博疫苗的 30 30 % (10 /30 )。无论是暴露前或暴露后注射 ,全程注射后抗体阳转率均为 10 0 % ,中和抗体GMT为 4 17～ 12 0 1IU/ml。该疫苗不仅副反应轻微 。

大鼠白细胞及骨髓有核细胞减少模型的研究

目的 建立白细胞及骨髓有核细胞减少的大鼠模型。方法 2 0只正常SD大鼠 ,随机分成两组 ,试验组给大鼠腹腔反复注射环磷酰胺 ,对照组注射等体积的生理盐水。结果 试验组大鼠体重明显降低 ,白细胞及骨髓有核细胞数明显减少 ,且停药 15d时 ,白细胞总数仍维持在低值水平。结论 此方法建立的大鼠模型 ,低白细胞水平维持的时间长 ,能够满足实验研究需要的观察时间 ,可用于化疗毒性的治疗药物筛选及其他治疗手段的研究。

无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗的研制

目的研制无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTaP/Hib)。方法按不同抗原配比配制3组联合疫苗,分别检测疫苗的效价及安全性,从中选择最佳配比配制3批联合疫苗,并用相应批原液,按相同配比配制3批DTaP和3批Hib疫苗作为对照,检测联合疫苗中抗原的相容性。结果3组配比的联合疫苗效价及安全性均达到《中国药典》三部(2005版)要求,联合疫苗中以每毫升含AcP18μgPN、D25Lf、T7Lf和Hib多糖抗原20μg为最佳配比。动物实验证明联合疫苗各抗原间不存在免疫干扰。结论已成功研制4种抗原配比合理的DTaP/Hib联合疫苗。

狐脑炎犬肾传代细胞弱毒苗的研制和应用

采用A 72细胞复壮CAV—2弱毒、CK细胞培养病毒的方法,成功地研制出狐脑炎犬肾传代细胞弱毒苗。经安全试验、效力试验、免疫期试验等证明,该苗不仅制造工艺简单、纯度高、安全可靠,而且免疫原性好、免疫期长,能有效地预防狐脑炎。

b型流感嗜血杆菌荚膜多糖纯化方法的优化

对b型流感嗜血杆菌荚膜多糖纯化工艺中冷酚抽提次数、沉淀核酸的乙醇浓度、沉淀糖精的乙醇浓度进行研究。结果表明,最佳纯化工艺为冷酚抽提4次,300 mL/L的乙醇沉淀核酸,650 mL/L的乙醇沉淀糖。所建立的提取纯化工艺提取的荚膜多糖纯度高,各项指标能够达到WHO的规程要求。

兔耳缘静脉毛细玻璃管采血法的研究

兔耳缘静脉毛细玻璃管采血法是采用毛细玻璃管在兔耳静缘脉上捻动使血管造成完全开放或不完全开放的小孔。此方法由于损伤刺激小 ,不易产生血管痉挛 ,所以具有出血时间长、出血量大的特点。在 2 3℃以上时 ,5分钟内采血量能够达到 2 0多毫升 ,且能够多次重复采血 ,能够满足多次实验的采血要求。

对环磷酰胺引起低白细胞大鼠的白细胞分类变化研究

目的 研究环磷酰胺引起低白细胞大鼠的白细胞分类变化。方法 给大鼠腹腔注射环磷酰胺(30mg kg) ,连续 5天 ;对照组注射等体积的生理盐水。结果 大鼠外周血白细胞总数明显减少且低水平维持时间较长 ;杆状核粒细胞明显增高 ,停药 15天 ,仍维持在较高水平 ;分叶核粒细胞在给药期间有明显减少 ,停药后即恢复 ;对淋巴细胞没有影响。结论 给大鼠反复注射环磷酰胺能引起白细胞总数及其分类的变化 ,杆状核粒细胞显著升高和分叶核粒细胞明显降低 。

ELISA检测鸡传染性囊病抗体方法的研究及应用I．IBD－ELISA检测抗体方法的建立

ＥＬＩＳＡ检测鸡传染性囊病抗体方法的研究及应用Ｉ．ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ检测抗体方法的建立张晨生，郑海发（北京市兽医实验诊断所１００１０１）本试验目的在于建立ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ方法与计算机联用作到快速、敏感、准确、特异，适用大量检测样品。作者在抗原包被、...

一种新型原代地鼠肾细胞(PHKC)精制狂犬病疫苗的实验室质量评估

本文通过对一种新型疫苗 PHKC精制狂犬病疫苗的全面实验室检定并与法国Vero细胞狂犬病疫苗比较 ,认为该疫苗安全性良好 ,纯度较高 。

应用ELISA检测EDS－76血清抗体的研究

应用ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ－７６血清抗体的研究张晨生，梁明珍（北京市兽医实验诊断所，１００１０１）郑海发（中国药品生物制品检定所）产蛋下降综合征（ＥＤＳ－７６）是１９７６年由ＶａｎＥｃｋ在荷兰首次报道。现已流行于世界各国。我国于１９８５－１９８８年已有...

犬腺病毒2型的致弱和狐脑炎弱毒疫苗的研究

将犬腺病毒2型(CAV—2),用PK_(15)细胞继代53代后毒力减弱,然后用A_(72)细胞继续继代20代。经对继代毒的毒力测定和稳定性试验证明,53—73代毒对狐无致病性,而且毒力稳定,我们选用60—69代毒作制苗种毒成功地研制出狐狸脑炎弱毒苗。试验表明,该苗具有制造技术先进、使用安全、免疫原性好等优点。狐免疫10^(4.5)TCID_(50)/ml接种疫苗,保护率可达100％。该苗免疫21天后能耐受10^(-2)CAV—l强毒的攻击,免疫期为一年。现场应用26754头份均取得良好的免疫效果.